生物一 微生物的基本培养技术获奖课件ppt

这是一份生物一 微生物的基本培养技术获奖课件ppt，共30页。PPT课件主要包含了学习目标，课堂小结等内容，欢迎下载使用。

通过对培养皿和培养基进行灭菌，了解消毒和灭菌的原理及方法。（科学思维）
掌握通过配制培养基，了解配制培养基的基本步骤，以及培养基中各类营养物质的配比。（生命观念）
通过对酵母菌进行纯培养，理解并掌握微生物接种、分离和培养的基本原理和过程。（科学探究）
基本成分：碳源、氮源、水、无机盐
特殊需求：维生素（如乳酸杆菌）、碱基等
温故知新：培养基的配制和无菌技术
问题1：微生物结构简单、形体微小，眼睛看不到，若想看某种纯净的微生物,当我们掌握了培养基配制和无菌技术后，我们接下来该如何操作？
（一）培养物、纯培养物、纯培养概念辨析：
在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体。
由单一个体繁殖所获得的微生物群体。
获得纯培养物的过程就是纯培养。
酵母菌的纯化培养过程（视频）
1.倒平板时(1)为什么需要使锥形瓶的瓶口过火焰？(2)平板冷凝后，为什么要将平板倒置？(3)怎么确定所倒平板未被杂菌污染？2.平板划线法时注意事项有哪些？3.接种过程中在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？4.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？5.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗？为什么？
合作探究一：请同学们自主学习教材P11-13页，小组合作思考讨论完成问题。
称取去皮的马铃薯200g
加水1000mL，加热煮沸至马铃薯软烂
滤液中加入20g葡萄糖，15~20g琼脂
用蒸馏水定容至1000mL
将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞
包上牛皮纸，并用皮筋勒紧
压力100kPa、温度为121℃的条件下，灭菌15 ~ 30min
放入干热灭菌箱内，160 ~ 170℃灭菌2h
待培养基冷却至50 ℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。
操作：在酒精灯火焰附近
问题1：为什么需要使锥形瓶的瓶口过火焰？
通过灼烧灭菌，防止瓶口微生物污染培养基
问题2：平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
防止培养基表面的水分过度挥发;防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染
问题3：怎么确定所倒平板未被杂菌污染？
将所倒平板放入 37℃ 的恒温箱中培养 12∼24 h ，观察是否有菌落存在以确定是否被污染或灭菌是否彻底。
1.下列关于倒平板的叙述，错误的是( ) A.待培养基冷却至50 ℃左右时倒平板 B.倒平板整个过程应在酒精灯火焰旁进行 C.完全打开培养皿皿盖，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖 D.为避免水滴滴入培养基，平板应倒过来放置
4.接种和分离酵母菌：
划3个平板（重复实验）1个不划线（空白对照）
（1）接种环只蘸一次菌液,但要在培养基不同位置连续划线多次
（2）划线首尾不能相接
（3）每次划线前灼烧接种环进行灭菌
（4）划线操作结束后，仍需灼烧接种环
问题4：在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？
以免接种环温度太高，杀死菌种。
问题5：在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？
划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
问题6：为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗？为什么？
接种前，杀死接种环上的微生物，避免污染培养基
杀死残留菌种，确保每次划线菌种来自上次划线的末端
划线结束后，杀死残留菌种，避免环境污染和感染操作者
接种环三个不同时期灼烧的目的
完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28℃左右的恒温培养箱中培养24-28h。
既可以防止培养基表面的水分挥发；又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染
作对照，该培养皿无菌落说明培养基没有污染
①配制培养基（马铃薯、葡萄糖、琼脂、水）
③倒平板（在酒精灯火焰附近操作）
培养基：湿热灭菌（高压蒸汽灭菌锅）
培养皿：干热灭菌（干热灭菌锅）
用接种环在固体培养基上用平板划线法接种
平板倒置，放入28℃左右的恒温培养箱培养
2.下列为几位同学描述的平板划线接种法的划线方式，其中正确的是（ ）
3.下图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是( )。
4.下图为微生物平板划线示意图，划线的顺序为1、2、3、4、5，下列叙述正确的是( )。
A.在每一区域内划线时接种环上的菌种直接来源于菌液 B.划线操作时应在酒精灯火焰旁边打开皿盖，划线接种 C.每次划线只能从上一次划线的末端开始，才能确保菌种逐步稀释以得到单菌落 D.第1区和第5区的划线最终要连接起来，以便比较前后的菌落数
5.在分离、纯化细菌的实验中，划线接种(甲)、培养结果(乙)如下图，a、b、c、d是划线的四个区域。下列叙述错误的是
A.每次划线前后都要对接种环灼烧灭菌B.连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落C.甲图中的a区域为划线的起始区域D.蘸取菌液和划线要在酒精灯火焰旁进行
6.下列关于倒平板及对菌种纯化的说法，正确的是(　　) A.倒平板时左手将灭过菌的培养皿盖完全打开，右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿(10～20 mL)，左手立即盖上培养皿盖 B.使用已灭菌的接种环及培养基之后不需要再灭菌 C.平板冷凝后要将平板倒置，以防皿盖上的冷凝水流入培养基 D.平板划线法是首先进行梯度稀释，然后将稀释的菌种通过接种环在固体培养基上连续划线，从而将聚集的菌种逐渐分散形成单个菌落
7.有关纯化酵母菌实验操作的叙述，错误的是(　　) A.在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液 B.第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物 C.每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种 D.划线结束后，灼烧接种环能及时杀死接种环上的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者
8.防止杂菌入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是（ ） A．实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒 B．在实验室中，切记不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防被微生物感染 C．接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰的不充分燃烧层灼烧 D．使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境
9．下列有关平板划线操作的叙述，正确的是（ ） A．待灼烧灭菌的接种环冷却后再进行划线 B．用接种环蘸取菌种后需要立即塞上棉塞 C．划线结束后要形成首尾相连的环形圈 D．每次划线都要在菌液中蘸取一环菌液
10.灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是（ ）A．动、植物细胞DNA的提取必须在无菌条件下进行B．微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染C．为防止蛋白质变性，不能用高压蒸汽灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌D．可用高压蒸汽灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌
11．下列关于无菌技术的叙述，错误的是（ ）A．经过巴氏消毒法处理的食品因微生物未彻底消灭，不能在常温下长期保存B．接种用的操作台需要进行灭菌处理C．使用巴氏消毒法处理牛奶是因为高温容易破坏牛奶的营养成分D．在分解纤维素的纯培养过程中，在培养基中观察到不同形态的菌落，可能是杂菌污染造成的