高中生物人教版 (2019)选择性必修3一 微生物的基本培养技术完美版ppt课件

这是一份高中生物人教版 (2019)选择性必修3一 微生物的基本培养技术完美版ppt课件，共41页。PPT课件主要包含了不加凝固剂，加凝固剂如琼脂，选择培养基等内容，欢迎下载使用。

经过杀菌处理的牛奶中添加某些对人体有益的细菌，在经过发酵就可以制成酸奶，由于制作工艺并不复杂，一些人会在家里自制酸奶，自制酸奶虽然方便，但是食用自制酸奶导致肠胃不适的事件屡见不鲜，主要原因是制作过程中有杂菌混入。
解析：应该先对制作用具和原料进行灭菌处理，再接种纯的菌种，并控制发酵条件，避免杂菌进入
真菌：酵母菌、毛霉等；原生生物：草履虫、变形虫等
病毒：SARS病毒、新冠病毒等RAN病毒；噬菌体等DNA病毒
细菌：蓝细菌、大肠杆菌、乳酸菌等；放线菌：链霉菌等
2）微生物生长繁殖产生的菌落
2、实验室培养微生物条件
1）提供微生物生长繁殖所需营养和环境条件
2）确保其它微生物无法混入
【自主探究】请结合教材P9-10面，思考这些问题的答案。1.培养基的用途有哪些？2.培养基的必备营养成分有哪些？3.配制培养基时，如何满足不同微生物的特殊需求？举例说明。4.培养基的种类有哪些？
人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
（ ①提供微生物繁殖所需各种营养， ②异养微生物的能源）
微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种
含化学成分不明确的天然物质
允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基
培养、分离出特定微生物
在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物
怎样选择出抗氨苄青霉素能力的细菌?
4、培养基的营养构成:
碳源、氮源、水、无机盐
注：含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源
Ca、K 、Mg为大量元素Zn、Cu、Mn、C、M等微量元素
凡是能够为微生物提供C、N等元素的营养物质。
（牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有）
(2)还需满足微生物对 pH、特殊营养物质、氧气的需求
维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等
举例说明：培养乳酸菌需要添加维生素培养霉菌时需将PH调至酸性，培养细菌时将PH调至中性或微碱性培养厌氧微生物时需要提供无氧条件
(1)用于发酵的微生物主要指细菌和真菌(　　)(2)培养基中加入琼脂的目的是提供碳源(　　)(3)所有微生物在培养时，培养基中都需加入氮源(　　)(4)培养不同微生物的培养基成分完全一样(　　)
2.关于微生物的营养，下列说法正确的是A.同一种物质不可能既作碳源又作氮源 B.凡是碳源都能提供能量C.除水以外的无机物仅提供无机盐 D.无机氮源也可能提供能量
3.下列有关培养基的叙述，正确的是A.微生物的培养都需要提供水、碳源、氮源、无机盐，缺一不可B.微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌C.培养细菌时，需要将培养基调至中性或弱碱性D.培养基只能培养细菌
【自主探究】请结合教材P10-11面，思考下列问题：1.获得纯净培养物的关键是什么？2.消毒和灭菌的区别是什么？3.为了防止杂菌污染，具体措施有哪些？（四个方面）4.如何针对不同的作用对象选择合适的消毒/灭菌方法？
泛指在培养微生物的操作中，避免杂菌污染的方法。
避免已经灭菌的材料用具与周围物品接触为了避免周围环境微生物污染，操作应在超净工作台并在酒精灯火焰旁进行。
使用较为温和的物理、化学或生物等方法，杀死物体表面或内部一部分微生物。
指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有微生物，包括芽孢和孢子。
①灼烧灭菌：酒精灯火焰灼烧
效果：最彻底原理：使微生物燃烧对象：接种工具如接种环、接种针，以及接种过程中的试管口或瓶口等易被污染部位
有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。
芽孢壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3小时以后才死亡。
细菌、原生动物、真菌和植物等产生的一种有繁殖作用的无性生殖细胞。能直接发育成新个体。
原理：使微生物细胞膜破坏、蛋白质变性和原生质干燥等 对象：耐高温，需保持干燥的物品，适用于 玻璃器皿 (如试管、培养皿、吸管、注射器) 金属器具 (如针头、 镊子、剪刀等)的灭菌
②干热灭菌：干热灭菌箱内160-170 ℃下加热2-3h
原理：高温蒸汽破坏蛋白质、核酸等结构使其变性 优点：操作简便，效果可靠，可以杀灭所有的生物，包括最耐热的 某些微生物的休眠体。基本保持培养基的营养成分不被破坏。 对象：培养基等
注：使用后的培养基必须灭菌后 才能丢弃，以免污染环境。
③湿热灭菌：高压蒸汽灭菌锅内100kPa、121 ℃下维持15-30min
(1)获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染(　　)(2)灭菌相比消毒对微生物的杀灭更彻底(　　)(3)无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用干热灭菌法进行灭菌(　　)
5.下列有关无菌技术的说法，正确的是A.无菌技术的关键是杀灭实验室中的所有的微生物B.培养微生物的试剂和器具都要进行湿热灭菌C.经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭，不能在常温下长期　保存D.无菌技术中，若处理对象为液体，则只能消毒，不能灭菌
6.关于消毒、灭菌的方法，下列描述错误的是A.接种用的无菌操作台要进行灭菌处理B.用巴氏消毒法处理牛奶是因为高温易破坏牛奶的营养成分C.煮沸半小时后的凉开水中可能仍含有部分芽孢和孢子D.先喷洒消毒液，再用紫外线照射可增强消毒效果
2．常用方法： 法和 法。
不同菌落的形状、大小、颜色等不同。菌落是鉴定菌种的重要依据。
1.概念：由 繁殖所获得的微生物群体是纯培养物，获得 的过程就是纯培养。
称取去皮马铃薯200g，切成小块，加水1000ml，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入20g葡萄糖、15-20g琼脂，用蒸馏水定容至1000ml.
将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，再放入高压蒸汽灭菌锅中，在压力为100kPa、温度为121℃的条件下，灭菌15-30min.将5-8套培养皿包成一包，用几层牛皮纸包紧，放入干热灭菌箱内，在160-170℃灭菌2h.
——待培养基冷却至50左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。
灭菌后的培养基在无菌操作台上倒入4个培养皿中，倒后立即置于水平位置上，轻轻晃动，使培养基铺满平皿底部，待凝，使之形成平面。
倒平板注意事项：①温度：50℃左右②操作：在酒精灯火焰附近③冷凝后平板倒置
1.培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？
可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉温度下降到刚刚不烫手即可。
2.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？
最好不要用这个平板培养微生物。 防止空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。
将所倒平板放入37℃的恒温箱中培养12h～24h，观察是否有菌落存在以确定是否被污染或灭菌是否彻底。
4.怎么确定所倒平板未被杂菌污染或灭菌彻底？
3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高；将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。经过数次划线后培养可以分离得到单菌落。
(2)“平板划线”实验操作
①灼烧接种环，直至接种环金属丝烧红
②在火焰旁冷却接种环，拔出酵母菌培养液试管的棉塞
④在火焰附近用接种环蘸取一环菌液
⑤试管口通过火焰，并塞上棉塞
⑥将皿盖打开一条缝隙，用接种环在培养基表面迅速划三至五条平行线，盖上皿盖
⑦灼烧接种环，待其冷却后，从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作，作第三、四、五次划线
划3个平板（重复实验）1个不划线（空白对照）
①接种环只蘸一次菌液,但要在培养基不同位置连续划线多次.②划线首尾不能相接③每次划线前接种环进行灭菌④划线后,培养皿倒置培养
1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时， 仍然需要灼烧接种环吗？为什么？
杀死接种环上原有微生物。
杀死上次划线时残留菌种，使下一次划线的菌种直接来源上次划线的末端
杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。
2.在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线的原因？
以免接种环温度太高，杀死菌种。
3.在作第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线的原因？
使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，以便获得单个菌落。
完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28℃左右的恒温培养箱中培养24-28h。
如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2 d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。
如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合酵母菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。
培养12 h与24 h后的酵母菌菌落的大小会有明显不同。 （培养时间越长，菌落越大、颜色越深）
1.培养基的制作是否合格？
2.接种操作是否符合无菌要求？
3.是否进行了及时细致的观察与记录？
(1)倒平板后，待平板冷凝之后需将其倒置(　　)(2)若皿盖和皿底之间溅上培养基，这个培养基不可再用(　　)(3)培养微生物的温度因菌种不同而稍有差异(　　)
8.下列关于倒平板的叙述，错误的是A.待培养基冷却至50 ℃左右时倒平板B.倒平板整个过程应在酒精灯火焰旁进行C.完全打开培养皿皿盖，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左　手立即盖上培养皿的皿盖D.为避免水滴滴入培养基，平板应倒过来放置
解析　C项应是用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，而不是完全打开皿盖，目的是防止杂菌污染。
9.在分离、纯化细菌的实验中，划线接种(甲)、培养结果(乙)如下图，a、b、c、d是划线的四个区域。下列叙述错误的是
A.每次划线前后都要对接种环灼烧灭菌B.连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落C.甲图中的a区域为划线的起始区域D.蘸取菌液和划线要在酒精灯火焰旁进行
解析　图中a对应的区域出现了单个菌落，d区域菌落最多，因此a区域应该为划线的最终区域，d区域为划线的起始区域，C错误。