高中生物人教版 (2019)选择性必修3一 微生物的基本培养技术优质ppt课件

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食用自制酸奶导致肠胃不适屡见不鲜
那么怎么才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢？
目录 /CONTENTS
个体无法用肉眼观察的微小生物。
人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
(1)按物理性质：液体培养基、固体培养基。
(2)按化学组成：天然培养基、合成培养基。
(3)按目的用途：选择培养基、鉴别培养基。
分离、鉴定、计数和菌种保存等。
固体培养基中的琼脂仅作为凝固剂， 不能为微生物生长提供能量和碳源。
单个微生物在培养基表面或内部形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。
菌落是鉴定菌种的重要依据。
观察微生物的运动、分类鉴定
微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种
含化学成分不明确的天然物质
在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长
培养、分离出特定微生物
在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物
怎样选择出抗氨苄青霉素能力的细菌?
4.培养基的营养成分:
碳源、氮源、无机盐、水
无机碳源：CO2、CO32-、HCO3-
有机碳源：糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油等
功能：①构成细胞物质和一些代谢产物②有机碳既是碳源又是能源。
无机氮源：NH4＋、NO3-、NH3等
有机氮源：牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等
功能：主要用于合成蛋白质、核酸及含氮代谢产物等。
含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源。
功能：提供无机营养 调剂PH 维持渗透压
功能：良好的溶剂 维持生物大分子结构的稳定
pH、O2和特殊营养物质
例： 1、培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素； 2、培养霉菌时，需要将培养基调制酸性； 3、培养细菌时，需要将培养基调制中性或弱碱性； 4、培养厌氧微生物时，需要提供无氧条件
生长因子、氨基酸、维生素、碱基等
牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌）
牛肉膏是采用新鲜牛肉经过消化、过滤、浓缩而得到的一种棕黄色至棕褐色的膏状物。有牛肉自然香味，易溶于水，水溶液呈淡黄色。
蛋白胨是一种外观呈淡黄色的粉剂。一般用于蛋白胨生产的蛋白包括动物蛋白（肉类）和植物蛋白（豆类）等两种。
查氏培养基（培养霉菌）
哪一种培养基的成分明确？
获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染！
1.消毒：是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。2.灭菌：是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
操作的空间、操作者的衣着和手
用于培养微生物的器皿、接种用具和培养基
芽孢是某些细菌在营养条件缺乏时，在菌体内形成的含水量低、抗逆性强的休眠体；孢子是脱离亲本后能直接或间接发育成新个体的生殖细胞。
-----与消毒最本质区别
较为温和理化方法，杀死部分微生物。
强烈的理化方法，杀死所有微生物。
100℃煮沸5～6min
62～65℃煮30min或80-90℃煮30s-1min
生物活体（皮肤、伤口）、水源等
擦拭等,如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源
接种的金属工具、接种时用的试管口或瓶口等
直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧
耐高温、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金属用具等
物品放入干热灭菌箱,160～170℃加热2～3h
培养基及多种器材和物品
高压蒸汽灭菌锅内,100kPa,温度121 ℃,15～30min
接种室、接种箱，超净工作台
请阅读教材P9资料卡, 完成下列表格
连一连：物品所对应的灭菌或消毒方法 培养基 培养皿 接种环 实验操作者的双手 实验室 牛奶
微生物的纯培养
在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的培养。
由单一个体繁殖所获得的微生物群体。
获得纯培养物的过程就是纯培养。
鉴定菌种的重要依据：形状、大小、光泽度、颜色、透明度等。
①平板划线法 ②稀释涂布平板法
待培养基冷却至50 ℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。
②操作：在酒精灯火焰附近
1.怎么确定所倒平板未被杂菌污染？
将所倒平板放入37℃的恒温箱中培养12h～24h，观察是否有菌落存在以确定是否被污染或灭菌是否彻底。
2.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？
最好不要用这个平板培养微生物。防止空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。
1）留意接种环灭菌的注意事项。 2）划线的注意事项。
【平板划线法注意事项】
1.接种环只蘸一次菌液，但要在培养基不同位置连续划线多次；
2.划线首尾不能相接；
3.每次划线前灼烧接种环进行灭菌；
4.划线操作结束后，仍需灼烧接种环。
为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？ 在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗？为什么？
杀死接种环上原有微生物
杀死上次划线时残留菌种，使下一次划线的菌种直接来源上次划线的末端，从而使每次划线时菌种数目逐渐减少，直至得到单个细胞
杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者
完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28℃左右的恒温培养箱中培养24-48h。
划3个平板（重复实验）1个不划线（空白对照）
作对照，该培养皿无菌落说明培养基没有污染.
用记号笔标记培养皿中菌落皿底上
平板划线法可以对菌种进行分离，不能对培养液中菌种进行计数
警示：在实验室中，切不可吃东西、喝水；离开实验室时一定要洗手，以 防止被微生物感染。使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭菌处理，以免 污染环境。
1. 微生物的纯培养既需要适宜的培养基，又要防止杂菌污染。判断下列相关表述是否正确。 （1）培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利。（ ） （2）消毒和灭菌的杀菌程度存在差异。 （ ） （3）微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物。（ ）
2.日常生活中保存食品的方法有哪些？这些方法是如何阻止或抑制微生物生长的？
干制——降低食品的水分含量；腌制——通过食盐、糖等制造高渗环境，从而抑制微生物的生长和繁殖；低温储存——通过降低微生物的代谢速率来抑制微生物的生长和繁殖。
1.某同学将5个手指尖在贴有“洗手前”标签的培养基上轻轻按一下。然后用肥皂将该手洗干净，再将5个指尖在贴有“洗手后”标签的同种培养基上轻轻按一下。将这两个培养皿放入37℃恒温培养箱中培养24h后，发现贴有“洗手后”标签的培养皿中菌落较少。请分析回答下列问题。（1）这个实验中需要进行灭菌处理的材料用具有________________。（2）“将指尖在培养基上轻轻按一下”相当于微生物培养中的哪一步操作？（3）从实验结果来看，洗手后我们就能进行无菌操作了吗？操作时，我们可以采用什么方法来避免手上微生物的污染？
洗手后手上还有一些微生物，不能直接进行无菌操作。可以通过用酒精棉球擦拭双手，或戴消过毒的手套等方法来避免手上微生物的污染。
2. 某生物兴趣小组将从葡萄皮上成功分离来的野生酵母菌分别接种于3个盛有等量同种液体培养基的锥形瓶中，并放置在摇床上培养，摇床转速分别为 210 r/min， 230 r/min和250 r/min。培养时间与酵母菌种群密度的关系如下图所示。请分析回答下列问题。
（1）摇床转速不同，意味着培养条件有什么不同？
培养液中02含量不同。
（2）从图中数据你可以得出什么结论?其原因是什么?
培养液中02含量越高，酵母菌种群密度越大。
（3）为什么培养8h后，其中2个锥形瓶中酵母菌的种群密度基本达到稳定?
这时候已经达到了环境容纳量。
孢子是脱离亲本后能直接或间接发育成新个体的生殖细胞。有时候可直接由营养细胞通过细胞壁加厚和积贮养料而形成，能抵抗不良环境条件。
又称内生孢子，是细菌休眠体。芽孢含水量极低，抗逆性强，能经受高温、紫外线，电离辐射以及多种化学物质灭杀等。恶劣环境下，一个细菌产生一个芽孢，条件适宜时重新成为一个细菌。