选择性必修3第1节 重组DNA技术的基本工具一等奖ppt课件

这是一份选择性必修3第1节 重组DNA技术的基本工具一等奖ppt课件，共29页。PPT课件主要包含了学习目标，基因工程的基本工具，温故知新，探究实验，实验原理，实验材料及用具，研磨液，溶解并提取DNA，析出DNA，溶解DNA等内容，欢迎下载使用。

关注基因工程的诞生和发展历程，参与讨论基础理论和技术发展如何催生基因工程。（社会责任）
探究DNA的物理与化学性质， 进行DNA分子的提取与鉴定。（科学思维）
运用结构与功能观说明基因工程的各种工具的特点。（生命观念）
质粒、噬菌体 、动植物病毒
DNA的粗提取和鉴定
概述DNA粗提取和鉴定的原理，以及材料的选择。
以小组为单位画出实验流程简图。
合作探究一：请同学们自主阅读教材P74-75，小组合作思考讨论完成问题。
第一次过滤后DNA在沉淀中还是上清液中？
你能分析出粗提取的DNA中可能含有哪些杂质吗？
DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精
DNA能溶于物质的量浓度为2 ml/L的NaCl溶液
在一定温度下，DNA被二苯胺试剂染成蓝色
DNA含量相对较高的生物组织，如新鲜洋葱、香蕉、菠菜、菜花和猪肝等。
问题1:能否选用牛、羊、马、猪等哺乳动物的红细胞做实验材料？
不能选择哺乳动物成熟的红细胞，因为哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核和线粒体，几乎不含DNA。
体积分数为95%的酒精
2ml/L 的NaCl溶液
鉴定DNA，要现配现用
(1)研磨：称取约30g洋葱,切碎,然后放入研中,倒入10mL研磨液,充分研磨。(2)提取上清液：在漏斗中垫上纱布,将洋葱研磨液过滤到烧杯中,在4℃冰箱中放置几分钟后,再取上清液。也可以直接将研磨液倒入塑料离心管中,在1500r/min的转速下离心5min,再取上清液放入烧杯中。
研磨不充分，会使DNA分子不能从细胞核中释放出来，从而影响提取的DNA含量
不可以，因为DNA会被吸附到滤纸上而大量损失。
可能含有DNA、RNA以及蛋白质、脂质、糖类等。
(3)加酒精析出：在上清液中加入体积相等的、预冷的酒精溶液(体积分数为95%),静置2~3 min,溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸去上面的水分;或者将溶液倒入塑料离心管中,在10000r/min的转速下离心5min,弃上清液,将管底的沉淀物(粗提取的DNA)晾干。
（1）冷却的酒精溶液(体积分数95％)作用：
一是抑制核酸水解酶活性，防止DNA降解；
二是低温有利于增加DNA分子柔韧性，减少断裂。
这一步的目的是蛋白质溶解在酒精中，DNA不溶于酒精而析出。
将丝状物或沉淀物溶于 溶液中，加入 试剂，混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min。
在等体积的NaCl溶液中加入二苯胺试剂，将试管置于同等沸水浴中加热5min。
加入2ml/L氯化钠溶液
DNA在沸水浴的情况下遇二苯胺试剂会被染成蓝色
问题1:你提取出白色丝状物或沉淀物了吗？用二苯胺试剂鉴定的结果如何？
观察提取的DNA的颜色，如果不是白色丝状物，说明DNA中的杂质较多。二苯胺试剂鉴定呈现蓝色说明实验基本成功；如果不呈现蓝色，可能的原因有所提取的DNA含量低，或者在实验操作过程中出现了失误等。
问题2:你能分析出粗提取的DNA中可能含有哪些杂质吗？
本实验粗提取的DNA可能仍然含有核蛋白、多糖等杂质。
问题3:与其他同学提取的DNA进行比较，看看实验结果有何不同，分析产生差异的原因。
实验结果不明显的可能原因：①材料中的核物质没有充分释放出来，如研磨不充分或蒸馏水的量不够。②加入酒精后摇动或搅拌时过猛，DNA被破坏。③二苯胺最好现用现配，否则二苯胺变成浅蓝色，影响鉴定效果。
本试验只是对DNA进行了粗提取，请查阅资料，了解实验室提取纯度较高的DNA的一种方法，并与本实验中所使用的方法进行比较，总结两种方法的异同。
实验室提取纯度较高的DNA的方法有不少。例如，可以先添加质量分数为25%的SDS溶液，使蛋白质变性后与DNA分开；随后，加入氯仿—异丙醇混合液（体积比为24:1），通过离心将蛋白质及其它杂质除去，取清液；可重复上述操作几次，直至上清液变成透明的粘稠液体。此外，由于苯酚可以迅速使蛋白质变性，抑制核酸酶的活性，因此还可以先用苯酚处理，然后离心分层，这时DNA溶于上层水相，蛋白质变性后存在于酚层中，用吸管、微量移液器等实验用具就可以将二者分开。
1.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成( ) A.砖红色 B.橘黄色 C.紫色 D.蓝色2.DNA析出与鉴定过程中，会出现白色丝状物，用玻璃棒搅拌时为什么要沿一个方向轻轻搅拌( ) A.为了省力 B.加快蛋白质的析出 C.为了加大DNA的溶解度 D.防止DNA结构被破坏
3.在DNA析出与鉴定过程中加入酒精的目的是( ) A.溶解DNA B.除去DNA中所有杂质 C.析出DNA D.稀释溶液降低浓度
4.DNA的粗提取中，加入与滤液体积相等的、冷却的某物质的溶液，静置2～3 min，溶液中会出现白色丝状物。上面提到的某物质的溶液是指(　　)A．0.9%的NaCl溶液 B．0.14 ml/L的NaCl溶液C．质量分数为15%的HCl溶液 D．体积分数为95%的酒精溶液
5.关于DNA在NaCl溶液中的溶解度，下面的叙述哪一个是正确的（ ） A.随着NaCl溶液浓度的增大，DNA在NaCl溶液中的溶解度也增大 B.随着NaCl溶液浓度的减小，DNA在NaCl溶液中的溶解度也减小 C.DNA在NaCl溶液中的溶解度与NaCl溶液的浓度无关 D.当NaCl溶液的浓度为0.14M时，DNA的溶解度最低
6.下表关于DNA粗提取与鉴定实验的表述，不正确的是（ ）
7.下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验原理的叙述，正确的是(　　)A．DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的升高而减小B．利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNAC．DNA是大分子有机物，易溶于水也溶于某些有机溶剂D．在沸水浴中，DNA遇二苯胺会出现紫色反应
8.利用新鲜洋葱作为实验材料提取DNA时A.可将洋葱置于清水中，细胞吸水破裂后将DNA释放出来B.离心后上清液中加入75%冷酒精，出现的白色丝状物就是纯净的DNAC.将晾干的白色丝状物置于2 ml/L的NaCl溶液中，会发生溶解现象D.可利用DNA在低温下遇到二苯胺试剂呈现蓝色反应的特性对其进行鉴定
9. 下列有关“ DNA 的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是( )A. 实验室可用鸡血细胞作为提取 DNA 的材料B. 在 2 ml/LNaCl 溶液中， DNA 溶解度较大C. 向上清液中缓慢加入预冷的酒精，是为了充分稀释 DNA D. 二苯胺试剂要现配现用，否则会影响鉴定效果
10.DNA粗提取与鉴定实验中所依据的原理是①DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同②DNA易被甲紫溶液染成紫色③溶解有DNA的NaCl溶液加入二苯胺试剂沸水浴后会呈现蓝色④加入体积分数为95%的冷酒精，DNA会从溶液中析出⑤加入体积分数为70%的冷酒精，DNA会从溶液中析出A.①②③ B.①③④C.②③④ D.①③⑤
11.下列关于DNA粗提取与鉴定的叙述，错误的是( )A. DNA析出过程中，搅拌操作要轻柔以防DNA断裂B. 预冷的酒精溶液可用来粗提取DNAC. 用二苯胺试剂鉴定DNA需要进行水浴加热D. 鉴定DNA时，应将丝状物直接加入到二苯胺试剂中进行沸水浴
12.下图是“DNA粗提取与鉴定”实验中的两个操作步骤示意图，下列有关叙述错误的是(　　)
A.图1中的丝状物含有DNAB.图1所示操作的原理是DNA能溶于酒精，而蛋白质等杂质不溶C.图2所示实验操作完成后，最好待试管溶液冷却后观察颜色变化D.图2中的溶液b能够溶解DNA