2020-2021学年第1章 发酵工程第2节 微生物的培养技术及应用一 微生物的基本培养技术第1课时免费复习练习题

第2节　微生物的培养技术及应用

第1课时　微生物的基本培养技术

基础过关练

题组一　培养基的配制

1.下表是一种培养基的配方,此培养基提供的主要营养物质有(　易错　)

A.3类 B.4类 C.5类 D.6类

2.关于培养基中满足微生物生长对pH、特殊营养物质及O2的需求,下列叙述错误的是(　深度解析　)

A.培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素

B.培养霉菌时需将培养基调至碱性

C.培养细菌时需将培养基调至中性或弱碱性

D.培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件

题组二　无菌技术

3.(2020山西平遥中学高二期中)下列关于灭菌和消毒的理解,正确的是(　易错　)

A.医务人员进入工作区要全身灭菌

B.接种疫苗前要对注射区域进行消毒

C.消毒与灭菌的含义本质是相同的

D.常用的消毒方法有灼烧和高压蒸汽

4.(2020山东潍坊高二期中)在生产、生活和科研实践中,经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。下列说法错误的是(　　)

A.牛奶的消毒常采用巴氏消毒法

B.密闭空间内的空气常采用紫外线照射消毒

C.玻璃实验器具可以放入干热灭菌箱中进行干热灭菌

D.水厂供应的自来水通常是经过高锰酸钾消毒的

5.(2020山东莱州一中高二月考)微生物的实验室培养,获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染。下列无菌操作中,错误的是(　　)

A.对实验用的培养基,采用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌

B.对锥形瓶、塞上棉塞的试管或吸管等,用干热灭菌箱进行灭菌

C.对操作者的双手、衣着以及操作空间等,采用紫外线进行消毒

D.对试管口、锥形瓶口等部位,通过火焰灼烧进行灭菌

题组三　微生物的纯培养

6.下列有关酵母菌纯培养的叙述,错误的是　(　　)

A.培养酵母菌的试剂和器具不都进行高压蒸汽灭菌

B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线

C.为了防止污染,接种环经过火焰灭菌,然后立即快速挑取菌落

D.酵母菌菌种分离使用的是固体培养基

7.下列不是细菌接种过程中的无菌操作的是(　　)

A.灼烧接种环 B.高压蒸汽灭菌

C.在超净工作台操作 D.靠近火焰

8.下列有关平板划线法的操作错误的是　(　　)

A.将接种环放在火焰上灼烧　　　　　

B.将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液

C.蘸取菌液和划线要在火焰旁进行　　

D.划线时要将最后一次的划线与第一次的划线相连

9.有关倒平板的操作错误的是(　深度解析　)

A.将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上

B.使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰

C.将培养皿打开,培养皿盖倒放在桌子上

D.等待培养基冷却凝固后,将培养皿倒过来放置

10.(2020山东威海文登高三期末,)如图是微生物平板划线示意图,划线的顺序为1、2、3、4、5,下列操作方法错误的是(　　)

A.每次划线操作后要将接种环放在火焰上灼烧灭菌

B.划线操作应在超净工作台上进行

C.第3次划线操作可从第2次开始划出,也可从第1次开始

D.在第4次划线区域中也可以得到菌落

11.图1是酵母菌纯培养过程的一些步骤,请据图回答下列问题:

　　　　　　　图1　　　　　　　　　　　　图2

(1)图1中所表示的接种方法是　　　　　,请用线条和箭头在图2空白圆圈内画出该方法接种的路径示意图。 

(2)图示接种方法的目的是　。 

(3)在进行　　　　　和　　　　操作之间要对用到的培养基作灭菌处理。 

(4)灭菌是指　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　,对培养基的灭菌需要在　　　　　　　　　　的条件下维持15~30 min。 

能力提升练

题组一　归纳培养基的成分及种类

1.(2020山西吕梁高二月考,)有关培养基配制原则的表述正确的是(　　)

A.任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、水以及无机盐

B.碳源和氮源必须具有一定比例,碳元素的含量最多,其次为氮元素

C.有的培养基还需要满足微生物生长对pH、氧以及特殊营养物质的需求

D.营养物质的浓度越高越好

2.(不定项)(2020河南南阳一中模拟改编,)下列有关培养基的叙述正确的是(　　)

A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质

B.培养基可用来培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物

C.固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基

D.微生物在固体培养基上生长时,可以形成肉眼可见的单个细菌

题组二　归纳常见的无菌技术

3.(2020辽宁丹东高二期末,)关于消毒和灭菌的方法,描述不正确的是(　　)

A.接种用的超净工作台要进行灭菌处理

B.经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭,所以不能在常温下长期保存

C.煮沸半小时后的凉开水中仍含有部分芽孢和孢子

D.对接种环灼烧灭菌后,要等其温度下降再进行接种

4.(不定项)(2020山东枣庄高三第二次调研改编,)消毒和灭菌是微生物培养中常用的操作方法。下列说法不正确的是(　　)

A.微生物接种技术的方法不同,但核心都是要防止杂菌污染,保证培养物的纯度

B.在100 ℃条件下煮沸5~6分钟属于灭菌方法,可杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢

C.无菌技术中,若处理对象为液体,则只能消毒,不能灭菌

D.高压蒸汽灭菌锅只有当压力表的压力降到一个标准大气压时,才能打开盖子

题组三　微生物的纯培养及应用

5.()某酿酒厂得到了一批优良酵母菌菌种,技术人员对其进行了纯化,获得了如图所示的效果图,下列叙述错误的是(　　)

A.该培养皿中获得的分散开来的菌落较符合要求

B.该接种方法是平板划线法,接种环在每次划线后都必须进行灼烧灭菌

C.该纯化过程所用的培养基应添加琼脂,且琼脂应在培养基灭菌之后加入

D.由于划线过程中接种环上的菌种逐渐减少,平板中部分酵母菌菌落间距离较大

6.(2020四川泸县一中高三月考,)如图为微生物的实验室培养和纯化醋酸菌的部分操作步骤,请回答下列问题:

(1)①是制备培养基时　　　　　的操作,该操作需待培养基冷却至　　　　左右时进行。 

(2)该实验中纯化醋酸菌的接种方法是　　　　　　;完成步骤④的操作,接种共需要　　　　次灼烧处理,其中最后一次灼烧的目的是　 

　。 

(3)划线的某个平板经培养后,第一次划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二次划线区域的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落,造成划线上无菌落可能的操作失误有 

　(回答2个)。 

(4)接种结束后,将④倒置培养,皿底上标注　　　　　　　　　　　。 

7.(2020四川眉山高三第三次诊断,)某同学配制含琼脂的牛肉膏蛋白胨培养基后,对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌,当培养基温度下降到50 ℃时,在酒精灯火焰附近倒平板,待培养基冷却至室温,按如表处理:

将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养2~3天,观察每个培养皿中的菌落特征和数目。回答下列问题:

(1)上述实验的实验目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　。若E组的培养基表面有菌落生长,说明　　　　　　　　　　。 

(2)培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为微生物生长提供　　　　和　　　　　。“在酒精灯火焰附近”进行相关操作是为了　　　　　　　　　　　　　　。 

(3)实验过程特别强调温度控制,请简要说明下列温控措施的目的:

①“待培养基冷却至室温”的目的有 

　。 

②“将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养”的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 

(4)培养微生物时将培养皿倒置的目的是　　　　　　　　　　　　　　。实验结束后,对使用过的培养基应进行　　　　　处理。 

第2节　微生物的培养技术及应用

第1课时　微生物的基本培养技术

基础过关练

1.C　培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质,该培养基中牛肉膏提供的主要营养物质有碳源、磷酸盐和维生素等,蛋白胨提供的主要营养物质有氮源和维生素等,NaCl为无机盐,因此该培养基提供的主要营养物质有水、无机盐、氮源、碳源和维生素5类。

易错警示

对微生物所需的营养物质认识不全面而出错

无机盐和水是微生物生长不可缺少的营养物质,绝不能误认为水和无机盐不是微生物所需的营养物质。

2.B　维生素是乳酸杆菌生长繁殖所必须的营养物质,因此要在培养乳酸杆菌的培养基中添加维生素,A正确;培养霉菌时应将培养基调至酸性,B错误;培养细菌时需将培养基调至中性或弱碱性,C正确;厌氧微生物在有氧时无氧呼吸受抑制,因此培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件,D正确。

归纳总结

培养基配制的原则

(1)目的要明确:根据微生物的种类、培养目的等确定配制培养基的种类,因为不同的微生物对营养物质的需求不同。

(2)营养要协调:注意各种营养物质的浓度和比例。

(3)环境要适宜:不同微生物适宜生长的pH不同,同时不同微生物需氧情况也可能不同。

3.B　医务人员进入工作区要全身消毒,A错误;接种疫苗前要对注射区域进行消毒,B正确;灭菌是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子,而消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物,C错误;常用的消毒方法有煮沸消毒、巴氏消毒、紫外线消毒和化学药物消毒等,灼烧和高压蒸汽都是灭菌的方法,D错误。

易错警示

混淆灭菌和消毒

消毒是使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物,对被消毒物基本无害的措施。灭菌是使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子,主要将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。

4.D　巴氏消毒法可以杀死牛奶中绝大多数微生物,并且不破坏牛奶的营养成分,因此牛奶的消毒常采用巴氏消毒法,A正确;密闭空间内的空气常采用紫外线照射消毒,B正确;玻璃实验器具可以放入干热灭菌箱中进行干热灭菌,C正确;水厂供应的自来水通常经过氯气消毒,D错误。

5.C　对实验用的培养基,采用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌,A正确;对锥形瓶、塞上棉塞的试管或吸管等,用干热灭菌箱进行灭菌,B正确;对操作者的双手应用酒精进行消毒,C错误;对试管口、锥形瓶口等部位,通过火焰灼烧进行灭菌,D正确。

6.C　接种室、接种箱等常用紫外线消毒法处理,接种环等常用灼烧灭菌法处理,吸管、培养皿等常用干热灭菌法处理,培养基等常用湿热灭菌法(高压蒸汽灭菌锅)处理,A正确;转换划线角度后,为避免杂菌污染,需灼烧接种环再进行划线,B正确;为了防止污染,接种环经火焰灭菌后需要冷却后再挑取菌落,防止高温使菌种死亡,C错误;酵母菌菌种分离使用的是固体培养基,因为分散的酵母菌在固体培养基上可形成菌落,D正确。

7.B　在细菌接种的前后都需要灼烧接种环,A不符合题意;高压蒸汽灭菌一般用于培养基的灭菌,而在细菌接种过程中不需要高压蒸汽灭菌,B符合题意;细菌接种过程应该在超净工作台上操作,以防止杂菌的污染,C不符合题意;细菌接种过程应该在酒精灯火焰附近进行,以防止杂菌的污染,D不符合题意。

8.D　接种过程中需注意的内容:①无菌操作;②灼烧后的接种环冷却后再取菌液;③划线时不要将培养基表面划破,最后一次的划线与第一次的划线不能相连。因此,D错误。

9.C　整个倒平板过程要防止杂菌的污染,因此该过程需要注意:①灭过菌的培养皿放在火焰旁;②打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰;③培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,不能将培养皿盖完全打开;④等待培养基冷却凝固后,将培养皿倒过来放置。

归纳总结

倒平板的过程需要进行无菌操作,要对培养基进行高压蒸汽灭菌,对培养皿进行干热灭菌。

10.C　每次划线操作后要将接种环放在火焰上灼烧灭菌,可以杀死接种环上残留的微生物,A正确;划线操作应在超净工作台上进行,B正确;结合题干信息,划线的顺序为1、2、3、4、5,平板划线过程要保证每次划线的菌种来自上一次划线的末端,C错误;在5个划线区域中,只要有单个活细菌,通过培养就可获得所需菌落,D正确。

11.答案　(1)平板划线法

(2)分离、纯化酵母菌,得到单个菌落　(3)调pH　倒平板　(4)使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子　压力为100 kPa、温度为121 ℃

解析　(1)题图1中所表示的接种方法是平板划线法,该方法接种的路径示意图见答案。(2)用平板划线法进行接种的目的是对酵母菌分离、纯化,得到单个菌落。(3)在进行调pH和倒平板操作之间要对用到的培养基作灭菌处理。(4)灭菌是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。对培养基的灭菌常采用高压蒸汽灭菌,需要在压力为100 kPa、温度为121 ℃的条件下维持15~30 min。

能力提升练

1.C　培养基一般都含有碳源、氮源、无机盐和水等营养物质,而分离自生固氮菌的培养基中,不需要加入氮源,A错误;碳源和氮源必须具有一定比例,但碳元素的含量不一定最多,自养型微生物的培养基不需要加入碳源,B错误;配制培养基时还需要考虑微生物生长对pH、氧以及特殊营养物质的需求,C正确;营养物质的浓度过高可能会造成微生物渗透失水死亡,D错误。

2.AB　培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求,为微生物的生长繁殖提供碳源、氮源、水和无机盐等营养的基质,A正确;培养基可用来培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物,B正确;固体培养基中去除凝固剂(如琼脂)即可制成液体培养基,C错误;微生物在固体培养基上生长时,可以形成肉眼可见的菌落,但不是单个细菌,D错误。

3.A　接种用的超净工作台用紫外线消毒处理,A错误;巴氏消毒法不能杀灭所有的微生物,因此经巴氏消毒法处理的食品不能在常温下长期保存,B正确;煮沸仅杀死物体表面或内部一部分微生物,不能杀死全部芽孢和孢子,C正确;对接种环灼烧灭菌后,要等其温度下降再进行接种,以防温度过高杀死微生物,D正确。

4.BCD　微生物接种技术的方法不同,但核心都是要防止杂菌污染,保证培养物的纯度,A正确;在100 ℃条件下煮沸5~6分钟属于煮沸消毒法,B错误;无菌技术中,若处理对象为液体,可以用高压蒸汽进行灭菌,C错误;高压蒸汽灭菌锅只有当压力表的压力降到0时,才能打开盖子,D错误。

5.C　题图所示的分离方法为平板划线法,该培养皿中获得的分散开来的菌落较符合要求,A正确;接种环在每次划线后都必须进行灼烧灭菌,杀死接种环上残留的菌种,B正确;该纯化过程所用的培养基为固体培养基,应加入一定量的琼脂,对培养基的灭菌应该在加入琼脂之后进行,C错误;由于划线过程中接种环上的菌种逐渐减少,平板中部分酵母菌菌落间距离较大,D正确。

6.答案　(1)倒平板　50 ℃　(2)平板划线法　6　杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者　(3)接种环灼烧后未冷却;划线未从第一次划线末端开始　(4)菌种及接种日期等信息

解析　(1)①是制备培养基时倒平板的操作,需要将培养基冷却到50 ℃左右时进行。(2)根据步骤④可知,该实验纯化醋酸菌的接种方法是平板划线法,平板划线时,每次划线后接种环都要进行灼烧,第一次划线前也要进行灼烧,因此完成步骤④的操作,接种共需要6次灼烧处理,其中最后一次灼烧的目的是杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。(3)造成划线上无菌落可能的操作失误有接种环灼烧后未冷却或划线未从第一次划线末端开始。(4)为了防止培养皿盖上的水珠滴落到培养基上引发污染,需要将培养皿倒置培养,且同时在培养基皿底标注菌种及接种日期等信息。

7.答案　(1)探究不同高度空气中微生物的种类和数量　培养基灭菌不合格(受到杂菌污染)　(2)碳源　氮源　避免周围环境中微生物的污染　(3)①使培养基凝固,防止培养基温度过高杀死接种在其上的微生物　②让微生物在适宜的温度下生长(繁殖)　(4)防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上(污染培养基和破坏菌落)　灭菌

解析　(1)题述实验中的自变量是打开培养皿盖的培养皿距地面的高度,因此该实验的实验目的是探究不同高度空气中微生物的种类和数量。若E组的培养基表面有菌落生长,说明该培养基灭菌不彻底(受到杂菌污染)。(2)培养基中的牛肉膏提供的主要营养物质是碳源、磷酸盐和维生素等,蛋白胨提供的主要营养物质是氮源和维生素等,而微生物的生长需要的营养物质主要是碳源和氮源。“在酒精灯火焰附近”进行相关操作是为了避免周围环境中微生物的污染。(3)①“待培养基冷却至室温”的目的是使培养基凝固,防止培养基温度过高杀死接种在其上的微生物。②“将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养”的目的是让微生物在适宜的温度下生长(繁殖)。(4)培养微生物时将培养皿倒置的目的是防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上,污染培养基和破坏菌落。实验结束后,对使用过的培养基应进行灭菌处理。