生物选择性必修3第1章 发酵工程第2节 微生物的培养技术及应用一 微生物的基本培养技术教课ppt课件

这是一份生物选择性必修3第1章 发酵工程第2节 微生物的培养技术及应用一 微生物的基本培养技术教课ppt课件，共56页。PPT课件主要包含了内容索引，课前篇自主预习，课堂篇探究学习，素养目标，培养基的配制，消毒和灭菌，酵母菌的纯培养，自养微生物，不添加氮源，唯一氮源等内容，欢迎下载使用。

自我检测1.人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的培养基,判断下列有关培养基的表述是否正确。(1)所有的微生物在培养时都必须添加氮源。( × )(2)CO2可作为异养微生物的碳源。( × )(3)不同培养基的具体配方不同,但一般都含水、碳源、氮源和无机盐。( √ )(4)液体培养基含有水,而固体培养基不含水。( × )
2.(2021辽宁葫芦岛高二月考)下列关于培养基的叙述,正确的是(　　)A.培养基可以用来培养、分离、鉴定、保存微生物或者积累其代谢物B.培养基都必须含有水、碳源、氮源、无机盐和维生素等C.牛肉膏蛋白胨培养基中的牛肉膏和蛋白胨来源于植物,含有糖、维生素和有机氮等营养物质D.微生物在琼脂固体培养基表面或者内部生长时,可以形成肉眼可见的单个细菌
答案 A解析 培养基可以用来培养、分离、鉴定、保存微生物或者积累其代谢物,A项正确;培养不同微生物时培养基所含的必需物质不同,培养细菌一般不需要维生素,培养动物细胞还需要加入生长因子,B项错误;牛肉膏蛋白胨培养基中的牛肉膏和蛋白胨来源于动物,C项错误;微生物在琼脂固体培养基表面或内部生长时,可以形成肉眼可见的菌落,D项错误。
二、无菌技术1.获得纯净的微生物培养物的关键:防止杂菌污染。2.具体操作(1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。
4.注意事项(1)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。(2)为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在超净工作台上并在酒精灯火焰附近进行。
自我检测1.灭菌是将处理物内外的一切微生物全部杀灭,消毒是将物体表面或内部的微生物减少到不再影响实验对象的程度,判断下列有关消毒和灭菌的表述是否正确。(1)灭菌相比消毒对微生物的杀灭更彻底。( √ )(2)无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。( × )(3)培养基最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。( √ )(4)选择消毒或灭菌要根据无菌操作的对象及目的而定。( √ )
三、微生物的纯培养1.纯培养:在微生物学中,将接种于培养基内,在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体称为培养物。由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物,获得纯培养物的过程就是纯培养。2.微生物纯培养的步骤:微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。3.菌落及获得方法(1)菌落:分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体。(2)获得单菌落的方法:平板划线法和稀释涂布平板法。
5.倒平板的具体操作待培养基冷却至50 ℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板。倒平板的具体操作步骤如下。 无菌区域
6.平板划线的具体操作
自我检测1.酵母菌的纯培养可分为制备培养基、接种和分离酵母菌、培养酵母菌三个阶段,判断下列有关酵母菌的纯化培养的表述是否正确。(1)由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。( √ )(2)配制好的培养基可用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。( √ )(3)培养基冷却凝固后应将培养皿倒置。( √ )(4)接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌。( √ )
2.如图是微生物平板划线示意图,下列叙述正确的是(　　)A.对接种环用酒精进行消毒即可B.每次划线前后都要对接种环灭菌C.只有在5区才可能得到单菌落D.划线力度要大,保证划线清晰答案 B解析 对接种环要进行灼烧灭菌,A项错误;每次划线前后都要对接种环灭菌,防止杂菌污染,B项正确;在5个区域中,只要有单个活细菌,通过培养即可获得所需菌落,C项错误;划线力度应适宜,避免划破培养基,D项错误。
特定培养基的设计原理与应用举例
[归纳提升]1.培养基的营养成分
2.几种微生物的营养和能量来源
[探究应用]1.下表为培养某种微生物的培养基配方,下列相关叙述错误的是(　　)
A.该培养基没有凝固剂,属于液体培养基B.该培养基含有青霉素,属于选择培养基C.培养基中的碳源是(CH2O),氮源是NaNO3D.该培养基可用于筛选培养纤维素分解菌
答案 D解析 该培养基没有凝固剂琼脂,根据物理性质划分,属于液体培养基,A项正确;该培养基配方中含有青霉素,根据用途划分,该培养基属于选择培养基,可抑制细菌生长繁殖,筛选出真菌,B项正确;能为微生物的生长繁殖提供所需碳元素的物质叫碳源,能为微生物的生长繁殖提供所需氮元素的物质叫氮源。该培养基配方中唯一碳源是(CH2O),唯一氮源是NaNO3,C项正确;用该培养基筛选纤维素分解菌(属于细菌),则应除去(CH2O)和青霉素,再添加纤维素,D项错误。
2.下列关于培养基的叙述,正确的是(　　)A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B.培养基都含有水、碳源、氮源、无机盐和生长因子等C.牛肉膏蛋白胨培养基属于合成培养基,营养全面D.微生物在固体培养基上生长时,可以形成肉眼可见的单个细菌答案 A解析 培养基是为微生物的生长繁殖提供碳源、氮源、水和无机盐等营养的基质,A项正确;微生物培养基的主要营养物质有碳源、氮源、水和无机盐等,有的还需要生长因子等特殊的营养,B项错误;牛肉膏蛋白胨培养基属于天然培养基,营养全面,C项错误;微生物在固体培养基上生长时,可以形成肉眼可见的菌落,但不一定是单个细菌繁殖而来的,D项错误。
3.(2021山东泰安一中高二月考)下列关于培养基的叙述,正确的是(　　)A.在配制培养基时,除满足营养需求外,还应考虑pH、O2及特殊营养物质的需求B.获得假单胞杆菌菌落后,在进行扩大培养时,应选用固体培养基C.从土壤中获取乙草胺降解菌,为了防止杂菌的污染,可在培养基中加入青霉素D.倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上
答案 A解析 培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐,此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质(如维生素)以及氧气的要求,A项正确;获得假单胞杆菌菌落后,在进行扩大培养时,应选用液体培养基,B项错误;青霉素抑制细菌的繁殖,在培养基中加入青霉素,青霉素能抑制杂菌繁殖的同时,也会抑制乙草胺降解菌的繁殖,C项错误;倒平板时,用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基(约10~20 mL)倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖,避免空气中的杂菌进入培养皿中,D项错误。
1.请判断以下材料或用具需要消毒还是灭菌?请从①~⑤中选择合适的方法。①化学消毒　②灼烧灭菌　③干热灭菌　④紫外线消毒　⑤高压蒸汽灭菌(1)培养细菌用的培养基(　　)、培养皿(　　　　)(2)接种工具——接种环(　　)(3)实验操作者的双手(　　)(4)稀释用的移液管和试管(　　)(5)培养有害微生物的实验室空气(　　)
2.消毒和灭菌的原理有哪些?试举例说明。提示 使菌体蛋白凝固变性,如高压蒸汽灭菌法;抑制细菌代谢和生长,或破坏细菌细胞膜的结构,改变其通透性,使细胞破裂、溶解,如某些化学消毒法;损伤细菌DNA等,如紫外线消毒法。3.消毒和灭菌都能杀死所有的微生物吗?提示 灭菌可杀死物体内外的全部微生物,包括芽孢和孢子,而消毒仅杀死部分微生物。
[归纳提升]1.无菌技术的重要性无菌技术是获得纯净培养物的关键。防止外来杂菌污染培养物,离不开无菌技术;要防止培养物污染人体和环境,也离不开无菌技术。
2.消毒和灭菌的比较
[探究应用]1.下表中有关消毒与灭菌的描述错误的是(　　)A.若要彻底除去物体内外的芽孢和孢子,只靠方法①②③是不行的B.牛奶、啤酒等通常用方法②消毒,④可以为接种针、涂布器等灭菌C.⑤⑥灭菌时,灭菌物品均不能与箱壁或桶壁接触,其原因不同D.培养皿、培养基灭菌均可采用⑤⑥方法
答案 D解析 常用的消毒方法并不能除去孢子和芽孢,若要除去芽孢和孢子,需要灭菌处理,A项正确;牛奶、啤酒等这些不耐高温的液体,常用的方法是巴氏消毒法,对于金属操作工具常用灼烧灭菌法,如涂布器、接种环等,B项正确;运用干热灭菌法时,灭菌的物品不与灭菌箱内壁接触,防止包装纸烤焦起火;运用高压蒸汽灭菌法时,锥形瓶与试管口不与桶壁接触是为了避免冷凝水淋湿包裹瓶口的纸而透入棉塞,C项正确;培养基不能用干热灭菌法,只能使用高压蒸汽灭菌,D项错误。
2.下列关于消毒和灭菌的叙述,错误的是(　　)A.灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B.培养皿、胶头吸管可用干热灭菌法灭菌C.高压蒸汽灭菌时间达到后待压力降至零时,再打开排气阀排气D.接种疫苗前要对注射区域进行消毒
答案 B解析 灭菌是指使用强烈的理化方法杀灭环境中的一切微生物,包括芽孢和孢子,A项正确;玻璃器皿和金属用具的灭菌常采用干热灭菌法,培养皿可用干热灭菌法灭菌,胶头吸管可用高压蒸汽法灭菌,B项错误;高压蒸汽灭菌时间达到后,先切断热源让温度自然下降,当压力表的压力降到零时,再打开排气阀排气,C项正确;接种疫苗前要对注射区域进行消毒,可通过酒精等化学药物消毒,D项正确。
3.下列关于灭菌或消毒的相关叙述,正确的是(　　)A.巴氏消毒法常用于消毒牛奶,可以杀死牛奶中的全部微生物B.在接种过程中,试管口、瓶口等都可以通过火焰灼烧进行灭菌C.培养基、接种环、涂布器、外植体可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌D.可用紫外线照射接种室,以杀死空气中的所有微生物及芽孢和孢子
答案 B解析 巴氏消毒法常用于消毒牛奶,可以杀死牛奶中的大部分微生物,但不是所有微生物,A项错误;在接种过程中,试管口、瓶口等都可以通过火焰灼烧进行灭菌,B项正确;培养基采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌,接种环、涂布器采用灼烧灭菌法进行灭菌,外植体只能进行消毒,不能灭菌,C项错误;可用紫外线照射接种室进行消毒,以杀死空气中的微生物,但不包括芽孢和孢子,D项错误。
1.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?提示 对瓶口进行灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。2.从防止杂菌污染的角度思考,培养基冷却凝固后将培养皿倒置的原因是什么?提示 培养基冷却凝固后,培养皿的皿盖上会凝结水珠,将培养皿倒置,可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。
3.采用平板划线法接种菌种时,哪些操作可防止杂菌污染?提示 (1)接种前将接种环放在酒精灯火焰上灼烧灭菌。(2)接种环蘸取菌液前后,要将试管口通过火焰。(3)划线时将培养皿的皿盖打开一条缝隙,将蘸有菌种的接种环迅速伸入平板内,划线后及时盖上皿盖。(4)每次划线结束后,灼烧接种环,冷却后再进行下一次划线。(5)整个接种过程要在酒精灯火焰旁进行。4.在做第二次划线以及其后的操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线?提示 划线末端含有的菌体数目较少,每次从上一次划线的末端开始划线能够使菌体的数目随划线次数的增加而逐渐减少,最终分散成单个的菌体。
[归纳提升]1.倒平板操作的注意事项(1)培养基灭菌后需要冷却至50 ℃左右时才能倒平板。温度过高,培养基凝固后皿盖上冷凝水过多,落入培养基,造成污染;温度过低,培养基又会凝固。(2)将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,不要完全打开,以免杂菌污染培养基。
(3)培养基冷却凝固后,要将培养皿倒置的原因:防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。(4)在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板应弃用,因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。(5)整个操作过程要在酒精灯火焰旁进行,避免杂菌污染。
2.平板划线操作的注意事项(1)蘸取菌液前及每次划线之后都需灼烧接种环,划线操作结束仍需灼烧接种环,每次灼烧的目的不同。
(2)灼烧接种环之后,要等其冷却后才能伸入菌液或进行划线,以免温度太高,杀死菌种。(3)在做第二次以及其后的划线操作时,要从上一次划线的末端开始划线,这样才能使菌体的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终得到由单个菌体繁殖而来的菌落。(4)最后一次的划线不要与第一次的划线相连。(5)划线时用力要大小适当,防止用力过大将培养基划破。
[探究应用]1.(多选)微生物接种的方法有很多,平板划线法是常用的一种。如图是平板划线示意图,划线的顺序为①②③④。下列相关叙述错误的是(　　)A.划线操作时,将蘸有菌种的接种环插入培养基B.平板划线后培养微生物时要倒置培养C.可以将第④区域的划线与第①区域的划线相连D.在第②~④区域中划线前都要对接种环进行灭菌
答案 AC解析 划线时不能将接种环插入培养基,而是在培养基表面划线,A项错误;用平板培养基培养微生物时,为防止水蒸气凝集滴入培养基造成干扰或污染,应将平板倒置培养,B项正确;划线时要避免最后一区域的划线与第一区域的划线相连,如果连在一起则有可能影响单个菌落的分离效果,C项错误;在第②~④区域中划线前都要对接种环进行灼烧灭菌,保证每次划线的菌种都来自上一区域的末端,D项正确。
2.下列有关平板划线操作的叙述,正确的是(　　)A.用接种环蘸取菌种后需要立即塞上棉塞B.待灼烧灭菌的接种环冷却后再进行划线C.划线结束后要形成首尾相连的环形圈D.每次划线都要在菌液中蘸取一环菌液
答案 B解析 用接种环蘸取菌种后,要将试管口再次通过酒精灯火焰,灼烧灭菌后再塞上棉塞,A项错误;待灼烧灭菌的接种环冷却后再进行划线,避免温度过高杀死菌种,B项正确;划线结束后第一次划线区不能和最后一次划线区相连,C项错误;只要在第一区第一次划线时蘸取一环菌液,后续的划线不需要再蘸取菌液,D项错误。
3.下列有关大肠杆菌的分离与培养的叙述,正确的是(　　)A.在大肠杆菌培养基中,由牛肉膏提供维生素,由蛋白胨提供磷酸盐,而琼脂起凝固作用B.稀释涂布平板法是通过连续划线的方法将聚集的菌种分散C.平板划线法接种时,在接种之前及每次划线操作之后都要对接种环进行灭菌D.纯化培养时,培养皿应倒置放在恒温培养箱内的摇床上培养