生物选择性必修3基因工程的基本操作程序教学ppt课件

这是一份生物选择性必修3基因工程的基本操作程序教学ppt课件，共23页。PPT课件主要包含了终止子，DNA复制的起始位点，终止目的基因的转录，启动子，花粉管通道法，农杆菌特点，农杆菌转化过程，农杆菌，目的基因，T-DNA等内容，欢迎下载使用。
（1）使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代。
（2）使目的基因能够表达和发挥作用。
阅读P80第二段内容，思考基因表达载体由哪些部分组成？试结合P72图3—4质粒的结构画出基因表达载体模式图，标注各组成部分的名称。
基因表达载体的构建——基因工程的核心
2.基因表达载体组成及其功能
注意：目的基因必须插入到________与________之间。
RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA。
便于重组DNA分子的筛选
控制特定性状或表达特定产物
3.基因表达载体构建的流程
①用一定的限制酶切割载体，使其出现一个切口，露出黏性末端。
②用同种限制酶或能产生相同末端的限制酶切割含有目的基因的DNA片段。
③利用DNA连接酶将目的基因片段拼接到载体的切口处，形成重组DNA分子。
目的基因与运载体的结合过程，实际上是不同来源的基因重组的过程。
转化是指目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
不同生物的导入方法各不同。
转化的实质是将目的基因整合到受体细胞基因组中。
将目的基因导入受体细胞
①用微量注射器将含目的基因的DNA溶液直接注入子房中；
②在植物授粉后一定时间内，剪去柱头，将DNA溶液滴在花柱切面，使目的基因通过花粉管通道进入胚囊。
易感染双子叶植物和裸子植物，对大多数单子叶植物没有感染能力。
Ti质粒上的T-DNA可以转移到被侵染的受体细胞，并将其整合到该细胞染色体的DNA上。
2.农杆菌转化法
结合视频资料，对照P81图解思考农杆菌转化过程步骤，可分哪几个阶段？
________插入Ti质粒的_______中形成含目的基因的重组Ti质粒
将含目的基因的重组Ti质粒导入_________
目的基因插入植物细胞中的____________上
目的基因拼接到Ti质粒的T-DNA上；
被插入目的基因的T-DNA拼接到受体细胞染色体的DNA上。
将含目的基因的重组Ti质粒导入农杆菌
含目的基因的T-DNA导入受体细胞
注意过程中的“两拼接”“两导入”的指代
3.将目的基因导入动物细胞——显微注射法
获得具新性状的转基因动物
4.将目的基因导入微生物细胞
一般先用Ca2+处理大肠杆菌，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，后再将重组的基因表达载体导入其中
检测转基因生物染色体DNA上是否插入目的基因
检测目的的基因是否转录出了mRNA
检测目的基因是否翻译成蛋白质
抗虫鉴定抗病鉴定活性鉴定
③使探针和转基因生物的DNA（或mRNA）杂交，若显示出杂交带，表明目的基因已插入染色体DNA中（或目的基因转录出了mRNA）。
①提取转基因生物的DNA
②制作基因探针：用含目的基因的DNA片段用放射性同位素等作标记。
从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原-抗体杂交，若有杂交带出现，表明目的基因已形成蛋白质产品。
通过抗虫或抗病的接种实验。有的基因工程产品需要与天然产品的功能进行活性比较。
基因工程的基本操作程序
1.下列关于基因的叙述中正确的是（ ）A.基因在DNA双链上成对存在 B.基因中含有遗传密码C.基因位于DNA分子上D.基因由四个脱氧核糖核苷酸分子组成
2.有关基因工程的叙述正确的是（ ）A.限制酶只在获得目的基因时才用B.重组质粒的形成在细胞内完成C.质粒都可作为运载体 D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料
3、以下说法正确的是（ ）A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接D、基因控制的性状都能在后代表现出来
4、不属于质粒被选为基因运载体的理由是（ ）A、能复制 B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA5.下列关于基因表达载体的叙述不正确的是（ ）A.启动子是与RNA聚合酶识别和结合的部位，是起始密码B.启动子和终止子都是特殊结构的DNA短片段，对mRNA的转录起调控作用C.标记基因是为了鉴别受体细胞中是否有目的基因从而便于筛选D.基因表达载体的构建视受体细胞及导入方式不同而有所差别
6、基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是（ ）A、人工合成目的基因 B、目的基因与运载体结合C、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因的检测和表达
7．在受体细胞中能检测出目的基因是因为（ ）A.目的基因上有标记 B.重组质粒能够复制 C.质粒具有某些标记基因D.以上都不正确
8.下列有关体内DNA复制与PCR技术比较的叙述，错误的是（ ）A.二者子链的延伸方向相同，均为5′端→3′端B.二者均需要解旋酶破坏氢键来实现解旋C.体内DNA复制需要能量，PCR反应也需要能量D.二者遵循的碱基互补配对原则相同