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高中生物人教版 (2019)选择性必修3二 微生物的选择培养和计数课后测评
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这是一份高中生物人教版 (2019)选择性必修3二 微生物的选择培养和计数课后测评，共8页。
1．选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这样培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。为选择酵母菌和硝化细菌，应选用的培养基分别为( )
A．伊红美蓝培养基、含青霉素培养基
B．含青霉素培养基、含氨的无机培养基
C．含氨的无机培养基、含青霉素培养基
D．含青霉素培养基、伊红美蓝培养基
【答案】B
【解析】酵母菌是真菌，通常可以用含青霉素的培养基进行选择培养，因为青霉素能抑制细菌生长，但不能抑制真菌生长。硝化细菌为自养型生物，能够利用氨转变为亚硝酸和硝酸所释放的能量把无机物转变为有机物以维持自身生命活动，利用含氨的无机培养基可以进行选择培养。
2．(2023·广东深圳期中)土壤中有些细菌可以利用原油中的多环芳烃。为筛选出能高效降解原油的菌株并投入除污，某研究小组进行了相关实验。下列有关叙述错误的是( )
A．选择被原油污染的土壤取样，使用稀释涂布平板法或平板划线法进行分离
B．配制以多环芳烃为唯一碳源的选择培养基进行培养，可提高目的菌的浓度
C．将土壤稀释液彻底灭菌后再接种到培养基上，可以有效防止杂菌的污染
D．在分离纯化菌种后，需借助生物化学的方法对分离的菌种作进一步的鉴定
【答案】C
【解析】由题干信息可知，实验的目的是筛选出能高效降解原油的菌株，故应选择被原油污染的土壤取样，使用稀释涂布平板法或平板划线法进行分离，A正确；配制以多环芳烃为唯一碳源的选择培养基进行培养，可提高目的菌的浓度，B正确；若将土壤稀释液彻底灭菌，需要筛选的目的菌也被一并杀死，需要灭菌的是用于稀释的无菌水，C错误；在分离纯化菌种后，需借助生物化学的方法对分离的菌种作进一步的鉴定，D正确。
题组二 微生物的数量测定方法
3．(2023·广东珠海期末)下列关于分离微生物和统计菌落数目方法的叙述，错误的是( )
A．进行土壤取样时，针对不同的微生物，所取土样的场所和深度是不同的
B．在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌液量过多会影响分离效果
C．平板划线法分离菌株时，从上一次划线的末端开始作为下一次划线的起点
D．用稀释涂布平板法计数时，获得的菌落数等于菌液中的活菌数
【答案】D
【解析】不同微生物的生存环境和适宜土壤条件不同，所以针对不同的微生物，所取土样的场所和深度是不同的，A正确；在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多，否则会导致菌体堆积，影响分离效果，B正确；平板划线法分离菌株时，从上一次划线的末端开始作为下一次划线的起点，C正确；用稀释涂布平板法计数时，获得的菌落数往往少于菌液中的活菌数，D错误。
4．下列关于统计菌落数目的方法的叙述，不正确的是( )
A．采用平板计数法获得的菌落数往往少于实际的活菌数
B．当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落
C．为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数
D．在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别不大，则应以它们的平均值为统计结果
【答案】C
【解析】当两个或多个细菌连在一起时，平板上形成的只是一个菌落，因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。一般选择菌落数在30～300的平板计数，密度过大会使计数结果偏小，影响结果的准确性。涂布三个平板作为重复组，取其平均值计数能增强实验结果的说服力和准确性。
题组三 能分解尿素的细菌的分离与计数
5．在土壤中分解尿素的细菌的分离和计数实验中，某培养基上没有生长菌落，某同学分析了出现上述现象的原因，其中不合理的是( )
A．培养基中含葡萄糖B．土壤样品稀释倍数过大
C．培养时间过短D．涂布器灼烧后立刻接种
【答案】A
【解析】葡萄糖为细菌提供碳源，没有长菌落，不可能是加了葡萄糖的缘故，A错误；土壤样品稀释倍数过大会导致接种量太少，可能会看不到菌落，B正确；培养时间过短，细菌繁殖数量少，因此看不到菌落，C正确；涂布器灼烧后立刻接种会导致接种量过少甚至没有，因此看不到菌落，D正确。
6．(2023·广东广州期中)如图所示为分离某种以尿素为氮源的细菌的实验过程，下列叙述错误的是( )
A．土样从有哺乳动物尿液的地方取，获得目的菌种的概率更高
B．为验证尿素固体培养基具有选择作用，可用牛肉膏蛋白胨固体培养基作对照
C．C组三个培养皿中分别形成了54个、46个、50个菌落，则1 g土壤样本中约有分解尿素的细菌5×107个
D．在尿素固体培养基上生长的细菌有可能不都是以尿素为氮源的细菌
【答案】C
【解析】在含哺乳动物排泄物的土壤中有较多能合成脲酶的细菌，因此土样从有哺乳动物尿液的地方取，获得目的菌种的概率更高，A正确；取不同稀释倍数的土壤稀释液各0.1 mL，分别涂布于牛肉膏蛋白胨固体培养基、尿素固体培养基上，其中牛肉膏蛋白胨固体培养基是对照组，用以说明尿素固体培养基是否有选择作用，B正确；C组三个培养皿中分别形成了54个、46个、50个菌落，则1 g土壤样本中约有分解尿素的细菌(54＋46＋50)÷3÷0.1×104＝5×106个，C错误；在尿素固体培养基上生长的细菌大多数是以尿素为氮源的细菌，还有一些利用空气中氮的微生物也能生长，D正确。
7．(2023·广东名校阶段练习)下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验操作的叙述，错误的是( )
A．利用稀释涂布平板法准确估计菌落数目的关键是有恰当的稀释度
B．若要判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置未接种的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照
C．该实验应采用稀释涂布平板法
D．用以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基来培养该细菌后不会使酚红指示剂变红
【答案】B
【解析】利用稀释涂布平板法准确估算菌落数目的关键是有恰当的稀释度，稀释倍数太低，菌落太多会长在一起，稀释倍数太高，平板上菌落数目过少，不易计数，A正确；若要判断选择培养基是否起到了选择作用，需设置接种了的没有选择作用的细菌通用的牛肉膏蛋白胨培养基作对照，B错误；在土壤中分解尿素的细菌的分离和计数实验中，应采用稀释涂布平板法，C正确；分解尿素的细菌能合成脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基，则能维持pH稳定，不会使酚红指示变红，D正确。
8．(2023·广东名校阶段练习)在农业生产中，为了提高农作物的产量，人们会向农田中施用大量的化学肥料。化肥残留过多会影响土壤的理化性质。利用微生物分解残留化肥的效果较好，为了筛选并保存高效分解尿素的微生物，研究人员配制了两份培养基如下表所示。下列相关叙述不正确的是( )
A．尿素分解菌可直接以尿素作为氮源
B．可用平板划线法获得单菌落以及计算土壤样品中分解尿素的活菌数量
C．可用稀释涂布平板法来统计土壤样品中分解尿素的活菌数量
D．平板划线时，灭菌后的接种环需每次在上次划线的末端划线
【答案】B
【解析】尿素分解菌能分解尿素，因此可直接以尿素作为氮源，A正确；平板划线法可获得单个菌落，但不能计数活菌数目，B错误；可用稀释涂布平板法来统计土壤样品中分解尿素的活菌数量，C正确；平板划线时，灭菌后的接种环需每次在上次划线的末端划线，保证菌种来自每次划线的末端，D正确。
[能力提升]
9．(2023·广东珠海统考)高浓度铵盐对海水养殖中的对虾有一定毒害作用，这是制约其大规模养殖的因素之一，具有高降解能力的硝化细菌能有效净化水体中的铵盐。科研人员将等量的三种硝化细菌甲、乙、丙分别接入铵盐浓度为40 mg·L-1的模拟养殖污水中，适宜条件下培养一段时间，检测并比较三组培养瓶中的铵盐浓度，具体操作如下图。下列相关叙述错误的是( )
A．上图选择培养基应以铵盐为唯一氮源并向其中添加琼脂
B．样品接种及候选菌接种时均需要对接种环进行灼烧灭菌
C．铵盐浓度最高的锥形瓶中可得到降解能力最强的候选菌
D．硝化细菌通过降解铵盐可获取氮来合成核酸等生命物质
【答案】C
【解析】硝化细菌是一类能降解铵盐的自养型细菌，故为了筛选出硝化细菌，需要配制以铵盐为唯一氮源的固体培养基，A正确；避免防止杂菌污染，样品接种及候选菌接种时均需要对接种环进行灼烧灭菌，B正确；由题目可知，图示中三个锥形瓶中的铵盐浓度是一样的，C错误；核酸含有N元素，故硝化细菌通过降解铵盐可获取氮来合成核酸等生命物质，D正确。
10．下图是研究人员从红棕壤中筛选能高效分解尿素的细菌的过程示意图，有关叙述错误的是( )
A．在配制步骤②③的培养基时，应先调pH后进行高压蒸汽灭菌
B．步骤③纯化能分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞菌落
C．步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素
D．步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力
【答案】C
【解析】配制培养基时，应先调pH后进行高压蒸汽灭菌，A正确；步骤③纯化能分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌通过涂布平板法分散，获得单细胞菌落，B正确；步骤③筛选能分解尿素的细菌，培养基中应以尿素为唯一氮源，C错误；步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力，D正确。
11．某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物X。研究人员用化合物X、磷酸盐、镁盐以及一些微量元素配制成培养基，成功筛选到能高效降解化合物X的细菌(目的菌)，实验的主要步骤如图所示。下列有关叙述错误的是( )
A．该培养基中化合物X可能既作碳源又作氮源
B．实验培养过程中进行振荡培养的主要目的是增大目的菌的浓度
C．实验操作过程中，要注意防止外来杂菌污染
D．将固体培养基得到的目的菌重复多次上述实验的目的是对菌种进行“纯化”
【答案】B
【解析】磷酸盐、镁盐以及一些微量元素中不含C、N元素，由此可推测该培养基中化合物X可能既作碳源又作氮源，A正确；实验培养过程中进行振荡培养的主要目的是增加培养液中的溶氧量，满足微生物对氧气的需求，B错误；筛选微生物的过程中应注意防止外来杂菌污染，C正确；在以化合物X为唯一碳源的培养基中只有能降解化合物X的微生物才能生长繁殖，不能利用化合物X的微生物因缺乏碳源和氮源，无法生长繁殖，将固体培养基得到的目的菌重复多次上述实验的目的是对菌种进行“纯化”，D正确。
12．为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：
(1)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过________灭菌。
(2)示意图A和B中，________表示的是用平板划线法接种培养后得到的结果。能够得到单菌落的是图________。
(3)图B的接种工具是________，如果图B中的菌种是某细菌，则一般稀释倍数为____________倍。
(4)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量，将1 mL水样稀释100倍，在4个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，4个平板上的菌落数分别为29、39、38和37，据此可得出每升水样中的活菌数为____________个。
(5)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是振荡培养能提高培养液中______的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率。
【答案】(1)灼烧 (2)A A、B (3)涂布器 1×104、1×105、1×106 (4)3.8×107 (5)溶解氧
【解析】(1)对接种环常用的灭菌方法是灼烧灭菌。(2)分析题图可知，A培养皿采用的接种方法是平板划线法，B培养皿采用的接种方法是稀释涂布平板法，这两种接种方法都可获得单菌落。(3)图B的接种方法是稀释涂布平板法，该方法所需的接种工具是涂布器；细菌的稀释倍数一般为1×104、1×105、1×106倍。(4)为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，因此1 mL水样中的菌落数是(39＋38＋37)÷3÷0.1×100＝3.8×104个，每升水样中的活菌数为3.8×104×103＝3.8×107个。(5)由题意可知，振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快，由此可以说明该细菌是需氧菌，由于振荡培养提高了培养液中溶解氧的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高了营养物质的利用率，细菌生长速度加快。
13．尿素是一种重要的农业氮肥，但是尿素不能被农作物直接吸收，只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。请回答下列问题。
(1)土壤中的某些细菌能分解尿素，是因为它们能合成________。
(2)配制好的培养基常用____________法进行灭菌。为了检测所用培养基平板灭菌是否合格，需要进行的操作是____________________________________。
(3)为了筛选到能分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择尿素作为唯一氮源，原因是______________________________________；若平板上长出菌落，可通过加入显色剂初步鉴定该种细菌能够分解尿素，加入的显色剂是________。
(4)一位同学在某浓度下稀释涂布了一个平板，统计的菌落数为230。该同学的实验结果________(填“有”或“无”)说服力，原因是___________________________________。
【答案】(1)脲酶
(2)高压蒸汽灭菌 将灭菌后的空白平板培养一段时间，观察培养基上是否有菌落产生
(3)只有能够利用尿素的细菌才能在该培养基上生长 酚红
(4)无 没有设置重复组
【解析】(1)土壤中的某些细菌能够合成脲酶，脲酶能够将尿素分解为氨和二氧化碳。(2)培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌。检测培养基灭菌是否合格，需要将灭菌后的空白平板培养一段时间，观察培养基上是否有菌落产生，如果没有菌落产生证明培养基灭菌合格，否则不合格。 (3)筛选能分解尿素的细菌时需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，因为只有能够利用尿素的细菌才能在该培养基上生长，其他微生物不能分解尿素而不能生长。能分解尿素的细菌能够将尿素分解为氨而使pH升高，酚红指示剂能够与氨反应呈红色，故可以用酚红指示剂检测能分解尿素的细菌。(4)根据题意可知该同学没有设置重复组，所以结果没有说服力。编号
成分
甲
KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水
乙
牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、蒸馏水
1．选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这样培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。为选择酵母菌和硝化细菌，应选用的培养基分别为( )
A．伊红美蓝培养基、含青霉素培养基
B．含青霉素培养基、含氨的无机培养基
C．含氨的无机培养基、含青霉素培养基
D．含青霉素培养基、伊红美蓝培养基
【答案】B
【解析】酵母菌是真菌，通常可以用含青霉素的培养基进行选择培养，因为青霉素能抑制细菌生长，但不能抑制真菌生长。硝化细菌为自养型生物，能够利用氨转变为亚硝酸和硝酸所释放的能量把无机物转变为有机物以维持自身生命活动，利用含氨的无机培养基可以进行选择培养。
2．(2023·广东深圳期中)土壤中有些细菌可以利用原油中的多环芳烃。为筛选出能高效降解原油的菌株并投入除污，某研究小组进行了相关实验。下列有关叙述错误的是( )
A．选择被原油污染的土壤取样，使用稀释涂布平板法或平板划线法进行分离
B．配制以多环芳烃为唯一碳源的选择培养基进行培养，可提高目的菌的浓度
C．将土壤稀释液彻底灭菌后再接种到培养基上，可以有效防止杂菌的污染
D．在分离纯化菌种后，需借助生物化学的方法对分离的菌种作进一步的鉴定
【答案】C
【解析】由题干信息可知，实验的目的是筛选出能高效降解原油的菌株，故应选择被原油污染的土壤取样，使用稀释涂布平板法或平板划线法进行分离，A正确；配制以多环芳烃为唯一碳源的选择培养基进行培养，可提高目的菌的浓度，B正确；若将土壤稀释液彻底灭菌，需要筛选的目的菌也被一并杀死，需要灭菌的是用于稀释的无菌水，C错误；在分离纯化菌种后，需借助生物化学的方法对分离的菌种作进一步的鉴定，D正确。
题组二 微生物的数量测定方法
3．(2023·广东珠海期末)下列关于分离微生物和统计菌落数目方法的叙述，错误的是( )
A．进行土壤取样时，针对不同的微生物，所取土样的场所和深度是不同的
B．在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌液量过多会影响分离效果
C．平板划线法分离菌株时，从上一次划线的末端开始作为下一次划线的起点
D．用稀释涂布平板法计数时，获得的菌落数等于菌液中的活菌数
【答案】D
【解析】不同微生物的生存环境和适宜土壤条件不同，所以针对不同的微生物，所取土样的场所和深度是不同的，A正确；在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多，否则会导致菌体堆积，影响分离效果，B正确；平板划线法分离菌株时，从上一次划线的末端开始作为下一次划线的起点，C正确；用稀释涂布平板法计数时，获得的菌落数往往少于菌液中的活菌数，D错误。
4．下列关于统计菌落数目的方法的叙述，不正确的是( )
A．采用平板计数法获得的菌落数往往少于实际的活菌数
B．当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落
C．为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数
D．在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别不大，则应以它们的平均值为统计结果
【答案】C
【解析】当两个或多个细菌连在一起时，平板上形成的只是一个菌落，因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。一般选择菌落数在30～300的平板计数，密度过大会使计数结果偏小，影响结果的准确性。涂布三个平板作为重复组，取其平均值计数能增强实验结果的说服力和准确性。
题组三 能分解尿素的细菌的分离与计数
5．在土壤中分解尿素的细菌的分离和计数实验中，某培养基上没有生长菌落，某同学分析了出现上述现象的原因，其中不合理的是( )
A．培养基中含葡萄糖B．土壤样品稀释倍数过大
C．培养时间过短D．涂布器灼烧后立刻接种
【答案】A
【解析】葡萄糖为细菌提供碳源，没有长菌落，不可能是加了葡萄糖的缘故，A错误；土壤样品稀释倍数过大会导致接种量太少，可能会看不到菌落，B正确；培养时间过短，细菌繁殖数量少，因此看不到菌落，C正确；涂布器灼烧后立刻接种会导致接种量过少甚至没有，因此看不到菌落，D正确。
6．(2023·广东广州期中)如图所示为分离某种以尿素为氮源的细菌的实验过程，下列叙述错误的是( )
A．土样从有哺乳动物尿液的地方取，获得目的菌种的概率更高
B．为验证尿素固体培养基具有选择作用，可用牛肉膏蛋白胨固体培养基作对照
C．C组三个培养皿中分别形成了54个、46个、50个菌落，则1 g土壤样本中约有分解尿素的细菌5×107个
D．在尿素固体培养基上生长的细菌有可能不都是以尿素为氮源的细菌
【答案】C
【解析】在含哺乳动物排泄物的土壤中有较多能合成脲酶的细菌，因此土样从有哺乳动物尿液的地方取，获得目的菌种的概率更高，A正确；取不同稀释倍数的土壤稀释液各0.1 mL，分别涂布于牛肉膏蛋白胨固体培养基、尿素固体培养基上，其中牛肉膏蛋白胨固体培养基是对照组，用以说明尿素固体培养基是否有选择作用，B正确；C组三个培养皿中分别形成了54个、46个、50个菌落，则1 g土壤样本中约有分解尿素的细菌(54＋46＋50)÷3÷0.1×104＝5×106个，C错误；在尿素固体培养基上生长的细菌大多数是以尿素为氮源的细菌，还有一些利用空气中氮的微生物也能生长，D正确。
7．(2023·广东名校阶段练习)下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验操作的叙述，错误的是( )
A．利用稀释涂布平板法准确估计菌落数目的关键是有恰当的稀释度
B．若要判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置未接种的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照
C．该实验应采用稀释涂布平板法
D．用以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基来培养该细菌后不会使酚红指示剂变红
【答案】B
【解析】利用稀释涂布平板法准确估算菌落数目的关键是有恰当的稀释度，稀释倍数太低，菌落太多会长在一起，稀释倍数太高，平板上菌落数目过少，不易计数，A正确；若要判断选择培养基是否起到了选择作用，需设置接种了的没有选择作用的细菌通用的牛肉膏蛋白胨培养基作对照，B错误；在土壤中分解尿素的细菌的分离和计数实验中，应采用稀释涂布平板法，C正确；分解尿素的细菌能合成脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基，则能维持pH稳定，不会使酚红指示变红，D正确。
8．(2023·广东名校阶段练习)在农业生产中，为了提高农作物的产量，人们会向农田中施用大量的化学肥料。化肥残留过多会影响土壤的理化性质。利用微生物分解残留化肥的效果较好，为了筛选并保存高效分解尿素的微生物，研究人员配制了两份培养基如下表所示。下列相关叙述不正确的是( )
A．尿素分解菌可直接以尿素作为氮源
B．可用平板划线法获得单菌落以及计算土壤样品中分解尿素的活菌数量
C．可用稀释涂布平板法来统计土壤样品中分解尿素的活菌数量
D．平板划线时，灭菌后的接种环需每次在上次划线的末端划线
【答案】B
【解析】尿素分解菌能分解尿素，因此可直接以尿素作为氮源，A正确；平板划线法可获得单个菌落，但不能计数活菌数目，B错误；可用稀释涂布平板法来统计土壤样品中分解尿素的活菌数量，C正确；平板划线时，灭菌后的接种环需每次在上次划线的末端划线，保证菌种来自每次划线的末端，D正确。
[能力提升]
9．(2023·广东珠海统考)高浓度铵盐对海水养殖中的对虾有一定毒害作用，这是制约其大规模养殖的因素之一，具有高降解能力的硝化细菌能有效净化水体中的铵盐。科研人员将等量的三种硝化细菌甲、乙、丙分别接入铵盐浓度为40 mg·L-1的模拟养殖污水中，适宜条件下培养一段时间，检测并比较三组培养瓶中的铵盐浓度，具体操作如下图。下列相关叙述错误的是( )
A．上图选择培养基应以铵盐为唯一氮源并向其中添加琼脂
B．样品接种及候选菌接种时均需要对接种环进行灼烧灭菌
C．铵盐浓度最高的锥形瓶中可得到降解能力最强的候选菌
D．硝化细菌通过降解铵盐可获取氮来合成核酸等生命物质
【答案】C
【解析】硝化细菌是一类能降解铵盐的自养型细菌，故为了筛选出硝化细菌，需要配制以铵盐为唯一氮源的固体培养基，A正确；避免防止杂菌污染，样品接种及候选菌接种时均需要对接种环进行灼烧灭菌，B正确；由题目可知，图示中三个锥形瓶中的铵盐浓度是一样的，C错误；核酸含有N元素，故硝化细菌通过降解铵盐可获取氮来合成核酸等生命物质，D正确。
10．下图是研究人员从红棕壤中筛选能高效分解尿素的细菌的过程示意图，有关叙述错误的是( )
A．在配制步骤②③的培养基时，应先调pH后进行高压蒸汽灭菌
B．步骤③纯化能分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞菌落
C．步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素
D．步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力
【答案】C
【解析】配制培养基时，应先调pH后进行高压蒸汽灭菌，A正确；步骤③纯化能分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌通过涂布平板法分散，获得单细胞菌落，B正确；步骤③筛选能分解尿素的细菌，培养基中应以尿素为唯一氮源，C错误；步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力，D正确。
11．某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物X。研究人员用化合物X、磷酸盐、镁盐以及一些微量元素配制成培养基，成功筛选到能高效降解化合物X的细菌(目的菌)，实验的主要步骤如图所示。下列有关叙述错误的是( )
A．该培养基中化合物X可能既作碳源又作氮源
B．实验培养过程中进行振荡培养的主要目的是增大目的菌的浓度
C．实验操作过程中，要注意防止外来杂菌污染
D．将固体培养基得到的目的菌重复多次上述实验的目的是对菌种进行“纯化”
【答案】B
【解析】磷酸盐、镁盐以及一些微量元素中不含C、N元素，由此可推测该培养基中化合物X可能既作碳源又作氮源，A正确；实验培养过程中进行振荡培养的主要目的是增加培养液中的溶氧量，满足微生物对氧气的需求，B错误；筛选微生物的过程中应注意防止外来杂菌污染，C正确；在以化合物X为唯一碳源的培养基中只有能降解化合物X的微生物才能生长繁殖，不能利用化合物X的微生物因缺乏碳源和氮源，无法生长繁殖，将固体培养基得到的目的菌重复多次上述实验的目的是对菌种进行“纯化”，D正确。
12．为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：
(1)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过________灭菌。
(2)示意图A和B中，________表示的是用平板划线法接种培养后得到的结果。能够得到单菌落的是图________。
(3)图B的接种工具是________，如果图B中的菌种是某细菌，则一般稀释倍数为____________倍。
(4)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量，将1 mL水样稀释100倍，在4个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，4个平板上的菌落数分别为29、39、38和37，据此可得出每升水样中的活菌数为____________个。
(5)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是振荡培养能提高培养液中______的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率。
【答案】(1)灼烧 (2)A A、B (3)涂布器 1×104、1×105、1×106 (4)3.8×107 (5)溶解氧
【解析】(1)对接种环常用的灭菌方法是灼烧灭菌。(2)分析题图可知，A培养皿采用的接种方法是平板划线法，B培养皿采用的接种方法是稀释涂布平板法，这两种接种方法都可获得单菌落。(3)图B的接种方法是稀释涂布平板法，该方法所需的接种工具是涂布器；细菌的稀释倍数一般为1×104、1×105、1×106倍。(4)为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，因此1 mL水样中的菌落数是(39＋38＋37)÷3÷0.1×100＝3.8×104个，每升水样中的活菌数为3.8×104×103＝3.8×107个。(5)由题意可知，振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快，由此可以说明该细菌是需氧菌，由于振荡培养提高了培养液中溶解氧的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高了营养物质的利用率，细菌生长速度加快。
13．尿素是一种重要的农业氮肥，但是尿素不能被农作物直接吸收，只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。请回答下列问题。
(1)土壤中的某些细菌能分解尿素，是因为它们能合成________。
(2)配制好的培养基常用____________法进行灭菌。为了检测所用培养基平板灭菌是否合格，需要进行的操作是____________________________________。
(3)为了筛选到能分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择尿素作为唯一氮源，原因是______________________________________；若平板上长出菌落，可通过加入显色剂初步鉴定该种细菌能够分解尿素，加入的显色剂是________。
(4)一位同学在某浓度下稀释涂布了一个平板，统计的菌落数为230。该同学的实验结果________(填“有”或“无”)说服力，原因是___________________________________。
【答案】(1)脲酶
(2)高压蒸汽灭菌 将灭菌后的空白平板培养一段时间，观察培养基上是否有菌落产生
(3)只有能够利用尿素的细菌才能在该培养基上生长 酚红
(4)无 没有设置重复组
【解析】(1)土壤中的某些细菌能够合成脲酶，脲酶能够将尿素分解为氨和二氧化碳。(2)培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌。检测培养基灭菌是否合格，需要将灭菌后的空白平板培养一段时间，观察培养基上是否有菌落产生，如果没有菌落产生证明培养基灭菌合格，否则不合格。 (3)筛选能分解尿素的细菌时需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，因为只有能够利用尿素的细菌才能在该培养基上生长，其他微生物不能分解尿素而不能生长。能分解尿素的细菌能够将尿素分解为氨而使pH升高，酚红指示剂能够与氨反应呈红色，故可以用酚红指示剂检测能分解尿素的细菌。(4)根据题意可知该同学没有设置重复组，所以结果没有说服力。编号
成分
甲
KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水
乙
牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、蒸馏水
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