高中生物二 微生物的选择培养和计数优质ppt课件

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1.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物。2.概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。
学科素养1.文化基础：各类微生物都能适应其生活环境。2.自主发展：根据微生物的代谢类型配制选择培养基。3.社会参与：运用生物与环境相适应观点理解选择培养基的原理。
1.水生栖热菌的筛选：水生栖热菌能在　　　　　　　　　 ℃的高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下　　　　　　　　　。2.选择培养基：在微生物学中，允许　　　　　　　　　　的微生物生长，同时抑制或阻止　　　　　　　　　　微生物生长的培养基。
3.选择培养基的筛选方法、特点及举例（拓展）
拓展：比较三种选择培养基的筛选方法特点及案例
(1)如何从大豆田土壤中分离出固氮微生物？
提示：从大豆田土壤取土样，利用缺乏氮源的培养基可分离出固氮微生物。
(2)要分离出分解纤维素的微生物，应在什么样的环境中取土样？应配制什么样的培养基？
提示：应从富含纤维素的培养基中取土样，如树林中多年落叶形成的腐殖土。应配制以纤维素为唯一碳源的培养基。
(3)根据选择培养基的原理，如何筛选出耐酸菌？
提示：可将培养基的pH调至酸性，再接种培养。
(4)如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？
提示：KH2PO4、NaHPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、水
(5)该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？
提示：共同点都有微生物生长所需碳源、氮源、水、无机盐，不同点是氮源使用尿素，普通培养基一般使用蛋白胨等。
1.分解尿素的细菌的分离 分解尿素的细菌能合成脲酶，该酶能催化尿素分解产生 ，以此作为细菌生长的氮源。要将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方设计思路是 。
培养基中除了含有细菌必需的碳源、水、无机盐外，还要含有唯一氮源尿素
2．稀释涂布平板法分离分解尿素的细菌
土壤中细菌的数量庞大，要想得到能分解尿素的细菌的纯培养物，必须要对土样进行_________________，然后再将菌液_______到制备好的____________________，操作过程如下：
将10 g土样加入盛有90 mL____________的锥形瓶中，充分摇匀。取1 mL上清液加入盛有_____ mL无菌水的试管中，依次______________。
取_______mL菌液，滴加到培养基表面
将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中
将涂布器放在_________上灼烧，待酒精燃尽、涂布器_________后，再进行涂布
用涂布器将菌液均匀地涂布在________________表面。涂布时可转动_______________，使涂布均匀
涂布的菌液被培养基吸收后，将平板________，放入____________ ℃的恒温箱中培养1～2 d。
土壤中分解尿素的分离与计数视频
(1)结合对照组，分析培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出一些菌落。
提示：对照的培养皿在培养过程中没有菌落生长，说明培养基没有被杂菌污染。对照组无菌落，实验组有菌落。
(2)你是否获得了某一稀释度下菌落数为30—300的平板？在这一稀释度下，是否至少有2个平板的菌落数接近？
提示：通常选择一定稀释范围的样品液进行培养，一般选用菌落数为30—300的平板。
(4)每克样品中的菌株数＝某一稀释度下平板上生长的平均菌落数÷涂布平板时所用的稀释液的体积×稀释倍数。
用稀释涂布平板法计数微生物的方法
(1)稀释涂布平板操作要求：按照平行重复原则，每一稀释度的菌液涂布3个或3个以上的平板。
(2)计数的时机：当各平板上菌落数目稳定时进行计数。
(3)选择可用于计数的平板：选择菌落数在30～300的平板(相同稀释度的平板均符合该特点)进行计数，然后取平均值。
是否还有其他微生物的数量测定方法？
当样品的___________足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的____________。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数为_____________的平板进行计数。
统计的菌落数往往比活菌的实际数目______。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
利用特定的细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下观察、计数。
统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和。
1．统计菌落数目时，统计的菌落数是否是活菌的实际数目？ 2．分解尿素的细菌在分解尿素时，可以将尿素转化为氨，使得培养基的pH发生什么变化？ 3．在用涂布器涂布平板时，为了操作方便是否可以完全打开培养皿盖？
提示：由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。
提示：尿素分解菌将尿素转化为氨，使培养基的pH升高。
提示：为了防止杂菌污染，不能完全打开皿盖。
微生物生长量的测定有计数法、重量法、生理指标法等方法，但是一般使用计数法，计数法可分为直接计数法和间接计数法。
拓展：微生物生长量的测定方法：
比较两种微生物计数的方法
活菌计数技术广泛应用于食品卫生、水源污染度的检验和土壤含菌量的测定等方面。如果你感兴趣，可以从下列项目中选做一个，并走访相关部门或企业，了解他们是如何进行检测的。
1.空气中微生物总数的检测
提示：沉淀法（1）将肉膏琼脂培养基、麦芽汁培养基、高氏培养基融化后，各倒4个平板。（2）分別取两个上述三种培养基平板，在空气中暴露5min，另外2个平板用于检查无菌空气管道排气口的无菌情况。（3）将上述平板置28℃培养48h后计算其菌落数，并观察菌落形态、颜色，将结果列表
2.水中细菌总数的检测
提示：1.取样；2.样品稀释；3.微生物培养与观察；4.菌落计数；5.实验报告。
3.牛奶中细菌的分离与计数
提示：1.取牛奶样液；2.稀释（根据牛奶中菌长得多少而定）；3.涂布平板；4.菌落计数；5.实验报告。
1．用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是(　　)A．涂布了1个平板，统计的菌落数是230B．涂布了2个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238C．涂布了3个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163D．涂布了3个平板，统计的菌落数分别是212、240和250，取平均值234
提示：在设计实验时，一定要涂布至少3个平板作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性，A、B错误。C项虽然涂布了3个平板，但是，其中1个平板的计数结果与其他的相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误，此时，不能简单地用3个平板的计数值来求平均值，C错误。
2．下图为“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数” 实验中样品稀释示意图。据图分析，下列叙述正确的是( 　　)
A．3号试管的稀释倍数为103倍B．4号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数恰好为5号试管的10倍C．5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×109个D．该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要多
提示：3号试管的稀释倍数为104倍，A项错误；4号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数不一定恰好为5号试管的10倍，B项错误；5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为(168＋175＋167) ÷3÷0.1×106＝1.7×109（个），C项正确；在固体培养基上可能存在两个或多个菌体形成一个菌落的情况，得到的结果往往会比实际活菌数目少，D项错误。