高中生物人教版 (2019)选择性必修3二 微生物的选择培养和计数课后复习题

这是一份高中生物人教版 (2019)选择性必修3二 微生物的选择培养和计数课后复习题，共9页。

1．测定微生物数量的方法不包括( )
A．稀释涂布平板法 B．显微镜直接计数
C．平板划线法D．滤膜法
2．研究人员通过对大肠杆菌进行基因改造，可以使其不仅能以传统生物能源技术中使用的蔗糖为原料，还能以广泛存在于植物纤维中的半纤维素为原料，分解产生燃料物质。若要将这种大肠杆菌分离出来，应将它们接种在( )
A．不含氮源的培养基上
B．含有蛋白胨的固体培养基上
C．只含半纤维素而无其他碳源的选择培养基上
D．不含营养要素的培养基上
3.
用纸片扩散法测定某病原菌对各种抗生素敏感性的实验，是在某病原菌均匀分布的平板上，铺设含有不同种抗生素的纸片后进行培养。图示为培养的结果，其中抑菌圈是在纸片周围出现的透明区域。下列分析正确的是( )
A．在图示固体培养基上可用平板划线法或稀释涂布平板法接种病原菌
B．未出现抑菌圈可能是病原菌与抗生素接触后发生抗性变异
C．形成的抑菌圈较小的原因可能是微生物对药物较敏感
D．不同抗生素在平板上的扩散速度不同会对实验结果造成影响
4．测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释，其原因是( )
A．细菌个体小，真菌个体大
B．细菌易稀释，真菌不易稀释
C．细菌在土壤中的数量比真菌多
D．随机的，没有原因
5．下列关于产纤维素酶菌分离及运用的叙述，不合理的是( )
A．筛选培养基中应含有大量的葡萄糖或蔗糖
B．可从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌
C．在分离平板上长出的菌落需进一步确定其产纤维素酶的能力
D．用产纤维素酶菌发酵处理农作物秸秆可提高其饲用价值
6．用稀释涂布平板法对微生物进行纯培养的步骤，正确的是( )
A．样品稀释→涂布法分离→培养成单菌落
B．样品稀释→培养成单菌落→划线或涂布法分离
C．样品稀释→划线或涂布→分离→培养成单菌落
D．样品稀释→划线→涂布→分离→培养成单菌落
7．下图为从土壤中分离纯化尿素分解菌的过程。下列有关叙述错误的是( )
A．①②③④培养基都应以尿素为唯一氮源
B．图中所用培养基灭菌常用的方法是湿热灭菌
C．①～③过程是梯度稀释，稀释溶剂是无菌水
D．可用酚红染料鉴定，菌落周围是否出现红色圈
8．若某一稀释度下，平板上生长的平均菌落数为90个，涂布平板时所用的稀释液体积为0.1mL，稀释液的稀释倍数为105，则每克样品中的活菌数约为( )
A．9×108个B．9×107个
C．9×105个D．9×106个
9．某生物兴趣小组，进行土壤中尿素分解菌的分离和计数实验。请回答下列问题。
(1)实验原理：尿素是一种重要的农业氮肥，但它并不能直接被农作物吸收，需要转变成NH3，才能被吸收，这个转变依赖于土壤中能产生________的微生物的作用。
(2)实验步骤：
①配制培养基(成分：葡萄糖、Na2HPO4、KH2PO4、MgSO4·7H2O、尿素、Y、H2O、琼脂)，并制作无菌平板。
②设置________________组和若干实验组，进行相关操作。
③将各组平板置于恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。
a．为了更好地鉴别出此类微生物，在培养基配方中加入了Y，Y是________________。
b．为了对实验的结果进行进一步统计，需要用____________法进行接种。具体情况如图所示。
c.恒温培养48小时后，在稀释倍数为105下，平板上的菌落数目在30～300之间，小组成员进行统计，应注意统计周围为________菌落。统计三个平板上的菌落数目，分别为68、73、87，则每克土样中尿素分解菌的活菌数约为________。
(3)实验结果分析：
兴趣小组的同学在统计菌落数目时，除了上述统计的菌落外，还发现有些菌落周围的培养基没有变化，试分析这些菌落产生的可能原因(答出一点即可)。
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
【综合应用题组】(学业水平四)
10．漆酶属于木质降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。下图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程，下列相关叙述错误的是( )
A．生活污水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品
B．筛选培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落
C．在涂布平板上长出的菌落，再通过划线进一步纯化
D．在适宜温度下，接种后的斜面培养基上菌落长成后，可在低温下临时保存菌株
11．有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。下列说法正确的是( )
A．该实验所用的选择培养基可以用苯磺隆、蔗糖等作为碳源
B．本实验的目的是探究能降解苯磺隆的物质是否为该菌种所产生的蛋白质
C．在微生物的接种实验中，用95%的酒精对实验者的双手和超净工作台进行消毒
D．该实验中，采集的土壤样品经高温灭菌后，可以用于制取土壤稀释液
12．(不定项选择)筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后，若细菌能分解淀粉，培养平板经稀碘液处理，会出现以菌落为中心的透明圈(如图)，实验结果见表。
有关本实验的叙述，正确的是( )
A．培养基除淀粉外还含有氮源等其他营养物质
B．筛选分解淀粉的细菌时，菌液应稀释后涂布
C．以上两种细菌均不能将淀粉酶分泌至细胞外
D．H/C值反映了两种细菌分解淀粉能力的差异
13．(不定项选择)聚羟基脂肪酸酯(PHA)是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，且废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中寻找生产PHA菌种的流程图如下。下列说法正确的是( )
①取湖水―→②eq \a\vs4\al(\(\s\up7(接种在培),\s\d5(养基上)))―→③培养―→④eq \a\vs4\al(挑取单菌,落并分别,扩大培养)―→⑤eq \a\vs4\al(检测菌的,数目和PHA,的产量)―→⑥eq \a\vs4\al(获得目,标菌株)
A.步骤②可用稀释涂布平板法接种到含合成塑料的选择培养基上
B．步骤③需要将接种后的培养基放入恒温箱中倒置培养
C．步骤④所用到的培养基应加入琼脂，以便挑取单菌落获得纯化菌株
D．挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量
14．乳链菌肽是由乳酸乳球菌分泌的一种由34个氨基酸组成的小肽，对许多革兰氏阳性菌，尤其是对引起食品腐败的细菌具有强烈的抑制作用，是一种高效无毒的天然食品防腐剂。研究人员从新鲜牛奶中获得多株产乳链菌肽的菌株，进行了如下实验：
(1)筛选菌株：将含有杀菌物质的滤纸片放到滴有细菌培养液的固体培养基上，经过培养，杀菌物质杀死细菌后会在滤纸片周围形成抑菌圈。将革兰氏阳性菌涂布于平板上，将灭菌的大小相同的滤纸片均匀地摆放在培养基表面，在其上分别滴加等量备选菌株培养液的上清液，对比观察____________________，选取抑制作用最强的菌株。
(2)纯化菌株：
eq \x(\a\al(A.制备,培养基)) ―→eq \x(\a\al(B.,灭菌)) ―→eq \x(\a\al(C.扩大,培养)) ―→eq \x(\a\al(D.划线分,离和培养)) ―→eq \x(\a\al(E.菌种临,时保存))
A过程配制时除了加入特定的营养物质以外，还要加入一定量的氯化钠，以维持________。B过程常用的方法是
________________________________________________________________________，
该过程中温度是121℃，压力______，灭菌15min。D过程与C过程相比，培养基中增加的物质是______________。E过程需将纯化的菌株用________(用具)接种于________培养基中4℃保存。
(3)为了解乳链菌肽对革兰氏阳性菌的作用方式是抑制细菌生长、溶菌性杀死细菌(细胞破裂)还是非溶菌性杀死细菌，科研人员活将乳链菌肽加入革兰氏阳性菌菌液中，随着发酵时间的延长，检测革兰氏阳性菌的活菌数、除去菌体的上清液中核酸含量，实验结果如图所示。
对革兰氏阳性菌活菌的计数方法为________。以上实验表明乳链菌肽对革兰氏阳性菌的作用方式为________。
(4)口服乳链菌肽，不会改变人体肠道中的正常菌群，也不会进入内环境，推测可能的原因是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
15．随着个人承担传染病防控社会责任的意识的不断加强，很多人外出能自觉地戴口罩。某同学对戴一段时间后的灭菌口罩上的微生物进行检测，以了解其污染情况。请回答下列问题：
(1)从戴一段时间后的口罩上剪取总量5cm2样品，剪碎后加入灭菌生理盐水中，定容至100mL，充分混匀，得到样液A。待样液A自然沉降后，取上清液稀释103倍得到样液B。取4个经________(填“干热”或“灼烧”)灭菌处理的培养皿，向其中3个培养皿中分别加入1mL样液B，再将冷却到45～50℃的培养基倒入培养皿。随即转动培养皿，使样液B与培养基充分混匀，待________后，将平板倒置，置于培养箱内培养24h。第4个培养皿添加________________(填“样液”、“培养基”或“样液和培养基”)作为对照。
(2)一段时间后，3个平板上长出的菌落数分别为50、40和45，可计算出1cm2口罩样品中菌体数量为________。统计计算出的量往往________(填“大于”、“等于”或“小于”)口罩中菌体的实际数量，原因可能是在培养箱中培养的时间过短，________________________。
(3)若要对口罩中的金黄色葡萄球菌进行选择性分离培养，可将样液B用________________________法接种到甘露醇高盐琼脂培养基上，培养基中的高浓度氯化钠用于____________________。
16．绿水青山就是金山银山，污水治理是生态文明建设的一项重要任务，利用微生物降解是水污染治理的有效手段之一。聚乙烯醇(PVA)是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶分解PVA，PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑，请回答下列问题：
(1)表中是筛选出能高效分解PVA的细菌的培养基配方，表中X物质最可能为
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(2)若图中污水取样是从聚乙烯醇(PVA)污染的水体中采集，通过图示过程分离出分解聚乙烯醇(PVA)的菌落，则进行过程1的作用是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(3)若将100mL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释104倍后，取0.1mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为160个，空白对照组平板上未出现菌落，则100mL原菌液中有PVA分解菌____________个，该接种方法是______________，通过该方法测量的菌落数值与实际值相比一般会____________(填“偏大”“偏小”或“相等”)。
(4)要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入____________用于鉴别PVA分解菌。若用上述培养基比较不同菌株降解PVA能力的大小，请用简洁的语言写出设计思路：________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
课后分层检测案3 微生物的选择培养和计数
1．解析：稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌的数目，利用显微镜直接计数，统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和，两者均可以测定微生物的数量，A正确，B正确；平板划线法不能用于计数，只能用来分离纯化微生物，C错误；当样品中微生物浓度较低时，可采用滤膜法，如测定饮用水中大肠杆菌的数量，D正确。
答案：C
2．解析：分析题干可知，改造后的大肠杆菌“能以广泛存在于植物纤维中的半纤维素为原料，分解产生燃料物质”，因此若要将这种大肠杆菌分离出来，应将它们接种在只含半纤维素而无其他碳源的选择培养基上。
答案：C
3．解析：图示固体培养基上采用的接种方法应是稀释涂布平板法，A错误；病原菌发生抗性变异在与抗生素接触之前，B错误；微生物对药物较敏感形成的抑菌圈应较大，C错误；纸片所含的药物吸取平板中的水分溶解后，便不断向纸片周围区域扩散，不同抗生素在平板上的扩散速度不同会对实验结果造成影响，D正确。
答案：D
4．解析：土壤中的微生物大约70%～90%是细菌，真菌的数量要比细菌少；样品的稀释度越高，在平板上生成的菌落数目就越少；在实际操作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数为30～300的适于计数的平板，所以细菌的稀释倍数要高于真菌的稀释倍数。
答案：C
5．解析：应该用以纤维素为唯一碳源的培养基筛选纤维素分解菌，A错误；木材、秸秆中富含纤维素，故可以从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌，B正确；用以纤维素为唯一碳源的培养基筛选纤维素分解菌后，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，以确定得到的是纤维素分解菌，并了解其产纤维素酶的能力，C正确；用产纤维素酶菌发酵处理农作物秸秆，可以把纤维素分解成葡萄糖，提高饲用价值，D正确。
答案：A
6．解析：稀释涂布平板法包括样品稀释、涂布及培养三个基本步骤，A正确。
答案：A
7．解析：尿素分解菌可以合成脲酶将尿素分解，因此要分离纯化尿素分解菌，培养基都应以尿素为唯一氮源，A正确；对培养基灭菌常用的方法是湿热灭菌法，B正确；①～③过程是选择培养，该过程用来选择培养尿素分解菌，因此培养基应该是以尿素为唯一氮源的培养基，而不是无菌水，C错误；分解尿素的菌能将尿素分解成NH3，使培养基碱性增强，pH升高，酚红指示剂会变红，因此可用酚红染料鉴定尿素分解菌，观察菌落周围是否出现红色圈，D正确。
答案：C
8．解析：每克样品中的菌落数＝(90÷0.1)×105＝9×107(个)，即每克样品中的活菌数约为9×107个。
答案：B
9．解析：(1)尿素分解菌能产生脲酶将尿素分解成NH3，土壤中的尿素只有被分解成NH3后才能被植物吸收利用，因此可用以尿素为唯一氮源的培养基来分离尿素分解菌。(2)②为检验培养基是否受到杂菌污染，需要设置空白对照组。③a.细菌合成的脲酶将尿素分解成了NH3，NH3会使培养基的碱性增强，pH升高，因此可以通过检查培养基的pH变化来鉴别尿素分解菌的存在，在培养基配方中加入的Y可以是酚红指示剂。b.分析图示实验过程可知，该实验采用了稀释涂布平板法进行接种，用于计数土壤稀释液中尿素分解菌的数量。c.当尿素分解菌产生的脲酶将尿素分解为NH3后，培养基pH升高，酚红指示剂会变红，因此应注意统计周围为红色的菌落。在稀释倍数为105下，三个平板的菌落数目分别为68、73、87个，因此每克土样中尿素分解菌的活菌数约为(68＋73＋87)÷3÷0.1×105＝7.6×107(个)。(3)有些菌落周围的培养基没有变化，说明这些细菌不能产生脲酶，不能利用尿素作为氮源，而氮源为微生物生长所必需的，因此可推测可能存在固氮微生物，它们能利用空气中的氮气作为氮源，而不能将培养基中的尿素分解成氨(不与指示剂作用)，所以有些菌落产生而菌落周围的培养基没有变化。
答案：(1)脲酶 (2)②空白对照 ③a.酚红指示剂 b．稀释涂布平板 c．红色的 7.6×107个 (3)可能存在固氮微生物，它们能利用空气中的氮气作为氮源，而不能将培养基中的尿素分解成氨(不与指示剂作用)，所以有些菌落产生而菌落周围的培养基没有变化
10．解析：生活污水中含有大量微生物，但不一定含有产漆酶的菌株，A错误；筛选培养基中需要加入漆酶的底物，只有产漆酶的微生物才能在该培养基上生长，进而通过菌落特征挑出产漆酶的菌落，B正确；由图可知，在涂布平板上长出的菌落，再通过划线进一步纯化，C正确；在适宜温度下，接种后的斜面培养基上菌落长成后，可在低温下临时保存菌株，D正确。
答案：A
11．解析：选择培养基只允许特定种类的微生物生长，同时要抑制或阻止其他种类微生物生长，因而必须以苯磺隆为唯一碳源只让目的菌生存繁殖，A错误；图乙上清液中加入的蛋白酶溶液是用于水解上清液中的某蛋白质的，由此可判定实验目的是探究目的菌是否通过分泌某种蛋白质来降解苯磺隆，B正确；在微生物接种时，需用70%的酒精对实验者的双手和超净工作台进行消毒，C错误；在分离土壤中目的菌的实验中，采集的土样经高温灭菌后，土样中的微生物被杀死，再制取土壤稀释液接种并培养，不会得到菌落，D错误。
答案：B
12．解析：微生物培养基含有四类营养物质：水、无机盐、碳源、氮源，A正确；常用稀释涂布平板法筛选淀粉分解菌，涂布前需将菌液稀释，B正确；淀粉分解菌可分解淀粉，导致菌落周围的淀粉被分解，不能与碘液反应生成蓝色，故而出现透明圈，透明圈直径与菌落直径的比值越大，说明细菌分解淀粉能力越强，D正确；由题图可知，细菌Ⅰ和Ⅱ形成的菌落周围都出现了透明圈，说明两种细菌都能将淀粉酶分泌至细胞外，C错误。
答案：ABD
13．解析：PHA是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，要筛选嗜盐细菌，步骤②可用稀释涂布平板法接种到含盐量较高的选择培养基上，A错误；步骤③为防止皿盖上的冷凝水滴入培养基，需要将接种后的培养基放入恒温箱中倒置培养，B正确；步骤④扩大培养应选用液体培养基，液体培养基中不应加入琼脂，C错误；要挑选高产聚羟基脂肪酸酯(PHA)的嗜盐菌，挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量，最后进行比较，D正确。
答案：BD
14．解析：(1)由于含有杀菌物质的滤纸片放到滴有细菌培养液的固体培养基上，经过培养，杀菌物质杀死细菌后会在滤纸片周围形成抑菌圈。抑菌圈越大说明杀菌物质的杀菌能力越大。所以将革兰氏阳性菌涂布于平板上，将灭菌的大小相同的滤纸片均匀地摆放在培养基表面，在其上分别滴加等量备选菌株培养液的上清液，对比观察抑菌圈的大小，选取抑制作用最强的菌株。(2)A过程配制时除了加入特定的营养物质以外，还要加入一定量的氯化钠，以维持渗透压；B过程常用的方法是湿热灭菌法。这是培养基灭菌常用的方法，温度是121℃，压力为100kPa；D过程所需的是固体培养基，而C过程所需的是液体培养基，因此D过程培养基中增加的物质是凝固剂，主要是琼脂。E过程需将纯化的菌株接种于固体斜面培养基中4℃保存，接种工具是接种环。(3)对革兰氏阳性菌活菌的计数方法为稀释涂布平板法；由图可知，对照组的种群数量变化呈S形。由于曲线3活菌数降为零，说明是杀死细菌；除去菌体的上清液中核酸含量没有明显变化，说明不是溶菌。(4)乳链菌肽作为天然防腐剂，它是由34个氨基酸组成的多肽，口服使用的优点是不会改变人体肠道内正常菌群，也不会进入内环境，推测其原因可能是食用后被消化道中蛋白酶所降解而被人体消化。
答案：(1)抑菌圈的大小 (2)渗透压 湿热灭菌法 100kPa 凝固剂，主要是琼脂 接种环 固体斜面 (3)稀释涂布平板法 非溶菌性杀死细菌 (4)食用后可能被消化道中蛋白酶所降解而被人体消化
15．解析：(1)培养皿的灭菌方法有干热灭菌，培养基的灭菌方法是湿热灭菌。倒平板时，需等培养基凝固(完全冷却)后，才能将平板倒置。根据题意分析，第4个培养基为对照组，只需要添加培养基即可，其他操作与实验组相同。一段时间后，对照组培养基上无菌落产生，说明实验组上长出的菌落均来自样液中的微生物。(2)3个平板上长出的菌落数均在30～300之间，说明操作中的稀释倍数是合适的，其平均数是(50＋40＋45)/3＝45。考虑1ml样液B是稀释103倍的样液A，样液A共100mL，这些样液A内的菌数是45×103×100＝45×105，则1cm2口罩样品中菌体数量为(45×105)/5＝9×105。统计计算出的量往往小于口罩中菌体的实际数量，原因可能是在培养箱中培养的时间过短(24h)，培养基上部分菌体还未形成肉眼可见的菌落。(3)稀释涂布平板法常用于固体培养基上的接种、分离培养等。甘露醇高盐琼脂培养基含有高浓度的NaCl。与一般的微生物对所需无机盐的适量要求是不符合的，可推知高浓度NaCl可抑制除金黄色葡萄球菌外的其他微生物的生长。
答案：(1)干热 培养基凝固(完全冷却) 培养基 (2)9×105 小于 培养基上部分菌体还未形成肉眼可见的菌落
(3)稀释涂布平板 抑制除金黄色葡萄球菌外的其他微生物的生长
16．解析：(1)分析题意可知，表格是筛选出能高效分解PVA的细菌的培养基配方，该培养基属于选择培养基，因此表中X物质最可能为聚乙烯醇(或PVA)。(2)图中过程1具有富集的作用，能通过选择培养增加PVA分解菌的数量，有利于在培养基上形成分解聚乙烯醇(PVA)的菌落。(3)若将100mL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释104倍后，取0.1mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为160个，空白对照组平板上未出现菌落，则100mL原菌液中有PVA分解菌160×104×100÷0.1＝1.6×109个，该过程需要先稀释后涂布，因此该接种方法是稀释涂布平板法。由于当两个或多个细菌连在一起时，平板上显示一个菌落，因此通过该方法测量的菌落数值与实际值相比一般会偏小。(4)根据题干信息“PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑”可知，要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入碘，用于鉴别PVA分解菌。形成的白色透明斑大小能反映PVA分解菌的能力大小，白色透明斑越大，说明PVA分解菌分解PVA能力越强，因此要用上述培养基比较不同菌株降解PVA能力的大小，可配制相同PVA浓度的培养基来培养不同菌株，一定时间后通过测定形成白色透明斑大小来确定不同菌株降解PVA能力的大小。
答案：(1)聚乙烯醇(或PVA) (2)通过选择培养增加PVA分解菌的数量 (3)1.6×109 稀释涂布平板法 偏小 (4)碘 用含相同PVA浓度的上述培养基来培养不同菌株，一定时间后，通过测定白色透明斑的大小(或直径)来确定不同菌株降解PVA能力的大小
菌种
菌落直径：C/mm
透明圈直径：H/mm
H/C
细菌Ⅰ
5.1
11.2
2.2
细菌Ⅱ
8.1
13.0
1.6
成分
MgSO4
蛋白质
X物质
水
琼脂
用量
5g
10g
7g
1000mL
20g