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    生物:第二部分《实验六 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测》课件8(浙科版选修1)
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    生物选修1《生物技术实践》课题1 果酒和果醋的制作授课课件ppt

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    这是一份生物选修1《生物技术实践》课题1 果酒和果醋的制作授课课件ppt,共17页。PPT课件主要包含了酶的固定化方法,物理吸附法,包埋法,化学结合法,交联法和共价偶联法,交联法,共价偶联法,遇碘显蓝色,遇碘显红色,遇碘不显色等内容,欢迎下载使用。

    二 、酶在应用过程中存在的问题
    ①天然酶通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感,容易失活
    ②溶液中酶很难回收,不能再次利用,提高了生产成本
    ③反应后,酶会混在产物中,影响产品质量,难以在工业生产中广泛应用
    针对酶的特点,如何在生产实践中加以应用?
    固定化酶:将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上,使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。
    直接使用酶和固定化酶的优缺点
    将酶吸附到固体吸附剂表面的方法,固体吸附剂多为活性碳、多孔玻璃等
    将酶包裹在多孔的载体中,包埋成格子型或包埋成微胶囊型
    将酶分子相互结合,或将其结合到纤维素、琼脂糖,离子交换树脂等载体上的固定方式
    实验六 a-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测
    实验原理:本实验是用吸附法将a-淀粉酶固定在石英砂上,一定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后,可使淀粉水解成糊精,用淀粉指示剂溶液测试,流出物呈红色表明水解产物糊精生成
    这里使用的是枯草杆菌的a-淀粉酶,其作用的最适温度为50~75℃;最适PH为5.5~7.5
    四、“α-淀粉酶固定化”实验
    实验目的:1、制备固定化的α-淀粉酶 2、检测固定化α-淀粉酶的效果
    设备及用品:5ml塑料注射器 50ml烧杯 滴管 自行车用气门心及夹子 注射器架 试管及微量离心管3支
    1、a-淀粉酶的固定化:在烧杯中将5mg a-淀粉酶溶于4ml蒸馏水中。由于酶不纯,可能有些不溶物。再加入5g石英砂,不时搅拌,30min后装入1支下端接有气门心并用夹子封住的注射器中(石英砂体积约4ml)。用10倍体积的蒸馏水洗涤此注射器,流速为1ml/min。
    2、可溶性淀粉溶液:取50ml可溶性淀粉溶于100ml热水中,搅拌均匀。
    3、5mml/L KI-I2溶液:称取0.127g碘和0.83g碘化钾。加蒸馏水100ml完全溶解后装入滴瓶中。
    除去未吸附的游离淀粉酶
    1、将灌注了固定化酶的注射器放在注射器架上,用滴管滴加淀粉溶液,使淀粉溶液以0.3ml/min的流速过柱。2、在流出5ml后接收0.5ml流出液,加入1~2滴KI-I2溶液,观察颜色。用水稀释1倍后再观察颜色。
    2、实验后,用10倍柱体积的蒸馏水洗涤此柱,放置在4℃冰箱中,几天后再重复上述实验,看是否有相同的结果。
    1、如何证明洗涤固定化酶柱的流出液中没有淀粉酶?
    2、耐高温的淀粉酶有哪些可能的用途?
    可在试管中加入1ml可溶性淀粉,再加几滴淀粉酶柱流出液,保温几分钟后用碘液检验。如仍显蓝色,则流出液中没有淀粉酶了。
    可以在高温下使淀粉水解快,而且酶不会因高温上而失活,所以可在一些需要高温加热同时又要水解淀粉的反应中使用。
    1、研究认为,用固定化酶技术处理污染物是很有前途的。如将从大肠杆菌得到的磷酸三酯酶固定到尼龙膜上制成制剂,可以用来降解残留在土壤中的有机磷农药,与用微生物降解相比,其作用不需要适宜的( )A、温度 B、PHC、水分 D、营养
    2、目前,日用化工厂大量生产的酶制剂,其中的酶大都来自A、化学合成 B、动物体内 C、植物体内 D、微生物体内
    3.酶的固定方法不包括( )。A. 将酶吸附在固体表面上 B.将酶相互连接起来C.将酶包埋在细微网格里 D.将酶制成固体酶制剂,如加酶洗衣粉中的酶
    5. 关于固定化酶的叙述不正确的是 ( )。A.既能与反应物接触,又能与反应物分离 B.固定在载体上的酶可被反复利用C.可催化一系列反应 D.酶的活性和稳定性受到限制
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