人教版 (2019)选择性必修3动物细胞培养课堂教学ppt课件

这是一份人教版 (2019)选择性必修3动物细胞培养课堂教学ppt课件，共34页。PPT课件主要包含了皮肤的自体移植，动物细胞培养的条件，动物组织，分散成单个细胞，快速浏览培养过程，蛋白质，教材P44旁栏思考，加培养液，细胞悬液，细胞贴壁过程等内容，欢迎下载使用。
2.2 动物细胞工程 2.2.1 动物细胞培养
患者自身的不够用，如何解决？
人造皮肤：人体再生术的秘密
从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。
细胞；不能获得完整动物个体。
充足的营养、稳定的内环境
培养基的构成：合成培养基 + 血清等天然成分
一般用液体培养基，也称为培养液
①培养液、培养用具：灭菌处理；②无菌操作；③适量添加抗生素
定期更换培养液，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。
维持细胞正常的形态和功能。
95%空气 + 5%CO2 的CO2 培养箱
你还记得体液调节中的CO2 的作用吗？
根据动物细胞培养的概念，小组为单位初步构建动物细胞培养的流程：【8min】
（1）培养前，为什么要将动物组织分散成单个细胞？（2）怎样将动物组织分散成单个细胞？（3）分散成的单个细胞，如何培养？（4）培养一段时间后，细胞分裂会受阻，为什么？怎么解决？（5）什么是原代培养和传代培养？（6）进行传代培养（分瓶培养）时，如何处理？
根据动物细胞培养的概念，初步构建动物细胞培养的流程：
（1）培养前，为什么要将动物组织分散成单个细胞？
①分散不会限制彼此的生长和增殖；②分散有利于与培养液充分接触，保证O2与营养供应和代谢物及时排出。
（2）怎样将动物组织分散成单个细胞？
机械的方法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间。
机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理
不可以，多数动物细胞生存的适宜pH为7.2～7.4，而胃蛋白酶的适宜pH约为2，在此环境中会失活。
会破坏细胞结构，把细胞消化掉
（3）分散成的单个细胞，如何培养？
用培养液将细胞制成细胞悬液，放入培养皿或松盖培养瓶内，置于适宜环境中培养。
放入培养瓶在适宜条件中
★体外培养动物细胞分为两类:①悬浮生长细胞细胞能够悬浮在培养液中生长増殖;②贴壁生长细胞（主要类型）细胞需要贴附于某些基质表面才能生长增殖
【如淋巴细胞、大部分血液系统来源细胞】
圆球形细胞刚开始铺展贴壁生长（100×）
培养的动物细胞贴壁生长并进行有丝分裂（100×）
细胞单层贴壁生长铺满瓶壁后出现接触抑制（100×）
正常细胞只有一层；肿瘤细胞/癌细胞有多层癌细胞表面糖蛋白减少，黏着性降低，适宜条件可无限增殖。
（4）培养一段时间后，细胞分裂会受阻，为什么？
（5）什么是原代培养和传代培养？
①原代培养：指动物组织经处理后的初次培养。②传代培养：分瓶后的细胞培养。
（6）进行传代培养（分瓶培养）时，如何处理？
②制成细胞悬液，分瓶培养
用机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理
细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等
①原代培养：指动物组织经处理后的初次培养。②细胞贴壁：大多数细胞需要贴附于某些基质表面才能增殖，这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上。③接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖的现象。④传代培养：分瓶后的细胞培养。
悬浮培养的细胞:直接用离心法收集贴壁细胞:用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，用离心法收集
1、幼龄动物的细胞与老龄动物的细胞比较，分化程度低的细胞与分化程度高的细胞比较，哪些细胞更易于培养？为什么？
幼龄动物的细胞;分化程度低的细胞。这些个体的细胞分化程度低、分裂能力强，易培养。
思考●讨论2：植物组织培养和动物细胞培养的比较 P42
蔗糖、植物激素（生长素、细胞分裂素）
①都进行有丝分裂，不涉及减数分裂；②均需无菌操作，需要适宜的温度、pH等条件
外植体 ↓脱分化愈伤组织 　 ↓再分化芽、根或胚状体 ↓生长发育植物体
动物的组织　　　　　 ↓ 机械法或胰蛋白酶、 ↓ 胶原蛋白酶处理细胞悬液↓原代培养↓细胞悬液↓传代培养
1、在进行动物细胞培养时，需要（ ）A、用胶原蛋白酶、胃蛋白酶等处理以获得细胞悬液B、充入5%CO2以刺激细胞正常呼吸C、加入经高压蒸汽灭菌处理的血清以提供营养D、定期更换培养液以清除代谢物2、下列关于动物细胞培养叙述错误的是(    )A．选用的材料一般是幼龄动物的器官或组织，原因是其细胞分裂能力强B．动物细胞培养和植物细胞培养可获得大量细胞，原理均为细胞增殖C．通常将动物组织经处理后在培养瓶中的初次培养称为原代培养D．培养瓶中的细胞都需要定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续培养
《干细胞技术带来延长生命的可能》
动物和人体内保留的具有分裂和分化能力的细胞。在一定的条件下，干细胞可以分化成其他类型的细胞。
早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中。
具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。
在体外分化成心肌细胞、神经元细胞和造血干细胞等
必须从胚胎中获取 ，涉及伦理问题；因而限制了在医学上的应用。
造血干细胞（骨髓、外周血和脐带血中）神经干细胞（神经系统中）精原干细胞（睾丸中）
具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的能力
治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病（如帕金森病、阿尔茨海默病等）
治疗白血病及一些恶性肿瘤放疗或化疗后引起的造血系统、免疫系统功能障碍等疾病
治疗细胞损伤造成的疾病
通过体外诱导小鼠成纤维细胞得到的类似胚胎干细胞的一种细胞
①将特定基因或特定蛋白导入细胞 （成纤维细胞、已分化的T细胞、B细胞）
②用小分子化合物诱导形成。
①诱导过程无须破坏胚胎；
②iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应。
可治疗镰状细胞贫血症；在治疗阿尔兹海默病、心血管疾病等领域的研究也取得了新进展
诱导多能干细胞（iPS细胞）
体外诱导小鼠成纤维细胞
iPS细胞的应用前景：
临床治疗人类疾病如：白血病、帕金森病、阿而茨海默病等
1.判断下列有关动物细胞培养的表述是否正确。（1）培养环境中需要O2，不需要CO2 。（ ）（2）细胞要经过脱分化形成愈伤组织。（ ）（3）培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清（ ）（4）培养瓶中的细胞需定期用胰蛋白酶处理,分瓶后才能继续增殖（ ）
2.干细胞有着广泛的应用前景。下列相关叙述错误的是( ) A.干细胞是从胚胎中分离提取的细胞 B.造血干细胞可以分化为各种血细胞 C.不同类型的干细胞,它们的分化潜能是有差别的 D.由iPS细胞产生的特定细胞,可以在新药的测试中发挥重要作用