生物人教版 (2019)一 动物细胞培养完整版课件ppt
展开1、动物细胞培养(基础)2、动物细胞融合与单克隆抗体3、动物细胞核移植技术与克隆动物
动物细胞工程的基本技术
目录 /CONTENTS
患者自身的不够用,如何解决?
人造皮肤:人体再生术的秘密
从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适当的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。
获得细胞或细胞产物;不能获得完整动物个体。
充足的营养、稳定的内环境
培养基的构成:合成培养基 + 血清等天然成分
一般用液体培养基,也称为培养液
①培养液、培养用具:灭菌处理;②无菌操作;③适量添加抗生素
定期更换培养液,以便清除代谢物。
维持细胞正常的形态和功能。
95%空气 + 5%CO2 的CO2 培养箱
1)选幼龄动物(或胚胎)的组织器官
这些个体的细胞分化程度低、分裂能力强,易培养。
3)分散细胞时为何不选用胃蛋白酶?
2)培养前为什么分散成单个细胞?
①分散不会限制彼此的生长与增殖; ②分散有利于与培养液充分接触,保证O2与营养供应和代谢物及时排出。
多数动物细胞生存的适宜pH为7.2~7.4,而胃蛋白酶的适宜pH约为2,在此环境中会失活。
要求:(培养瓶(皿)内表面光滑、无毒、易于贴附)
悬液中分散的细胞贴附在瓶壁生长的现象;
细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等
①原代培养:指动物组织经处理后的初次培养,分瓶前的细胞培养。②传代培养:分瓶后的细胞培养。
②制成细胞悬液,分瓶培养
植物组织培养和动物细胞培养的比较 P42
①都进行有丝分裂,不涉及减数分裂;②均需无菌操作,需要适宜的温度、pH等条件
外植体 ↓脱分化愈伤组织 ↓再分化芽、根或胚状体 ↓生长发育植物体
动物的组织 ↓ 机械法或胰蛋白酶、 ↓ 胶原蛋白酶处理细胞悬液↓原代培养↓细胞悬液↓传代培养
动物和人体内保留的具有分裂和分化能力的细胞。在一定的条件下,干细胞可以分化成其他类型的细胞。
早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中。
具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞,并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。
在体外分化成心肌细胞、神经元细胞和造血干细胞等
必须从胚胎中获取 ,涉及伦理问题;因而限制了在医学上的应用。
造血干细胞(骨髓、外周血和脐带血中)神经干细胞(神经系统中)精原干细胞(睾丸中)
具有组织特异性,只能分化成特定的细胞或组织,不具有发育成完整个体的能力
治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病(如帕金森病、阿尔茨海默病等)
治疗白血病及一些恶性肿瘤放疗或化疗后引起的造血系统、免疫系统功能障碍等疾病
治疗细胞损伤造成的疾病
通过体外诱导小鼠成纤维细胞得到的类似胚胎干细胞的一种细胞
①将特定基因或特定蛋白导入细胞 (成纤维细胞、已分化的T细胞、B细胞)
②用小分子化合物诱导形成。
①诱导过程无须破坏胚胎;
②iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞,将它移植回病人体内后,理论上可以避免免疫排斥反应。
可治疗镰状细胞贫血症;在治疗阿尔兹海默病、心血管疾病等领域的研究也取得了新进展
诱导多能干细胞(iPS细胞)
体外诱导小鼠成纤维细胞
iPS细胞的应用前景:
临床治疗人类疾病如:白血病、帕金森病、阿而茨海默病等
1.判断下列有关动物细胞培养的表述是否正确。(1)培养环境中需要O2,不需要CO2 。( )(2)细胞要经过脱分化形成愈伤组织。( )(3)培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清( )(4)培养瓶中的细胞需定期用胰蛋白酶处理,分瓶后才能继续增殖( )
2.干细胞有着广泛的应用前景。下列相关叙述错误的是( ) A.干细胞是从胚胎中分离提取的细胞 B.造血干细胞可以分化为各种血细胞 C.不同类型的干细胞,它们的分化潜能是有差别的 D.由iPS细胞产生的特定细胞,可以在新药的测试中发挥重要作用
现在关于iPS细胞的研究正在不断深入。请你从以下两个方面来查阅资料进行思考。(1)由于诱导iPS细胞、促使其分化都需要时间,因此用某人特异的iPS细胞进行医疗只限于时间比较充裕的情形。从实际事故、疾病发生的不可预测性方面考虑,如果要将这些细胞用于紧急情况,应该提前采取什么措施?
像建立骨髓库一样,有研究团队正在尝试建立HLA(Human Leukcyte Antigen,人类白细胞抗原)多态性丰富的iPS细胞库,可以为需要的人找到HIA匹配度较高的iPS细胞,这样不仅可以节省时间、成本,还能减轻异体干细胞移植后发生的免疫排斥反应。
(2)如果诱导iPS细胞定向分化为生殖细胞的技术发展成熟,该技术可能会有哪些应用?又可能带来哪些问题?
该技术可能被用于治疗不孕症;获得足够量的生殖细胞来进行濒危物种的克隆研究;获得生殖细胞进行转基因操作,再经过受精、胚胎发育等过程来获得转基因动物。该技术可能带来一系列的伦理问题。例如,如果用同一个人的iPS细胞分别诱导形成精子和卵子,两者受精可能培育出“单亲”婴儿;有的人还可能有目的地选择iPS细胞,从而“设计”婴儿。
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