人教版 (新课标)选修3《现代生物科技专题》植物细胞工程的实际应用课文内容课件ppt
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这是一份人教版 (新课标)选修3《现代生物科技专题》植物细胞工程的实际应用课文内容课件ppt,共28页。PPT课件主要包含了培养基制备,图10,图11,图12,图13,图14,无菌苗接种培养,图15,图28,图29等内容,欢迎下载使用。
配制培养基需要的仪器设备电子天平、烧杯、电磁炉或微波炉、不锈钢盆、移液器、吸头和吸头盒、高压蒸汽灭菌锅、组培瓶、量筒、药勺、玻璃棒、植物组织培养试剂盒。(见下图)
培养基制备所需仪器设备及耗材
称取42g的MS固体培养基(图1)(试剂盒提供的每瓶42g),放入不锈钢盆中量取1L蒸馏水加入搅拌均匀溶解(图2,图3)。也可按照相应的比例配制合适体积的培养基。
将溶解的培养基用电磁炉加热煮沸至琼脂全部溶解,溶液呈澄清态。少量的培养基可用烧杯放于微波炉加热。煮沸溶解后添加蒸馏水补充加热损失的水分。(图4)
按照培养的不同植物以及不同外植体添加合适的激素(图5)(矮牵牛腋芽转接不需加激素),调节pH值至6.0。(图6、7)
待培养基冷却至50℃~60℃时,分装到组培瓶中,每瓶25~30mL,拧上盖子。(图8,10,11) [注:瓶盖上的固定滤膜装置要拧紧,防止滤膜脱落。(图9)]
把分装好的组培瓶和培养皿放于高压蒸汽灭菌锅中121℃灭菌20分钟。(图12,13,14)灭菌结束后取出放置室温冷却凝固备用。
超净工作台、光照培养架或恒温光照培养箱、解剖剪、镊子、两面板(试管架)、酒精灯、火柴(打火机)、酒精棉球、无菌培养皿、废液缸。
接种培养需要的仪器设备
打开超净工作台内的紫外灯和风机(开到低速档),把实验用到的相关器械放进超净工作台紫外照射灭菌20 ~30min。灭菌结束后关闭紫外灯,继续吹风5min去除臭氧的味道。(图15)
点燃酒精灯,使用酒精棉球擦拭双手,尽量擦拭到手指缝和指甲盖位置。(图16,17)注:如果用火柴点酒精灯一定要让火柴熄灭后方可放入废液缸,以免点燃使用过的酒精棉球引起火灾。
先使用酒精棉球对解剖剪(解剖刀)和镊子进行擦拭,然后放于酒精灯火焰进行灼烧,剪刀的交叉部位需张开活动以便充分灼烧。灼烧灭菌后放于两面板或试管架上冷却。(图17,18,19,20)
把装有无菌苗的组培瓶口在酒精灯火焰周围灭菌几秒钟,打开瓶盖,用镊子夹出无菌苗放于无菌培养皿中,盖好培养皿盖子。(图21,22,23,24) (注:瓶口灭菌时间不宜过长,以免烧坏瓶口)剪去无菌苗的叶子,只留下茎段和叶柄。把无菌苗按芽剪成“丫”字型,只留一个腋芽和叶柄。(图25,26,27)
(图21、22、23、24)
修剪叶片时先四周剪平,剪出伤口,叶子较大的话再剪开,最后剪成边长0.5cm大小即可。修剪茎段即剪取两个腋芽之间的部分。注意:使用叶片为材料时,挑选叶片较大植株;使用茎段为材料时挑选茎段较长的植株,方便修剪。
(图25、26、27)
把未接种培养基瓶口在酒精灯火焰灭菌2 ~3秒后打开瓶盖,用镊子夹取腋芽或叶片接种于培养瓶内。叶片平铺在培养基上,页面朝上,腋芽直接插入培养基即可。(图28,29)
接种结束后把瓶口和瓶盖在酒精灯火焰灭菌2 ~3秒后盖上瓶盖,放在光照培养架或者恒温光照培养箱内培养。(图30,31)培养条件:25℃室温光照培养12h,黑暗培养12h。
移栽到花盆或花圃、也可移栽至小型无土栽培系统。
挑选长势较好而且长出根系的无菌苗,在移栽培养的环境中先闭瓶放置3天,再打开瓶盖放置3天,让无菌苗适应室内的温度和湿度。(图32)
炼苗结束后把无菌苗从组培瓶中取出,去净培养基,把组培苗移栽到蛭石和草炭土的混合基质中。(图33,34,35,36)
在培养的过程中要经常浇水或营养液,温度维持在25℃ ~30℃,植株容易开花。(图37)
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