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【生物】陕西省渭南市尚德中学2018-2019学年高二下学期期中考试试卷 （解析版）
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陕西省渭南市尚德中学2018-2019学年高二下学期
期中考试试卷
一、单选题
1.科学家们经过多年的努力，创立了一种生物技术——基因工程，实施该工程的最终目的是（ ）
A. 定向提取生物体的DNA分子
B. 定向地改造生物的遗传性状
C. 在生物体外对DNA分子进行改造
D. 定向地对DNA分子进行人工“剪切”
【答案】B
【解析】
【分析】
基因工程又叫DNA重组技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
【详解】科学家们经过多年的努力，创立了一种新兴的生物技术--基因工程，通过基因工程技术实现不同生物的基因重新组合，最终达到定向改造生物的遗传性状的目的，故选B。
2.下列不属于获取目的基因的方法是 （ ）
A. 从基因文库中提取 B. 利用PCR技术合成
C. 利用DNA转录合成 D. 利用化学方法人工合成
【答案】C
【解析】
【分析】
获得目的基因的方法：
①从基因文库中获取；
②利用PCR技术扩增；
③人工合成：这种方法有两条途径，一是以目的基因转录的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，再在酶的作用下合成双链DNA，即目的基因；另一条途径是蛋白质的氨基酸序列，推测出信使RNA序列，再推测出结构基因的核苷酸序列，然后用化学的方法以单核苷酸为原料合成。
【详解】可以从基因组文库中获取目的基因，A正确；可以利用PCR技术扩增目的基因，B正确；利用DNA转录合成的是RNA，不是基因，C错误；可以利用化学方法人工合成目的基因，D正确。
3.干扰素是动物或人体细胞受到病毒侵染后产生的一种糖蛋白，是一种抗病毒的特效药。科学家可用基因工程的方法生产干扰素。下列相关叙述不正确的是 （ ）
A. 基因工程可以克服生殖隔离
B. 基因工程是在个体水平上进行的操作
C. 用于生产干扰素的受体细胞可以是酵母菌
D. 基因工程的原理是基因重组
【答案】B
【解析】
【分析】
基因工程又叫DNA重组技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
【详解】基因工程可以突破生殖隔离，实现不同物种之间的基因交流，A正确；基因工程是在分子水平上进行的操作，B错误；用于生产干扰素的受体细胞可以是酵母菌，C正确；基因工程又叫DNA重组技术，其原理是基因重组，D正确。
4.在基因工程的操作过程中构建重组质粒不需要（ ）
①DNA连接酶 ②同一种限制酶③DNA聚合酶④具有标记基因的质粒⑤目的基因⑥4种核糖核苷酸
A. ③⑥ B. ②④ C. ①⑤ D. ①②④
【答案】A
【解析】
【分析】
在基因工程的操作过程中，需要用同一种限制酶切割目的基因与载体，并用DNA连接酶将两者的黏性末端（或平末端）连接起来，所选择的质粒必须具有标记基因，以便进行目的基因的检测。
【详解】DNA连接酶将具有相同黏性末端的目的基因和运载体连接起来，①正确；同一种限制酶切割目的基因与载体，形成相同的黏性末端，②正确；DNA复制过程中需要DNA聚合酶，但是在基因工程中不需要，③错误；具有标记基因的质粒作为载体，以便进行目的基因的检测，④正确；基因表达载体中含有目的基因、启动子、终止子和标记基因，⑤正确；合成目的基因时需要4种脱氧核苷酸，而基因表达载体的构建不需要，⑥错误。因此，在基因工程的操作过程中构建重组质粒不需要③⑥，故选A。
5.下列关于目的基因导入受体细胞的描述不正确的是 （ ）
A. 基因枪法导入植物体细胞的方法比较经济有效
B. 显微注射技术是转基因动物中采用最多的方法
C. 目的基因导入大肠杆菌最常用的方法是Ca2+处理法
D. 农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞最常用的方法
【答案】A
【解析】
【分析】
将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。
（1）将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；
（2）将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；
（3）将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法（Ca2+处理法）。
【详解】将目的基因导入植物体细胞最经济有效的方法是农杆菌转化法，A错误；将目的基因导入动物细胞常用显微注射法，B正确；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法，即用Ca2+处理大肠杆菌，C正确；将目的基因导入植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法，此外还有基因枪法和花粉管通道法，D正确。
6. 基因工程运载体必须具备的条件中，错误的是( )
A. 能在宿主细胞中复制并稳定保存
B. 具有多个限制酶切点，以便于外源基因连接
C. 能进入宿主细胞中并控制其新陈代谢过程
D. 在限制酶切点外必须含有标记基因，便于筛选
【答案】C
【解析】
试题分析：作为基因工程的运载体必须具备的条件有：①要具有限制酶的切割位点； ②要有标记基因(如抗性基因)，以便于重组后重组子的筛选；③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。故本题选C。
考点：基因工程
点评：本题考查了基因工程的运载体必须具备的条件，属于对识记层次的考查。
7.PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，下列有关PCR过程的叙述，不正确的是（ ）
A. 变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键
B. 复性过程中引物与DNA模板链的结合依靠碱基补配对原则完成
C. 延伸过程中需要RNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸参与
D. 与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高
【答案】C
【解析】
【分析】
PCR技术：
1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。
2、原理：DNA复制。
3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。
4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。
5、过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。
【详解】PCR技术过程中，高温变性破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，A正确；复性过程是引物的核苷酸序列上的碱基与单链DNA分子上的核苷酸序列的碱基的结合遵循碱基互补配对原则，B正确；PCR反应的产物是DNA，因此该过程需要的原料是四种游离的脱氧核苷酸，不是核糖核苷酸，C错误；PCR扩增DNA与细胞内DNA复制相比，其所需要酶是耐高温的DNA聚合酶，D正确。
8.下列关于基因工程应用的叙述，正确的是（ ）
A. 基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因
B. 基因诊断的基本原理是核酸分子杂交
C. 一种基因探针能检测水体中的各种病毒
D. 原核生物基因不能用来进行真核生物的遗传改良
【答案】B
【解析】
【分析】
基因治疗是将目的基因通过载体导入患者受体细胞形成重组受体细胞，体外培养后再输回患者体内，或将目的基因通过载体直接送入患者体内．前者为体外途径，后者为体内途径。进行基因检测有两个必要条件，一是必需的特异的DNA探针；二是必需的基因组DNA，当两者都变性呈单链状态时，就能进行分子杂交。
【详解】基因治疗是指把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，A错误；基因诊断又称DNA诊断或分子诊断，通过分子生物学和分子遗传学的技术，直接检测出分子结构水平和表达水平是否异常，从而对疾病做出判断，利用的原理就是DNA分子杂交，B正确；基因探针是用放射性同位素（或荧光分子）标记的含有目的基因DNA片段，一种基因探针只能检测水体中的一种或一类病毒，C错误；原核生物基因能用来进行真核生物的遗传改良，现在很多转基因生物就是用原核生物的基因杂交产生新品种的，比如抗虫棉等，D错误。
9.下列关于蛋白质工程的说法，正确的是 （ ）
A. 蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作
B. 蛋白质工程能生产出自然界中不存在的新型蛋白质分子
C. 对蛋白质的改造是通过直接改造相应mRNA来实现的
D. 蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是相同的
【答案】B
【解析】
【分析】
蛋白质工程是指以蛋白质分子结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活需求．蛋白质工程能对现有的蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质；而基因工程原则上能生产自然界原有的蛋白质．
【详解】蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。由概念可知：蛋白质工程是在分子水平上对现有蛋白质的基因分子进行操作，A错误；由概念可知：蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子，B正确；对蛋白质的改造是通过直接改造现有蛋白质的基因来实现的，C错误；蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是不完全相同的，D错误。
【点睛】本题考查蛋白质工程的相关知识，蛋白质工程的原理（实质）是：改造基因．蛋白质工程的过程：（1）根据中心法则逆推以确定目的基因的碱基序列：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）；（2）进行基因修饰或基因合成；（3）最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成．因此蛋白质工程生产合成的蛋白质是自然界中不存在的新型蛋白质分子．
10. 从某海洋动物中获得一基因，其表达产物为一种抗菌体和溶血性均较强的多肽P1。目前在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，首先要做的是
A．合成编码目的肽的DNA片段
B．构建含目的肽DNA片段的表达载体
C．依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽
D．筛选出具有优良活性的模拟肽作为目的肽
【答案】C
【解析】
，该题目属于蛋白质工程，已经获得该目的基因片段，不需要合成编码目的肽的DNA片段，故A错误；是需要构建含目的肽DNA片段的表达载体，但这不是第一步，故B错误；蛋白质工程的第一步是根据蛋白质的功能，设计P1氨基酸序列，从而推出其基因序列，故C正确；该基因表达产物为一种抗菌体和溶血性均较强的多肽P1，。目前在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，而目的多肽是抗菌性强但溶血性弱，所以必需对其改造，保持其抗菌性强，抑制其溶血性，故D错误。
【考点定位】本题综合考查了蛋白质工程和基因工程的相关内容。属于中等偏上难度题。
11. 基因工程技术引起的生物变异属于
A. 染色体变异 B. 基因突变
C. 基因重组 D. 不可遗传的变异
【答案】C
【解析】
【分析】
基因工程又叫DNA重组技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
【详解】基因工程将外源基因导入受体细胞，实现了不同生物的基因之间的组合，因此基因工程的原理是基因重组，故选C。
12.下列所示的黏性末端是由几种限制性核酸内切酶作用产生的（ ）
A. 1种 B. 2种 C. 3种 D. 4种
【答案】D
【解析】
【分析】
解答此题只需根据限制酶的特性解答即可，一种限制酶只能识别一种特定核苷酸序列。
【详解】限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，从而形成两个相同的黏性末端。图中四个黏性末端均不相同，因此是由四种限制性内切酶切割形成的。故选D。
13.质粒作为基因工程的载体，下列说法正确的是 （ ）
A. 质粒只有一个限制酶切割位点 B. 质粒上有特殊的标记基因
C. 质粒不能在受体细胞中自我复制 D. 质粒上不含碱基T
【答案】B
【解析】
【分析】
最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。载体具备的条件：能在受体细胞中复制并稳定保存；具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入；具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。
【详解】质粒作为载体应该含有一个到多个限制酶切割位点，A错误；质粒上应该具有标记基因，用于检测目的基因是否导入受体细胞，B正确；质粒作为载体必须能在受体细胞中复制并稳定保存，C错误；质粒的本质是双链DNA，含有碱基A、T、G、C，D错误。
14.下列有关限制性核酸内切酶的说法，正确的是 （ ）
A. 主要来自真核生物 B. 识别序列只含6个核苷酸
C. 能识别DNA上特定的核苷酸序列 D. 切割产生的均为黏性末端
【答案】C
【解析】
【分析】
基因的“剪刀”--限制性核酸内切酶（简称限制酶）：
①分布：主要存在于原核生物中。
②特性：一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子。
③切割结果：产生两个带有黏牲末端或平末端的 DNA片段。
④作用：基因工程中重要的切割工具，通常能将外来的DNA切断，对自己的DNA无损害。
⑤实例：EcoRl限制酶能专一识别CAATTC序列，并在G和A之间将这段序列切开。
【详解】限制性核酸内切酶主要存在于原核生物中，A错误；大多数限制酶识别的序列是6个核苷酸组成的，也有少数限制酶的识别序列由4、5或8个核苷酸组成，B错误；限制酶能识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，C正确；限制酶切割产生的DNA片段末端可以是黏性末端或平末端，D错误。
【点睛】解答本题的关键是生识记限制酶的来源、特点及作用等，能紧扣两个“特定”来理解限制酶的专一性，明确限制酶识别的序列不一定是6个核苷酸序列，进而结合所学的知识准确判断各选项。
15. 用某人胰岛素基因制成 DNA探针，用来检测下列物质，不能形成杂交分子的是
A. 该人胰岛A细胞中的 DNA B. 该人胰岛 B细胞的mRNA
C. 该人胰岛A细胞的mRNA D. 该人肝脏细胞中的DNA
【答案】C
【解析】
该人胰岛A细胞中含有胰岛素基因，因此能与探针形成杂交分子，A错误；该人胰岛B细胞中的胰岛素基因可以转录形成相应的mRNA，因此能与探针形成杂交分子，B错误；由于基因的选择性表达，胰岛素基因在胰岛A细胞中不表达，因此该人胰岛A细胞的mRNA不能与探针形成杂交分子，C正确；该人肝脏细胞中含有胰岛素基因，因此能与探针形成杂交分子，D错误。
【考点定位】基因工程的原理及技术
【名师点睛】解决本题关键在于需要学生明确“胰岛素基因在人体所有细胞中都存在，但只在胰岛B细胞中才表达”，进而作出准确的判断。
16. 动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是
A. 诱导融合的方法完全相同 B. 所用的技术手段完全相同
C. 所采用的原理完全相同 D. 都能形成杂种细胞
【答案】D
【解析】
试题分析：
A．诱导融合的方法不完全相同，前者使细胞分散后，诱导细胞融合，而后者去除细胞壁后诱导原生质体融合。
B．所用的技术手段不完全相同，前者是离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导，而后者是离心、电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导。
C．所采用的原理不完全相同，前者是细胞膜的流动性，细胞的全能性，而后者是细胞膜的流动性。
D．两者都能形成杂种细胞
考点：本题考查动物细胞融合和植物体细胞杂交的相关知识。
点评：植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较：
项目
细胞融合原理
细胞融合方法
诱导手段
用途
植物体细胞杂交
细胞膜的流动性，（细胞的全能性）
去除细胞壁后诱导原生质体融合
离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导
克服远缘杂交不亲和，获得杂交植株
动物细胞融合
细胞膜的流动性
使细胞分散后，诱导细胞融合
离心、电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导
制备单克隆抗体的技术之一
17.基因工程的操作步骤：①使目的基因与运载体相结合②将目的基因导入受体细胞③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求④提取目的基因，正确的操作顺序是 （ ）
A. ④①②③ B. ②④①③
C. ③②④① D. ③④①②
【答案】A
【解析】
基因工程的操作步骤是先要获取目的基因，故B、C、D错误。然后将目的基因与运载体结合导入到受体细胞中，最后进行目的基因的检测与表达，A正确。
点睛：基因工程的四个步骤一定要按照顺序记下来，将每个步骤中的关键知识点也要记忆并理解，如运载体要符合什么条件。
18. 我国自主研制的复制型艾滋病疫苗，是把艾滋病病毒RNA的几个重要片段经某种处理后插入天花病毒DNA中，形成重组病毒疫苗。该疫苗在人体内具有复制能力，产生的抗原蛋白可以持续刺激免疫系统，使人产生较强的免疫能力。在该疫苗研制过程中( )
①使用了逆转录酶
②运用基因工程手段，用质粒作载体
③可利用培养的动物细胞培养天花病毒
④体现了天花病毒的间接使用价值
A. ①② B. ③④
C. ①③ D. ②④
【答案】C
【解析】
依题意可知，艾滋病病毒的遗传物质为RNA，若将其片段插入天花病毒的DNA上，需先逆转录合成DNA，此过程需使用逆转录酶，①正确；在该疫苗研制过程中，运用基因工程手段，用天花病毒作载体，②错误；病毒必须寄生在活细胞内才能生存，可利用动物细胞培养天花病毒，③正确；该疫苗研制工程直接使用了天花病毒，体现其直接使用价值，④错误。综上分析，C项正确，A、B、D三项均错误。
【考点定位】基因工程、生命活动离不开细胞、生物多样性的价值
【名师点睛】本题以“我国研制的复制型艾滋病疫苗”为情境，综合考查学生对基因工程、生命活动离不开细胞、生物多样性的价值的认知、理解和掌握情况。解答此题一定要抓住“把艾滋病病毒RNA的几个重要片段经某种处理后插入天花病毒DNA中”这一关键信息和解题的切入点，运用相关的知识分析各选项的问题情境，进而作答。
19.下列关于蛋白质工程应用的叙述，不正确的是 （ ）
A. 蛋白质工程可以改造酶的结构，提高酶的热稳定性
B. 利用蛋白质工程可以在大肠杆菌细胞中得到人的胰岛素
C. 通过蛋白质工程可以改变蛋白质的活性
D. 蛋白质工程可以对胰岛素进行改造和修饰，合成速效型胰岛素制剂
【答案】B
【解析】
【分析】
基因工程是通过对基因的操作，将符合人们需要的目的基因导入适宜的生物体，原则上只能生产自然界已存在的蛋白质；蛋白质工程是指以蛋白质分子结构规律及其与生物功能的关系为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产或或生活需要。
【详解】蛋白质工程可以通过改造基因进而改造酶的结构，提高酶的热稳定性，A正确；利用基因工程可以在大肠杆菌细胞中得到人的胰岛素，但是还需要进行人工修饰，B错误；蛋白质工程可以改变蛋白质的活性，C正确；蛋白质工程可以通过改造胰岛素基因来对胰岛素进行改造和修饰，从而合成速效型胰岛素制剂，D正确。
【点睛】解答本题的关键是识记蛋白质工程的概念、操作过程等基础知识，掌握蛋白质工程与基因工程的关系，明确蛋白质工程直接改造的对象是基因，进而结合所学的知识准确判断各选项。
20.蛋白质工程的基本流程正确的是 （ ）
①蛋白质分子结构设计 ②DNA合成 ③预期蛋白质功能 ④根据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列
A. ①→②→③→④ B. ④→②→①→③
C. ③→④→①→② D. ③→①→④→②
【答案】D
【解析】
蛋白质工程的基本流程是：③预期蛋白质功能→①设计预期的蛋白质结构，推测应有氨基酸序列→④据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列（基因）→②DNA合成，最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成。故D项正确，A、B、C项错误。
【考点定位】蛋白质工程
21.如图为植物组织培养的基本过程，则制作人工种子及生产治疗烫伤、割伤的药物－紫草素，应分别选用的编号是 （ ）
A. ④② B. ③② C. ③④ D. ④③
【答案】B
【解析】
分析图形可知，①是外植体，②是愈伤组织，③是胚状体，④是试管苗；植物组织培养技术的应用中，用人造种皮包裹胚状体制成人工种子；利用愈伤组织提取药物紫草素，故B正确。
22.下列选项中没有采用植物组织培养技术的是 （ ）
A. 扦插的枝条生根后长成月季植株
B. 利用花药离体培养得到单倍体植株
C. 利用基因工程培育抗棉铃虫的棉花植株
D. 利用细胞工程培育“番茄－马铃薯”杂种植株
【答案】A
【解析】
【分析】
植物组织培养是一种无性繁殖的技术，将离体的单个植物细胞培养成完整的植株的过程，体现了植物细胞的全能性。植物基因工程、单倍体育种和植物体细胞杂交过程中均运用了植物组织培养技术。
【详解】扦插的枝条生根后长成月季植株的过程中，没有对外植体进行离体培养，因此没有采用植物组织培养技术，A正确；花药离体培养得到单倍体植株采用了植物组织（花粉）培养技术，B错误；基因工程培养抗棉铃虫的棉花植株的过程中，将含有目的基因的棉花细胞培养成转基因植物要用到植物组织培养技术，C错误；运用细胞工程培育“番茄-马铃薯”杂种植株，需要采用植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株，D错误。
23.下列关于植物体细胞杂交的叙述，错误的是（ ）
A. 不同种植物原生质体融合的过程属于植物体细胞杂交过程
B. 融合的原生质体仍具有再生细胞壁、连续分裂并长成完整植株的能力
C. 参与杂种细胞的细胞壁形成的细胞器主要是线粒体和核糖体
D. 植物体细胞杂交技术可克服不同种植物之间杂交不亲和的障碍
【答案】C
【解析】
【分析】
植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。
（1）诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。
（2）细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成。
（3）植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束。
（4）杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。
【详解】植物体细胞杂交的过程包括酶解法去壁、原生质体融合、再生细胞壁等过程，A正确；融合的原生质体再生细胞壁形成杂种细胞，再通过连续的细胞分裂和分化最终发育为完整的个体，B正确；参与杂种细胞的细胞壁形成的细胞器主要是线粒体和高尔基体，C错误；植物体细胞杂交技术可打破生殖隔离，克服不同种植物之间杂交不亲和的障碍，D正确。
【点睛】解答本题的关键是识记并理解植物体细胞杂交技术的详细过程、原理等知识点，明确细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成，且细胞壁的形成需要高尔基体的参与。
24.下列关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是 （ ）
A. 动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同
B. 动物细胞培养和植物组织培养的理论基础相同
C. 烟草叶片细胞离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞离体培养可大量增殖
D. 动物细胞培养可用于检测有毒物质，植物组织培养可用于快速繁殖
【答案】B
【解析】
【分析】
植物组织培养和动物细胞培养的比较：
比较项目
植物组织培养
动物细胞培养
原理
细胞的全能性
细胞增殖
培养基性质
固体培养基
液体培养基
培养基成分
营养物质（蔗糖）、植物激素等
营养物质（葡萄糖）、动物血清等
培养结果
植物体
细胞株、细胞系
培养目的
快速繁殖、培育无毒苗等
获得细胞或细胞产物
【详解】动物细胞培养和植物组织培养所用的培养基成分不同，物理性质也不同，A正确；植物组织培养技术的原理是植物细胞的全能性，动物细胞培养技术的原理是细胞增殖，B错误；植物细胞具有全能性，因此烟草叶片离体培养能产生新个体；小鼠杂交瘤细胞可以在体外培养条件下无限增殖，因此小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖，C正确；动物细胞培养可以用于检测有毒物质，植物组织培养可用于快速繁殖，D正确。
【点睛】解答本题的关键是识记动物细胞培养和植物组织培养技术的过程和原理，能够列表比较两种技术的原理、培养基的性质和成分等，进而结合选项分析答题。
25.下列有关动物细胞培养条件的叙述，正确的是 （ ）
A. 用抗生素对培养液进行消毒处理
B. 气体环境是由95%CO2和5%空气组成
C. 通过定期更换培养液体防止培养过程中有毒物质积累
D. 动物细胞培养中需要添加生长素和动物血清等
【答案】C
【解析】
【分析】
动物细胞培养需要满足以下条件：
（1）充足的营养供给——微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。
（2）适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。
（3）无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。
（4）气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。
【详解】动物细胞的培养液需要进行灭菌处理，在培养液中加入抗生素可以防止培养过程中被杂菌污染，A错误；气体环境是由5%CO2和95%空气组成，B错误；动物细胞培养过程中，应定期更换培养液，以防止代谢产物积累对细胞自身造成危害，C正确；动物细胞培养液需要加入动物血清、血浆等，但是不需要加入生长素，D错误。
26.下列关于动物细胞培养的叙述，不正确的是 （ ）
A. 培养至细胞发生接触抑制时，瓶壁上的细胞呈单层分布
B. 在细胞培养过程中，有部分细胞的基因型会发生改变
C. 骨髓瘤细胞的传代培养次数通常不是无限的
D. 传代培养时，需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理
【答案】C
【解析】
【分析】
动物细胞的培养：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖；动物细胞培养液的成分：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等；动物细胞培养液的特点：液体培养基含动物血清。动物细胞培养的过程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
【详解】由于接触抑制，动物细胞培养时只能形成单层细胞，A正确；在细胞培养的传代培养过程中，有部分细胞的遗传物质发生了改变，因此基因型会发生改变，B正确；骨髓瘤细胞是癌细胞，具有无限增值的特点，C错误；传代培养时，需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞，D正确。
27.下列有关体细胞核移植过程的叙述，不正确的是 （ ）
A. 在体外将从卵巢采集到的卵母细胞培养到减数第二次分裂中期
B. 通过显微操作技术去除卵母细胞的细胞核和第一极体
C. 使用电脉冲等方法激活重组细胞使其完成细胞分裂和发育
D. 动物胚胎细胞核移植的难度高于体细胞核移植
【答案】D
【解析】
【分析】
动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎。
【详解】在体外需要将采集到的卵母细胞培养到减数第二次分裂中期，A正确；可以通过显微操作技术去除卵母细胞的细胞核和第一极体，B正确；核移植时，对提供细胞核和细胞质的奶牛不需要进行同期发情处理，使用电脉冲等方法可以激活重组细胞使其完成细胞分裂和发育，C正确；动物体细胞核移植的难度高于胚胎细胞核移植，D错误。
28.生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下提供的“复生”野驴个体的方法中能够成功的是 （ ）
A. 将野驴的体细胞取出，利用细胞培养技术，可培育新个体
B. 将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体
C. 取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵母细胞中，经孕育培养成新个体
D. 将野驴的一个基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体
【答案】C
【解析】
【分析】
将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为克隆动物；植物细胞具有全能性，因此植物复生可以通过植物组织培养来实现，而动物细胞的全能性受到限制，因此动物复生不能通过动物细胞培养实现。
【详解】由于动物细胞的全能性受到限制，目前动物细胞还不能培养成动物个体，A错误；由于动物细胞的全能性受到限制，目前动物细胞融合技术还不能产生生物体，B错误；将野驴的体细胞核移植到雌性家驴的去核卵细胞中，可以克隆形成野驴，C正确；将野驴的一个基因导入家驴的受精卵中，只能培育出转基因驴，不能让野驴“复生”，D错误。
29. 关于动物细胞融合的说法，不正确的是（ ）
A. 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程
B. 动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞
C. 常用的诱导动物细胞融合的因素有：聚乙二醇、灭活的病毒、电激、紫外线照射等
D. 细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能
【答案】C
【解析】
试题分析：动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，一般多数为两个细胞的融合，A正确；动物细胞融合后，原来两个或多个动物细胞的遗传信息重新形成一个单核细胞，称为杂交细胞，例如骨髓瘤细胞和浆细胞融合，形成杂交瘤细胞，B正确；紫外线照射常用作人工诱变的物理诱变因子，可诱发基因突变，而不是诱导细胞融合的因素，物理诱导法有离心、震动、电刺激等，C错误；细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，克服远缘杂交不亲和的障碍，D正确．
考点：细胞融合的概念及方法
30. 单克隆抗体与血清抗体相比，优越之处在于
A. 单克隆抗体能够制成“生物导弹”
B. 单克隆抗体可以在体外制备
C. 单克隆抗体的特异性强．灵敏度高，产量大大高于血清抗体
D. 单克隆抗体的制备过程简单
【答案】C
【解析】
单克隆抗体的功能用于治疗疾病和运载药物，可制成“生物导弹”，故A错误；杂交瘤细胞能注射到小老鼠体内和体外培养，再从培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体，属于制备过程，故B错误；单克隆抗体由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系产生的化学性质单一、特异性强的抗体，优点是特异性强，灵敏度高，可大量制备，故C正确；单克隆抗体的制备过程涉及动物细胞融合和动物细胞培养，过程复杂，故D错误。
【考点定位】单克隆抗体的制备过程
31. 在以下4种细胞工程技术中，培育出的新个体中，体内遗传物质均来自一个亲本的是
A. 植物组织培养 B. 细胞融合
C. 植物体细胞杂交 D. 细胞核移植
【答案】A
【解析】
试题分析：植物细胞和组织培养形成的新个体中遗传物质只来自一个亲本，A正确；细胞融合、植物体细胞杂交、细胞核移植形成的新个体具有两个亲本的遗传物质，BCD错误。
考点：植物培养的条件及过程；植物体细胞杂交的过程；细胞融合的方法；动物细胞核移植技术
32.植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是 （ ）
A. 纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理一一酶的专一性
B. 植物组织培养和动物细胞培养一一细胞的全能性
C. 原生质体融合和动物细胞融合一一生物膜的流动性
D. 紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养一一细胞分裂
【答案】B
【解析】
【分析】
据题文和选项的描述可知：该题考查学生对植物组织培养技术、植物体细胞杂交技术、动物细胞培养技术、动物细胞融合技术的相关知识的识记和理解能力。
【详解】植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因植物细胞外面的细胞壁阻碍了植物体细胞间的杂交，因此在诱导植物细胞融合之前，先要用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞的细胞壁，动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织，因此在动物细胞培养中，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织以便将其分散成单个细胞，可见，纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理，均利用了酶的专一性，A正确；植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，动物细胞培养的原理是细胞的增殖，B错误；原生质体融合和动物细胞融合都是以生物膜的流动性为基础，C正确；紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养，其原理都是细胞分裂，D正确。
33.在利用PCR技术扩增目的基因的过程中，不需要的条件是（ ）
A. 引物 B. 模板DNA
C. 热稳定DNA聚合酶 D. 核糖核苷酸
【答案】D
【解析】
【分析】
PCR技术：
1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。
2、原理：DNA复制。
3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。
4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。
5、过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。
【详解】PCR技术需要一对引物，以便延伸子链，A错误；PCR技术需要DNA的两条链作为模板，B错误；PCR技术需要热稳定DNA聚合酶的催化，C错误；PCR技术需要脱氧核苷酸作为原料，不需要核糖核苷酸，D正确。
34.下列关于愈伤组织叙述错误的是 （ ）
A. 愈伤组织是脱分化和细胞分裂形成的 B. 愈伤组织细胞没有全能性
C. 愈伤组织是一群薄壁细胞 D. 愈伤组织可以形成胚状体
【答案】B
【解析】
【分析】
离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，愈伤组织是一团排列疏松而无规则、高度液泡化的、呈无定形状态的、具有分生能力的薄壁细胞，不具有特定的结构和功能。
【详解】愈伤组织是离体细胞经过脱分化和细胞分裂形成的，A正确；愈伤组织细胞具有全能性，B错误；愈伤组织的特点是细胞排列疏松无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状的薄壁细胞，C正确；愈伤组织可以再分化形成胚状体，D正确。
35. 为达到相应的目的，必须通过分子检测的是
A. 携带链霉素抗性基因受体菌的筛选
B. 产生抗人白细胞介素-8抗体的杂交瘤细胞的筛选
C. 转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定
D. 21三体综合征的诊断
【答案】B
【解析】
熟悉检测手段应用的范围是解决本题的关键。逐项解析如下：携带链霉素抗性基因受体菌的筛选方法有两种：①可利用含链霉素的培养基培养菌体进行，②用标记的链霉素抗性基因通过分子杂交技术筛选；A项错误。筛选出抗人白细胞介素-8抗体的杂交瘤细胞，只能用抗原——抗体杂交技术；B项正确。转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定，属于个体生物学水平的鉴定，需要做抗虫的接种实验来确定；C项错误。21三体综合征是由于患者的21号染色体比正常者的多一条导致，因此该病的诊断科可通过显微镜下对染色体的观察确定；D项错误。
【考点定位】本题考查分子水平、个体水平上的鉴定方法，意在考查考生对知识的识记及理解应用能力。
二、非选择题
36.科学家通过基因工程，将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入到普通棉株细胞内，并成功的实现了表达，从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉。其过程大致如下图所示：
（1）基因工程的操作程序主要包括四个步骤，其核心是____________________。
（2）获取Bt毒蛋白基因的方法一般有________等（最少写出2种）。
（3）Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T-DNA，把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中是利用了T-DNA的_________________________________________特点。Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内并成功实现表达的过程，在基因工程中称为________。
（4）将目的基因导入受体细胞的方法很多，在该题中涉及到的方法是___________。
（5）一个基因表达载体的组成必须有__________、_________、___________、______、__________等五部分组成。
【答案】 (1). 基因表达载体的构建 (2). 从基因文库中提取、PCR扩增、人工合成等 (3). 可转移到受体细胞并整合到受体细胞染色体DNA分子上 (4). 转化 (5). 农杆菌转化法 (6). 目的基因 (7). 标记基因 (8). 启动子 (9). 终止子 (10). 复制原点
【解析】
【分析】
进行基因工程操作一般要经过的四个步骤是：目的基因的获取；基因表达载体的构建（或目的基因与运载体结合）；将目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与鉴定。
【详解】（1）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建。
（2）获取目的基因的方法有从基因文库中获取、PCR技术扩增、人工合成等。
（3）农杆菌的T—DNA具有转移到受体细胞并整合到受体细胞染色体DNA上的能力；目的基因在受体细胞中表达的过程称为转化。
（4）将目的基因导入到植物细胞的方法有农杆菌转化法和花粉管通道法，本题使用的是农杆菌转化法。
（5）基因表达载体的组成成分包括目的基因、启动子、终止子、标记基因、复制原点。
【点睛】解答本题的关键是识记和掌握基因工程的四个基本步骤，明确将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，并能够识记基因表达载体的组成成分以及每一个成分的功能，进而结合题干要求分析答题。
37.植物组织培养可简略表示如下：
据此回答：
（1）①表示____________，它能被培养成为④的根本原因是__________________。
（2）②表示____________，它与①相比分化程度______，全能性______。
（3）若想制作人工种子，应该选用（填编号）____________。
（4）若①是花药，则④是____________，继续对其使用____________处理可获得______正常植株，该过程称为__________________。
（5）若利用此项技术制造治疗烫伤、割伤的药物－紫草素，培养将进行到（填编号）______。
【答案】 (1). 离体的植物器官、组织或细胞 (2). 植物细胞具有全能性 (3). 愈伤组织 (4). 低 (5). 高 (6). ③ (7). 单倍体植株 (8). 秋水仙素 (9). 纯合子 (10). 单倍体育种 (11). ②
【解析】
【分析】
植物组织培养的过程：离体的植物组织或器官愈伤组织胚状题植株，植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。据图分析，图中①表示离体的植物组织或器官（外植体），②表示愈伤组织，③表示胚状体，④表示植株体。
【详解】（1）①表示离体的植物组织或器官，它能被培养成为④完整植株的根本原因是植物细胞具有全能性。
（2）②表示愈伤组织，它是由①经过脱分化而形成，因此与①相比分化程度低，全能性高。
（3）人工种子是指通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子，因此若想制作人工种子，应该选用③胚状体。
（4）若①是花药，则④是单倍体植株，由于单倍体植株高度不育，因此需要对其使用秋水仙素处理，而秋水仙素能抑制纺锤体的形成，使染色体数目加倍，因此可获得纯合的正常植株，该过程称为单倍体育种。
（5）紫草素的细胞代谢产物，可以从②愈伤组织提取。
【点睛】解答本题的关键是识记植物组织培养的过程，确定图中各个数字代表的结构的名称，明确愈伤组织、胚状体、新植株在生产中有不同的应用。
38.近年来，我国死于狂犬病的人数有上升趋势。狂犬病病毒的核酸是RNA，机体感染病毒后产生的特异性IgC抗体，能消除狂犬病病毒，这是接触狂犬病病毒后及时注射疫苗和特异抗体的重要依据。下面是单克隆抗体制备过程示意图，请据图回答：
（1）图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是____________细胞，该细胞能够产生___________。从小鼠体内提取分离该细胞之前，给小鼠注射的特定的物质是_______。
（2）图中B过程是细胞融合，该过程需要用灭活的_______、聚乙二醇或电激等诱导。
（3）特异性抗体获取的方法也可以采用向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后从动物血清中分离所需抗体。与这种方法制备的抗体相比，单克隆抗体具有_______、________、________等优点。
（4）单克隆抗体的制备还有哪些用途？(写两点即可)___________、___________。
【答案】 (1). B淋巴 (2). 抗体 (3). 抗原(狂犬病病毒) (4). 病毒 (5). 特异性强 (6). 灵敏度高 (7). 并可大量制备 (8). 作为诊断试剂 (9). 运载药物(生物导弹)
【解析】
【分析】
单克隆抗体制备的过程：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。据图分析，A过程表示注射抗原获得相应的B淋巴细胞（效应B细胞）的过程，B表示诱导动物细胞融合并经过两次筛选获得能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
【详解】（1）图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是已免疫的B细胞（或效应B细胞），该细胞能够产生抗体；已经免疫的B淋巴细胞需要相应的抗原刺激才能产生，故从小鼠体内提取分离该细胞之前，给小鼠注射的特定的物质是抗原（或狂犬病病毒）。
（2）诱导动物细胞融合的方法有灭活的病毒、聚乙二醇或电激等方法。
（3）单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、并可大量制备等优点。
（4）单克隆抗体可以作为诊断试剂，也可以用于运载药物（或生物导弹）等。
【点睛】解答本题的关键是掌握动物细胞融合和单克隆抗体制备的详细过程，确定图中A、B字母代表的过程及其涉及到的技术，明确诱导动物细胞融合不同于植物的方法是灭活的病毒。
期中考试试卷
一、单选题
1.科学家们经过多年的努力，创立了一种生物技术——基因工程，实施该工程的最终目的是（ ）
A. 定向提取生物体的DNA分子
B. 定向地改造生物的遗传性状
C. 在生物体外对DNA分子进行改造
D. 定向地对DNA分子进行人工“剪切”
【答案】B
【解析】
【分析】
基因工程又叫DNA重组技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
【详解】科学家们经过多年的努力，创立了一种新兴的生物技术--基因工程，通过基因工程技术实现不同生物的基因重新组合，最终达到定向改造生物的遗传性状的目的，故选B。
2.下列不属于获取目的基因的方法是 （ ）
A. 从基因文库中提取 B. 利用PCR技术合成
C. 利用DNA转录合成 D. 利用化学方法人工合成
【答案】C
【解析】
【分析】
获得目的基因的方法：
①从基因文库中获取；
②利用PCR技术扩增；
③人工合成：这种方法有两条途径，一是以目的基因转录的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，再在酶的作用下合成双链DNA，即目的基因；另一条途径是蛋白质的氨基酸序列，推测出信使RNA序列，再推测出结构基因的核苷酸序列，然后用化学的方法以单核苷酸为原料合成。
【详解】可以从基因组文库中获取目的基因，A正确；可以利用PCR技术扩增目的基因，B正确；利用DNA转录合成的是RNA，不是基因，C错误；可以利用化学方法人工合成目的基因，D正确。
3.干扰素是动物或人体细胞受到病毒侵染后产生的一种糖蛋白，是一种抗病毒的特效药。科学家可用基因工程的方法生产干扰素。下列相关叙述不正确的是 （ ）
A. 基因工程可以克服生殖隔离
B. 基因工程是在个体水平上进行的操作
C. 用于生产干扰素的受体细胞可以是酵母菌
D. 基因工程的原理是基因重组
【答案】B
【解析】
【分析】
基因工程又叫DNA重组技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
【详解】基因工程可以突破生殖隔离，实现不同物种之间的基因交流，A正确；基因工程是在分子水平上进行的操作，B错误；用于生产干扰素的受体细胞可以是酵母菌，C正确；基因工程又叫DNA重组技术，其原理是基因重组，D正确。
4.在基因工程的操作过程中构建重组质粒不需要（ ）
①DNA连接酶 ②同一种限制酶③DNA聚合酶④具有标记基因的质粒⑤目的基因⑥4种核糖核苷酸
A. ③⑥ B. ②④ C. ①⑤ D. ①②④
【答案】A
【解析】
【分析】
在基因工程的操作过程中，需要用同一种限制酶切割目的基因与载体，并用DNA连接酶将两者的黏性末端（或平末端）连接起来，所选择的质粒必须具有标记基因，以便进行目的基因的检测。
【详解】DNA连接酶将具有相同黏性末端的目的基因和运载体连接起来，①正确；同一种限制酶切割目的基因与载体，形成相同的黏性末端，②正确；DNA复制过程中需要DNA聚合酶，但是在基因工程中不需要，③错误；具有标记基因的质粒作为载体，以便进行目的基因的检测，④正确；基因表达载体中含有目的基因、启动子、终止子和标记基因，⑤正确；合成目的基因时需要4种脱氧核苷酸，而基因表达载体的构建不需要，⑥错误。因此，在基因工程的操作过程中构建重组质粒不需要③⑥，故选A。
5.下列关于目的基因导入受体细胞的描述不正确的是 （ ）
A. 基因枪法导入植物体细胞的方法比较经济有效
B. 显微注射技术是转基因动物中采用最多的方法
C. 目的基因导入大肠杆菌最常用的方法是Ca2+处理法
D. 农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞最常用的方法
【答案】A
【解析】
【分析】
将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。
（1）将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；
（2）将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；
（3）将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法（Ca2+处理法）。
【详解】将目的基因导入植物体细胞最经济有效的方法是农杆菌转化法，A错误；将目的基因导入动物细胞常用显微注射法，B正确；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法，即用Ca2+处理大肠杆菌，C正确；将目的基因导入植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法，此外还有基因枪法和花粉管通道法，D正确。
6. 基因工程运载体必须具备的条件中，错误的是( )
A. 能在宿主细胞中复制并稳定保存
B. 具有多个限制酶切点，以便于外源基因连接
C. 能进入宿主细胞中并控制其新陈代谢过程
D. 在限制酶切点外必须含有标记基因，便于筛选
【答案】C
【解析】
试题分析：作为基因工程的运载体必须具备的条件有：①要具有限制酶的切割位点； ②要有标记基因(如抗性基因)，以便于重组后重组子的筛选；③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。故本题选C。
考点：基因工程
点评：本题考查了基因工程的运载体必须具备的条件，属于对识记层次的考查。
7.PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，下列有关PCR过程的叙述，不正确的是（ ）
A. 变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键
B. 复性过程中引物与DNA模板链的结合依靠碱基补配对原则完成
C. 延伸过程中需要RNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸参与
D. 与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高
【答案】C
【解析】
【分析】
PCR技术：
1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。
2、原理：DNA复制。
3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。
4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。
5、过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。
【详解】PCR技术过程中，高温变性破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，A正确；复性过程是引物的核苷酸序列上的碱基与单链DNA分子上的核苷酸序列的碱基的结合遵循碱基互补配对原则，B正确；PCR反应的产物是DNA，因此该过程需要的原料是四种游离的脱氧核苷酸，不是核糖核苷酸，C错误；PCR扩增DNA与细胞内DNA复制相比，其所需要酶是耐高温的DNA聚合酶，D正确。
8.下列关于基因工程应用的叙述，正确的是（ ）
A. 基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因
B. 基因诊断的基本原理是核酸分子杂交
C. 一种基因探针能检测水体中的各种病毒
D. 原核生物基因不能用来进行真核生物的遗传改良
【答案】B
【解析】
【分析】
基因治疗是将目的基因通过载体导入患者受体细胞形成重组受体细胞，体外培养后再输回患者体内，或将目的基因通过载体直接送入患者体内．前者为体外途径，后者为体内途径。进行基因检测有两个必要条件，一是必需的特异的DNA探针；二是必需的基因组DNA，当两者都变性呈单链状态时，就能进行分子杂交。
【详解】基因治疗是指把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，A错误；基因诊断又称DNA诊断或分子诊断，通过分子生物学和分子遗传学的技术，直接检测出分子结构水平和表达水平是否异常，从而对疾病做出判断，利用的原理就是DNA分子杂交，B正确；基因探针是用放射性同位素（或荧光分子）标记的含有目的基因DNA片段，一种基因探针只能检测水体中的一种或一类病毒，C错误；原核生物基因能用来进行真核生物的遗传改良，现在很多转基因生物就是用原核生物的基因杂交产生新品种的，比如抗虫棉等，D错误。
9.下列关于蛋白质工程的说法，正确的是 （ ）
A. 蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作
B. 蛋白质工程能生产出自然界中不存在的新型蛋白质分子
C. 对蛋白质的改造是通过直接改造相应mRNA来实现的
D. 蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是相同的
【答案】B
【解析】
【分析】
蛋白质工程是指以蛋白质分子结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活需求．蛋白质工程能对现有的蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质；而基因工程原则上能生产自然界原有的蛋白质．
【详解】蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。由概念可知：蛋白质工程是在分子水平上对现有蛋白质的基因分子进行操作，A错误；由概念可知：蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子，B正确；对蛋白质的改造是通过直接改造现有蛋白质的基因来实现的，C错误；蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是不完全相同的，D错误。
【点睛】本题考查蛋白质工程的相关知识，蛋白质工程的原理（实质）是：改造基因．蛋白质工程的过程：（1）根据中心法则逆推以确定目的基因的碱基序列：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）；（2）进行基因修饰或基因合成；（3）最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成．因此蛋白质工程生产合成的蛋白质是自然界中不存在的新型蛋白质分子．
10. 从某海洋动物中获得一基因，其表达产物为一种抗菌体和溶血性均较强的多肽P1。目前在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，首先要做的是
A．合成编码目的肽的DNA片段
B．构建含目的肽DNA片段的表达载体
C．依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽
D．筛选出具有优良活性的模拟肽作为目的肽
【答案】C
【解析】
，该题目属于蛋白质工程，已经获得该目的基因片段，不需要合成编码目的肽的DNA片段，故A错误；是需要构建含目的肽DNA片段的表达载体，但这不是第一步，故B错误；蛋白质工程的第一步是根据蛋白质的功能，设计P1氨基酸序列，从而推出其基因序列，故C正确；该基因表达产物为一种抗菌体和溶血性均较强的多肽P1，。目前在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，而目的多肽是抗菌性强但溶血性弱，所以必需对其改造，保持其抗菌性强，抑制其溶血性，故D错误。
【考点定位】本题综合考查了蛋白质工程和基因工程的相关内容。属于中等偏上难度题。
11. 基因工程技术引起的生物变异属于
A. 染色体变异 B. 基因突变
C. 基因重组 D. 不可遗传的变异
【答案】C
【解析】
【分析】
基因工程又叫DNA重组技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
【详解】基因工程将外源基因导入受体细胞，实现了不同生物的基因之间的组合，因此基因工程的原理是基因重组，故选C。
12.下列所示的黏性末端是由几种限制性核酸内切酶作用产生的（ ）
A. 1种 B. 2种 C. 3种 D. 4种
【答案】D
【解析】
【分析】
解答此题只需根据限制酶的特性解答即可，一种限制酶只能识别一种特定核苷酸序列。
【详解】限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，从而形成两个相同的黏性末端。图中四个黏性末端均不相同，因此是由四种限制性内切酶切割形成的。故选D。
13.质粒作为基因工程的载体，下列说法正确的是 （ ）
A. 质粒只有一个限制酶切割位点 B. 质粒上有特殊的标记基因
C. 质粒不能在受体细胞中自我复制 D. 质粒上不含碱基T
【答案】B
【解析】
【分析】
最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。载体具备的条件：能在受体细胞中复制并稳定保存；具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入；具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。
【详解】质粒作为载体应该含有一个到多个限制酶切割位点，A错误；质粒上应该具有标记基因，用于检测目的基因是否导入受体细胞，B正确；质粒作为载体必须能在受体细胞中复制并稳定保存，C错误；质粒的本质是双链DNA，含有碱基A、T、G、C，D错误。
14.下列有关限制性核酸内切酶的说法，正确的是 （ ）
A. 主要来自真核生物 B. 识别序列只含6个核苷酸
C. 能识别DNA上特定的核苷酸序列 D. 切割产生的均为黏性末端
【答案】C
【解析】
【分析】
基因的“剪刀”--限制性核酸内切酶（简称限制酶）：
①分布：主要存在于原核生物中。
②特性：一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子。
③切割结果：产生两个带有黏牲末端或平末端的 DNA片段。
④作用：基因工程中重要的切割工具，通常能将外来的DNA切断，对自己的DNA无损害。
⑤实例：EcoRl限制酶能专一识别CAATTC序列，并在G和A之间将这段序列切开。
【详解】限制性核酸内切酶主要存在于原核生物中，A错误；大多数限制酶识别的序列是6个核苷酸组成的，也有少数限制酶的识别序列由4、5或8个核苷酸组成，B错误；限制酶能识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，C正确；限制酶切割产生的DNA片段末端可以是黏性末端或平末端，D错误。
【点睛】解答本题的关键是生识记限制酶的来源、特点及作用等，能紧扣两个“特定”来理解限制酶的专一性，明确限制酶识别的序列不一定是6个核苷酸序列，进而结合所学的知识准确判断各选项。
15. 用某人胰岛素基因制成 DNA探针，用来检测下列物质，不能形成杂交分子的是
A. 该人胰岛A细胞中的 DNA B. 该人胰岛 B细胞的mRNA
C. 该人胰岛A细胞的mRNA D. 该人肝脏细胞中的DNA
【答案】C
【解析】
该人胰岛A细胞中含有胰岛素基因，因此能与探针形成杂交分子，A错误；该人胰岛B细胞中的胰岛素基因可以转录形成相应的mRNA，因此能与探针形成杂交分子，B错误；由于基因的选择性表达，胰岛素基因在胰岛A细胞中不表达，因此该人胰岛A细胞的mRNA不能与探针形成杂交分子，C正确；该人肝脏细胞中含有胰岛素基因，因此能与探针形成杂交分子，D错误。
【考点定位】基因工程的原理及技术
【名师点睛】解决本题关键在于需要学生明确“胰岛素基因在人体所有细胞中都存在，但只在胰岛B细胞中才表达”，进而作出准确的判断。
16. 动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是
A. 诱导融合的方法完全相同 B. 所用的技术手段完全相同
C. 所采用的原理完全相同 D. 都能形成杂种细胞
【答案】D
【解析】
试题分析：
A．诱导融合的方法不完全相同，前者使细胞分散后，诱导细胞融合，而后者去除细胞壁后诱导原生质体融合。
B．所用的技术手段不完全相同，前者是离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导，而后者是离心、电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导。
C．所采用的原理不完全相同，前者是细胞膜的流动性，细胞的全能性，而后者是细胞膜的流动性。
D．两者都能形成杂种细胞
考点：本题考查动物细胞融合和植物体细胞杂交的相关知识。
点评：植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较：
项目
细胞融合原理
细胞融合方法
诱导手段
用途
植物体细胞杂交
细胞膜的流动性，（细胞的全能性）
去除细胞壁后诱导原生质体融合
离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导
克服远缘杂交不亲和，获得杂交植株
动物细胞融合
细胞膜的流动性
使细胞分散后，诱导细胞融合
离心、电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导
制备单克隆抗体的技术之一
17.基因工程的操作步骤：①使目的基因与运载体相结合②将目的基因导入受体细胞③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求④提取目的基因，正确的操作顺序是 （ ）
A. ④①②③ B. ②④①③
C. ③②④① D. ③④①②
【答案】A
【解析】
基因工程的操作步骤是先要获取目的基因，故B、C、D错误。然后将目的基因与运载体结合导入到受体细胞中，最后进行目的基因的检测与表达，A正确。
点睛：基因工程的四个步骤一定要按照顺序记下来，将每个步骤中的关键知识点也要记忆并理解，如运载体要符合什么条件。
18. 我国自主研制的复制型艾滋病疫苗，是把艾滋病病毒RNA的几个重要片段经某种处理后插入天花病毒DNA中，形成重组病毒疫苗。该疫苗在人体内具有复制能力，产生的抗原蛋白可以持续刺激免疫系统，使人产生较强的免疫能力。在该疫苗研制过程中( )
①使用了逆转录酶
②运用基因工程手段，用质粒作载体
③可利用培养的动物细胞培养天花病毒
④体现了天花病毒的间接使用价值
A. ①② B. ③④
C. ①③ D. ②④
【答案】C
【解析】
依题意可知，艾滋病病毒的遗传物质为RNA，若将其片段插入天花病毒的DNA上，需先逆转录合成DNA，此过程需使用逆转录酶，①正确；在该疫苗研制过程中，运用基因工程手段，用天花病毒作载体，②错误；病毒必须寄生在活细胞内才能生存，可利用动物细胞培养天花病毒，③正确；该疫苗研制工程直接使用了天花病毒，体现其直接使用价值，④错误。综上分析，C项正确，A、B、D三项均错误。
【考点定位】基因工程、生命活动离不开细胞、生物多样性的价值
【名师点睛】本题以“我国研制的复制型艾滋病疫苗”为情境，综合考查学生对基因工程、生命活动离不开细胞、生物多样性的价值的认知、理解和掌握情况。解答此题一定要抓住“把艾滋病病毒RNA的几个重要片段经某种处理后插入天花病毒DNA中”这一关键信息和解题的切入点，运用相关的知识分析各选项的问题情境，进而作答。
19.下列关于蛋白质工程应用的叙述，不正确的是 （ ）
A. 蛋白质工程可以改造酶的结构，提高酶的热稳定性
B. 利用蛋白质工程可以在大肠杆菌细胞中得到人的胰岛素
C. 通过蛋白质工程可以改变蛋白质的活性
D. 蛋白质工程可以对胰岛素进行改造和修饰，合成速效型胰岛素制剂
【答案】B
【解析】
【分析】
基因工程是通过对基因的操作，将符合人们需要的目的基因导入适宜的生物体，原则上只能生产自然界已存在的蛋白质；蛋白质工程是指以蛋白质分子结构规律及其与生物功能的关系为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产或或生活需要。
【详解】蛋白质工程可以通过改造基因进而改造酶的结构，提高酶的热稳定性，A正确；利用基因工程可以在大肠杆菌细胞中得到人的胰岛素，但是还需要进行人工修饰，B错误；蛋白质工程可以改变蛋白质的活性，C正确；蛋白质工程可以通过改造胰岛素基因来对胰岛素进行改造和修饰，从而合成速效型胰岛素制剂，D正确。
【点睛】解答本题的关键是识记蛋白质工程的概念、操作过程等基础知识，掌握蛋白质工程与基因工程的关系，明确蛋白质工程直接改造的对象是基因，进而结合所学的知识准确判断各选项。
20.蛋白质工程的基本流程正确的是 （ ）
①蛋白质分子结构设计 ②DNA合成 ③预期蛋白质功能 ④根据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列
A. ①→②→③→④ B. ④→②→①→③
C. ③→④→①→② D. ③→①→④→②
【答案】D
【解析】
蛋白质工程的基本流程是：③预期蛋白质功能→①设计预期的蛋白质结构，推测应有氨基酸序列→④据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列（基因）→②DNA合成，最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成。故D项正确，A、B、C项错误。
【考点定位】蛋白质工程
21.如图为植物组织培养的基本过程，则制作人工种子及生产治疗烫伤、割伤的药物－紫草素，应分别选用的编号是 （ ）
A. ④② B. ③② C. ③④ D. ④③
【答案】B
【解析】
分析图形可知，①是外植体，②是愈伤组织，③是胚状体，④是试管苗；植物组织培养技术的应用中，用人造种皮包裹胚状体制成人工种子；利用愈伤组织提取药物紫草素，故B正确。
22.下列选项中没有采用植物组织培养技术的是 （ ）
A. 扦插的枝条生根后长成月季植株
B. 利用花药离体培养得到单倍体植株
C. 利用基因工程培育抗棉铃虫的棉花植株
D. 利用细胞工程培育“番茄－马铃薯”杂种植株
【答案】A
【解析】
【分析】
植物组织培养是一种无性繁殖的技术，将离体的单个植物细胞培养成完整的植株的过程，体现了植物细胞的全能性。植物基因工程、单倍体育种和植物体细胞杂交过程中均运用了植物组织培养技术。
【详解】扦插的枝条生根后长成月季植株的过程中，没有对外植体进行离体培养，因此没有采用植物组织培养技术，A正确；花药离体培养得到单倍体植株采用了植物组织（花粉）培养技术，B错误；基因工程培养抗棉铃虫的棉花植株的过程中，将含有目的基因的棉花细胞培养成转基因植物要用到植物组织培养技术，C错误；运用细胞工程培育“番茄-马铃薯”杂种植株，需要采用植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株，D错误。
23.下列关于植物体细胞杂交的叙述，错误的是（ ）
A. 不同种植物原生质体融合的过程属于植物体细胞杂交过程
B. 融合的原生质体仍具有再生细胞壁、连续分裂并长成完整植株的能力
C. 参与杂种细胞的细胞壁形成的细胞器主要是线粒体和核糖体
D. 植物体细胞杂交技术可克服不同种植物之间杂交不亲和的障碍
【答案】C
【解析】
【分析】
植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。
（1）诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。
（2）细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成。
（3）植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束。
（4）杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。
【详解】植物体细胞杂交的过程包括酶解法去壁、原生质体融合、再生细胞壁等过程，A正确；融合的原生质体再生细胞壁形成杂种细胞，再通过连续的细胞分裂和分化最终发育为完整的个体，B正确；参与杂种细胞的细胞壁形成的细胞器主要是线粒体和高尔基体，C错误；植物体细胞杂交技术可打破生殖隔离，克服不同种植物之间杂交不亲和的障碍，D正确。
【点睛】解答本题的关键是识记并理解植物体细胞杂交技术的详细过程、原理等知识点，明确细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成，且细胞壁的形成需要高尔基体的参与。
24.下列关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是 （ ）
A. 动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同
B. 动物细胞培养和植物组织培养的理论基础相同
C. 烟草叶片细胞离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞离体培养可大量增殖
D. 动物细胞培养可用于检测有毒物质，植物组织培养可用于快速繁殖
【答案】B
【解析】
【分析】
植物组织培养和动物细胞培养的比较：
比较项目
植物组织培养
动物细胞培养
原理
细胞的全能性
细胞增殖
培养基性质
固体培养基
液体培养基
培养基成分
营养物质（蔗糖）、植物激素等
营养物质（葡萄糖）、动物血清等
培养结果
植物体
细胞株、细胞系
培养目的
快速繁殖、培育无毒苗等
获得细胞或细胞产物
【详解】动物细胞培养和植物组织培养所用的培养基成分不同，物理性质也不同，A正确；植物组织培养技术的原理是植物细胞的全能性，动物细胞培养技术的原理是细胞增殖，B错误；植物细胞具有全能性，因此烟草叶片离体培养能产生新个体；小鼠杂交瘤细胞可以在体外培养条件下无限增殖，因此小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖，C正确；动物细胞培养可以用于检测有毒物质，植物组织培养可用于快速繁殖，D正确。
【点睛】解答本题的关键是识记动物细胞培养和植物组织培养技术的过程和原理，能够列表比较两种技术的原理、培养基的性质和成分等，进而结合选项分析答题。
25.下列有关动物细胞培养条件的叙述，正确的是 （ ）
A. 用抗生素对培养液进行消毒处理
B. 气体环境是由95%CO2和5%空气组成
C. 通过定期更换培养液体防止培养过程中有毒物质积累
D. 动物细胞培养中需要添加生长素和动物血清等
【答案】C
【解析】
【分析】
动物细胞培养需要满足以下条件：
（1）充足的营养供给——微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。
（2）适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。
（3）无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。
（4）气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。
【详解】动物细胞的培养液需要进行灭菌处理，在培养液中加入抗生素可以防止培养过程中被杂菌污染，A错误；气体环境是由5%CO2和95%空气组成，B错误；动物细胞培养过程中，应定期更换培养液，以防止代谢产物积累对细胞自身造成危害，C正确；动物细胞培养液需要加入动物血清、血浆等，但是不需要加入生长素，D错误。
26.下列关于动物细胞培养的叙述，不正确的是 （ ）
A. 培养至细胞发生接触抑制时，瓶壁上的细胞呈单层分布
B. 在细胞培养过程中，有部分细胞的基因型会发生改变
C. 骨髓瘤细胞的传代培养次数通常不是无限的
D. 传代培养时，需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理
【答案】C
【解析】
【分析】
动物细胞的培养：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖；动物细胞培养液的成分：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等；动物细胞培养液的特点：液体培养基含动物血清。动物细胞培养的过程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
【详解】由于接触抑制，动物细胞培养时只能形成单层细胞，A正确；在细胞培养的传代培养过程中，有部分细胞的遗传物质发生了改变，因此基因型会发生改变，B正确；骨髓瘤细胞是癌细胞，具有无限增值的特点，C错误；传代培养时，需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞，D正确。
27.下列有关体细胞核移植过程的叙述，不正确的是 （ ）
A. 在体外将从卵巢采集到的卵母细胞培养到减数第二次分裂中期
B. 通过显微操作技术去除卵母细胞的细胞核和第一极体
C. 使用电脉冲等方法激活重组细胞使其完成细胞分裂和发育
D. 动物胚胎细胞核移植的难度高于体细胞核移植
【答案】D
【解析】
【分析】
动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎。
【详解】在体外需要将采集到的卵母细胞培养到减数第二次分裂中期，A正确；可以通过显微操作技术去除卵母细胞的细胞核和第一极体，B正确；核移植时，对提供细胞核和细胞质的奶牛不需要进行同期发情处理，使用电脉冲等方法可以激活重组细胞使其完成细胞分裂和发育，C正确；动物体细胞核移植的难度高于胚胎细胞核移植，D错误。
28.生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下提供的“复生”野驴个体的方法中能够成功的是 （ ）
A. 将野驴的体细胞取出，利用细胞培养技术，可培育新个体
B. 将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体
C. 取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵母细胞中，经孕育培养成新个体
D. 将野驴的一个基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体
【答案】C
【解析】
【分析】
将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为克隆动物；植物细胞具有全能性，因此植物复生可以通过植物组织培养来实现，而动物细胞的全能性受到限制，因此动物复生不能通过动物细胞培养实现。
【详解】由于动物细胞的全能性受到限制，目前动物细胞还不能培养成动物个体，A错误；由于动物细胞的全能性受到限制，目前动物细胞融合技术还不能产生生物体，B错误；将野驴的体细胞核移植到雌性家驴的去核卵细胞中，可以克隆形成野驴，C正确；将野驴的一个基因导入家驴的受精卵中，只能培育出转基因驴，不能让野驴“复生”，D错误。
29. 关于动物细胞融合的说法，不正确的是（ ）
A. 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程
B. 动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞
C. 常用的诱导动物细胞融合的因素有：聚乙二醇、灭活的病毒、电激、紫外线照射等
D. 细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能
【答案】C
【解析】
试题分析：动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，一般多数为两个细胞的融合，A正确；动物细胞融合后，原来两个或多个动物细胞的遗传信息重新形成一个单核细胞，称为杂交细胞，例如骨髓瘤细胞和浆细胞融合，形成杂交瘤细胞，B正确；紫外线照射常用作人工诱变的物理诱变因子，可诱发基因突变，而不是诱导细胞融合的因素，物理诱导法有离心、震动、电刺激等，C错误；细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，克服远缘杂交不亲和的障碍，D正确．
考点：细胞融合的概念及方法
30. 单克隆抗体与血清抗体相比，优越之处在于
A. 单克隆抗体能够制成“生物导弹”
B. 单克隆抗体可以在体外制备
C. 单克隆抗体的特异性强．灵敏度高，产量大大高于血清抗体
D. 单克隆抗体的制备过程简单
【答案】C
【解析】
单克隆抗体的功能用于治疗疾病和运载药物，可制成“生物导弹”，故A错误；杂交瘤细胞能注射到小老鼠体内和体外培养，再从培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体，属于制备过程，故B错误；单克隆抗体由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系产生的化学性质单一、特异性强的抗体，优点是特异性强，灵敏度高，可大量制备，故C正确；单克隆抗体的制备过程涉及动物细胞融合和动物细胞培养，过程复杂，故D错误。
【考点定位】单克隆抗体的制备过程
31. 在以下4种细胞工程技术中，培育出的新个体中，体内遗传物质均来自一个亲本的是
A. 植物组织培养 B. 细胞融合
C. 植物体细胞杂交 D. 细胞核移植
【答案】A
【解析】
试题分析：植物细胞和组织培养形成的新个体中遗传物质只来自一个亲本，A正确；细胞融合、植物体细胞杂交、细胞核移植形成的新个体具有两个亲本的遗传物质，BCD错误。
考点：植物培养的条件及过程；植物体细胞杂交的过程；细胞融合的方法；动物细胞核移植技术
32.植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是 （ ）
A. 纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理一一酶的专一性
B. 植物组织培养和动物细胞培养一一细胞的全能性
C. 原生质体融合和动物细胞融合一一生物膜的流动性
D. 紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养一一细胞分裂
【答案】B
【解析】
【分析】
据题文和选项的描述可知：该题考查学生对植物组织培养技术、植物体细胞杂交技术、动物细胞培养技术、动物细胞融合技术的相关知识的识记和理解能力。
【详解】植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因植物细胞外面的细胞壁阻碍了植物体细胞间的杂交，因此在诱导植物细胞融合之前，先要用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞的细胞壁，动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织，因此在动物细胞培养中，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织以便将其分散成单个细胞，可见，纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理，均利用了酶的专一性，A正确；植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，动物细胞培养的原理是细胞的增殖，B错误；原生质体融合和动物细胞融合都是以生物膜的流动性为基础，C正确；紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养，其原理都是细胞分裂，D正确。
33.在利用PCR技术扩增目的基因的过程中，不需要的条件是（ ）
A. 引物 B. 模板DNA
C. 热稳定DNA聚合酶 D. 核糖核苷酸
【答案】D
【解析】
【分析】
PCR技术：
1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。
2、原理：DNA复制。
3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。
4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。
5、过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。
【详解】PCR技术需要一对引物，以便延伸子链，A错误；PCR技术需要DNA的两条链作为模板，B错误；PCR技术需要热稳定DNA聚合酶的催化，C错误；PCR技术需要脱氧核苷酸作为原料，不需要核糖核苷酸，D正确。
34.下列关于愈伤组织叙述错误的是 （ ）
A. 愈伤组织是脱分化和细胞分裂形成的 B. 愈伤组织细胞没有全能性
C. 愈伤组织是一群薄壁细胞 D. 愈伤组织可以形成胚状体
【答案】B
【解析】
【分析】
离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，愈伤组织是一团排列疏松而无规则、高度液泡化的、呈无定形状态的、具有分生能力的薄壁细胞，不具有特定的结构和功能。
【详解】愈伤组织是离体细胞经过脱分化和细胞分裂形成的，A正确；愈伤组织细胞具有全能性，B错误；愈伤组织的特点是细胞排列疏松无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状的薄壁细胞，C正确；愈伤组织可以再分化形成胚状体，D正确。
35. 为达到相应的目的，必须通过分子检测的是
A. 携带链霉素抗性基因受体菌的筛选
B. 产生抗人白细胞介素-8抗体的杂交瘤细胞的筛选
C. 转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定
D. 21三体综合征的诊断
【答案】B
【解析】
熟悉检测手段应用的范围是解决本题的关键。逐项解析如下：携带链霉素抗性基因受体菌的筛选方法有两种：①可利用含链霉素的培养基培养菌体进行，②用标记的链霉素抗性基因通过分子杂交技术筛选；A项错误。筛选出抗人白细胞介素-8抗体的杂交瘤细胞，只能用抗原——抗体杂交技术；B项正确。转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定，属于个体生物学水平的鉴定，需要做抗虫的接种实验来确定；C项错误。21三体综合征是由于患者的21号染色体比正常者的多一条导致，因此该病的诊断科可通过显微镜下对染色体的观察确定；D项错误。
【考点定位】本题考查分子水平、个体水平上的鉴定方法，意在考查考生对知识的识记及理解应用能力。
二、非选择题
36.科学家通过基因工程，将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入到普通棉株细胞内，并成功的实现了表达，从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉。其过程大致如下图所示：
（1）基因工程的操作程序主要包括四个步骤，其核心是____________________。
（2）获取Bt毒蛋白基因的方法一般有________等（最少写出2种）。
（3）Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T-DNA，把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中是利用了T-DNA的_________________________________________特点。Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内并成功实现表达的过程，在基因工程中称为________。
（4）将目的基因导入受体细胞的方法很多，在该题中涉及到的方法是___________。
（5）一个基因表达载体的组成必须有__________、_________、___________、______、__________等五部分组成。
【答案】 (1). 基因表达载体的构建 (2). 从基因文库中提取、PCR扩增、人工合成等 (3). 可转移到受体细胞并整合到受体细胞染色体DNA分子上 (4). 转化 (5). 农杆菌转化法 (6). 目的基因 (7). 标记基因 (8). 启动子 (9). 终止子 (10). 复制原点
【解析】
【分析】
进行基因工程操作一般要经过的四个步骤是：目的基因的获取；基因表达载体的构建（或目的基因与运载体结合）；将目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与鉴定。
【详解】（1）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建。
（2）获取目的基因的方法有从基因文库中获取、PCR技术扩增、人工合成等。
（3）农杆菌的T—DNA具有转移到受体细胞并整合到受体细胞染色体DNA上的能力；目的基因在受体细胞中表达的过程称为转化。
（4）将目的基因导入到植物细胞的方法有农杆菌转化法和花粉管通道法，本题使用的是农杆菌转化法。
（5）基因表达载体的组成成分包括目的基因、启动子、终止子、标记基因、复制原点。
【点睛】解答本题的关键是识记和掌握基因工程的四个基本步骤，明确将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，并能够识记基因表达载体的组成成分以及每一个成分的功能，进而结合题干要求分析答题。
37.植物组织培养可简略表示如下：
据此回答：
（1）①表示____________，它能被培养成为④的根本原因是__________________。
（2）②表示____________，它与①相比分化程度______，全能性______。
（3）若想制作人工种子，应该选用（填编号）____________。
（4）若①是花药，则④是____________，继续对其使用____________处理可获得______正常植株，该过程称为__________________。
（5）若利用此项技术制造治疗烫伤、割伤的药物－紫草素，培养将进行到（填编号）______。
【答案】 (1). 离体的植物器官、组织或细胞 (2). 植物细胞具有全能性 (3). 愈伤组织 (4). 低 (5). 高 (6). ③ (7). 单倍体植株 (8). 秋水仙素 (9). 纯合子 (10). 单倍体育种 (11). ②
【解析】
【分析】
植物组织培养的过程：离体的植物组织或器官愈伤组织胚状题植株，植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。据图分析，图中①表示离体的植物组织或器官（外植体），②表示愈伤组织，③表示胚状体，④表示植株体。
【详解】（1）①表示离体的植物组织或器官，它能被培养成为④完整植株的根本原因是植物细胞具有全能性。
（2）②表示愈伤组织，它是由①经过脱分化而形成，因此与①相比分化程度低，全能性高。
（3）人工种子是指通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子，因此若想制作人工种子，应该选用③胚状体。
（4）若①是花药，则④是单倍体植株，由于单倍体植株高度不育，因此需要对其使用秋水仙素处理，而秋水仙素能抑制纺锤体的形成，使染色体数目加倍，因此可获得纯合的正常植株，该过程称为单倍体育种。
（5）紫草素的细胞代谢产物，可以从②愈伤组织提取。
【点睛】解答本题的关键是识记植物组织培养的过程，确定图中各个数字代表的结构的名称，明确愈伤组织、胚状体、新植株在生产中有不同的应用。
38.近年来，我国死于狂犬病的人数有上升趋势。狂犬病病毒的核酸是RNA，机体感染病毒后产生的特异性IgC抗体，能消除狂犬病病毒，这是接触狂犬病病毒后及时注射疫苗和特异抗体的重要依据。下面是单克隆抗体制备过程示意图，请据图回答：
（1）图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是____________细胞，该细胞能够产生___________。从小鼠体内提取分离该细胞之前，给小鼠注射的特定的物质是_______。
（2）图中B过程是细胞融合，该过程需要用灭活的_______、聚乙二醇或电激等诱导。
（3）特异性抗体获取的方法也可以采用向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后从动物血清中分离所需抗体。与这种方法制备的抗体相比，单克隆抗体具有_______、________、________等优点。
（4）单克隆抗体的制备还有哪些用途？(写两点即可)___________、___________。
【答案】 (1). B淋巴 (2). 抗体 (3). 抗原(狂犬病病毒) (4). 病毒 (5). 特异性强 (6). 灵敏度高 (7). 并可大量制备 (8). 作为诊断试剂 (9). 运载药物(生物导弹)
【解析】
【分析】
单克隆抗体制备的过程：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。据图分析，A过程表示注射抗原获得相应的B淋巴细胞（效应B细胞）的过程，B表示诱导动物细胞融合并经过两次筛选获得能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
【详解】（1）图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是已免疫的B细胞（或效应B细胞），该细胞能够产生抗体；已经免疫的B淋巴细胞需要相应的抗原刺激才能产生，故从小鼠体内提取分离该细胞之前，给小鼠注射的特定的物质是抗原（或狂犬病病毒）。
（2）诱导动物细胞融合的方法有灭活的病毒、聚乙二醇或电激等方法。
（3）单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、并可大量制备等优点。
（4）单克隆抗体可以作为诊断试剂，也可以用于运载药物（或生物导弹）等。
【点睛】解答本题的关键是掌握动物细胞融合和单克隆抗体制备的详细过程，确定图中A、B字母代表的过程及其涉及到的技术，明确诱导动物细胞融合不同于植物的方法是灭活的病毒。
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