山东省大联考2023-2024学年高二下学期3月月考生物试卷（Word版附解析）

这是一份山东省大联考2023-2024学年高二下学期3月月考生物试卷（Word版附解析），文件包含山东省大联考2023-2024学年高二下学期3月月考生物试题docx、山东高二3月生物答题卡pdf等2份试卷配套教学资源，其中试卷共15页， 欢迎下载使用。

1．答卷前，考生务必将自己的姓名、考场号、座位号、准考证号填写在答题卡上。
2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上，写在本试卷上无效。
3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
考试时间为90分钟，满分100分
一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。
1．如图为将胡萝卜的离体组织在一定条件下培育形成试管苗的过程示意图，有关叙述正确的是
A．利用此过程获得的试管苗可能为杂合子
B．①、②过程中均发生细胞的增殖和分化
C．多倍体植株的培育需经过如图所示过程
D．对愈伤组织细胞进行处理使其发生突变，就可以得到对人们有用的新品种
2．下列有关菊花组织培养的叙述，错误的是
A．外植体一般选自于未开花植株的茎上部新萌生的嫩枝
B．培育菊花丛状苗的过程可以不经历脱分化过程
C．培养形成的愈伤组织可继续在原培养基中分化形成植株
D．用药剂对外植体消毒时，要兼顾消毒效果和植物的耐受性
3．下图表示用灭活的仙台病毒诱导动物细胞融合的部分过程，下列相关叙述正确的是
A．细胞A和细胞B必须为同种细胞才能融合
B．细胞C同时有细胞A和细胞B的遗传物质
C．该融合过程体现了细胞膜具有选择透过性
D．植物细胞的融合过程与动物细胞完全相同
4．理论上来说，正常的植物细胞都具有全能性。下列有关植物细胞全能性的叙述，错误的是
A．植物细胞具有全能性的原因是细胞中含有发育成完整个体的全部信息
B．一粒玉米种子发育成完整植株的过程体现了植物细胞全能性
C．一般来说，植物体内分化程度越高的体细胞，其全能性越低
D．花药在体外被诱导成完整的单倍体植株不能体现体细胞全能性
5．粉美人萱草形态优美、色彩艳丽，具有极大的栽培价值。剪取健壮、无病虫害的单株粉美人萱草的新鲜花茎进行离体培养，下列相关说法错误的是
A．首选花序轴作为外植体，脱分化后形成具有特定结构和功能的愈伤组织
B．取样时间也会影响粉美人萱草无菌材料的获得
C．不同种类植物对培养基的成分如激素浓度、比例要求不同，再生能力也存在差异
D．为防止一些代谢产物的积累等因素影响培养物生长，一般需要在2～4周后将培养物转移至新鲜培养基中继续培养
6．制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括
①细胞培养②细胞融合③胚胎移植④细胞核移植
A．①②B．①③C．②③D．③④
7．试管婴儿、试管苗和克隆羊三者均属于生物工程技术的杰出成果，下列叙述正确的是
A．都需细胞工程的技术支持B．都能保持母本性状属于无性生殖
C．都充分体现了体细胞的全能性D．都可能发生突变和基因重组
8．将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合，融合后的细胞经培养产生单克隆抗体，其依据是
A．骨髓瘤细胞可以产生抗体，但不能无限增殖
B．B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合才能产生抗体
C．骨髓瘤细胞可以无限增殖，且能产生抗体
D．B淋巴细胞可以产生抗体，但在体外培养不能无限增殖，骨髓瘤细胞可以无限增殖
9．如图为科学家在实验室中培养“人造牛肉”的简要过程，下列相关叙述正确的是
A．“人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产，但环境污染严重
B．用胃蛋白酶处理牛肌肉组织，获得分裂能力强的肌肉母细胞
C．生物反应器内应控制适宜的温度，并充入纯氧保证细胞呼吸
D．培养瓶中的肌肉母细胞需定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖
10．下列有关哺乳动物早期胚胎发育的叙述正确的是
A．受精完成并开始发育的标志是在卵细胞膜和透明带之间观察到两个极体
B．受精卵在输卵管内进行卵裂时，细胞数量增加但胚胎总体积并不增加
C．受精卵发育为桑葚胚的过程是在透明带内完成的，孵化后进入囊胚期
D．胚胎发育至原肠胚时期即开始了细胞分化，随后发育形成三个胚层
11．我国科学家利用猴胚胎干细胞首次创造了人工“猴胚胎”，研究流程如图所示。下列相关叙述正确的是
A．睾丸中的精原干细胞也属于胚胎干细胞
B．③处的细胞将来可发育成胎儿的各种组织
C．需要在充满CO2的培养箱中培养胚胎干细胞
D．人工“猴胚胎”的遗传特性与代孕受体保持一致
12．采用机械方法将早期胚胎切割后移植，可以获得同卵双胎或多胎，下列说法正确的是
A．胚胎分割时，应选取发育良好、形态正常的囊胚或原肠胚
B．利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎
C．胚胎分割时，需将囊胚的滋养层进行均等分割
D．胚胎移植能充分发挥雌性优良受体的繁殖潜能
13．下列关于DNA重组技术基本工具的说法，正确的是
A．DNA连接酶可催化脱氧核苷酸链间形成氢键
B．限制酶切割DNA后一定能产生黏性末端
C．质粒是基因工程中唯一的载体
D．微生物中的限制酶对自身DNA无损害作用
14．关于“DNA的粗提取及鉴定”实验的叙述，错误的是
A．初步分离DNA与蛋白质的原理是DNA不溶于酒精而蛋白质溶于酒精
B．鉴定提取物中有DNA的原理是在常温下DNA遇二苯胺试剂呈蓝色
C．在提取白色丝状物时单向搅拌比双向搅拌更有利于获得结构完整的DNA
D．往洋葱研磨液经离心后的上清液中加入冷酒精的目的是获得含杂质少的DNA
15．RDX是一种弹药使用后残留的危险污染物。研究人员将两个源于细菌的RDX降解酶基因XplA和XplB插入柳枝稷草染色体中，如图所示，使柳枝稷草获得降解实弹射击场土壤中RDX的能力。若要通过PCR检测所获转基因柳枝稷草中是否含有正确插入的XplA和XplB基因，应选择的引物组合是
A．引物1+引物3B．引物1+引物4
C．引物2+引物3D．引物2+引物4
二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。
16．花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。为培育抗黑腐病杂种植株，研究者设计如下流程。下列相关叙述正确的是
A．过程①需要使用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶来处理两种细胞
B．过程②后，显微镜下观察到有叶绿体的细胞即为融合细胞
C．过程③的培养基中需加入植物激素来诱导脱分化和再分化
D．可借助PCR技术、黑腐病菌接种实验对杂种植株进行鉴定
17．我国科学家首次通过把食蟹猴的胚胎干细胞注射到猪的胚胎中，培育出了“猪—猴嵌合体”仔猪（如下图所示）。下列相关叙述错误的是
A．细胞培养过程中细胞会因接触抑制而停止分裂，需用胃蛋白酶处理后继续传代培养
B．采集的卵母细胞需培养至MII期才能与获能的精子受精，进而获得猪胚胎
C．从食蟹猴囊胚期胚胎的内细胞团获取胚胎干细胞具有发育成各种组织、器官的潜能
D．培育出的“仔猪”细胞遗传物质是猴细胞与猪细胞之和，具有猴和猪的融合性状
18．我国科学家将含有人凝血因子基因的DNA片段导入到羊的受精卵中，由该受精卵发育而成的羊，分泌的乳汁中含有人的凝血因子，可用于治疗血友病。下列叙述正确的是
A．这项研究说明人和羊共用一套遗传密码
B．该羊的乳腺细胞中含有人的凝血因子基因
C．该羊分泌的乳汁中含有人的凝血因子基因
D．该羊的后代也可能含有人的凝血因子基因
19．图1为某种质粒简图，图2表示某外源DNA上的目的基因，小箭头所指分别为限制酶EcRI、BamHI、HindⅢ的酶切位点。下列有关叙述正确的是
A．在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，则可选EcRI
B．如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcRI酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcRI酶切点有1个
C．为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHI和HindⅢ两种限制酶同时处理
D．一个图1所示的质粒分子经EcRI切割后，含有1个游离的磷酸基团
20．研究者用EBV（一种病毒颗粒）感染动物B淋巴细胞，获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞，用以解决杂交瘤细胞传代培养中B淋巴细胞染色体丢失的问题。EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对乌本苷（Oua）敏感，骨髓瘤细胞不能在HAT培养基中存活。下图为该实验操作示意图。相关叙述错误的是
A．B淋巴细胞可从多次间歇注射抗原的动物脾脏中获得
B．HAT培养基的作用主要是为了去除未融合的EBV转化细胞
C．未融合的EBV转化细胞和骨髓瘤细胞死亡的原因相同
D．筛选后的杂交瘤细胞具有产生抗EBV抗体的能力
三、非选择题：本题共5小题，共55分。
21．（12分）辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域，辣椒素的获得途径如图所示。回答下列问题：
（1）图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的__________和__________过程，要获得脱毒苗，对外植体的取材要求是__________。
（2）图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是__________。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值__________（填“高”或“低”）时，有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时，应采取的灭菌方法是___________。
（3）图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是___________。用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是__________和纤维素酶。
（4）细胞产物工厂化生产是植物组织培养技术的重要应用。高产细胞系须培养至__________，再从中提取辣椒素。
22．（12分）动物细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。现在已经广泛应用于多种学科的研究工作中，特别是新发展起来的杂交瘤技术，为制备单克隆抗体开辟了新途径。研究表明DNA合成有两条途径：“S途径”和“D途径”，淋巴细胞（浆细胞）有“S途径”和“D途径”；骨髓瘤细胞只有“D途径”；HAT培养液中氨基嘌呤可以阻断DNA合成的“D途径”。下图是单克隆抗体制备流程示意图。回答下列问题：
（1）__________技术是单克隆抗体技术的基础。
（2）单克隆细胞是指__________。
（3）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是__________。
（4）杂交瘤细胞既具有骨髓瘤细胞的__________的特点，又具备淋巴细胞的___________的特点。
（5）图示过程有两次筛选。第一次是用HAT培养液筛选出杂交瘤细胞，那么淋巴细胞（浆细胞）在HAT培养液中不生长的原因是__________，骨髓瘤细胞在HAT培养液中不生长的原因是__________。
23．（10分）近年来，由于世界人口的迅速增长、生物资源的过度开发和环境污染的日渐增重等诸多问题，导致野生动物郊狼的物种数量不断减少、濒临灭绝，采集精子或卵子开展常规辅助生殖较为困难，甚至无法完成。科研人员利用种间体细胞核移植技术（iSCNT）在野生动物遗传资源的保护中发挥了重要作用，具体流程如下。回答下列问题：
（1）图示过程中①是__________，②是__________，③通常需要激活，使其完成__________进程。
（2）与胚胎细胞核移植技术相比，iSCNT技术难度更__________，原因是__________。
（3）一般来说，郊狼的耳廓组织在培养时除营养外，还需提供的条件是适宜的温度、pH和渗透压、__________、___________。
（4）从生态的角度分析，iSCNT技术的优点是__________。
24．（10分）北极比目鱼体内含有抗冻基因A，其编码的抗冻蛋白中含有一段具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数与其抗冻能力呈显著正相关。如图是利用抗冻基因A获得转基因抗冻番茄植株的过程示意图。回答下列问题：
（1）进行过程①时需要__________（答3种）等基本条件。
（2）过程②属于可遗传变异中的__________，判断的依据是__________。
（3）图中表示构建表达载体的步骤是__________（填序号），该过程需要的工具酶有__________。
（4）为了检测抗冻番茄植株是否成功培育，应将该植株放在__________环境中培养。
（5）欲获得无子番茄，应该对番茄花进行的处理有___________。（编号选填）
①人工传粉②人工去雄③施加生长素类似物④施加秋水仙素
25．（11分）人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：
（1）科学家用PCR的方法对htPA基因进行体外扩增，基本过程如下图，请据图回答：
①PCR包括三个步骤I___________、Ⅱ___________、Ⅲ___________。
②加热至94℃的目的是使DNA样品的___________键断裂，这一过程在生物体细胞内是通过___________酶的作用来完成的。
③如果htPA基因的部分序列是：
5'-ATGGCT……AGGAAC-3'
3'-TACCGA……TCCTTG-5'
根据上述序列，应选择引物___________（填字母）进行PCR。
A．引物：5'-GTTCCT-3'B．引物：5'-TACCGA-3'
C．引物：5'-ATGGCT-3'D．引物：5'-AUGGCU-3'
（2）为获得更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其___________。采集的精子需要经过___________，才能具备受精能力。
（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是___________，通常用___________等技术检测htPA基因是否插入到早期胚胎的染色体DNA上。
2023-2024学年高二大联考（3月）
生物参考答案及评分意见
1．A【解析】分析题图可知，图示为植物组织培养过程，利用此过程获得的试管苗的基因型与亲本的基因型相同，可能为杂合子，也可能为纯合子，A正确；图中①是脱分化过程，没有发生细胞分化，B错误；多倍体植株的培育需利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，不需要经过组织培养，C错误；对愈伤组织细胞进行处理使其发生突变，由于基因突变具有不定向性，因此不一定能得到对人们有用的品种，D错误。
2．C【解析】在以快速繁殖为主要目的时，菊花未开花植株的茎上部新萌生的侧枝是最为常用的外植体，因为该处细胞分裂能力强、分化程度低，全能性容易表达，A正确；从带芽的茎段上长出丛状苗不需要经历脱分化，长出的丛状苗需分株，B正确；培养形成的愈伤组织需要转移到分化培养基中才能再分化形成根和芽，进而发育成植株，C错误；外植体接种前常进行流水冲洗、酒精处理、消毒液处理等消毒措施，要兼顾消毒效果和植物的耐受性，最后为了避免消毒液的危害，还需要用无菌水清洗三次，D正确。
3．B【解析】不同种的细胞也能融合，如人、鼠细胞融合，A错误；如题图所示，细胞A和细胞B融合成一个细胞，细胞C同时有细胞A和细胞B的遗传物质，B正确；该融合过程体现了细胞膜具有一定的流动性，C错误；植物细胞的融合通常要先去掉细胞壁，过程与动物细胞不完全相同，D错误。
4．B【解析】正常的植物体细胞经受精卵有丝分裂产生相同的细胞，这些相同的细胞再经基因的选择性表达分化成不同功能的细胞，这些细胞仍含有与受精卵相同的本物种生长、发育所需的全部遗传信息；正常的植物生殖细胞经原始生殖细胞减数分裂产生，仍含有本物种生长、发育所需的全套遗传信息，因此植物细胞即使分化后仍具全能性，A正确；玉米种子中含有胚，种子发育成植株是胚发育成个体的过程，是正常的生长发育过程，不能体现细胞的全能性，B错误；植物细胞的全能性与植物细胞的分化程度相关，一般来说，分化程度越高，越难体现出细胞的全能性，C正确；植物花药在体外被诱导成为完整的单倍体植株，利用的是植物组织培养技术，体现的是生殖细胞的全能性而不是体细胞全能性，D正确。
5．A【解析】细胞若离体后在培养基上培养时会由原来的分化状态，失去原有的某些具有特定结构和功能的细胞结构（如叶肉细胞的叶绿体等），变成分生状态的细胞，分裂产生愈伤组织，即愈伤组织是没有特定功能的，A错误；幼嫩的材料容易在酒精中失绿或被酒精杀死，浸泡时间不宜过长，若所取花序轴生长时间过长，花序轴老化，消毒不彻底导致污染率提高，故取样时间也会影响粉美人萱草无菌材料的获得，B正确；植物生命活动受到激素、环境以及基因表达的共同调控，不同种类植物对培养基的成分如激素浓度、比例要求不同，再生能力也存在差异，C正确；为了防止由于营养物质的枯竭，水分的散失，以及一些组织代谢产物的积累，必须将组织及时转移到新的培养基上，以免影响细胞正常生命活动，D正确。
6．A【解析】单克隆抗体主要涉及的细胞工程技术包括动物细胞培养、动物细胞融合技术，A正确；单克隆抗体不涉及胚胎移植、细胞核移植，B、C、D错误。
7．A【解析】试管婴儿涉及到的技术是体外受精和胚胎移植，属于胚胎工程的技术，胚胎工程需要动物细胞工程的技术支持，通过植物组织培养获得试管苗，以及核移植和胚胎移植获得的克隆羊属于细胞工程的相关技术，A正确；试管婴儿属于有性生殖，具有两个亲本的遗传特性，植物组织培养获得试管苗，属于无性生殖，克隆羊属于无性生殖，遗传特性主要来源于供体细胞，B错误；试管婴儿体现受精卵的全能性，试管苗体现植物体细胞的全能性，克隆羊体现动物体细胞的细胞核具有全能性，C错误；植物组织培养获得试管苗和克隆羊都属于无性生殖，不能发生基因重组，D错误。
8．D【解析】骨髓瘤细胞不能产生专一性抗体，但在体外能无限繁殖，A错误；B淋巴细胞只有在抗原的刺激下才能增殖分化形成浆细胞，才能产生特异性抗体，B错误；骨髓瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体，C错误；B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖，骨髓瘤细胞可以无限增殖，D正确。
9．D【解析】理论上来说，仅来自1只动物的干细胞，可制成的肉品数量，比宰杀1头牛还多100万倍，可有利于牛肉的工厂化生产，同时也可减少对土地、饮用水和饲料的需求，且温室气体等其他环境污染物也会减少，A错误；胰蛋白酶处理动物组织，可以使组织分散成单个细胞，利于动物细胞培养，B错误；动物细胞培养的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%CO2，C错误；动物细胞培养过程中悬液中的细胞会很快贴附在瓶壁上，培养瓶中的肌肉母细胞需定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖，D正确。
10．B【解析】在卵黄膜和透明带之间观察到两个极体，说明卵细胞已经完成了受精，这是判断卵细胞是否受精的重要标志，不是判断开始发育的标志，A错误；形成的受精卵在输卵管内开始进行卵裂，卵裂过程中，每个细胞的体积不断缩小，细胞的总体积基本不变或略有缩小，故卵裂过程中细胞数量增加但胚胎总体积基本不增加，B正确；孵化是指囊胚从透明带出来，孵化后进入原肠胚阶段，C错误；细胞分化开始于囊胚时期，D错误。
11．B【解析】胚胎干细胞来自于早期胚胎或早期原始性腺，精原干细胞不属于胚胎干细胞，A错误；③是内细胞团的细胞，具有发育全能性，可发育成胎儿各种组织，B正确；动物细胞培养和早期胚胎培养需要在95%空气和5%二氧化碳的环境中，C错误；人工“猴胚胎”的遗传特性与提供胚胎干细胞的供体基本一致，代孕受体提供营养，D错误。
12．B【解析】胚胎分割时，应选取发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚，A错误；来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎，B正确；胚胎分割时需将囊胚阶段的内细胞团进行均等分割，C错误；胚胎移植能充分发挥雌性优良供体的繁殖潜能，产生更多的优良后代，D错误。
13．D【解析】DNA连接酶可催化脱氧核苷酸链间形成磷酸二酯键，A错误；限制酶切割DNA后能产生黏性末端或平末端，B错误；质粒是基因工程中常用的载体，噬菌体、动植物病毒也可以作为基因工程的运载体，C错误；微生物中的限制酶对自身DNA无损害作用，主要用于切割外源DNA，D正确。
14．B【解析】初步分离DNA与蛋白质的原理是DNA不溶于酒精而蛋白质溶于酒精，A正确；鉴定提取物中有DNA的原理是在水浴加热条件下，DNA遇二苯胺试剂呈蓝色，B错误；在提取白色丝状物时单向搅拌比双向搅拌更有利于获得结构完整的DNA，C正确；往洋葱研磨液经离心后的上清液中加入冷酒精的目的是获得含杂质少的DNA，D正确。
15．A【解析】根据启动子的位置，若正确插入，模板链应为甲图中的下链，则引物1应与下链的3’端结合，引物3可以结合甲图上链的3’端，引物1+引物3可通过PCR检测所获转基因柳枝稷草中是否含有正确插入的XplA和XplB基因，A正确。
16．D【解析】过程①是去除细胞壁，可用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，A错误；过程②表示诱导原生质体融合的过程，显微镜下观察有无叶绿体作为初步筛选的标志，还需要鉴定是否具有抗黑腐病特性来确定融合细胞，B错误；过程③是脱分化形成愈伤组织的过程，没有再分化，C错误；在分子水平上可通过PCR技术对杂种植株进行鉴定，在个体水平上可以通过对杂种植株进行黑腐病菌接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株，D正确。
17．AD【解析】动物细胞培养过程中会因接触抑制而停止分裂增殖，需要用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理后继续培养，A错误；体外受精时，需要将所采集到的卵母细胞在体外培养到减数分裂Ⅱ中期，才可以与获能精子完成受精作用，进而获得猪胚胎，B正确；胚胎干细胞具有发育的全能性，故从食蟹猴囊胚期胚胎的内细胞团获取的胚胎干细胞具有发育成各种组织、器官的潜能，C正确；培育出的“仔猪”细胞遗传物质一部分来自猴细胞，一部分来自猪细胞，不是猴细胞与猪细胞之和，D错误。
18．ABD【解析】自然界中的所有生物共用同一套遗传密码，这是人的凝血因子基因能在羊的乳腺细胞中表达的基础，A正确；该羊分泌的乳汁中含有人的凝血因子，说明该羊的乳腺细胞中含有人的凝血因子基因，但该羊的乳汁中不含有人的凝血因子基因，B正确，C错误；将含有人凝血因子基因的DNA片段注射到羊的受精卵中，培育出的转基因羊的性腺细胞含有该基因，通过减数分裂产生的卵细胞可能含有该基因，其后代也可能含有人的凝血因子基因，D正确。
19．AC【解析】目的基因两侧都有，且质粒也有的限制酶是EcRⅠ，所以在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，可选EcRⅠ，A正确；如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcRⅠ酶切点有2个，B错误；为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理，C正确；一个图l所示的质粒分子经EcRⅠ切割后，产生两个黏性末端，含有2个游离的磷酸基团，D错误。
20．BCD【解析】B淋巴细胞在骨髓中发育成熟，可分布于淋巴结和脾脏等处，故B淋巴细胞可来源于抗原刺激后动物的淋巴结和脾脏等处，A正确；HAT培养基的作用主要是为让细胞存活，而乌本苷（Oua）起筛选作用，B错误；EBV转化细胞死亡是因为无法增殖而死亡，骨髓瘤细胞死亡是因为对乌本（Oua）敏感而死亡，C错误；本实验中EBV的作用是获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞，而不是刺激B细胞分化成浆细胞产生抗体，所以该杂交瘤细胞不能产生抗EBV的抗体，D错误。
21．（除标注外，每空1分，共12分）
（1）脱分化 再分化 切取一定大小的茎尖进行组织培养（2分）
（2）琼脂 低（2分） 湿热灭菌法（高压蒸汽灭菌法）
（3）70% 果胶酶
（4）愈伤组织（2分）
【解析】分析题图：①是脱分化过程、②是再分化过程。上面一种途径是通过植物组织培养技术获得脱毒苗，再从果实中获得相应的产物；下面一种途径是采用植物细胞培养技术获得大量细胞产物。
（1）由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程称为脱分化，脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。要获得脱毒苗，对外植体的取材要求是切取一定大小的茎尖进行组织培养。
（2）培养基中常用的凝固剂是琼脂。生长素和细胞分裂素用量的比值低时，有利于芽的分化；反之则利于根的分化。培养基应用湿热灭菌法灭菌。
（3）外植体消毒所用酒精的体积分数是70%；植物细胞的细胞壁含有纤维素和果胶，故用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是果胶酶和纤维素酶。
（4）高产细胞系须在培养基培养至愈伤组织，再从中提取辣椒素。
22．（除标注外，每空2分，共12分）
（1）动物细胞培养、动物细胞融合
（2）单个细胞增殖形成的细胞群
（3）特异性强、灵敏度高、可大量制备
（4）在体外大量增殖（无限增殖）（1分） 分泌特异性抗体（1分）
（5）缺乏在体外培养液中增殖的能力 其DNA合成途径被氨基嘌呤阻断而不能进行DNA复制
【解析】（1）单克隆抗体技术的基础是动物细胞培养和动物细胞融合技术。
（2）单个细胞增殖形成的细胞群为单克隆细胞。
（3）与常规抗体相比，单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高、可大量制备。
（4）杂交瘤细胞具有骨髓瘤细胞的能在体外无限增殖和淋巴细胞的能产生专一性抗体的特点。
（5）淋巴细胞不增殖，而骨髓瘤细胞的DNA合成途径被氨基嘌呤阻断而不能进行DNA复制，导致骨髓瘤细胞不能在HAT培养基中生长。
23．（除标注外，每空1分，共10分）
（1）第一极体 透明带 细胞分裂和发育
（2）大 体细胞分化程度高，表现全能性更困难（2分）
（3）无菌、无毒的环境 适宜的气体环境
（4）利于保护生物多样性，维持生态系统稳定性（2分）
【解析】（1）据图可知，图中①是第一极体，②是透明带；③是重组细胞，通常需要激活，使其完成细胞分裂和发育进程。
（2）与胚胎细胞核移植技术相比，种间体细胞核移植技术（iSCNT）的成功率更低，这是由于动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，故与胚胎细胞核移植技术相比，iSCNT技术难度更大。
（3）郊狼的耳廓组织在培养时除营养外，还需提供的条件是适宜的温度、pH和渗透压、无菌、无毒的环境以及适宜的气体环境（95%空气和5%的CO2）。
（4）从生态的角度分析，iSCNT技术的优点是利于保护生物多样性，维持生态系统稳定性，故iSCNT在野生动物遗传资源的保护中发挥了重要作用。
24．（除标注外，每空1分，共10分）
（1）模板（RNA）、原料（脱氧核苷酸）、能量（ATP）、酶（逆转录酶）、引物（答出3种即可，2分）
（2）基因突变 该过程中抗冻基因A内部发生了碱基序列的改变（2分）
（3）③ 限制酶（限制性内切核酸酶）和DNA连接酶（2分）
（4）低温（寒冷）
（5）②③
【解析】（1）过程①是以RNA为模板合成DNA的过程，为逆转录，该过程需要mRNA做模板、四种脱氧核苷酸为原料，ATP提供能量，逆转录酶催化，即该过程需要的条件包括模板（RNA）、原料（脱氧核苷酸）、能量（ATP）、酶（逆转录酶）、引物等。
（2）过程②是基因A内部中多个序列重复导致碱基序列改变，从而引起基因结构改变，因此，该变异类型为基因突变。
（3）转基因工程的核心工作是构建基因表达载体，即③过程；该过程需要限制酶（切割目的基因和运载体）和DNA连接酶（连接切割后的目的基因和运载体）的参与。
（4）本实验的目的是为了获得抗冻番茄植株，因此，为了检测抗冻番茄植株是否成功培育，应将该植株放在低温（寒冷）环境中培养，该方法属于个体生物学鉴定。
（5）①人工传粉可获得有子番茄；
②人工去雄能避免传粉获得种子，因而可以获得无子番茄；
③施加生长素类似物能促进子房发育成果实，进而获得无子番茄；
④施加秋水仙素不能获得无子番茄。
可见为了获得无子番茄应该对番茄花进行的处理有②③。
25．（除标注外，每空1分，共11分）
（1）①变性 复性 延伸
②氢 解旋
③AC（回答不全得1分，共2分）
（2）超数排卵 获能
（3）显微注射法 PCR
【解析】（1）①PCR扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物；PCR技术中每轮循环依次包括Ⅰ变性、Ⅱ复性、Ⅲ延伸三个步骤。
②加热至94℃的目的是使DNA样品的氢键断裂，这一过程在生物体细胞内是通过解旋酶的作用来完成的。③已知htPA基因的部分序列是：，由于PCR技术中，子链合成的方向是从5'到3'，因此应选择引物5'-GTTCCT-3'和引物5'-ATGGCT-3'进行PCR扩增。
（2）为获得更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其超数排卵。采集的精子需要经过获能（处理），才能具备受精能力。
（3）将含有目的基因的重组表达载体导入受精卵的方法是显微注射法，检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用PCR技术。