生物人教版 (新课标)课题3 分解纤维素的微生物的分离课堂教学ppt课件

这是一份生物人教版 (新课标)课题3 分解纤维素的微生物的分离课堂教学ppt课件，共26页。PPT课件主要包含了基础知识，2纤维素酶，1组成，2作用，②各加入一张滤纸条，滤纸崩溃法，刚果红染色法，红色复合物，透明圈的应用，实验设计等内容，欢迎下载使用。

1.纤维素的化学组成、含量及分布
纤维素由C、H、O三种元素组成，是一种多糖(高分子化合物)—基本单位:葡萄糖（由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物）。
纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质。
纤维素是植物细胞壁的主要成分之一；植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素；其中棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物，木材、作物秸秆中也富含大量的纤维素。
纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。
一种复合酶：C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶
①取二支20mL的试管
实验：纤维素酶分解纤维素的实验
③各加入pH4.8，物质量为0.1ml/L的醋酸－醋酸钠缓冲液11ml和10ml
④在乙试管中加入1mL纤维素酶
⑤两支试管固定在锥形瓶中，放在140r/min的摇床上振荡1h
⑥结果：乙试管的滤纸条消失
讨论：乙试管的滤纸条为什么会消失？甲试管的作用是什么？
〖思考1〗实验分析：P27的小实验是如何构成对照的？
1U表示1个酶活力单位，是指在温度为25℃，其他反应条件，如pH等，均为最适的情况下，在1min内转化1mml的底物所需的酶量。
提示：本实验的自变量是纤维素酶的有无在一支试管：中添加适量（1mL）的纤维素酶溶液，另一支试管：不添加纤维素酶，但需加入等量的缓冲液，不能加入蒸馏水，否则会影响溶液的pH。
3.纤维素分解菌的筛选
即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
刚果红能与纤维素形成红色复合物，而与水解后的纤维二糖和葡萄糖不发生这种反应。
红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈
（该方法中通过颜色反应直接对微生物进行筛选）
不同菌落的透明圈大小不同，可以说明微生物产生纤维素酶能力的大小。
不同菌落的透明圈大小不同可以说明什么问题？
筛选具有某种特定功能（如分泌某种酶）的微生物（目的菌）.
四种纤维素分解菌在刚果红培养基上形成的透明圈
生物与环境的互相依存关系，在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高，因此从这种土壤中获得目的微生物的几率要高于普通环境。
取样的环境是怎样的，作出这种选择的理由是什么？
如果找不到合适的环境，可以将滤纸埋在土壤中，将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋在土壤中多深？
将滤纸埋在土壤中，能使纤维素分解菌相对聚集，实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将滤纸埋于深约10cm左右的腐殖土壤中。
(3)选择培养的操作：
将土样加入装有30ml选择培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在摇床上，在一定温度下震荡培养1～2天，直至培养液变浑浊。也可重复选择培养。
(2)制备选择培养基：
增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离所需要的微生物。
纤维素分解菌的选择培养基
提示：自变量为培养基的种类，即普通培养基和选择培养基。可用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照,或者将纤维素改为葡萄糖。
A、旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？
是液体培养基，原因是配方中无凝固剂（琼脂）
B、这个培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，是如何进行选择的？
有选择作用，本配方中纤维素作为主要碳源，只有能分解纤维素的微生物可以大量繁殖。
C、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用
在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。
为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？
注意：该步骤也可省略，但纤维素分解菌较少。
按照课题1的稀释操作方法，将选择培养后的培养基进行等比稀释101～107倍。
此培养基为固体培养基——在其中加入刚果红可形成以纤维素分解菌为中心的透明圈，据此可筛选到纤维素分解菌。
(水溶性羧甲基纤维素钠)
4.将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上
(1)制备鉴别培养基:
方法一：先 ，再加入刚果红进行颜色反应。方法二：在 时就加入刚果红。
挑取产生明显的透明圈的菌落（即为分解纤维素的菌落）→ 纯化培养。
思考：本实验的流程与课题2中的实验流程有哪些异同？
本实验流程与课题2的流程的区别如下。课题2是将土样制成的菌悬液直接涂布在以尿素为唯一氮源的选择性培养基上，直接分离得到菌落。本课题通过选择培养，使纤维素分解菌得到增殖后，再将菌液涂布在选择培养基上。其他步骤基本一致。
1.培养基的制作是否合格以及选择培养基是否筛选出菌落 对照的培养基在培养过程中没有菌落生长则说明培养基制作合格。 如果观察到产生透明圈的菌落，则说明可能获得了分解纤维素的微生物。
为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行_____________实验，纤维素酶的发酵方法有______ 发酵和______ 发酵。纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的________ 含量进行定量测定。
在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高。在培养基中加入酚红指示剂，如果pH升高指示剂会变红
刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶催化分解后红色复合物无法形成，培养基上就会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈
观察菌落周围是否有着色的环带出现来鉴定尿素分解菌
观察菌落周围是否出现透明圈来筛选纤维素分解菌
分解纤维素的微生物的分离
1.下列关于纤维素酶的说法，错误的是
A. 纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种B. 纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C. 纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D. 葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖
1、请回答下列与检验饮用水有关的问题：（1）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量,这种方为 。下面四种菌落分布图中，不可能由用该方法得到的是 。 A B C D