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2021学年课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段当堂达标检测题
展开1. 在进行PCR操作时,如果枪头受到污染,则会影响到
A. 复制循环速度B. DNA分子纯度C. DNA分子大小 D. 酶催化活性
2. 下列关于PCR技术的叙述,正确的是( )
A. PCR技术建立在对扩增的目的基因序列完全已知的基础上
B. 该技术需要解旋酶和热稳定的DNA聚合酶
C. 该技术需要一对特异性的引物,要求一对引物的序列是互补的
D. 该技术应用体内DNA双链复制原理,也需要模板、原料、能量、酶等条件
3. PCR实验中用到微量离心管、缓冲液和蒸馏水,使用前必须进行的关键步骤是( )
A.反复洗涤 B.用酒精擦洗
C.高压灭菌 D.在-20 ℃保存
4. DNA在波长为多大的时候有一强烈的吸收峰( )
A.260nm B.240nm C.280nm D.300nm
5. PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。下列防止污染的办法中不包括的是( )
A.将样品的处理、配制PCR反应液、PCR循环扩增及PCR产物的鉴定等步骤分区或分室进行
B.吸样枪吸样要慢,吸样时尽量一次性完成,枪头小套、小离心管应一次性使用,以免交叉污染
C.所有PCR试剂都应放置于大瓶分装,以减少重复加样次数,避免污染机会
D.PCR试剂、PCR反应液应与样品及PCR产物分开保存,不应放于同一冰盒或同一冰箱
6. 在PCR扩增的实验中,加入一种提取物(一种模板DNA片段),但实验得到的产物却有2种DNA。其原因可能是( )
A.基因突变 B.Taq聚合酶发生变异
C.基因污染 D.温度过高
7. 关于PCR技术的应用,错误的一项是( )
A.古生物学、刑侦破案、DNA序列测定
B.诊断遗传病、基因克隆、古生物学
C.DNA序列测定、基因克隆、刑侦破案
D.诊断遗传病、合成核苷酸、DNA序列测定
8. PCR利用了DNA热变性的原理,PCR仪实际上是一种能自动调控温度的仪器,对PCR过程中“温度的控制”的说法中错误的是( )
A.酶促反应需要高的温度,是为了确保模板是单链
B.延伸的温度必须大于复性温度,而小于变性温度
C.DNA聚合酶不具热变性,要用耐高温的聚合酶
D.DNA解旋酶不具热变性,为了确保模板是单链
9. 关于DNA的复制,下列叙述正确的是( )
A.DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从5′端延伸DNA链
B.DNA复制不需要引物
C.引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合
D.DNA的合成方向总是从子链的3′端向5′端延伸
10. 多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环:95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是:( )
A.变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现
B.复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成
C.延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸
D.PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高
参考答案:
1. 答案: B
解析:
2. 答案: D
解析:
3. 答案: C
解析: 在PCR实验中,为了避免外源DNA等因素的污染,微量离心管、枪头、缓冲液和蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌。同时也不能忽视其他操作步骤,如缓冲液和酶应该分装成小份,并且在-20 ℃保存。
4. 答案: A
解析:
5. 答案: C
解析: 所有的PCR试剂都应放置于小瓶分装,一次性用完,避免因多次使用造成污染。
6. 答案: C
解析: 其原因可能是基因污染。在PCR实验中,一定要做到隔离操作区、分装试剂、简化操作程序、使用一次性吸头等,尽量避免基因污染。
7. 答案: D.
解析: PCR技术在医学上用于遗传病的基因诊断、基因克隆、DNA序列测定,法医上用于刑侦破案,古生物学上用于生物化石样品分析.PCR技术是以4种脱氧核苷酸为原料,合成双链DNA的过程,PCR技术不能合成核苷酸.
8. 答案: D.
解析: PCR是一种体外DNA扩增技术.DNA双链的解开不需要解旋酶,靠高温使其变性,双螺旋结构解体,双链分开,延伸时,在耐高温的DNA聚合酶的作用下根据碱基互补配对原则合成新的DNA,因此延伸的温度要大于复性温度小于变性温度.
9. 答案: C
解析: 由于DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从引物的3′端开始延伸;由于DNA分子是反向平行的,子链是依据碱基互补配对原则,在DNA聚合酶作用下合成的,其合成方向是从子链5′端向3′端延伸。
10. 答案: C
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