高中生物人教版 (新课标)选修1《生物技术实践》课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段同步测试题

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1． 下列有关PCR技术的说法，错误的是：
A．DNA复制所需要的引物的作用是使DNA聚合酶能从3’端延伸DNA链
B．引物与DNA母链的关系是碱基互补配对
C．添加缓冲溶液的作用是维持pH基本不变
D．DNA聚合酶可以用来合成引物
2． 在实验室内模拟生物体内的DNA复制，需要哪些条件（ ）
①酶 ②游离的脱氧核苷酸 ③ATP ④DNA分子 ⑤引物 ⑥tRNA ⑦适宜的温度 ⑧适宜的酸碱度
A．①②③④⑤⑥ B．②③④⑤⑥⑦
C．②③④⑤⑦⑧ D．①②④⑤⑦⑧
3． 在PCR的实验操作中，下列说法正确的是（ ）
①在微量离心管中添加各种试剂时，只需要一个枪头
②离心管的盖子一定要盖严
③用手指轻弹离心管壁
④离心的目的是使反应液集中在离心管的底部
A．①②③ B．①②④
C．②③④ D．①③④
4． 在PCR实验操作中，下列说法不正确的是（ ）
A．在微量离心管中添加各种试剂时，只需一个枪头
B．离心管的盖子一定要盖严，防止液体外溢
C．用手轻弹离心管壁的目的是使反应液充分混合
D．离心的目的是使反应液集中在离心管底部，提高反应效果
5． PCR技术扩增DNA，需要的条件是（ ）
①目的基因 ②引物 ③四种脱氧核苷酸 ④DNA聚合酶等 ⑤mRNA ⑥核糖体
A．②③④⑤ B．①②③⑥
C．①②③④ D．①③④⑤
6． 下列对操作过程的叙述，错误的是（ ）
A．PCR反应中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌
B．PCR所用的缓冲液和酶应分装成小份，并在－20 ℃储存
C．PCR所用的缓冲液和酶从冰箱拿出之后，迅速融化
D．在微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的吸液枪头都必须更换
7． PCR技术是在遗传实验室中常见的一种DNA片段进行体外扩增的方法，利用它能快速得到大量的目的基因或DNA分子片段。在PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水使用前必须进行的关键步骤是（ ）
A．反复洗涤 B．不被外源DNA污染
C．高压灭菌 D．在－20℃保存
8． 回答下列关于DNA复制与PCR技术的相关问题：
(1)PCR与生物体内的DNA复制有何区别？
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(2)PCR每次循环都可分为________、________和______三步。
(3)_____ ___的发现和使用大大提高了PCR的效率，使PCR技术趋向________。
(4)PCR通过控制________来控制双链的________与________。
(5)PCR反应需要一定的缓冲溶液中提供________、分别与两条模板结合的__________、__________种脱氧核苷酸、________的DNA聚合酶。
(6)从第二轮循环开始，DNA聚合酶只能特异的复制________的DNA序列，使这段________的序列呈指数扩增。
9． 使用PCR仪具体实验操作顺序应为（ ）
①设计好PCR仪的循环程序 ②按配方准备好各组分 ③用微量移液器在微量离心管中依次加入各组分 ④进行PCR反应 ⑤离心使反应液集中在离心管底部
A．②③⑤④① B．①⑤③②④
C．②③⑤①④ D．④②⑤③①
10． PCR实验中使用的微量离心管、吸头、缓冲液以及蒸馏水使用前必须进行的关键步骤是( )
A．反复洗涤 B．外源DNA污染
C．高压蒸汽灭菌 D．在－20 ℃储存
参考答案：
1． 答案： D
解析：
2． 答案： D
解析： 在实验室内模拟DNA复制时，需要DNA聚合酶催化合成DNA子链；四种脱氧核苷酸为合成子链的原料；DNA母链为DNA复制的模板；还需要引物、较高的温度、适宜的酸碱度等。
3． 答案： C
解析： 在微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头都必须更换，以确保实验的准确性；盖严离心管口的盖子，防止实验中外源DNA污染；用手指轻轻弹击管的侧壁，使反应液混合均匀；离心目的是使反应液集中在离心管的底部，提高反应效果。
4． 答案： A
解析： 在微量离心管中添加各种试剂时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头必须更换，确保实验的准确性；离心管的盖子一定要盖严，防止实验中脱落或液体外溢；离心10 s的目的是使反应液集中在离心管底部，提高反应效果。
5． 答案： C
解析： PCR技术需要目的基因作为扩增的模板，DNA聚合酶催化反应的进行，而引物是满足DNA聚合酶起作用的需要，四种脱氧核苷酸是该过程的原料。
6． 答案： C
解析： 为了防止外源DNA等因素的污染，PCR反应中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌；所用的缓冲液及酶应分装成小份保存，并使用一次性吸液枪头，即A、B、D均正确。在冰箱中放置的缓冲液和酶取出后应放在冰块上缓慢融化，而不能迅速融化，故C错误。
7． 答案： C
解析： 通过对PCR实验中所用仪器和试剂进行高压灭菌，可以避免外源DNA等因素的污染。
8． 答案： (1)①PCR反应不需要解旋酶，而生物体内DNA复制时需要解旋酶；
②PCR需要耐热的DNA聚合酶，而生物体内DNA聚合酶在高温的时候会变性；
③PCR一般要经历三十多次循环，而生物体内DNA复制需要生物体自身的控制
(2)变性 退火 延伸
(3)Taq聚合酶 自动化
(4)温度 解聚 结合
(5)DNA模板 两种引物 四 耐热
(6)处于两个引物之间 固定长度
解析： 本题主要考查关于DNA复制与PCR技术的知识，尤其对PCR技术的考查较细致，可参考。
9． 答案： C
解析： PCR反应的操作步骤一般分为准备(包括配置配方及将各配方放于实验台上)→移液→混合→离心→反应，因PCR仪是一种自动控制温度的仪器，设计好循环程序就可以进行反应了。
10． 答案： C.
解析： 通过对PCR实验中所用仪器和试剂进行高压蒸汽灭菌，可以避免外源DNA等因素的污染.