高中生物人教版 (新课标)选修1《生物技术实践》课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段测试题

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1． 下列对PCR过程中“温度的控制”的叙述中不正确的是（ ）
A．PCR反应需要高温，是为了确保模板是单链
B．延伸的温度必须大于复性温度，而小于变性温度
C．要用耐高温的DNA聚合酶
D．需要耐高温的解旋酶
2． 洗涤红细胞时，离心所采用的方法是( )
A．低速长时间离心 B．低速短时间离心
C．高速长时间离心 D．高速短时间离心
3． 下列各项中，一般不影响凝胶色谱法分离蛋白质中的分离度的是( )
A．层析柱高 B．层析柱的直径
C．缓冲溶液 D．样品的分布
4． 聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环:95 ℃下使模板DNA变性、解链→55 ℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72 ℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是( )
A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现
B．复性过程中引物与DNA模板链的结合依靠互补配对原则完成
C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸
D．PCR与细胞内DNA复制相比,所需要酶的最适温度较高
5． 下列关于PCR技术的描述，错误的是（ ）
A．以DNA复制为基础而建立起来的技术
B．利用PCR技术可完全无误的扩增基因
C．反应体系需要模板、引物、四种脱氧核苷酸、耐热DNA聚合酶和缓冲溶液
D．以变性、复性和延伸为一个周期
6． DNA的双螺旋结构解开的温度范围是（ ）。
A．10～20 ℃ B．80～100 ℃
C．20～30 ℃ D．40～60 ℃
7． 在PCR扩增的实验中，加入一种提取物(一种模板DNA片段)，但实验得到的产物中，却有两种DNA。其原因可能是( )
A．基因突变B．Taq聚合酶发生变异
C．基因污染D．温度过高
8． PCR仪实质上是一台自动调控温度的仪器，下列关于它调控不同温度的目的叙述错误的是( )
A．94 °C，使DNA分子变性，解开螺旋
B．55 °C，引物与作为模板的单链DNA特定部位相互配对、结合
C．72 °C，使DNA分子开始复制，延伸
D．72 °C，使DNA分子恢复双螺旋结构，恢复活性
9． PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，其基本原理和过程与细胞内DNA的复制类似．下列关于两者共同点的叙述，不正确的是（ ）
①边解旋边复制
②遵循碱基互补配对原则
③需要引物
④过程可分为变性、复性、延伸等步骤．
A．①⑦B．⑦③
C．③④D．①④
10． PCR技术又称聚合酶链式反应，现在已成为分子生物学实验室的一种常规手段，它可以在体外很短的时间内将DNA大量扩增。你认为以下符合在体外进行PCR反应条件的一组是（ ）
① 稳定的缓冲液环境 ② DNA模板 ③ 合成引物 ④ 四种脱氧核苷酸
⑤ DNA聚合酶 ⑥ DNA解旋酶 ⑦ 限制性核酸内切酶 ⑧ 温控设备
A．①②③④⑤⑥ B．①②③④⑤⑥⑦⑧
C．③④⑤⑥⑧ D．①②③④⑤⑧
参考答案：
1． 答案： D
解析： PCR是体外DNA扩增技术，DNA双链的解开不需要解旋酶，而是靠高温使其变性解体。复性前，在耐高温的Taq DNA聚合酶的作用下根据碱基互补配对原则合成新的DNA，因此延伸的温度要大于复性温度但小于变性温度。
2． 答案： B
解析： 洗涤红细胞时，转速要低，时间要短，否则白细胞会与之一起沉淀，达不到分离目的。
3． 答案： B
解析： 分离度取决于柱高，为分离不同组分，凝胶柱必须有适宜的高度，分离度与柱高相关。样品的分布也影响分离度，缓冲溶液的pH影响蛋白质所带的电荷，因此也影响分离度。只有层析柱的直径一般不会影响分离度。
4． 答案： C
解析： 变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现;复性过程中引物与DNA模板链的结合依靠互补配对原则完成;延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种脱氧核糖核苷酸;PCR与细胞内DNA复制相比,所需要酶的最适温度较高
5． 答案： B
解析： 利用PCR技术也可能会出现扩增的基因出现错误。故选B
6． 答案： B
解析： 蛋白质大多不能忍受60～80 ℃的高温，而DNA在80 ℃以上才会变性。
7． 答案： C
解析： 实验中得到两种DNA的原因可能是靶细胞基因污染造成的，所以在实验中，必须做到隔离操作区、分装试剂、简化操作程序、使用一次性吸头等，尽量避免基因污染。
8． 答案： D
解析： PCR利用DNA热变性的原理，当温度上升到94 °C时，双链DNA解旋为单链，A项正确；当温度下降到40～60 °C左右时，两种引物通过碱基互补配对原则与两条单链DNA结合，B项正确；当温度上升到72 ℃左右时，在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链，从而实现DNA延伸，故C正确，D错误。
9． 答案： C
解析： 解：①PCR反应和体内DNA复制都是边解旋边复制，故①正确；
②PCR反应和体内DNA复制都遵循碱基互补配对原则，故②正确；
③PCR反应需要引物，但体内DNA复制不需要引物，故③错误；
④PCR过程可分为变性、复性、延伸等步骤，而体内DNA复制没有这些步骤，故④错误．
故选C．
10． 答案： D
解析： 试题分析：在PCR技术中，需要的条件有模板、引物、脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶，此外还需要适宜的温度和pH，故D正确。
考点：本题主要考查PCR的过程，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。