生物选修1《生物技术实践》专题3 植物的组织培养技术课题2 月季的花药培养图文课件ppt

这是一份生物选修1《生物技术实践》专题3 植物的组织培养技术课题2 月季的花药培养图文课件ppt，共17页。PPT课件主要包含了选择培养基，实验目的，实验原理，实验材料，实验步骤，各浓度做3个培养皿，目的菌，为目的菌提供氧气，葡萄糖，涂布平板划线等内容，欢迎下载使用。

定义：是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。
实例应用：1、培养基中加入抗生素可以筛选出抗生素抗性菌2、培养基中缺乏碳源时，可筛选出自养型生物
实验2 分离以尿素为氮源的微生物
1. 使用专一的培养基（含尿素）分离专一的细菌（有脲酶的细菌） 2.使用指示剂颜色的变化检知酶（脲酶）所催化的反应。
脲即尿素，是蛋白质降解的产物。有一些细菌含有脲酶可以分解尿素，利用尿素作为其生长的氮源(反应式)
本实验利用尿素培养基分离出土壤中能利用尿素的细菌，由于尿素在脲酶的催化下分解产生了NH3，溶液会呈碱性，可用酸碱指示剂颜色的变化检测
(1)全营养LB固体培养基：蛋白胨0.25g、酵母提取物0.12g、 NaCl 0.25g、琼脂0.5g、加水25ml。(2)尿素固体培养基：0.025g葡萄糖、NaCl 0.12g、K2HPO40.12g、 酚红0.25mg、琼脂糖0.5g、加水15ml。 灭菌冷却到60℃时加入经G6玻璃漏斗过滤 （使其无菌）的尿素。
酸碱指示剂：酸黄碱红
三、设备及用品：P25
（10倍稀释法：0.5mL悬液 +4.5 mL无菌水，摇匀即可）
3、涂布分离法分离细菌：取10-4和10-5稀释液各0.1ml，分别加到尿素培养基与LB培养基上，用玻璃刮刀将菌液涂布分离
4、倒置培养5、观察：比较LB培养基与尿素培养基上的菌落
1.制平板：LB固体培养基与尿素固体培养基
对照组： LB固体培养基实验组：尿素固体培养基
各盛有 4.5ml无菌水
分析与讨论：1、为什么要用琼脂糖代替琼脂配制固体培养基？2、有脲酶的细菌在生态稳态上起什么作用？
琼脂是未被纯化的混合物，内含一定量的含氮化合物，如果用琼脂固化培养基，会为细菌提供一定量的非尿素类氮源，这样会在尿素固体培养上产生大量以非尿素为氮源的细菌，不利于以尿素为氮源的细菌的筛选
如果土壤中有许多尿素，在自然界较高温度下会被水解，水解后的氨使土壤变成碱性，与其他阴离子形成化合物则会使土壤板结。有脲酶的细菌使植物废弃物和动物尸体降解，并利用所形成的氨，有利于自然界的氮循环
3、有脲酶的细菌菌落周围为什么有着色的环带出现？4、与全营养培养基上的菌落数比较，为什么尿素培养基上只有少数菌落？
细菌向胞外分泌脲酶，使培养基中的尿素水解，尿素分解后产生氨，氨为碱性，酚红在酸性环境中为黄色，在碱性环境里变为红色。培养基中的酸碱指示剂产生颜色变化，标志着存在脲酶水解尿素的作用，从而证明这一菌株可以以尿素为氮源。红色环状区域的大小代表脲酶活性的强弱和含量的多少。红色区域越大，表明菌株利用尿素的能力越强
能利用尿素的细菌在土壤菌群中只占极少数量。因为人和其他哺乳动物产生的排泄物毕竟是少量的，而且尿素还可以在高温下自然分解，因此，以尿素为氮源的菌群较少
1、土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如表所示，实验步骤如图所示。请分析回答：
                                                     （1）培养基中加入尿素的目的是筛选           ，这种培养基属于          培养基。（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的        和         ，实验需要振荡培养，原因是                   
（3）图中将细菌转到固体培养基上时，常采用      的方法接种，获得单菌落后继续筛选。（4）在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有       （填序号）。①土样不同  ②培养基污染  ③操作失误  ④没有设置对照（5）实验结束后，使用过的培养基应该进行               处理后，才能倒掉。
1. 为了实现燃料供应来源多样化，发展长期替代化石燃料的产品 如燃料酒精、生物柴油、沼气等已经列入我国未来10年的发展 计划。广东省是我国甘蔗主产区之一。甘蔗是一种高光效的植 物，单位面积产量很高，种植面积日益扩大，目前已成为南方 地区燃料酒精生产的重要原料。利用甘蔗生产燃料酒精的一般 工艺流程为：甘蔗榨汁（蔗糖）、酵母发酵﹑蒸馏﹑成品（燃 料酒精）。 请根据上述材料，回答下列问题：
(1)简述甘蔗大规模快速繁殖技术的过程
选取甘蔗外植体，通过诱导脱分化产生愈伤组织，然后通过调整植物激素比例，再分化形成芽和根，获得大量试管苗（或通过诱导大量形成胚状体，制成人工种子，适宜条件下萌发长成幼苗）。
（2）具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对 野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突 变菌，诱变及筛选过程如下： 步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。 步骤2: 制备选择培养基。在基本培养基的基础上，注意 和 ，加琼脂 后灭菌，制成固体平板。 步骤3：将紫外照射后的菌液稀释涂布平板。 步骤4：根据 筛选出突变菌。 （3)上述步骤2、3和4的依据分别是＿。
添加高浓度蔗糖（ 葡萄糖）
是否能在选择培养基上生长
提供高糖和酸性的筛选环境；获得单菌落；能生长代表该菌落具有耐高糖和耐酸的特性。
(4）利用获得的突变菌和蔗汁进行酒精发酵实验，除了将培养基 灭菌、保持空间 洁净外，发酵过程中防止外来杂菌入侵还有 哪些可行方法？（列举两种） （5)甘蔗榨汁以后还有大量的蔗渣废弃物，主要成分为木质素、 纤维素和半纤维素,但是酵母菌无法直接利用，原因是其＿。 请提出解决该问题的方法。（列 举两种方法）
①利用突变菌的耐酸特性，降低培养基的pH值，达到抑菌的目的；②利用突变菌的耐高糖特性，通过高渗环境达到抑菌目的；③保持厌氧环境，达到抑菌目的；④在培养基中添加一些抑制物如特殊的抗生素，达到抑菌目的。
缺乏相应分解酶系（或缺乏纤维素酶和半纤维素酶）。在酵母菌中转入分解酶 系相关基因；利用酶或微生物分解蔗渣；利用物理和化学方法分解蔗渣；将酵 母菌与其他能分解蔗渣的微生物混合发酵。
2.自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般 要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进 行数量测定的实验，请回答有关问题。 步骤如下：A.制备稀释倍数为10-2、10-3、10-4、10-5、10-6的系列稀释液。B.为了得到更加准确的结果，你选用 接种样品。C.适宜温度下培养。结果分析：(1)测定的大肠杆菌数，在对应稀释倍数为10-6的培养基中，得到以下 几种统计结果，正确可信的是( )A.一个平板，统计的菌落数是23B.两个平板，统计的菌落数是22和26，取平均值24C.三个平板，统计的菌落数分别是21、5和52，取平均值26D.四个平板，统计的菌落数分别是21、30、24和25，取平均值25