四川省资阳市安岳中学2025-2026学年高二下学期期中考试生物试题（Word版附解析）

这是一份四川省资阳市安岳中学2025-2026学年高二下学期期中考试生物试题（Word版附解析），共2页。试卷主要包含了单选题，填空题等内容，欢迎下载使用。
考试时间：75 分钟；满分：100 分
一、单选题（每小题 3 分，共计 45 分）
1. 食醋和黄酒是我国传统的日常调味品，均通过发酵技术生产。下列叙述错误的是（ ）
A. 醋酸的发酵是好氧发酵，而酒精的发酵是厌氧发酵
B. 以谷物为原料酿造食醋和黄酒时，伴有 pH 下降
C. 食醋和黄酒发酵过程中，微生物繁殖越快发酵产物产率越高
D. 使用天然混合菌种发酵往往会造成传统发酵食品的品质不一
【答案】C
【解析】
【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。参与果醋制作的微生物是
醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的
葡萄糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【详解】A、醋酸的发酵的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型，故醋酸的发酵是好氧发酵，而
酒精的发酵，参与的微生物是酵母菌，需要无氧呼吸产生酒精，故是厌氧发酵，A 正确；
B、以谷物为原料酿造食醋和黄酒时，产物中的醋酸、二氧化碳等会使 pH 下降，B 正确；
C、黄酒发酵过程中，酵母菌繁殖在有氧条件下，产酒精要在无氧条件下，繁殖越快则发酵产物酒精产率越
低，C 错误；
D、传统发酵食品所用的是自然菌种，没有进行严格的灭菌，以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，往
往会造成传统发酵食品的品质不一，D 正确。
故选 C。
2. 啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，其工业化生产流程如图所示。发酵过程分为主发酵和后
发酵两个阶段。下列叙述正确的是（ ）
A. 酵母菌将麦芽中的淀粉直接转化为酒精和 CO2
B. 焙烤是为了加热杀死种子胚，并使淀粉酶失活
C. 蒸煮能终止酶的进一步作用，并对糖浆灭菌
D. 糖的分解和酒精的生成都在后发酵阶段完成
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【答案】C
【解析】
【分析】啤酒的生产涉及多个工艺流程，其中涉及到酶的活性控制、灭菌以及发酵等重要环节。 在生物发
酵过程中，温度、氧气等条件对酶的活性和微生物的生长繁殖有着重要影响。发酵过程分为主发酵和后发
酵两个阶段。
【详解】A 、酵母菌不产生淀粉酶，不能将麦芽中的淀粉直接转化为酒精和 CO2 ，A 错误；
B 、焙烤的目的是加热杀死种子胚但不使淀粉酶失活，B 错误；
C 、 蒸煮可以终止酶的进一步作用，同时对糖浆进行灭菌，以减少杂菌污染，保证发酵的正常进行，C 正
确；
D 、 酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成，D 错误。
故选 C。
3. 尿素容易保存，是目前使用量较大的一种化学氮肥，尿素分子并不能直接被农作物吸收，只有被尿素分
解菌分解成氨之后，才能被植物利用。如图是从土壤中分离、计数尿素分解菌的过程，有关分析正确的是
（ ）
A. 若②过程稀释了 10 倍，则乙锥形瓶里盛有 9 mL 无菌水
B. ③的接种方法可用平板划线法或稀释涂布平板法
C. a、b、c 培养基可以用牛肉膏蛋白胨培养基
D. 若①②过程稀释了 10 倍，a、b、c 培养基上的菌落数依次为 57、58、56 个，则 10 g 土样中的尿素分解
菌数量为 5.7×109 个
【答案】D
【解析】
【分析】1、培养基的基本成分包括水、无机盐、碳源和氮源，此外还需要满足微生物生长对 pH、特殊营
养物质以及氧气的要求。
2、微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在
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恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形
成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可
形成单个菌落。
【详解】A、②过程加入了 2 mL 菌液，若稀释了 10 倍，则乙锥形瓶里应盛有 18 mL 无菌水，A 错误；
B、平板划线法不能计数，③的接种方法不能用平板划线法，B 错误；
C、牛肉膏和蛋白胨均可提供氮源，a、b、c 培养基应以尿素为唯一氮源，C 错误；
D、若 a、b、e 培养基上的菌落平均数为 57 个，10g 土样加入 90 mL 无菌水相当于稀释了 10 倍，则由题图
可知，共稀释了 1×106 倍，根据稀释涂布平板法的计算公式，每克样品中的菌株数=(57÷0.1)×106 =5.7×108
个，所以 10 g 土样可含有尿素分解菌 5.7×109 个，D 正确。
故选 D。
4. 水母雪莲是我国的一种名贵药材，主要活性成分为次生代谢产物黄酮。水母雪莲生长缓慢，长期的掠夺
性采挖导致该药材资源严重匮乏。研究人员开展了悬浮培养水母雪莲细胞合成黄酮的工程技术研究，结果
如表所示。下列叙述错误的是（ ）
转速（r/min） 55 65 75 85
相对生长速率 0.21 0.25 0.26 0.25
细胞干重（g/L
7.5 9.7 11.4 9.5 ）
黄酮产量（g/L
0.2 0.27 0.32 0.25 ）
A. 黄酮产量与细胞干重呈正相关
B. 黄酮是水母雪莲细胞生存和生长所必需的
C. 氧气供给对于水母雪莲细胞生长、分裂和代谢是必需的
D. 转速为 75r/min 时既利于细胞分裂，又利于黄酮的积累
【答案】B
【解析】
【分析】分析表格，随着转速升高，细胞干重增加，黄酮产量最多。
【详解】A．从图中看出，黄酮产量随着细胞干重增加而增加，所以黄酮产量与细胞干重呈正相关，A 正确；
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B．黄酮属于次生 代谢产物，并非细胞生存和生长所必需，B 错误；
C．氧气参与有氧呼吸，为细胞生长、分裂和代谢提供能量，所以氧气供给对于水母雪莲细胞生长、分裂和
代谢是必需的，C 正确；
D．75r/min 时相对生长速率、细胞干重和黄酮产量均最高，所以转速为 75r/min 时既利于细胞分裂，又利于
黄酮的积累，D 正确；
故选 B。
5. 如图为制备抗白细胞介素-6（IL-6）单克隆抗体的示意图。下列叙述正确的是（ ）
A. 步骤①给小鼠注射 IL-6 后，应从脾中分离筛选 T 淋巴细胞
B. 步骤②在脾组织中加入胃蛋白酶，制成单细胞悬液
C. 步骤③加入灭活病毒或 PEG 诱导细胞融合，体现了细胞膜的流动性
D. 步骤④经过克隆化培养和抗体检测筛选出了杂交瘤细胞
【答案】C
【解析】
【详解】A、步骤①给小鼠注射 IL-6 后，应从小鼠的脾中获取 B 淋巴细胞，A 错误；
B、步骤②需要在组织中加入胰蛋白酶或胶原蛋白酶，使其成为单细胞，进而制成悬液，B 错误；
C、步骤③是诱导细胞融合过程，该过程可加入灭活病毒或 PEG 诱导，细胞融合的过程体现了细胞膜的流
动性，C 正确；
D、步骤④是在选择培养基上筛选得到的杂交瘤细胞，该过程得到的杂交瘤细胞不一定能产生所需抗体，步
骤⑤经过克隆化培养和抗体检测筛选出了分泌所需抗体的杂交瘤细胞，D 错误。
故选 C。
6. 细胞工程技术已在生物制药和物种繁育等领域得到了广泛应用。下列关于动植物细胞工程的叙述，正确
的是（ ）
A. 用离心法诱导植物细胞融合后，在液体培养基中加入激素，诱导愈伤组织形成
B. 采用胚胎分割技术克隆动物常选用桑葚胚或囊胚
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C. 动物细胞在悬浮培养出现接触抑制后，需分瓶后进行传代培养
D. 利用组织培养技术培养红豆杉细胞，可获得有药用价值的初生代谢物紫杉醇
【答案】B
【解析】
【详解】A、植物细胞融合需用物理法（如电激）或化学法（如聚乙二醇）诱导，离心法通常用于动物细胞
融合；融合后需在固体培养基中添加植物激素（如生长素和细胞分裂素）诱导形成愈伤组织，而非液体培
养基，A 错误；
B、胚胎分割属于无性繁殖（克隆），需选择发育良好、形态正常的桑葚胚（全能性细胞）或囊胚（含内细
胞团），分割后移植可获得遗传性状相同的后代，B 正确；
C、接触抑制是贴壁生长的动物细胞在铺满瓶壁后停止增殖的现象，此时需用胰蛋白酶处理并分瓶进行传代
培养；但悬浮培养的细胞（如杂交瘤细胞）不贴壁，无接触抑制，C 错误；
D、紫杉醇是红豆杉产生的次生代谢产物（具有药用价值），而初生代谢物是维持细胞基本生命活动的产物
（如糖类、氨基酸）。植物组织培养技术可工厂化生产次生代谢物，但紫杉醇不属于初生代谢物，D 错误。
故选 B。
7. 下图表示某哺乳动物胚胎的早期发育过程，a～c 表示相关过程，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ表示相关阶段。下列相关叙
述正确的是（ ）
A. 过程 a 表示卵裂，该时期细胞数量和体积不断增加，有机物的含量减少
B. Ⅰ阶段形成的致密细胞团，形似桑葚，称为桑葚胚
C. 过程 b 细胞逐渐分化，Ⅱ阶段出现内胚层、中胚层和外胚层等结构
D. Ⅲ阶段，随着胚胎逐步扩大，透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，该过程叫做孵化
【答案】B
【解析】
【详解】A、过程 a 是卵裂期：细胞数量不断增加，但胚胎总体积基本不变；细胞呼吸消耗有机物，因此有
机物含量减少，A 错误；
B、Ⅰ阶段是桑葚胚，由 32 个左右的细胞组成，是致密的细胞团，形似桑葚，因此称为桑葚胚，B 正确；
C、过程 b 是桑葚胚→囊胚，Ⅱ阶段是囊胚，仅分化为内细胞团和滋养层；内胚层、中胚层、外胚层是Ⅲ阶
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段（原肠胚）的结构，不是囊胚的结构，C 错误；
D、孵化发生在囊胚阶段：囊胚扩大，透明带破裂，胚胎从透明带中伸展出来；Ⅲ阶段已经是原肠胚，孵化
在Ⅲ阶段之前完成，D 错误。
8. 梅花鹿和马鹿杂交后代生命力强、茸质好，但自然杂交很难完成，人工授精能解决此难题。胚胎工程技
术的应用，可提高繁殖率，增加鹿场经济效益。下列相关叙述合理的是（ ）
A. 采集的精液无需固定、稀释，即可用血细胞计数板检测精子密度
B. 人工授精时，采集的精液经获能处理后才能输入雌性生殖道
C. 超数排卵处理时，常用含促性腺激素的促排卵剂
D. 母体子宫对胚胎的免疫耐受性低下是胚胎移植的生理学基础
【答案】C
【解析】
【分析】体外受精主要操作步骤：（1）卵母细胞的采集和培养:方法一:对小型动物一般用促性腺激素处理，
使其排出更多的卵子，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。方法二:对大型动物是
借助超声波探测仪、腹腔镜等直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞，在体外经人工培养成熟后，才能与
获能的精子受精（或从刚屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞)。（2）精子的采集和获能:在体外受精前，要对精
子进行获能处理。采集方法:假阴道法、手握法和电刺激法等。获能方法:培养法和化学法。（3）受精:获能的
精子和培养成熟的卵细胞在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。。
【详解】A、采集的精子需要经过稀释和固定处理，否则活动精子会影响计数准确性，且血细胞计数板通常
用于已固定的细胞，A 错误；
B、人工授精时，精子在雌性生殖道内自然获能，无需提前体外处理，B 错误；
C、超数排卵通过注射促性腺激素（如 FSH 和 LH）促进卵泡发育和排卵，C 正确；
D、胚胎移植的生理学基础是母体子宫对胚胎的免疫耐受性高，不会发生免疫排斥，而非耐受低下，D 错误。
故选 C。
9. 我国科学家体外诱导食蟹猴胚胎干细胞，形成了类似囊胚的结构（类囊胚），为研究灵长类胚胎发育机制
提供了实验体系（如图）。相关叙述错误的是（ ）
A. 实验证实食蟹猴胚胎干细胞具有分化潜能
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B. 实验过程中使用的培养基含有糖类
C. 类囊胚的获得利用了核移植技术
D. 可借助胚胎移植技术研究类囊胚的后续发育
【答案】C
【解析】
【分析】该过程利用胚胎干细胞创造出了类胚胎结构，并在体外培养至原肠胚时期，将类囊胚移植进雄猴
体内后，成功引起了雌猴的早期妊娠反应有可能会产生新生个体，该过程属于无性生殖。
【详解】A、体外诱导食蟹猴胚胎干细胞， 形成了类似囊胚的结构(类囊胚)，证实了食蟹猴胚胎干细胞具有
分化潜能，A 正确；
B、实验过程中使用的培养基需含有糖类，糖类可为细胞培养提供能源物质，B 正确；
C、类囊胚的获得利用了动物细胞培养技术，并没有进行核移植，C 错误；
D、可借助胚胎移植技术将类囊胚移植到相应的雌性受体中继续胚胎发育，从而可以用来研究类囊胚的后续
发育，D 正确。
故选 C。
10. 某实验小组利用下图所示质粒和目的基因来构建基因表达载体，将目的基因导入大肠杆菌细胞并表达。
下列叙述正确的是（ ）
A. 图中的质粒用酶 A 切割后，会产生 2 个游离的磷酸基团
B. 在构建重组质粒时，可用酶 A 和酶 C 切割质粒和目的基因
C. 成功导入目的基因的大肠杆菌可在含四环素的培养基中生长
D. 若用酶 B 和酶 C 切割，可以避免质粒的自身环化
【答案】D
【解析】
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【分析】“分子手术刀”--限制性核酸内切酶（限制酶）
（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的；
（2）功能：能够识别双链 DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸
之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性；
（3）结果：经限制酶切割产生的 DNA 片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。由于酶 A 和 C 都在
质粒标记基因的位置，所以需要用酶 B 和 C 同时切割质粒和目的基因。
【详解】A、质粒中含有 2 个酶 A 的酶切位点，所以切割后会产生 4 个游离的磷酸基团，A 错误；
B、如果用酶 A 和 C 同时切割质粒，会破坏质粒的标记基因，B 错误；
C、根据 B 项分析，需要用酶 B 和 C 切割质粒和目的基因，导致四环素抗性基因被破坏，所以不能在含四
环素的培养基中生长，C 错误；
D、若用酶 B 和酶 C 切割，产生不同的黏性末端，避免质粒自身环化，D 正确。
故选 D。
11. 利用基因工程技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如下图所示，下列叙述正确的是（ ）
A. 过程①需使用 DNA 聚合酶
B. 过程②需使用解旋酶和 PCR 获取目的基因
C. 过程③使用的感受态细胞可用 NaCl 溶液制备
D. 过程④可利用 DNA 分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞
【答案】D
【解析】
【分析】
【详解】A、过程①为逆转录，需使用逆转录酶，A 项错误；
B、过程②为目的基因（CarE 基因）的获取，需使用限制酶，不需要解旋酶，B 项错误；
C、过程③是将目的基因导入大肠杆菌细胞，使用的感受态细胞用 CaCl2 溶液制备，C 项错误；
D、过程④为目的基因的检测与鉴定，可以利用 DNA 分子杂交技术鉴定目的基因是否导入受体细胞，D 项正
确。
故选 D。
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【点睛】本题以图文结合的形式考查学生对基因工程的基本操作程序的识记和理解能力。解答此题的关键
是熟记并理解相关的基础知识、形成清晰的知识网络。在此基础上从题图中提取信息，明确数字所示的过
程并结合题意作答。
12. 下列关于“DNA 粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的有（ ）
①羊的成熟红细胞可作为提取 DNA 的材料
②预冷的酒精溶液能抑制核酸水解酶活性，防止 DNA 水解
③研磨液在 4℃冰箱中放置几分钟后，应充分摇匀再倒入烧杯中
④实验中如果将研磨液更换为蒸馏水，DNA 提取的效率会降低
⑤将溶解的 DNA 粗提物与二苯胺试剂反应，可检测溶液中是否含有蛋白质杂质
A. 一项 B. 二项 C. 三项 D. 四项
【答案】C
【解析】
【分析】DNA 粗提取和鉴定的原理：（1）DNA 的溶解性：DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度 NaCl 溶液
中溶解度不同；DNA 不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA 对酶、高温和洗涤剂的耐受
性。（2）DNA 的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA 遇二苯胺会被染成蓝色。
【详解】①羊属于哺乳动物，其成熟红细胞没有细胞核和众多细胞器，也就不含 DNA，不能作为提取 DNA
的材料，①错误；
②预冷的酒精溶液能抑制核酸水解酶活性，防止 DNA 水解，同时 DNA 不溶于酒精，可使 DNA 沉淀析
出，②正确；
③在 DNA 的粗提取与鉴定实验中，研磨液在 4℃冰箱中放置几分钟后，取上清液倒入烧杯中，不可充分摇
匀，③错误；
④研磨液中含有洗涤剂等成分，有助于破碎细胞和溶解蛋白质等杂质，利于 DNA 提取。若将研磨液更换
为蒸馏水，细胞破碎不充分，杂质去除不彻底，DNA 提取的效率会降低，④正确；
⑤将溶解的 DNA 粗提物与二苯胺试剂反应，是用于检测 DNA，不能检测溶液中是否含有蛋白质杂质，⑤
错误。
综上错误的选项有①③⑤，共三项，C 正确，ABD 错误。
故选 C。
13. 兰州百合栽培过程中易受病毒侵染，造成品质退化。某研究小组尝试通过组织培养技术获得脱毒苗，操
作流程如下图。下列叙述正确的是（ ）
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A. ①为脱分化过程，1 号培养基中的愈伤组织是排列规则的薄壁组织团块
B. ②为再分化过程，愈伤组织细胞分化时可能会发生基因突变或基因重组
C. 3 号培养基用于诱导生根，其细胞分裂素浓度与生长素浓度的比值大于 1
D. 百合分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，可以作为该研究中的外植体
【答案】D
【解析】
【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、
芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。
【详解】A、在脱分化过程中，1 号培养基中的愈伤组织是排列不规则的薄壁组织团块，A 错误；
B、愈伤组织细胞分化时可能会发生基因突变，但基因重组发生在减数分裂过程中，而愈伤组织细胞的分化
过程是有丝分裂，所以不会发生基因重组，B 错误。
C、3 号培养基用于诱导生根，其细胞分裂素浓度与生长素浓度的比值应该小于 1，C 错误；
D、百合分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，因此可以作为该研究中的外植体，D 正确；
故选 D。
14. 为研究治疗性克隆技术能否用于帕金森综合征的治疗，科研人员利用人帕金森综合征模型鼠进行如图实
验，下列相关叙述错误的是（ ）
A. 过程①得到的细胞，其线粒体 DNA 来自供卵母体
B. 过程②重组细胞培养依次经历了桑椹胚、原肠胚和囊胚时期
C. 过程③的关键是利用特定条件诱导胚胎干细胞相关基因表达
D. 过程④对受体小鼠无需注射免疫抑制剂以抑制其细胞免疫功能
【答案】B
【解析】
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【分析】动物胚胎发育的基本过程：
(1)受精场所是母体的输卵管。
(2)卵裂期：细胞有丝分裂，细胞数量不断增加，但胚胎的总体体积并不增加，或略有减小。
(3)桑椹胚：胚胎细胞数目达到 32 个左右时，胚胎形成致密的细胞团，形似桑椹，是全能细胞。
(4)囊胚：细胞开始出现分化(该时期细胞的全能性仍比较高) ，聚集在胚胎端个体较大的细胞称为内细胞团，
将来发育成胎儿的各种组织，中间的空腔称为囊胚腔。
(5)原肠胚：有了三胚层的分化，具有囊胚腔和原肠腔。
【详解】A、过程①为核移植，该过程得到的细胞，其线粒体 DNA 来自供卵母体，A 正确；
B、过程②重组细胞培养依次经历了卵裂、桑椹胚、囊胚和原肠胚时期，B 错误；
C、过程③的关键是利用特定条件诱导胚胎干细胞相关基因表达，使之分化形成神经元，C 正确；
D、该过程属于自体移植，不会发生免疫排斥反应，因此过程④对受体小鼠无需注射免疫抑制剂以抑制其细
胞免疫功能，D 正确。
故选 B。
15. 如图为用转基因牛生产人血清白蛋白（药用蛋白）的过程，分析图中操作过程。下列叙述错误的是（
）
A. 图中的受体细胞是乳腺细胞，所以药用蛋白基因可以在乳腺细胞中表达
B. 上述过程实现了跨物种的基因重组
C. 过程①通常采用的方法是显微注射法
D. ③需要筛选性染色体组成为 XX 的胚胎进行移植
【答案】A
【解析】
【详解】A、图中的受体细胞不是乳腺细胞，而是受精卵（动物基因工程中，通常以受精卵作为受体细胞，
因为其全能性高，能发育成完整个体）。虽然最终药用蛋白在乳腺细胞中表达（通过乳汁分泌），但受体细
胞是受精卵，A 错误；
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B、该过程将人血清白蛋白的基因（人类基因）转入牛的受精卵中，属于跨物种的基因重组（不同物种间的
基因拼接与重组），实现了基因的跨物种转移与表达，B 正确；
C、将目的基因导入动物受精卵（受体细胞）时，通常采用显微注射法，这是动物基因工程中导入目的基因
的常用技术手段，C 正确；
D、因为药用蛋白从乳汁中分离，只有雌性个体（性染色体组成为 XX）能产生乳汁，所以③胚胎移植时需
要筛选性染色体组成为 XX 的胚胎，D 正确。
二、填空题（共 5 小题，共计 55 分）
16. 为使大豆获得抗除草剂性状，科研人员将抗除草剂基因导入大豆植株，获取转基因大豆。限制酶 SmaⅠ、
XmaⅠ、BglⅡ、NheⅠ的识别序列和切割位点分别为 CCC↓GGG、C↓CCGGG、A↓GATCT、G↓CTAGC。
请回答下列问题：
（1）获取和扩增抗除草剂基因的常用技术是________，该技术需要用到引物，引物的作用是______________
。启动子的作用是________。过程①称为________。
（2）将抗除草剂基因导入大豆细胞中的方法是________________。若抗除草剂基因成功转入植物细胞中，
可检测到________（填“Tet R”“Amp R”或“Tet R 和 Amp R”）的表达产物。T—DNA 的作用是将抗除草
剂基因导入大豆细胞并____________。
（3）若获得的抗除草剂基因如图所示，质粒需要用限制酶________切开，才能与抗除草剂基因高效连接。
（4）为防止抗除草剂基因污染，从提高转基因植物安全性的角度分析，可将目的基因导入大豆细胞中的
________（多选）。
A. 细胞核 B. 叶绿体 C. 线粒体 D. 核糖体
【答案】（1） ①. PCR 技术 ②. 使 DNA 聚合酶能够从引物的 3'端开始连接脱氧核苷酸 ③. RNA
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聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出 mRNA ④. 基因表达载体的构建
（2） ①. 农杆菌转化法 ②. Tet R ③. 整合到大豆细胞的染色体 DNA 上
（3）Xma Ⅰ和 BglⅡ （4）BC
【解析】
【小问 1 详解】
获取和扩增抗除草剂基因的常用技术是 PCR 技术。引物的作用是使 DNA 聚合酶能够从引物的 3'端开始连
接脱氧核苷酸。启动子的作用是 RNA 聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出 mRNA。过程①是将目的
基因和载体连接形成重组质粒，称为构建基因表达载体。
【小问 2 详解】
图中质粒带有 T-DNA，符合农杆菌转化法的特点，则将抗除草剂基因导入大豆细胞的方法是农杆菌转化法。
观察质粒结构可知，质粒会把 TDNA 转移到受体染色体 DNA 上，此时青霉素抗性基因不会转移，所以当
抗除 草剂基因成功转入植物细胞中，可检测到 Tet R 的表达产物。T-DNA 的作用是将抗除草剂基因导入大
豆细胞并整合到大豆细胞的染色体 DNA 上，这样目的基因就能随着受体细胞的染色体 DNA 一起复制和表
达。
【小问 3 详解】
若获得的抗除草剂基因，要进行碱基的替换。目的基因两端的黏性末端图中已经给出，观察各限制酶的识
别序列可知，限制酶 Xmal 和 Nhel 切割产生的黏性末端能与目的基因的黏性末端碱基相同，要想把目的基
因与质粒拼接起来，需要得到相同的黏性末端。因此质粒需要限制酶 XmaⅠ和 BglⅡ切割才能与抗除草剂基
因高效连接。
【小问 4 详解】
为防止抗除草剂基因污染，从提高转基因植物安全性的角度分析，可将目的基因导入大豆细胞中的叶绿体
或线粒体（多选），因为叶绿体和线粒体的遗传物质不会随花粉传播，能避免基因污染。AD 不符合题意，
BC 符合题意。
17. 请分析回答下列问题：
Ⅰ、豆豉是以黄豆或黑豆为原料，经各种微生物发酵形成的具有特殊色、香、味的发酵食品。某食品研发
小组以黄豆为主要原料研制豆豉酱，工艺设计流程如下。回答下列问题：
（1）毛霉可将黄豆种子中的蛋白质分解为______。
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Ⅱ、某研究小组用玻璃发酵罐、充氧泵、回旋式单向阀等组装一种果酒、果醋两用发酵装置，如下图 1 所
示。图 2 是发酵过程中培养液 pH 可能的变化情况。回答下列问题：
（2）图 1 发酵罐中并不装满发酵液，而是留出约 1/3 的空间，一方面是为了______，另一方面是为了______
。
（3）由果酒发酵转为果醋发酵时，有些方面需要做出调整，例如，需要______（填“升高”或“降低”）发酵
温度。请写出该过程的反应式：______。
（4）图 2 中，能表示整个发酵过程中 pH 变化情况的是曲线______。
【答案】（1）氨基酸和小分子肽
（2） ①. 酵母菌在初期进行有氧呼吸而大量繁殖 ②. 防止发酵液溢出
（3） ①. 升高 ②. C2H5OH+O2 CH3COOH+H2O
（4）②
【解析】
【小问 1 详解】
黄豆的主要成分是蛋白质，毛霉等微生物能产生蛋白酶，蛋白酶可以将蛋白质水解为小分子肽和氨基酸，
这是豆豉风味形成的重要基础。
【小问 2 详解】
发酵罐不装满发酵液、留出约 1/3 空间，有两个核心作用：①为酵母菌初期有氧呼吸提供氧气，酵母菌在有
氧条件下进行有氧呼吸，大量繁殖，增加菌种数量，为后续无氧发酵产酒做准备；②防止发酵液溢出，酵
母菌无氧呼吸产生酒精和 CO₂，CO₂会使发酵液体积膨胀，预留空间可避免发酵液因产气溢出，同时缓冲气
压。
【小问 3 详解】
果酒发酵（酵母菌）的最适温度为 18~30℃，果醋发酵（醋酸菌）的最适温度为 30~35℃，因此由酒发酵转
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为果醋发酵时，需要升高发酵温度。 醋酸菌在有氧条件下，将乙醇（酒精）氧化为醋酸，反应式为：
。
【小问 4 详解】
整个发酵分为两个阶段：果酒发酵阶段，酵母菌无氧呼吸产生酒精和 CO₂，CO₂溶于发酵液形成碳酸，使 pH
缓慢下降；果醋发酵阶段，醋酸菌将乙醇转化为醋酸，醋酸是强酸，会使 pH 快速、大幅下降，因此能表示
整个发酵过程 pH 变化的是曲线②。
18. 阅读下列关于能源、环境和农业生产方面的材料，回答相关问题：
材料 I：随着能源和环境问题日益严峻，利用纤维素酶降解秸秆生产燃料乙醇，对缓解全球能源危机有着重
大意义。某兴趣小组通过实验分离出能分解纤维素的微生物。
（1）为了筛选出分解纤维素的微生物，实验小组尝试从收割后的小麦田里取样，配制以纤维素为唯一碳源
的______（填“选择”或“鉴别”）培养基。配制好的培养基需_______灭菌。
（2）若要对培养的细菌计数，则需要用________法进行接种，当样品的稀释度足够高时，培养一段时间后，
可根据________初步鉴定并挑取产纤维素酶菌株。
材料Ⅱ：尿素是一种重要的农业氮肥，但尿素并不能直接被农作物吸收，只有当土壤中的细菌将尿素分解
成氨之后，才能被植物利用。某课题小组从土壤中分离能够分解尿素的细菌并进行计数的过程如图所示。
（3）图中培养基应以__________为唯一氮源。该琼脂培养基倒平板时需等待培养基冷却后倒过来放置，原
因是__________。
（4）某同学选取 5 个培养皿进行实验，其中 1 个不进行涂布或者用无菌水涂布平板，目的是_______；接
种其余 4 个培养皿，一段时间后 4 个培养皿中分别长出了 54、46、50、24 个菌落，根据实验结果，该 1g
土壤样本中约有分解尿素的细菌____________个。培养基表面生长的是单菌落，运用这种方法统计的结果
往往比实际值偏小的原因是______。
【答案】（1） ①. 选择 ②. 高压蒸汽
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（2） ①. 稀释涂布平板 ②. 菌落的特征
（3） ①. 尿素 ②. 防止皿盖上的水珠滴落在培养基上，造成污染
（4） ①. 检测培养基是否被污染 ②. 5×109 ③. 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到
的只是一个菌落
【解析】
【小问 1 详解】
为了筛选出分解纤维素的微生物，实验小组尝试从收割后的小麦田里取样，配制以纤维素为唯一碳源，原
则上，只有能分解纤维素的微生物才能在该培养基上生存和繁殖，因此属于选择培养基，配制好的培养基
需高压蒸汽灭菌。
【小问 2 详解】
若要对培养的细菌计数，则需要用稀释涂布平板法，该接种方法除可以用于分离微生物外，也常用来统计
样品中活菌的数目。当样品的稀释度足够高时，培养一段时间后，可根据菌落的特征（或菌落的形状、大
小、颜色等）初步鉴定并挑取产纤维素酶菌株。
【小问 3 详解】
由题干信息“课题小组从土壤中分离能够分解尿素的细菌并进行计数”可知，培养基应以尿素为唯一氮源。
琼脂培养基倒平板时需等待培养基冷却后倒过来放置，原因是防止皿盖上的水珠滴落在培养基上，造成污
染（避免培养基中的水分过快挥发）。
【小问 4 详解】
选取 5 个培养皿进行实验，其中 1 个不进行涂布或者用无菌水涂布平板，目的是检测培养基是否被污染。
一般选择菌落数为 30~300 的平板进行计数，选择 54、46、50 菌落数，则培养皿上生长菌落的平均值为（54
+46+50）÷3=50；由于锥形瓶中是在 1g 土壤中加入 99mL 无菌水，相当于稀释了 102，故⑤试管的稀释倍数
为 107，所以 1g 土壤样本中约有分解尿素的细菌 50÷0.1 × 107=5×109 个。培养基表面生长的是单菌落，运用
这种方法统计的结果往往比实际值偏小的原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个
菌落。
19. Ⅰ．下图表示科学家通过植物细胞工程，培育“矮牵牛—粉蓝烟草”杂种植株的过程。
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（1）步骤①常用含有________酶的________溶液处理离体细胞，既能获得 2 种植物细胞的原生质体，又能
避免原生质体因过度吸水而破裂。
（2）步骤③细胞融合完成的标志是________，获得的融合细胞至少有________种。若换用矮牵牛的叶肉细
胞和粉蓝烟草的________细胞重做该实验，则更易筛选出杂种细胞。
（3）“矮牵牛-粉蓝烟草”杂种植株的体细胞内含________条染色体，属于________倍体植株。
Ⅱ．银杏的次生代谢产物银杏黄酮、银杏内酯等具有良好的药用效果，一般从叶片中取得，但传统栽植方
法周期长、成本高、受环境影响大，无法很好满足市场需求。因而利用组织培养技术，从愈伤组织中提取，
具有一定的研究意义与应用前景。
（4）将愈伤组织转入到________培养基中进行扩大培养，以提取次生代谢物。该过程与植物组织培养相比
的优点有________。
A．细胞与培养基的结合更加充分
B．受培养基中成分差异的影响较小
C．对环境不敏感
D．对营养物质的吸收更容易
【答案】（1） ①. 纤维素酶和果胶 ②. 等渗或略高渗
（2） ①. 融合细胞再生出细胞壁 ②. 3##三 ③. 根尖等非绿色组织
（3） ①. 48 ②. 四
（4） ①. 液体 ②. AD
【解析】
【小问 1 详解】
植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，根据酶的专一性，可用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞获得原生
质体，同时为防止原生质体因渗透失衡而破裂，需置于等渗或略高渗溶液。
【小问 2 详解】
植物原生质体融合成功的标志是融合细胞再生出细胞壁；获得的融合细胞至少有 3 种，即甲+甲、乙+乙以
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及甲+乙三类杂合方式；若换用矮牵牛的叶肉细胞和粉蓝烟草的根尖等非绿色组织（不含叶绿体），则可依
据是否带绿色叶绿体来筛选出真正的杂种细胞。
【小问 3 详解】
植物体细胞杂交得到的植株染色体和染色体组数目是两个个体的染色体和染色体组数目之和，矮牵牛—粉
蓝烟草杂种植株体细胞含 48 条染色体（24+24）；杂种植株含有 4 个染色体组，故属于异源四倍体植株。
【小问 4 详解】
可以将愈伤组织转入到液体培养基中，进一步扩大培养，以提取有益次生代谢物，在此过程中需要做到无
菌操作；与固体培养基培养愈伤组织相比，液体培养基培养愈伤组织的优点有：与培养基的结合更加充分、
对营养物质的吸收更容易，AD 正确，BC 错误。
20. 乳糖酶缺乏症患者体内乳糖酶（LCT）的分泌量较少，导致患者无法完全消化母乳或牛乳中的乳糖，从
而引起非感染性腹泻。工业化生产无乳糖奶粉时，需用乳糖酶将奶中的乳糖除去。
Ⅰ.为了提高乳糖酶的产量，科研人员从牧民的奶酪（一种近似固体的发酵牛奶制品）中分离纯化出了能高
效生产乳糖酶的酵母菌，下图为流程示意图。请回答下列问题：
注：X-gal 为乳糖酶的显色底物，乳糖酶可以将无色的 X-gal 分解成半乳糖和蓝色的溴靛蓝。
（1）X-gal 是一种无色物质，能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝，使菌落呈蓝色。从含 X-gal 的培养
基中挑选目的菌时，应挑选的是_______。
Ⅱ.科学家采用基因工程技术将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组中，获得的转基因牛分泌的乳汁中乳糖含量大
大降低，用到的质粒和目的基因的部分结构如图 1 和图 2 所示，不同限制酶的识别序列及切割位点如表所
示。请回答下列问题：
限制酶 识别序列及切割位点
Hind Ⅲ 5´-A↓AGCTT-3´
Sma I 5´-CCC↓GGG-3´
Kpn I 5´-GGTAC↓C-3´
Sal I 5´-G↓TCGAC-3´
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Nhe I 5´-G↓CTAGC-3´
（2）为了将图 2 中的目的基因准确插入图 1 质粒中，需要在肠乳糖酶基因的两端分别添加限制酶_______
的识别序列。为保证肠乳糖酶基因的正确复制和与质粒的正确连接，需要设计 PCR 引物，请写出与β链结
合的引物的序列：________（写 10 个碱基）。
（3）在构建基因表达载体时，肠乳糖酶基因应插入_______之间。将含有肠乳糖酶基因的表达载体导入受
体细胞的常用方法是_______。
（4）利用胚胎工程技术将导入目的基因的受体细胞培育成个体，采用分子杂交技术检测肠乳糖酶基因在转
基因奶牛中是否转录出 mRNA 的大致思路为_______。
【答案】（1）直径最大的蓝色菌落
（2） ①. KpnI、SmaI ②. 5'-GGTACCATGC-3'
（3） ①. 启动子和终止子 ②. 显微注射法
（4）用放射性同位素标记的肠乳糖酶基因片段作探针，与从转基因个体的乳腺细胞中提取的 mRNA 杂交，
观察是否出现杂交带，若出现杂交带，则说明肠乳糖酶基因在转基因奶牛中转录出了 mRNA
【解析】
【小问 1 详解】
由于 X-gal 能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝，使菌落呈蓝色。而我们要挑选的是能高效生产乳糖酶
的酵母菌，在含 X-gal 的培养基中，能高效生产乳糖酶的酵母菌分解 X-gal 的能力强，产生的蓝色物质就多，
形成的蓝色菌落就会更大，所以从含 X-gal 的培养基中挑选目的菌时，应挑选蓝色菌落大的。
【小问 2 详解】
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分析题图，选用 HindⅢ会破坏质粒上的标记基因，选用 SalI、NheI 会破坏目的基因，因此只能选用 KpnI、
SmaI 切割质粒，则需要在目的基因的两端分别添加 KpnI、SmaI 的识别序列。为保证肠乳糖酶基因的正确
复制和与质粒的正确连接，且根据基因结构和连接要求，应在肠乳糖酶基因左侧添加 KpnI 的识别序列，
右侧添加 SmaI 的识别序列。又因为 PCR 过程中 DNA 复制从引物 3′端连接脱氧核苷酸，所以与β链结合的
引物的 5′端应添加 KpnI 的识别序列。由于只写 10 个碱基，KpnI 识别序列为 5′-GGTAC↓C-3′ ，取与β
链结合部分为 5′-GGTACCATGC-3′（取前 10 个碱基） 。
【小问 3 详解】
在构建基因表达载体时，启动子能启动转录，终止子能终止转录，所以肠乳糖酶基因应插入启动子和终止
子之间。 将含有肠乳糖酶基因的表达载体导入受体细胞（动物细胞）常用方法是显微注射法。
【小问 4 详解】
利用胚胎工程技术将导入目的基因的受体细胞培育成个体，采用分子杂交技术检测肠乳糖酶基因在转基因
奶牛中是否转录出 mRNA，大致思路为用放射性同位素标记的肠乳糖酶基因片段作探针，与从转基因奶牛
中提取的 mRNA 进行杂交，观察是否出现杂交带，若出现杂交带，则说明肠乳糖酶基因在转基因奶牛中转
录出了 mRNA。
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