2026届高三生物二轮复习课件（人教版）：简答题规范练　5.生物技术与工程（含答案）

这是一份2026届高三生物二轮复习课件（人教版）：简答题规范练　5.生物技术与工程（含答案），共27页。PPT课件主要包含了生物技术与工程，BamHⅠ，生长素和细胞分裂素，加法原理，减法原理，琼脂糖凝胶电泳，引物C，引物D，EcoRⅠ，一种引物的等内容，欢迎下载使用。
(1)BamH Ⅰ　③　生长素和细胞分裂素(2)SlJA2基因的碱基序列、碱基互补配对原则(3)加法原理　减法原理　基因的数量影响基因的表达量；一种基因可以控制多种性状
(1)2　使DNA聚合酶能从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸　DNA聚合酶需要Mg2＋激活　琼脂糖凝胶电泳(2)Bgl Ⅱ和Nt Ⅰ(3)利用大肠杆菌繁殖速度快的特点，短时间内可获取大量的重组质粒
(1)引物A、引物C　引物C、引物D 子链的延伸方向只能从5′端→3′端，以DNA分子③作模板时子链不能延伸(2)5′　KpnⅠ、EcRⅠ(3)含有空白质粒的大肠杆菌也能在该培养基上生长
(1)5′端　一种引物的比例显著多于另一种引物(2)SacⅡ和EcRⅠ(3)脱水四环素　头孢霉素(4)D
1.科研团队为了研究番茄抗虫基因(SlJA2)的功能，进行了相关实验。图1为SlJA2基因过表达番茄(OE)构建的过程，图2为SlJA2基因敲除突变番茄(KO)构建的部分过程。(1)图1中，为保证过程①获得的SlJA2基因与载体正确连接形成重组质粒，需在SlJA2基因上游添加限制酶________的识别序列；在过程____用钙离子可以提高SlJA2基因导入受体细胞的概率。在过程⑤中需通过调整___________________(填激素名称)的比例获得SlJA2基因过表达番茄(OE)。
(2)图2中，要准确敲除SlJA2基因，需设计正确的向导RNA(sgRNA)，才能准确引导Cas9蛋白切割SlJA2基因。设计sgRNA需要的信息及运用的原理是______________________________________。
SlJA2基因的碱基序列、碱基互补配对原则
(3)科研人员将OE、KO以及未处理(WT)三组番茄进行一系列实验，定期测量相关数据，记录如表(注：“＋”的数目代表程度或数量变化)：
与WT组相比，实验组OE组和KO组的设置分别采用了自变量控制中__________、__________(填科学方法)。据表分析SlJA2基因的表达量及性状的变化，可以得出结论：_______________________________________________________(答2点)。
基因的数量影响基因的表达量；一种基因可以控制多种性状
2.酵母细胞表达系统是一种利用酵母菌作为宿主来生产重组蛋白的技术平台。土壤中存在产PG酶(增大蛋白质的溶解性)的金黄杆菌，研究人员设计了利用基因工程高效生产PG 酶的方案，流程如图1所示，相关限制性内切核酸酶的识别和切割位点如图2所示。回答下列问题：
(1)过程①应用了PCR技术，利用PCR技术扩增时，需要____种引物，引物的作用是________________________________________________。一般还需要往PCR反应缓冲液中加入Mg2＋，其原因是_________________________。PCR反应过程可在PCR扩增仪中自动完成，而后常用_______________来鉴定PCR的产物。
使DNA聚合酶能从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸
DNA聚合酶需要Mg2＋激活
(2)完成过程②需要先将PG酶基因与pPIC9K 质粒重组，据图分析，该过程中最好选择限制酶______________切割。
(3)结合图中过程③分析，将重组质粒导入大肠杆菌内的目的是_____________________________________________________________。过程④中将重组质粒酶切后，整合在酵母菌染色体上。
利用大肠杆菌繁殖速度快的特点，短时间内可获取大量的重组质粒
3.重叠延伸PCR技术是采用具有互补末端的引物，使PCR产物形成了重叠链，从而在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸，将不同来源的扩增片段重叠拼接起来的技术，可通过定点诱变在体外改造DNA分子(图中黑色正方形代表替换的碱基)，并将改造后的目的基因导入质粒构建目的基因表达载体。回答下列问题：
(1)图中所示的重叠延伸PCR技术中，PCR1的引物是_____________。PCR4可获得大量定点诱变目的基因，此时的引物为______________。PCR3时模板DNA不能选择DNA分子③的原因是_____________________________________________________________________。
子链的延伸方向只能从5′端→3′端，以DNA分子③作模板时子链不能延伸
(2)为使重叠延伸PCR技术改造后的目的基因(该基因序列不含图中限制酶的识别序列)能与载体正确连接，PCR4时，应在基因上、下游引物的___端分别添加限制酶______________的识别序列。
(3)将目的基因、质粒及大肠杆菌混合，温育一段时间后涂在含四环素的平板上培养，一段时间后平板上长出菌落。这些菌落的菌体内不一定含有目的基因，理由是_____________________________________________。
含有空白质粒的大肠杆菌也能在该培养基上生长
4.(2025·常德二模)金黄色葡萄球菌(Sa)可引起败血症、细菌性肺炎等疾病。不规范使用抗生素易出现多重抗药性Sa，推测Sa产生头孢霉素抗性与其质粒上的R基因有关。为验证该推测，以图1中R基因的上、下游片段和质粒1构建质粒2，然后通过同源重组(质粒2中的上、下游片段分别与Sa基因组中R基因上、下游片段配对，并发生交换)敲除Sa的R基因。回答下列问题：
(1)利用PCR技术扩增出较多的R基因及其上、下游序列，应在引物的______(填“3′端”或“5′端”)添加相应的限制酶识别序列。若要扩增出较多DNA单链序列，在添加引物时需做怎样的处理？____________________________________。(2)质粒2的构建过程中需选择______________(填限制酶)对PCR扩增产物进行酶切。
比例显著多于另一种引物
(3)用质粒2转化临床分离的具有头孢霉素抗性、对氯霉素敏感的Sa，涂布在含有氯霉素的平板上，经培养获得含质粒2的Sa单菌落，再经多次传代增加同源重组敲除R基因的概率，随后稀释涂布在含____________的平板上，筛选并获得不再含有质粒2的菌落。从这些菌落中分别挑取少许菌体，依次接种到含_________的平板上，若无法增殖，则对应菌落中细菌的R基因可能被敲除。