高中生物人教版 (2019)选择性必修3微生物的选择培养和计数教学课件ppt

这是一份高中生物人教版 (2019)选择性必修3微生物的选择培养和计数教学课件ppt，共32页。PPT课件主要包含了从社会中来，无细胞结构，原核细胞，真核细胞，微生物，培养基的配制，培养基的类型，培养基的成分，基本成分，无机盐等内容，欢迎下载使用。
向经过杀菌处理的牛奶中添加某些对人体有益的细菌，再经过发酵酒可以形成酸奶。由于制作工艺并不复杂，一些人会在家里自制酸奶。自制酸奶虽然方便，但是由于自制酸奶造成肠胃不适的事屡见不鲜，主要原因是在制作过程中有杂菌混入。那么怎样才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物呢？
19世纪中期，法国酿酒业曾一度遭到毁灭性打击，生产的葡萄酒出现了变酸变味的怪事…
法国科学家巴斯德发现，导致生产失败的根源在于发酵物中混入了微生物。
真菌:酵母菌、毛霉等；原生生物:草履虫、变形虫等
微生物类群：难以用肉眼观察的微小生物的统称。
病毒:SARS病毒、新冠病毒等RAN病毒；噬菌体等DNA病毒
细菌:蓝细菌、大肠杆菌、乳酸菌等；放线菌：链霉菌等
①要为人们需要的微生物提供合适的营养和环境条件；②要确保其他微生物无法混入，并将需要的微生物分离出来。
1._____________________________________是研究和应用微生物的前提，也是发酵工程的重要基础。
防止杂菌污染，获得纯净的微生物培养物
2.在实验室培养微生物的要求:
有无 凝固剂琼脂
1、培养基的概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质即培养基。
2、培养基的作用：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢产物。
例1，加入青霉素的培养基：分离酵母菌、霉菌等真菌；例2，不加氮源的无氮培养基：分离固氮菌；例3，不加含碳有机物的无碳培养基：分离自养型微生物
例1，加入伊红美蓝的培养基：鉴别大肠杆菌例2，加入刚果红的培养基：鉴别纤维素分解菌
③按功能划分，包括________________________。
a选择培养基：将某种类微生物从混杂的微生物群体中分离出来。
b鉴别培养基：用于鉴别不同类型的微生物
①按物理性质划分，包括_______________________。
②按组成成分划分，包括______________________________________。
固体培养基和液体培养基
合成培养基、天然培养基、半合成培养基
选择培养基和鉴别培养基
注意：有些含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源， 又可以作为氮源，如氨基酸等
无机碳源：CO2、CO32-、HCO3-
有机碳源：牛肉膏、蛋白胨等
无机氮源：NH4＋、NO3-
有机氮源：牛肉膏、蛋白胨、尿素等
1000mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成
在主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长的条件有：对pH、特殊营养物质以及O2的需求。例如，培养乳酸杆菌需添加维生素；培养霉菌需调至酸性； 培养细菌需调至中性或弱碱性； 培养厌氧微生物需提供无氧环境。
例题1.下列有关微生物营养物质的叙述中，正确的是（ ）A. 是碳源的物质不可能同时是氮源 B. 凡碳源都提供能量C. 除水以外的无机物只提供无机盐 D. 无机氮源也能提供能量
1.获得纯净的微生物培养物的关键是______________。
①实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒
②培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌
③实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触
注意：为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在超净工作台并在酒精灯火焰附近进行。
①消毒：是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。
②灭菌：是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
3.防止杂菌污染的方法
①煮沸消毒：100℃煮沸5-6 min，可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢。
②巴氏消毒：62-65℃下煮30 min或80-90℃处理30s-1min，适合不耐高温的液体，如牛奶。可以杀死牛奶中的绝大多数微生物，并且不破坏牛奶的营养成分。
③化学药剂消毒：用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒；氯气消毒水源等。
④紫外线消毒：接种室、接种箱或超净工作台可用紫外线照射30min。在照射前，适量喷洒石碳酸或煤酚皂溶液等消毒液，加强消毒效果。
①湿热灭菌：利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌。高压蒸汽灭菌效果最好，100 kPa、121℃下维持15-30 min，常用于培养基、无菌水等的灭菌。
②干热灭菌：160-170℃下加热2-3h。常用于玻璃器皿和金属器具（耐高温的和需要保持干燥的物品）。
③灼烧灭菌：常用于涂布器、接种环、接种针、试管口或其它金属用具等的灭菌。直接在酒精灯火焰的充分燃烧层（外焰）灼烧。
较为温和理化方法，杀死部分微生物（不包括芽孢、孢子）
强烈的理化方法，杀死所有微生物（包括芽孢、孢子）
100 ℃煮沸5～6 min
62～65 ℃煮30 min或80-90 ℃煮30s-1 min
擦拭等,如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源
紫外线照射30 min
接种的金属工具、接种时用的试管口或瓶口等
直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧
耐高温、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金属用具等
物品放入干热灭菌箱,160～170 ℃加热2～3h
培养基、培养皿等,生产和实验室常用
高压蒸汽灭菌锅内,100 kPa,温度121 ℃,15～30 min
接种室、接种箱，超净工作台
某同学将5个手指尖在贴有“洗手前”标签的培养基上轻轻按一下；然后用肥皂将该手洗干净，再将5个指尖在贴有“洗手后”标签的同种培养基上轻轻按一下；将这两个培养皿放入37℃恒温培养箱中培养 24h 后，发现贴有“洗手后”标签的培养皿中菌落较少。请分析回答下列问题。
（1）这个材料中哪些材料用具需要灭菌处理？（2）从实验结果来看，洗手后我们就能进行无菌操作了吗？操作时，我们可以采用什么方法来避免手上的微生物的污染？
用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒；实验操作应在超净工作台并在酒精灯火焰附近进行
基本成分：碳源、氮源、水、无机盐
特殊需求：维生素（如乳酸杆菌）、碱基等
第2节 微生物的培养技术及应用一 微生物的基本培养技术（第2课时）
传统发酵通常直接利用原材料中天然酵母菌
工业生产通常使用人工选育的高活性酿酒酵母
①培养物：在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体成为培养物；②纯培养物、纯培养：由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，获得纯培养物的过程就是纯培养。
1.培养物、纯培养物、纯培养：
2.纯培养的步骤包括：
配制培养基、灭菌、接种、分离和培养
1.概念：分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，这就是菌落。2.特征：3.功能：4.获得单菌落的方法：
大小、形状、隆起程度、颜色等。
平板划线法、稀释涂布平板法
称取去皮马铃薯200g，切成小块，加水1000ml，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入20g葡萄糖、15-20g琼脂，用蒸馏水定容至1000ml。
将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，再放入高压蒸汽灭菌锅中，在压力为100kPa、温度为121℃的条件下，灭菌15-30min。将5-8套培养皿包成一包，用几层牛皮纸包紧，放入干热灭菌箱内，在160-170℃灭菌2h。
待培养基冷却到50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。
培养基：用高压蒸汽灭菌锅湿热灭菌培养皿：在干热灭菌箱内干热灭菌
2.将瓶口迅速通过火焰
3.用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，将培养基（10-20mL）倒入培养皿，立即盖上皿盖
4.等待培养基冷却凝固后，将培养皿倒转过来放置
思考1：培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？
可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉温度下降到刚刚不烫手即可。
思考2：在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？
最好不要用这个平板培养微生物。 防止空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。
将所倒平板放入37℃的恒温箱中培养12h～24h，观察是否有菌落存在以确定是否被污染或灭菌是否彻底。
思考4.怎么确定所倒平板未被杂菌污染？
思考3：平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
既可以防止培养基表面的水分挥发；又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
1.灼烧接种环，直至接种环金属丝烧红
2.在火焰旁冷却接种环，拔出酵母菌培养液试管的棉塞
4.在火焰附近用接种环蘸取一环菌液
5.试管口通过火焰，并塞上棉塞
6.将皿盖打开一条缝隙，将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划3-5条平行线，盖上皿盖。
7.灼烧接种环，待其冷却后，从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作，作第三、四、五次划线。
平板划线法的具体操作：
通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。经数次划线后培养，可以分离得到单菌落。
平板划线法的具体划法：
注意：①接种环只蘸一次菌液,但要在培养基不同位置连续划线多次②划线首尾不能相接③每次划线前接种环进行灭菌④划线后,培养皿倒置培养
思考：为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗？为什么？
杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者
杀死上次划线时残留菌种，使下一次划线的菌种直接来源上次划线的末端，从而使每次划线时菌种数目逐渐减少，直至得到单个细胞
杀死接种环上原有微生物
思考1：为什么要将平板倒置？
思考2：为什么要同时放入未接种的平板？
既可以防止培养基表面的水分挥发；又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染
作对照，该培养皿无菌落说明培养基没有污染
完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28℃左右(培养温度因酵母菌种类的不同而稍有差异)的恒温培养箱中培养24-48 h。
例题1.下列为几位同学描述的平板划线接种法的划线方式，其中正确的是（ ）
例题2.养殖池中存在的有毒物质，主要是氨及亚硝酸，这两种物质可被硝化细菌吸收利用。在“养殖池底泥中硝化细菌的分离与计数”实验中，说法错误的是（ ） A. 需要配制添加一定浓度氨盐的牛肉膏蛋白胨培养基，以筛选硝化细菌 B. 应对采集底泥使用的工具进行灭菌，全部接种过程均需在酒精灯火焰旁进行 C.可以采用平板划线法进行接种，还需与未接种的空白培养基同时培养D.应将接种后的培养基放在光照培养箱中培养，原因是硝化细菌为生产者
①配制培养基（马铃薯、葡萄糖、琼脂、水）
③倒平板（在酒精灯火焰附近操作）
培养基：湿热灭菌（高压蒸汽灭菌锅）
培养皿：干热灭菌（干热灭菌锅）
用接种环在固体培养基上用平板划线法接种
平板倒置，放入28℃左右的恒温培养箱培养