专题卷11 发酵工程 -【小题小卷】冲刺最新高考生物小题限时集训（新高考专用）

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一、对知识进行层级化的框架梳理：生物知识点比较多，我们可以引导学生以逻辑关系对知识进行层级化的“知识框架”梳理，以便让学生更牢固地掌握基础知识， 从而能够更好地把知识融会贯通。
二、回归教材，注重教材细节：新课标I卷的题“不偏”“不怪”“不坑”，不会在题目中设“语言陷阱”，大多数题考查的内容直接或改编至教材。
三、帮助学生进行“方法类知识”的梳理，深入理解生物学研究方法
四、掌握生物学实验的两大要素：自变量和对照。自变量保证了实验设计的逻辑正确，对照保证实验在特定条件下进行。
五、帮助学生总结一些答题技巧。做选择题把握住（1）高考题往往有非常明确的选项，比我们平时的模拟题要简单。（2）对于重要概念不能过于死记硬背，要理解。（3）生物不是数学，不考复杂的计算，数字越复杂，答案可能越简单。所以要善于运用倒推法、排除法来做选择题。做好以上几点，相信二轮复习后学生会有一个很大的提升。
专题11 发酵工程
难度：★★★☆☆ 建议用时： 30分钟 正确率 ： /20
一、单选题
1．（2023·重庆·重庆市凤鸣山中学校考模拟预测）家庭酿造甜米酒时一般是先将米煮熟，待其冷却后拌酒曲，然后在米饭中央挖一小洞，加盖后置于适当地方保温。下列关于此过程的叙述，正确的是（ ）
A．将米煮熟的目的只是消灭杂菌B．冷却的目的是防止拌酒曲时烫手
C．在米饭中央挖洞有利于CO2的排出D．发酵制米酒时并不需要严格密封
【答案】D
【分析】1.米酒制作菌种是酵母菌，代谢类型是异养兼性厌氧型真菌，属于真核细胞，条件是18~25℃、前期需氧，后期不需氧，酵母菌的呼吸过程如下：
有氧呼吸:第一阶段：在细胞质基质中，一分子葡萄糖形成两分子丙酮酸、少量的[H]和少量能量，这一阶段不需要氧的参与；第二阶段：丙酮酸进入线粒体的基质中，分解为二氧化碳、大量的[H]和少量能量；第三阶段:在线粒体的内膜上，[H]和氧气结合，形成水和大量能量，这一阶段需要氧的参与。
无氧呼吸：第一阶段:在细胞质的基质中，与有氧呼吸的第一阶段完全相同，即一分子的葡萄糖在酶的作用下分解成两分子的丙酮酸，过程中释放少量的H]和少量能量；第二阶段：在细胞质的基质中，丙酮酸在不同酶的催化下，分解为酒精和二氧化碳。
【详解】A、家庭酿造甜米酒时将米煮熟的原因是便于微生物发酵和可以食用，A错误；
B、冷却的目的是防止温度太高将菌种杀死，B错误；
C、在米饭中央挖洞是为了氧气的进入，进行酵母菌的繁殖，C错误；
D、发酵制米酒时并不需要严格密封，D正确。
故选D。
2．（2023·山东·模拟预测）图1是制作果酒和果醋的简易装置，图2是制作果酒或果醋过程中可能发生的物质变化。下列相关叙述正确的是（ ）
A．果酒发酵阶段，若开错气阀，则会导致发酵液溢出
B．果醋发酵阶段，醋酸菌进行④过程时发酵液中糖类充足
C．制作果酒的主要发酵菌进行①和②过程的场所是线粒体
D．制作果醋的主要发酵菌进行④过程时不需要O2的参与
【答案】A
【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～25℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。
2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。
【详解】A、果酒发酵阶段，开气阀的目的是排气，而排气时应打开气阀b，若错开气阀a，会导致发酵液从进气管溢出，A正确；
B、果醋发酵阶段，醋酸菌在糖类匮乏时能利用酒精经一系列化学反应生成醋酸，B错误；
C、图2中，①过程进行的场所是细胞质基质，C错误；
D、醋酸菌利用酒精生成醋酸时，需要氧气的参与，D错误。
故选A。
3．（2022·四川雅安·统考模拟预测）某果汁加工厂在制造柑橘汁时，为提高柑橘的经济价值、减少原料的浪费，设计了如图所示的生产加工方案。下列叙述错误的是（ ）
A．过程①温度控制在18~25℃，过程②温度控制在30~35℃
B．过程③为冷却的过程，目的是为了防止高温使酶变性失活
C．过程③后用果胶酶处理，可提高柑橘汁的出汁率和澄清度
D．过程④将果皮用水浸泡后再用石灰水处理，以提高出油率
【答案】D
【分析】从橘皮中提取的橘皮油，无色透明，具有诱人的橘香未，主要成分为柠檬烯，是优质的食品、化妆品、香水原料。在橘皮油的提取过程中，由于新鲜的橘皮含有大量的果蜡、果胶和水分，直接压榨出油率较低，通常采用石灰水浸泡10h以上，石灰水能够破坏细胞结构，分解果胶，防止橘皮在压榨时滑脱，提高出油率，并且压榨液的黏稠度不会太高，过滤时不会堵塞筛眼。过滤时首先用布袋除去固体物和残渣，然后采用离心进一步除去质量较小的残留固体物。
【详解】A、过程①表示制作果酒，温度控制在18~25℃，过程①表示制作果醋，温度控制在30~35℃，A正确；
B、制作柑橘汁时，过程③为冷却，目的是防止高温使酶变性失活，B正确；
C、酶处理时加入的酶是果胶酶，用该酶处理的目的是提高柑橘的出汁率和澄清度，C正确；
D、为了提高出油率，压榨前需要对橘皮进行处理将橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡，D错误。
故选D。
4．（2023·广东深圳·一模）《诗经》中有“中田有庐，疆场有瓜，是剥是范，献之皇祖”的诗句。“剥”和“范”是腌渍加工的意思。许慎《说文解字》解释“范菜者，酸菜也”。下列关于酸菜制作的叙述正确的是（ ）
A．为了降低杂菌污染的风险，发酵前需要对器具进行灭菌处理
B．保证泡菜坛内的无氧环境，腌制时应将泡菜坛装满
C．泡菜坛内液体表面可能出现一层由酵母菌繁殖形成的白膜
D．腌制过程中乳酸和亚硝酸盐的含量会先增加后减少再趋于稳定
【答案】C
【分析】制作泡菜时要用到乳酸菌，乳酸菌是一种厌氧菌，在无氧的条件下，乳酸菌发酵产生乳酸，使得菜呈现一种特殊的风味，还不改变菜的品质。因此泡菜制作的原理是需利用乳酸菌在无氧条件下发酵形成乳酸，然后制作成泡菜。
【详解】A、为了降低杂菌污染的风险，发酵前需要对器具进行消毒处理，A错误；
B、制作泡菜所需要的微生物为乳酸菌，为厌氧菌，为保证泡菜发酵过程中的无氧环境，在装坛发酵前后需要检泡菜坛有无裂纹和砂眼，并对泡菜坛进行用水密封坛口处理，B错误；
C、在泡菜制作过程中，泡菜发酵液的营养丰富，其表面往往含有适量的氧气，适合酵母菌生长繁殖，酵母菌生长繁殖会在泡菜坛液面的形成一层白膜，C正确；
D、在泡菜腌制过程中亚硝酸盐的含量会先增加后减少再趋于稳定，乳酸菌的含量先增加，后由于营养物质缺乏，pH下降而减少；乳酸的含量会一直增加，后稳定，D错误。
故选C。
5．（2022·浙江·一模）使用如图的发酵罐进行啤酒的现代化工业发酵。下列相关叙述错误的是（ ）
A．啤酒酵母在接入发酵罐前需要对其进行扩大培养
B．通过pH检测装置检测发酵液pH可监测发酵进程
C．发酵中期需使用叶轮搅拌发酵液以增加发酵液中的溶解氧
D．夏季高温时，可使用冷却水对罐体进行降温处理以免发酵失败
【答案】C
【分析】啤酒发酵时需要利用酵母菌的呼吸作用，为了让菌种数量增加，一般先对其进行扩大培养，先进行有氧呼吸，再营造密闭环境进而进行无氧呼吸产生酒精，在发酵过程中因酵母菌进行无氧呼吸使得发酵液处于一种缺氧、酸性的环境。
【详解】A、为了提高发酵菌种的数量，常常在接入发酵罐前需要对其进行扩大培养，A正确；
B、在啤酒的发酵过程中会随着发酵时间的延长pH慢慢降低，因此可通过pH检测装置检测发酵液pH可监测发酵进程，B正确；
C、发酵中期需要严格的无氧环境，不需要增加发酵液中的溶解氧，C错误；
D、酵母菌在发酵时需要严格控制发酵温度，夏季高温时，可使用冷却水对罐体进行降温处理以免发酵失败，D正确。
故选C。
6．（2022·福建漳州·统考一模）唐代苏敬的《新修本草》云：“凡作酒醴须曲，而蒲桃（即葡萄）、蜜等酒独不用曲”。葡萄不仅可以酿造果酒，还可以酿造果酷，制作过程如下图。下列分析正确的是（ ）
A．“蒲桃、蛋等酒独不用曲”说明葡萄酿制果酒不需要微生物
B．取新鲜葡萄制作果酒，果醋时应先去梗再冲洗
C．制作果酒、果醋的后期都需要密闭处理
D．图中①过程比②过程产生的气体多
【答案】D
【分析】据图分析，图中①是酒精发酵为果酒的过程，②是醋酸发酵为果醋的过程，据此分析作答。
【详解】A、葡萄酿制果酒需耍葡萄果皮上的野生醇母菌，A错误；
B、冲洗时葡萄时，果皮难免会有破损，果肉会被水中的微生物污染，增加发酵失败可能。因此取新鲜葡萄制作果酒、果醋时应先冲洗再去梗、B错误；
C、制作果酒是利用酵母菌发醇，后期密闭处理、利于酵母菌无氧呼吸产生酒精；制作果醋是利用醋酸菌发酵，醋酸菌是好氧菌，不需要密闭处理，C错误；
D、图中①过程表示酒精发酵、酵母菌无氧呼吸产生CO2，图中②过程表示醋酸菌利于乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为醋酸和水，不产生气体，D正确。
故选D。
7．（2023·北京海淀·一模）果啤以浓郁突出的啤酒醇香和水果风味，备受广大消费者青睐。以下是以库尔勒香梨为主要原料，利用啤酒酵母，结合啤酒工艺工业生产果啤的基本工艺流程图。下列叙述正确的是（ ）
A．图中两种原料的预处理方式不同，按比例混合后可直接作为发酵培养基
B．保存在斜面培养基中的菌种，可以直接接种于发酵培养基中进行发酵
C．为了让CO2更易排出，发酵过程中空气的进气量不宜太大
D．影响果啤风味的因素除了菌种外，还有原料、pH、温度等
【答案】D
【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。
【详解】A、图中两种原料的预处理方式不同，按比例混合后不可直接作为发酵培养基，麦汁需要进行煮沸，A错误；
B、保存在斜面培养基中的菌种，不可以直接接种于发酵培养基中进行发酵，需要经过活化后才应用于生产，B错误；
C、发酵利用的是酵母菌的无氧呼吸，不需要通入空气，C错误；
D、影响果啤风味的因素除了不同的菌种外，还有不同的原料、pH、温度、氧气等环境因素，D正确。
故选D。
8．（2023·福建厦门·统考二模）野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，赖氨酸营养缺陷型突变菌由于发生基因突变只能在添加了赖氨酸的培养基上生长。下图为以野生型菌株为材料，诱变、纯化赖氨酸营养缺陷突变株的部分流程图，数字代表培养基，A、B、C表示操作步骤。下列有关说法正确是（ ）
A．野生型大肠杆菌能够合成所需的全部氨基酸，因此培养基中无需提供氮源
B．①②④培养基中需添加赖氨酸，而③培养基中不能添加赖氨酸
C．需将①中的菌液适当稀释后，用接种环蘸取菌液在②上进行划线接种
D．从④培养基中挑取乙菌落进行纯化培养即可获得所需突变株
【答案】B
【分析】由题图信息分析可知，图中首先利用稀释涂布平板法分离细菌，然后运用影印法将菌种接种到两种培养基中，分别是基本培养基、完全培养基；野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，而氨基酸营养缺陷型菌株由于发生基因突变无法合成某种氨基酸只能在完全培养基上生长，据此利用培养基的种类便可以选择出氨基酸突变株。
【详解】A、野生型大肠杆菌菌株虽然能合成所需的全部氨基酸，但培养基中仍需提供氮源，A错误；
B、图中①②④为完全培养基需添加赖氨酸，③为基本培养基不能添加赖氨酸，B正确；
C、需将①中的菌液适当稀释后，涂布器将菌液均匀的涂布在②表面，C错误；
D、甲在基本培养基中无法生长，在完全培养基中可生长，说明甲是氨基酸缺陷型菌落，故经C过程影印及培养后，可从④培养基中挑取甲菌落进行纯化培养，D错误。
故选B。
9．（2023·安徽宿州·一模）某兴趣小组按下图所示的方法对鲜奶中的细菌数目进行检测，当菌落数目稳定时，3个平板上的菌分别为35、33、34．有关叙述正确的是（ ）
A．常采用高压蒸汽灭菌法对鲜奶进行灭菌
B．调节培养基的pH应在灭菌后凝固前进行
C．1mL该鲜奶中的细菌数约为3.4×106个
D．用图示方法统计的结果往往比实际值偏高
【答案】C
【分析】图中实验使用稀释涂布平板法，估算每毫升鲜奶中的细菌数目；使用稀释涂布平板法对微生物计数，数值往往偏小，原因是当两个或多个细胞连在一起时，在平板上只能观察到一个菌落。
【详解】A、实验的目的是检测鲜奶中的细菌数，若使用高压蒸汽灭菌处理鲜奶，则鲜奶就不含有细菌了，A错误；
B、调节培养基的pH应在灭菌前进行，B错误；
C、从图中可以看出涂布时添加的0.1mL的鲜奶，共经过了10×10×10×10=104倍稀释，根据公式（C/V）×稀释倍数，其中C=（35+33+34）÷3=34，V=0.1，即所以1mL鲜奶中细菌数约为=（34/0.1）×104=3.4×106个/mL，C正确；
D、使用稀释涂布平板法对微生物计数，数值往往偏小，原因是当两个或多个细胞连在一起时，在平板上只能观察到一个菌落，D错误。
故选C。
10．（2023·辽宁·辽宁实验中学校联考模拟预测）将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培养基。M培养基可用于真菌a的筛选，某同学将获得的真菌a利用如图的方式进行稀释，统计甲、乙，丙三个平板中的菌落数分别是110、140和149。下列分析正确的是（ ）
A．若真菌a为酵母菌，通常采用血细胞计数板对活菌进行计数
B．若在培养真菌a的培养基中添加一定量的青霉素，可抑制细菌的繁殖
C．选取甲、乙、丙三个培养基的目的是排除无关变量对实验的干扰
D．根据三个平板中的菌落数可推算培养液中真菌a的密度为1.33×107个/mL
【答案】B
【分析】血球计数板可以用于人体内红、白血球计数之用，也用于计算一些细菌、真菌、酵母等微生物的数量，因此若测定培养液中的菌体数，可在显微镜下用血球计数板直接计数，也可稀释涂布平板，根据菌落数计算活菌数目。
【详解】A、酵母菌相对较大，可采用血细胞计数板进行计数，但该方法统计的是活菌数和死菌数的总和，A错误；
B、青霉素可抑制细菌的繁殖，避免细菌对真菌a的干扰，B正确；
C、选取甲、乙、丙三个培养基的目的是减小实验误差，C错误；
D、根据三个平板中的菌落数可推算培养液中真菌a的密度为（110+140+149）÷3÷0.1×105=1.33×108个/mL，D错误。
故选B。
11．（2022·河北唐山·开滦第二中学统考模拟预测）乳链菌肽是由乳酸乳球菌分泌的一种多肽，对许多革兰氏阳性菌，尤其是对引起食品腐败的细菌具有强烈的抑制作用，是一种高效无毒的天然食品防腐剂。为了解乳链菌肽对革兰氏阳性菌的作用方式是抑制细菌生长、溶菌性杀死细菌（细胞破裂）还是非溶菌性杀死细菌，科研人员将乳链菌肽加入革兰氏阳性菌菌液中，随着发醝时间的延长，检测革兰氏阳性菌的活菌数，实验结果如下图所示。已知加入乳链菌肽前后，除去菌体的上清液中核酸含量未变。下列叙述正确的是（ ）
A．革兰氏阳性菌活菌的计数方法为平板划线法或稀释涂布平板法
B．除去菌体的上清液中核酸含量没有明显变化，说明是抑制细菌生长
C．若直接服用该防腐剂，则一定改变肠道中的正常菌群
D．乳链菌肽对革兰氏阳性菌的作用方式为非溶菌性杀死细菌差
【答案】D
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、平板划线法只能用于接种微生物，不能用于计数，A错误；
BD、对照组曲线1活菌数的变化呈S型，曲线2在加入乳链菌肽后活菌数降为零，且加入乳链菌肽前后，除去菌体的上清液中核酸含量未变，由此推测不是抑制细菌生长，应是乳链菌肽对革兰氏阳性菌的作用方式为非溶菌性杀死细菌，B错误，D正确；
C、分析题意可知，乳链菌肽是一种高效无毒的天然食品防腐剂，是由乳酸乳球菌分泌的一种多肽，若口服会被分解而失去作用，不一定会改变肠道中的正常菌群，C错误。
故选D。
12．（2023·江苏·一模）精氨酸依赖型菌株不能在缺少精氨酸的培养基上正常生长，但可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。如图为野生型谷氨酸棒状杆菌经诱变获得精氨酸依赖型菌并进行筛选的过程示意图。下列相关叙述错误的是（ ）
A．野生型菌液的培养皿中不会出现菌落
B．乙培养基与甲相比可能缺少了精氨酸
C．紫外线照射可导致谷氨酸棒状杆菌发生可遗传变异
D．乙中的菌落是通过影印法接种获得的，菌落A为鸟氨酸发酵的优良菌种
【答案】D
【分析】由图分析可知，图中①表示将紫外线照射处理的菌液接种在缺乏精氨酸的培养基上，②表示向培养基中添加精氨酸后继续培养，图甲中有A、B两个菌落，图乙中只有A菌落，因此甲中A表示野生型谷氨酸棒状杆菌，其中A为野生型谷氨酸棒状杆菌，B为精氨酸依赖型菌株。
【详解】A、液体培养基的作用是让细菌快速大量繁殖，细菌在固体培养基上才能形成菌落，故野生型菌液的培养皿中不会出现菌落，A正确；
B、图示为野生型谷氨酸棒状杆菌经诱变获得精氨酸依赖型菌并进行筛选的过程示意图，精氨酸依赖型菌株不能在缺少精氨酸的培养基上正常生长，因此A为野生型谷氨酸棒状杆菌，B为精氨酸依赖型菌株，乙培养基上没有B菌落，据此推测乙培养基与甲相比缺少了精氨酸，B正确；
C、野生型谷氨酸棒状杆菌能在缺少精氨酸的培养基上正常生长，精氨酸依赖型菌株不能在缺少精氨酸的培养基上正常生长，紫外线照射可导致谷氨酸棒状杆菌发生基因突变，产生可遗传变异，经过筛选可获得精氨酸依赖型菌株，C正确；
D、由图观察可知，乙中的菌落是通过影印法获得的，菌落A是野生型菌种，菌落B为精氨酸依赖型菌株，B可作为鸟氨酸发酵的优良菌种，D错误。
故选D。
13．（2022·浙江嘉兴·统考一模）青霉素是人类发现的第一种抗生素，由青霉菌分泌。科学家发现青霉菌在葡萄糖含量较低时会分泌青霉素杀死其他细菌，以保证自身生存所需的能量供应。下列关于工业化大规模生产青霉素过程的叙述，正确的是（ ）
A．青霉素具有杀菌作用，发酵罐无需严格灭菌
B．选育出的高产青霉菌菌株可直接用于大型发酵
C．降低发酵液中的葡萄糖浓度，有利于青霉菌增殖
D．发酵过程中需严格控制温度、pH和溶解氧等培养条件
【答案】D
【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术；发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配制、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面。
【详解】A、由于杂菌能分泌青霉素酶，从而分解青霉素，为防止杂菌生长，故发酵罐需要严格灭菌，A错误；
B、青霉素高产菌种是诱变育种产生的，选育出的高产菌种需经扩大培养和纯化后，确保能增加自身的浓度和纯度，才可以接种到发酵罐，以保证发酵效率的提高，B错误；
C、在提供相同含量的碳源情况下，葡萄糖溶液单位体积中溶质微粒较多，会导致细胞失水，所以发酵液中的碳源不宜使用葡萄糖；而乳糖是二糖，可被水解为半乳糖和葡萄糖，是青霉菌生长的最佳碳源，可以被青霉菌缓慢利用而维持青霉素分泌的有利条件，C错误；
D、青霉菌属于需氧生物，且微生物发酵过程，所以在发酵罐内发酵需严格控制溶解氧、温度、PH等条件，D正确。
故选D。
14．（2022·浙江·统考模拟预测）影印平板培养法，是使在一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法。某学者利用此方法研究大肠杆菌抗链霉素性状产生的原因，先将原始菌种接种在1号培养基上，培养出菌落后，将灭菌绒布在1号上印模，绒布沾上菌落并进行转印，使绒布上的菌落按照原位接种到2号和3号培养基上。待3号上长出菌落后，在2号上找到对应的菌落，然后接种到不含链霉素的4号培养液中，培养后再接种到5号培养基上，并重复以上步骤。实验过程如图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A．在大肠杆菌培养操作过程中，所用的实验器具和试剂都要高压蒸汽灭菌
B．11号培养基中观察到的菌落数一定等于初始时接种到该培养基上的菌体数
C．4号与8号培养液中，抗链霉素菌株的比例逐渐增大
D．大肠杆菌抗链霉素的性状是由链霉素的选择作用引起的
【答案】C
【分析】微生物实验室培养的核心是防止杂菌污染，常用的灭菌方法为：高压蒸汽灭菌法、灼烧灭菌、干热灭菌法等。接种环、涂布器常用灼烧灭菌法灭菌，培养基一般用高压蒸汽灭菌法灭菌，玻璃器皿常用干热灭菌法灭菌。该实验中含链霉素的培养基是选择培养基，能筛选出抗链霉素的大肠杆菌。
先将原始菌种接种在1号培养基上，培养出菌落后，将灭菌绒布在1号上印模，绒布沾上菌落并进行转印，使绒布上的菌落按照原位接种到2号和3号培养基上。3号上长出的菌落为抗链霉素的菌落，在2号上找到对应的菌落，然后接种到不含链霉素的4号培养液中扩大培养，培养后再接种到5号培养基上，并重复以上步骤。可见通过影印平板培养法接种时，是筛选出抗链霉素的大肠杆菌继续培养。
【详解】A、在大肠杆菌培养操作过程中，并非所用的实验器具和试剂都要高压蒸汽灭菌，如涂布器用灼烧灭菌法灭菌，玻璃器皿常用干热灭菌法灭菌，A错误；
B、据题意可知，通过影印平板培养法接种时，是筛选出抗链霉素的大肠杆菌继续培养。随着选择代数的增加，抗链霉素菌株的比例逐渐增大，故11号培养基中观察到的菌落数大于初始时接种到该培养基上的菌体数，B错误；
C、据题意，将2号平板上抗链霉素的大肠杆菌接种到4号培养液中，再将4号菌液接种到5号培养基，待5号长出菌落后通过影印平板培养法接种6号和7号，7号培养基长出的菌落是抗链霉素的，在6号培养基找到对应的菌落，接种到8号培养液，由于选择代数的增加，4号与8号培养液中，抗链霉素菌株的比例逐渐增大，C正确；
D、链霉素起到选择作用，不能决定大肠杆菌变异的方向，大肠杆菌抗链霉素的性状是基因突变的结果，而不是由链霉素的选择作用引起的，D错误。
故选C。
15．（2023·湖北·二模）垃圾分类是对垃圾收集处置传统方式的改革，是对垃圾进行有效处置的一种科学管理方法。去掉可回收的、不易降解的物质，可以减少垃圾数量达60%以上，从而减少污染。处理生活垃圾的有效方法之一是用微生物对其进行降解，下图表示筛选高效降解淀粉菌种的过程。相关叙述正确的是（ ）
A．乳制品厂废水中含有大量淀粉，该废水是分离高效降解淀粉菌种的首选样品
B．该实验中菌液接种到培养基上所用的接种工具只能选择火焰灼烧过的接种环
C．稀释涂布平板法除可以用于分离微生物外，也常用来统计样品中活菌的数目
D．由于菌种对碘的分解能力不同，所以菌落①与菌落②产生透明圈的大小不同
【答案】C
【分析】微生物常用的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法，平板划线法的接种工具是接种环，稀释涂布平板法的接种工具是涂布器。稀释涂布平板法除可以用于分离微生物外，也常用来统计样品中活菌的数目。淀粉遇碘液变蓝，在含淀粉的培养基中滴加碘液，淀粉分解菌菌落周围的淀粉被分解，会出现透明圈。
【详解】A、乳制品不会含有大量的淀粉，所以乳制品厂废水并不是分离高效降解淀粉菌种的首选样品，A错误；
B、该实验中菌液接种到培养基上所用的方法应为稀释涂布平板法，接种工具为涂布器，B错误；
C、稀释涂布平板法是微生物常用的接种方法，除可以用于分离微生物外，也常用来统计样品中活菌的数目，C正确；
D、菌落①与菌落②产生透明圈的大小不同是因为菌种对淀粉的分解能力不同，D错误。
故选C。
二、多选题
16．（2022·江苏徐州·徐州市第七中学校考模拟预测）北魏农学巨著《齐民要术》记载了许多古人在实际生产中积累的经验，也蕴藏着众多生物学知识。请阅读表格中的古籍原文，判断以下相关叙述，正确的是（ ）
A．“浸曲发”时用的酒曲中，微生物的呼吸类型为兼性厌氧型
B．“鱼眼汤”是指液面冒出小气泡的现象，由微生物呼吸作用释放CO2形成
C．“衣生”指发酵液表面形成一层菌膜的现象，主要是醋酸菌大量繁殖形成的
D．“令没菜把即止”指将蔬菜全部浸没在盐水中，主要是为了让蔬菜充分吸收盐分
【答案】BC
【分析】1、参与酒精的制作的微生物是酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型微生物，在有氧条件下进行有氧呼吸将葡萄糖分解为二氧化碳和水，在无氧条件下生成酒精和二氧化碳。
2、果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸．当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
3、泡菜制作的原理是利用乳酸菌在无氧条件下发酵形成乳酸。
【详解】A、酵母菌的呼吸类型为兼性厌氧型，但“浸曲发”时用的酒曲中，利用的是酵母菌酒精发酵，此时酵母菌的呼吸类型为厌氧型，A错误；
B、“鱼眼汤”是指酵母菌在呼吸过程中产生CO2，使溶液中出现气泡，B正确；
C、醋酸菌可将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，会在变酸的酒的表面大量繁殖形成菌膜，所以“衣生”指发酵液表面形成一层菌膜的现象，主要是醋酸菌大量繁殖形成的，C正确；
D、“令没菜把即止”指将蔬菜全部浸没在盐水中，主要是为了让蔬菜处于缺氧的条件下，有利于乳酸菌生长繁殖，让蔬菜变酸，D错误。
故选BC。
17．（2023·山东潍坊·统考一模）聚羟基脂肪酸酯（PHA）是某些细菌以蔗糖为原料合成的一种胞内聚酯，具有类似于合成塑料的物化特性及合成塑料所不具备的生物可降解性。PHA进入海洋后，可以被动物食用，约1 ~3年完全自然降解。下图为PHA的生产工艺流程，有关分析正确的是（ ）
A．培养基A需添加蔗糖，为选择培养基
B．菌株M用血细胞计数板进行直接计数
C．发酵罐内应严格控制温度、pH等条件
D．采用过滤、沉淀的方法得到PHA产品
【答案】AC
【分析】发酵条件直接会影响微生物的生长和发酵产品的质量，发酵条件包括温度、pH、溶解氧、通气量等。温度条件的调控可通过向冷却夹层通入冷水来调控；pH条件的调控可在培养基中加入缓冲液，在发酵过程中加酸或碱；溶解氧的调控需根据微生物的代谢类型，若微生物是需氧型的，可通过空气入口通入空气，并调整搅拌叶轮转速增加溶解氧，若微生物是厌氧型的，需封闭空气入口，建立厌氧环境等。
如果发酵产物是微生物本身可在发酵结束之后，采用过滤沉淀的方法，将菌体分离和干燥即可得到产品，如果产品是代谢物可根据产物的性质，采取适当的提取分离和纯化措施来获得产品
【详解】A、由题干信息“聚羟基脂肪酸酯是细菌以蔗糖为原料合成的胞内聚酯”可知：生产聚羟基脂肪酸酯需要以蔗糖为原料，故培养基中需添加蔗糖，在盐浓度60g／L，PH为10的培养基中，只有耐盐碱的微生物才能生存，其他微生物因无法适应这一环境而被淘汰，所以该培养基是选择培养基，A正确；
B、血细胞计数板比细菌计数板厚，常用于相对大的真菌等的计数，菌株M属于细菌个体较小，应用细菌计数板进行直接计数，B错误；
C、在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量产物浓度，以了解发酵进程，还要及时添加必需的营养组分，严格控制温度PH和溶解氧等发酵条件，因为环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成，C正确；
D、结合题意和分析可知，PHA是细菌的代谢物，应采用提取、分离、纯化措施来获取产品，D错误。
故选AC。
18．（2022·山东·济南一中校联考模拟预测）土壤被称为“微生物的天然培养基”。科学工作者要从土壤中分离或鉴定需要的微生物，需要配制选择培养基，再通过接种、培养、纯化、筛选等技术获得微生物。下列关于培养基对微生物的分离或鉴定的叙述，正确的是（ ）
A．从土壤中分离出酵母菌和霉菌，需要配制含青霉素的培养基，在灭菌后将培养基调至酸性
B．从土壤中分离出纤维素的分解菌，需要配制含纤维素为唯一碳源的培养基且加刚果红
C．以尿素为唯一氮源的培养基，采用稀释涂布平板法可分离出分解尿素的分解菌
D．从土壤中分离固氮微生物需要配制不含氮源的培养基，且培养条件要适宜
【答案】BCD
【分析】选择培养基是指一类根据特定微生物的特殊营养要求或其对某理化因素抗性的原理而设计的培养基。具有只允许特定的微生物生长，而同时抑制或阻止其他微生物生长的功能。
【详解】A、青霉素能杀死细菌，对真菌无影响，因此，从土壤中分离出酵母菌和霉菌，需要配制含青霉素的培养基，且调试pH需要在灭菌前，A错误；
B、纤维素分解菌含纤维素水解酶能利用纤维素，其他微生物不能利用纤维素，刚果红和纤维素形成红色复合物，纤维素被分解后出现透明圈，所以能分离和筛选纤维素的分解菌，B正确；
C、分解尿素的分解菌能合成脲酶，把尿素分解成NH3，NH3再转化NO3-、NH4+被植物利用，其他微生物细胞中不能合成脲酶，不能利用尿素，在以尿素为唯一氮源的培养基上不能生长，C正确；
D、固氮菌能利用空气中N2，其他微生物不能利用，因此需要配制不含氮源的培养基进行筛选，且培养条件要适宜，D正确。
故选BCD。
19．（2023·山东泰安·泰安一中统考一模）如图所示，科研人员利用诱变方式选育可高产β-胡萝卜素的三孢布拉霉负菌。未突变菌不能在含有β-紫罗酮的培养基上生长。随β-胡萝卜素含量增加，菌体颜色从黄色加深至橙红色。图甲为选育菌种及获得β-胡萝卜素的流程。下列说法正确的是（ ）
A．要得到图乙所示的菌落，可用稀释涂布平板法进行②操作，然后培养
B．经过程①紫外线照射的三孢布拉霉负菌有的不能在含β-紫罗酮培养基上生长
C．进行③操作时，应选择较小的橙红色菌落中的菌株继续接种培养
D．能在添加β-紫罗酮的乙上长成菌落的细菌，其遗传物质不一定发生改变
【答案】AB
【分析】微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是纯化的菌落。稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂适体培养基的表面，进行培养。
【详解】A、要得到乙培养基中的分布均匀的菌落，可用稀释涂布平板法接种，A正确；
B、过程①紫外线照射的作用是利用物理因素诱导基因突变，由于突变具有低频性和不定向性，被照射的三孢布拉霉负菌有的突变，有的没有，未突变菌不能在含有β-紫罗酮的培养基上生长，B正确；
C、随β-胡萝卜素含量增加，菌体颜色从黄色加深至橙红色，橙红色的菌体为高产菌，进行③操作时，应选择较大的橙红色菌落中的菌株继续接种培养 ，C错误；
D、根据题干可知，未突变的三孢布拉霉负菌不能在含有β-紫罗酮的培养基上生长，因此能在添加β-紫罗酮的乙培养基上长成菌落的细菌，发生了突变，其遗传物质一定发生了改变，D错误。
故选AB。
20．（2022·江苏扬州·统考模拟预测）根据食品安全国家标准（GB19645-2010）规定，每毫升合格的牛奶中细菌总数不超过50000个。某兴趣小组利用恒温水浴锅对新鲜牛奶进行消毒后，进行细菌总数测定，主要步骤如下图所示。相关叙述正确的是（ ）
A．步骤①中用巴氏消毒法对新鲜牛奶进行消毒，可以减少营养物质的损失
B．步骤②对牛奶进行梯度稀释可以使聚集的微生物分散，便于在培养基表面形成单菌落
C．步骤③中牛肉膏蛋白胨培养基要先高压蒸汽灭菌再调pH，以防止高温影响pH的稳定
D．实验结束时培养基上的菌落可能不止一种，若平均菌落总数少于50个则表明消毒合格
【答案】ABD
【分析】消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子）的手段，常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法；灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子），常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。
【详解】A、80℃ 、15min～30min处理新鲜牛奶属于巴氏消毒法，采用短时高温处理的目的是尽量减少食物中营养物质的损失，A正确；
B、步骤②将牛奶进行梯度稀释的目的是使聚集在一起的微生物分散，便于能在培养基表面形成单个菌落，B正确；C、牛肉膏蛋白胨培养基配制时应先调pH再灭菌，C错误；
D、由于生牛奶中的微生物可能不止一种，而牛肉膏蛋白胨培养基属于天然培养基，细菌、真菌等均可生长，因此，在实验中，培养基上可能不止出现一种菌落；依据样品液稀释1000倍，接种液体积为1mL，计算推测若平均菌落总数少于50个，则表明灭菌后牛奶中细菌总数不超过50000个，灭菌合格，D正确。
故选ABD。工艺名称
古籍原文
酿酒技术
浸曲发，如鱼眼汤，净淘米八斗，炊作饭，舒令极冷
制醋技术
大率酒斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。。。。。。七日后当臭，衣生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成
泡菜制作
技术
作盐水，令极咸，于盐水中洗菜，即内（纳）瓮中。其洗菜盐水，澄取清者，泻著瓮中，令没菜把即止，不复调和