四川省南充市西充中学2022-2023学年高二下学期期中生物试题（Word版附解析）

这是一份四川省南充市西充中学2022-2023学年高二下学期期中生物试题（Word版附解析），共32页。试卷主要包含了单选题，填空题等内容，欢迎下载使用。

时间:90分钟 满分：100分
一、单选题（本大题1-30题每题1分，31-40题每题2分，共50.0分）
1. 下列关于“腐乳的制作”的实验，叙述正确的是（ ）
A. 控制发酵温度的主要目的是腐乳调味
B. 腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用
C. 毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉
D. 卤汤中酒的含量一般控制在21%左右
【答案】B
【解析】
【分析】腐乳制作的原理：（1）腐乳的发酵在多种微生物的协同作用下进行，其中起主要作用的是毛霉，它是一种丝状真菌，新陈代谢类型是异养需氧型；（2）毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。
腐乳制作的流程：。
腐乳发酵中杂菌的控制：①事先用馒头放在温暖潮湿处培养毛霉，当馒头上长出青点（青霉菌落）、黄点（黄曲霉菌落）、红点（红曲霉菌落）时，及时用镊子和解剖针剔除，保留白毛让其生长黑色孢子；②消毒：将豆腐块加热，杀死表面的微生物，防止其他微生物的干扰．
③接种：将上述馒头上的孢子弹在豆腐块上，并用灭菌后的食品袋罩上，放在适宜的温度下培养；
腐乳制作所需豆腐的含水量及意义：豆腐含水量以70%为宜．毛霉为异养需氧型真菌，若含水量过高，影响毛霉的有氧呼吸，豆腐不宜成块；若含水量过少，则不利于毛霉的生长，毛霉的代谢也离不开水。
配制卤汤时酒量的控制：加酒的目的之一是杀死微生物．如果过少，达不到杀死微生物的目的，导致豆腐腐败；若过多，不但杀死了微生物，而且会因酒精度过高抑制了酶的活性，从而影响腐乳的成熟，同时还会因酒精含量过高而影响腐乳的风味．一般应控制在12%左右。
【详解】控制发酵温度的主要目的是利于毛霉的生长和代谢，A错误；腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用，B正确；毛霉的主要作用是产生蛋白酶和脂肪酶，分解蛋白质和脂肪，C错误；卤汤中酒的含量一般控制在12%左右，D错误。
【点睛】熟悉制作的原理、流程及其注意事项是判断本题的关键。
2. 果酒和果醋制作过程中，发酵条件的控制至关重要。下列相关措施正确的是（ ）
A. 葡萄汁要装满发酵瓶，造成无氧环境，有利于发酵
B. 果酒发酵过程中，每隔12 h左右打开瓶盖一次，放出CO2
C. 果酒发酵过程中温度控制在30 ℃，果醋发酵过程中温度控制在20 ℃
D. 在果醋发酵过程中，要适时通过充气口充气，以利于醋酸菌的代谢
【答案】D
【解析】
【分析】果酒和果醋发酵过程：将葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3的空间，并封闭充气口；在果酒发酵过程中，每隔12 h左右将瓶盖拧松一次，不能打开瓶盖；果酒发酵过程中温度控制在18~30 ℃，而果醋发酵过程中温度控制在30~35 ℃。
【详解】A、将葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3的空间，并封闭充气口，防止发酵液溢出，A错误；
B、葡萄酒发酵过程中，每隔12h左右拧松瓶盖一次，放出二氧化碳，不能打开瓶盖，目的是防止杂菌污染，B错误；
C、果酒发酵过程中温度控制在18~30 ℃，而果醋发酵过程中温度控制在30~35 ℃，C错误；
D、醋酸菌是好氧菌，因此在果醋发酵过程中，要适时通过充气口充气，有利于醋酸菌的代谢，D正确。
故选D。
3. 苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如下图所示，①为土壤样品。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 图中②培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源
B. 如果要测定②中活细菌数量，常采用稀释涂布平板法
C. 若图中④为对照实验，则其中应以苯酚作为唯一的碳源
D. 使用平板划线法可以在⑥上获得单菌落
【答案】C
【解析】
【分析】1、从土壤中筛选目的微生物的流程一般为：土壤取样→样品的稀释→涂布培养→挑选能生长的菌落→鉴定。
2、微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、由题干信息分析可知，该实验的目的是从土壤中筛选获得只能降解利用苯酚的细菌菌株，故图中②培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为唯一碳源，以增加目的菌的浓度，A正确；
B、如果要测定②中活细菌数量，常采用稀释涂布平板法，B正确；
C、④与⑤培养基的主要区别是④的培养基不加入苯酚作碳源，⑤的培养基加入苯酚作碳源，这样才能形成对照，C错误；
D、平板划线法和稀释涂布平板法都可能在培养基上形成单个菌落，D正确。
故选C。
4. 关于发酵技术，下列说法错误的是（ ）
A. 利用发酵技术，在羊奶中加入乳酸菌可制成乳酸制品
B. 制作泡菜的坛子加水密封隔绝空气是为了抑制乳酸菌繁殖
C. 霉菌和酵母菌两种（类）微生物在白酒的酿造过程中都有作用
D. 将新鲜的猪肉放在冰箱，其目的是抑制微生物的生长繁殖
【答案】B
【解析】
【分析】微生物的发酵在食品生产中具有重要的意义，如制作馒头、面包、酿酒等需要用到酵母菌的发酵；制作酸奶、泡菜需要用到乳酸菌的发酵。
【详解】A、制酸奶要用到乳酸菌，乳酸菌发酵产生乳酸，使得酸奶有一种特殊的酸味，A正确；
B、乳酸菌属于厌氧菌，制作泡菜时要密封，创造无氧环境，利于乳酸菌的发酵，B错误；
C、酿酒一定要加入酒曲，酒曲中的微生物主要是酵母菌和霉菌，其中霉菌主要起到糖化的作用，把米中的淀粉转化成葡萄糖，酵母菌在无氧的条件下，再把葡萄糖分解成酒精和二氧化碳，C正确；
D、冰箱中温度低，能抑制细菌、真菌等微生物的生长和繁殖，使其繁殖速度慢，数量少，不能充分分解食物，达到保鲜的目的，D正确。
故选B。
5. 豆豉是大豆经过发酵制成的一种食品。为了研究影响豆豉发酵效果的因素，某小组将等量的甲、乙两菌种分别接入等量的A、B两桶煮熟大豆中并混匀，再将两者置于适宜条件下进行发酵，并定期取样观测发酵效果。以下推测不合理的是
A. 该实验的自变量是菌种，温度属于无关变量
B. 大豆发酵过程中部分蛋白质转变为多肽，形成豆豉的独特风味
C. 若容器内上层大豆发酵效果优于底层，则发酵菌为厌氧菌
D. 煮熟大豆使蛋白质变性，有利于菌体分泌酶作用于蛋白质
【答案】C
【解析】
【详解】根据题干信息分析，该实验的自变量是菌种的种类（甲乙两种菌种），而温度属于无关变量，A正确；大豆发酵过程中部分蛋白质转变为多肽，形成豆豉的独特风味，B正确；若容器内上层大豆发酵效果优于底层，说明发酵菌为需氧型，C错误；煮熟大豆使蛋白质变性，有利于菌体分泌酶作用于蛋白质，D正确。
6. 氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易降解，会污染环境,小勇带领的研究小组为 了筛选出能高效降解氯苯的微生物 SP1 菌，设计了两组培养基，配方如下表，I 号和 II 号培 养基都属于
A. 通用培养基B. 液体培养基C. 选择培养基D. 气体培养基
【答案】B
【解析】
【分析】培养基为微生物提供生长、繁殖和积累代谢产物的营养物质。营养物质归纳为碳源、氮源、生长因子、无机盐和水。根据化学成分分为合成培养基、天然培养基等；根据用途分选择培养基、鉴别培养基；根据性质分为液体、半固体和固体培养基。
【详解】Ⅰ号培养基是为了获得更多的菌株，属于通用培养基，选择的作用不是很强，因为在培养基中含有蛋白胨和牛肉膏；Ⅱ号培养基是为选择出SP1菌株，属于选择培养基，因为碳源只能利用氯苯，不能利用氯苯的不能生存，Ⅱ号培养基成分中含氮物质为硝酸铵，可以为SP1菌株提供氮源；但两个培养基中都含有大量蒸馏水，且都不含琼脂，故都属于液体培养基。
故选B。
【点睛】本题综合微生物的培养的相关知识，理解各种培养基的概念以及组成成分，特别是判断培养基是否是选择培养基应该根据培养基的基本成分（碳源、氮源、水、无机盐）来判断。
7. 若除酶外所有试剂均已预保温，则在测定酶活力的试验中，下列操作顺序合理的是
A. 加入酶→加入底物→加入缓冲液→保温并计时→一段时间后检测产物的量
B. 加入底物→加入酶→计时→加入缓冲液→保温→一段时间后检测产物的量
C. 加入缓冲液→加入底物→加入酶→保温并计时→一段时间后检测产物的量
D. 加入底物→计时→加入酶→加入缓冲液→保温并计时→一段时间后检测产物的量
【答案】C
【解析】
【详解】依题意可知，该实验的pH为无关变量，为了排除无关变量的干扰，应控制相同且适宜，而缓冲液能够起到维持反应液的pH恒定的作用，因此需最先加入；酶具有高效性，所以在控制pH恒定的条件下，应先加底物后加酶，让酶促反应在适宜的温度条件下进行，一定时间后检测产物的量。根据题干信息“除酶外所有试剂均已预保温”，所以合理的操作顺序是在调整pH值后，加入酶，即加入缓冲液→加入底物→加入酶→保温并计时→一段时间后检测产物的量，故选C。
【点睛】获取题干信息“除酶外所有试剂均已预保温”，根据实验设计中无关变量要保持适宜且相同，科学设计实验程序。
8. 腐乳随着储存时间的延长， 其蛋白质越来越少，而短肽和氨基酸越来越多。某兴趣小组为了探究其原因，取适量豆腐乳制成样液，设计了如下表所示的实验(注：蛋白酶可以催化蛋白质水解为氨基酸或短肽)。下列相关叙述中错误的是（ ）
A. ①～③组的紫色越来越浅
B. ④组呈紫色的原因是高温使蛋白质的结构更加稳定
C. 该实验的自变量是处理的时间和温度
D. ③与④对照说明37 ℃有利于蛋白酶发挥作用
【答案】B
【解析】
【分析】本题主要是考查温度对酶促反应的影响，高温会使酶的空间结构改变而失去活性，失去活性后温度恢复最适温度，酶的活性不会恢复。随着酶促反应的进行，底物浓度会越来越低。
【详解】腐乳随着储存时间的延长，其蛋白质越来越少，而蛋白质与双缩脲反应呈紫色，其颜色变浅，A正确。④组高温导致蛋白酶变性不能分解蛋白质，B错。①～③组自变量为时间，③与④为温度，C正确。③37 ℃下蛋白质被蛋白酶分解，与双缩脲试剂反应不呈紫色，而④组高温导致蛋白酶变性，不能分解蛋白质，故蛋白质与双缩脲反应呈紫色，D正确。
【点睛】解决本题的关键是理解酶在高温条件下失去活性后，温度降低酶的活性不会恢复，从而准确的判断④组实验。
9. 下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述，正确的是( )
A. 将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处需加大用盐量
B. 果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵
C. 使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌
D. 使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA
【答案】D
【解析】
【分析】
【详解】A、制作腐乳时只有接近瓶口时因为容易感染需要加大用盐量，故A错误。
B、果醋是严格的好氧型细菌只能进行有氧发酵，故B错误。
C、果酒使用的是酵母菌，果醋是醋酸菌，腐乳主要是毛霉，故C错误。
D、它们都是细胞生物，醋酸菌是原核生物，酵母菌和毛霉是真菌，都有细胞壁、核糖体、DNA和RNA，故D正确。
故选D
【点睛】
10. 下列与微生物培养有关的说法，不正确的是（ ）
A. 高压蒸汽灭菌的原理是高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸，影响其生命活动
B. 培养基在50℃时搁置斜面以及倒平板都不需要无菌操作
C. 在微生物培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑pH、温度和渗透压等条件
D. 每个菌落都是由大量微生物组成，菌落的特征可以作为菌种鉴定的重要依据
【答案】B
【解析】
【分析】虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。
【详解】A、蛋白质是生命活动的主要承担者，核酸是细胞的遗传物质，高压蒸汽灭菌的原理是高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸，影响其生命活动，A正确；
B、培养基在50℃时搁置斜面以及倒平板都需要无菌操作，否则会导致杂菌污染，影响实验结果，B错误；
C、在微生物培养过程中，除考虑营养条件外，还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质、氧气、温度和渗透压等条件的要求，以确保微生物能够正常生长，C正确；
D、菌落是指由一个微生物细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的子细胞群体，菌落的特征可以作为菌种鉴定的重要依据，D正确。
故选B。
11. 微生物的实验室培养要用到基础培养基，但培养不同的微生物还需满足其生长、繁殖的特殊需求。下列有关说法正确的是
A. 培养霉菌时需将培养基的pH值调至碱性
B. 培养乳酸杆菌时需在培养基中添加维生素
C. 在基础培养基中添加纤维素用于筛选能分解纤维素的菌种
D. 培养酵母菌时需要提供无氧的条件
【答案】B
【解析】
【详解】A、霉菌生长所需要的pH是酸性，培养霉菌时应将pH调至酸性，在碱性情况下不易繁殖，甚至会导致霉菌死亡，A错误；
B、维生素是乳酸菌生长繁殖所必须的，在体内又不能合成，因此要在培养乳酸菌的培养基中添加维生素，B正确；
C、基础培养基是含有其他碳源的，应该用纤维素为唯一碳源的培养基，只有能分解纤维素的微生物才能生长，不能分解纤维素的微生物因缺乏碳源不能生长，能筛选分解纤维素的菌种；C错误；
D、酵母菌是兼性厌氧型微生物，在有氧条件下繁殖，无氧条件下产生酒精，所以培养酵母菌时需要提供有氧的条件，D错误。
故选B。
12. 从土壤中筛选纤维素分解菌的实验设计，正确的是（ ）
A. 土壤取样→梯度稀释→平板划线操作→挑选菌落
B. 土壤取样→选择培养→稀释涂布平板→挑选菌落
C. 土壤取样→梯度稀释→选择培养→挑选菌落
D. 土壤取样→梯度稀释→稀释涂布平板→选择培养→挑选菌落
【答案】B
【解析】
【分析】从土壤中分离纤维素分解菌的一般步骤是：土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布培养和筛选菌株，筛选纤维素分解菌需要用以纤维素为唯一碳源的选择培养基，纤维素分解菌可以用刚果红染液进行鉴别，在培养基中加入刚果红染液，在其菌落周围会出现透明圈。
【详解】从从土壤中分离纤维素分解菌的一般步骤是：土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布培养和筛选菌株，ACD错误，B正确。
故选B。
13. 下列有关纤维素和纤维素酶的说法正确的是（ ）
A. 纤维素是植物、真菌、细菌细胞的细胞壁的的主要成分
B. 纤维素酶是一种复合酶，其至少包括三种组分
C. 纤维素可以与刚果红形成透明复合物，可以通过是否产生透明圈筛选纤维素分解菌
D. 刚果红染色法只能在培养微生物的时候加入刚果红
【答案】B
【解析】
【分析】土壤中存在着大量纤维素分解酶，包括真菌、细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶。纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长。
【详解】A、纤维素是植物细胞壁的主要成分，细菌细胞壁的成分主要是肽聚糖，真菌细胞壁的成分主要是几丁质，A错误；
B、纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，B正确；
C、刚果红可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌，C错误；
D、刚果红染色法可以在培养微生物的时候加入刚果红，也可以在制作培养基时加入，D错误。
故选B。
14. 利用纤维素酶降解秸秆生产燃料乙醇，对缓解全球能源危机有着重大意义。以下关于分离纤维素分解菌的实验中相关叙述正确的是（ ）
A. 刚果红与纤维二糖和葡萄糖均可形成红色复合物
B. 为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验
C. 用刚果红染色法筛选目的菌时，必须在倒平板时就加入刚果红
D. 设置空白培养基作对照用于判断选择培养基是否起到了选择的作用
【答案】B
【解析】
【分析】在加入刚果红染液的培养基中，刚果红可以与纤维素结合形成红色的复合物。纤维素分解菌可以产生纤维素酶将纤维素分解为葡萄糖，因此在纤维素分解菌的菌落周围，由于缺少纤维素而出现透明圈，这是刚果红染液可以鉴别纤维素分解菌的原理。
【详解】A、刚果红纤维素结合形成红色复合物，但不能与水解后得纤维二糖和葡萄糖形成红色复合物，A错误；
B、筛选纤维素分解菌时，出现透明圈的菌落不一定是纤维素分解菌，为了确定得到的是纤维素分解菌，还需要发酵产纤维素酶的实验，B正确；
C、鉴定纤维素分解菌时，可以使用刚果红对其染色，常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是在倒平板时就加入刚果红，C错误；
D、若要判断选择培养基是否起到了选择作用，需设置接种普通培养基作对照，选择培养基和普通培养基上均出现的菌落即为要筛选的菌种，在普通培养基上出现而选择培养基上末出现的菌落，是被选择淘汰的菌种，空白培养基用于检验培养基灭菌是否严格，D错误。
故选B。
15. 下列有关微生物的叙述正确的是（ ）
A. 不同的微生物对营养物质的需要完全相同
B. 以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基中加入尿素和酚红的目的是相同的
C. 检验某培养基配制是否合格可在该种培养基中接种等量无菌水作对照培养
D. 利用平板划线法或稀释涂布平板法可对微生物进行接种、纯化、分离和计数
【答案】C
【解析】
【分析】虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。
【详解】A、微生物代谢类型不同，对营养物质的需要也不完全相同，A错误；
B、尿素分解菌的氮源是尿素，其他不能利用尿素的菌就不能生长，所以以尿素为唯一氮源的培养基上可以选择尿素分解菌，尿素分解菌可以将尿素分解为氨，可以使酚红指示剂变红，来鉴定该微生物，因此两者的目的不同，B错误；
C、为了检验培养基是否制作合格，需在该培养基上接种等量无菌水作对照，若长菌说明灭菌失败，反之成功，C正确；
D、平板划线法不能用于的计数，释涂布平板法才可以对微生物进行计数，D错误。
故选C。
16. 下列对四种微生物相关的叙述，错误的是（ ）
A. CO2和NH3分别是硝化细菌的碳源和氮源，该生物所需的能源来自NH3的氧化
B. CO2和硝酸盐分别是褐藻的碳源和氮源，该生物所需的能源来自太阳能
C. 糖类和N2是乳酸菌的碳源和氮源，该生物所需的能源来自乳酸的氧化分解
D. 葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源，但CO2一定不是酵母菌的碳源
【答案】C
【解析】
【分析】自养生物的碳源是二氧化碳，异养微生物的碳源是含碳有机物，化能合成作用的硝化细菌的氮源是氨，乳酸菌和酵母菌都是异养生物。
【详解】A、硝化细菌是化能自养需氧型微生物，CO2和NH3分别是硝化细菌的碳源和氮源，该生物所需的能源来自NH3的氧化，A正确；
B、褐藻是自养生物，能进行光合作用，CO2和硝酸盐分别是褐藻的碳源和氮源，该生物所需的能源来自太阳能，B正确；
C、乳酸菌是异养厌氧型微生物，糖类和蛋白质类有机物是乳酸菌的碳源和氮源，该生物所需的能源来自糖类的氧化分解，C错误；
D、酵母菌是异养生物葡萄糖既是酵母菌的碳源也是其能源，酵母菌不能直接利用二氧化碳，D正确。
故选C。
17. 常利用尿素固体培养基的选择作用，对土壤中分解尿素的细菌进行分离和计数，下列叙述正确的是（ ）
A. 分解尿素的细菌是以尿素的分解产物CO2作为碳源
B. 尿素固体培养基的平板中只有少数肉眼可见的菌体
C. 脲酶需要经过内质网和高尔基体的加工后，才具有生物学活性
D. 本实验采用的接种方法是稀释涂布法，涂布不均匀会致实验结果偏小
【答案】D
【解析】
【分析】稀释涂布平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。 计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在(否则一个菌落就不只是代表 一个细胞)，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。
【详解】A、分解尿素的细菌是异养型，不能利用CO2，是以葡萄糖作为碳源，A错误；
B、菌体需要用光学显微镜才能看到，尿素固体培养基的平板中只有少数肉眼可见的菌落，B错误；
C、细菌没有内质网和高尔基体，但是能分泌有活性的脲酶，C错误；
D、稀释涂布法可以用于计数，涂布不均匀会导致菌落重叠，导致统计实验结果偏小，D正确。
故选D。
18. 稀释涂布平板是常用的微生物培养方法，下列相关叙述正确的是（ ）
A. 灭菌锅中取出的培养基应趁烫时倒平板，如此可对培养皿灭菌
B. 稀释涂布平板法不可用于微生物的分离，可用于微生物的计数
C. 用此法估测的数值往往偏小，应以菌落数最多的平板计数为准
D. 为了保证结果准确，一般选择菌落数为30-300的平板计数
【答案】D
【解析】
【分析】稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。
【详解】A、灭菌锅中取出的培养基应放至不烫手时倒平板，A错误；
B、稀释涂布平板法既可用于微生物的分离，也可用于微生物的计数，B错误；
CD、当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，C错误，D正确。
故选D。
19. 下列有关“菌”的描述中，不正确的是（ ）
A. 酵母菌有线粒体能进行有氧呼吸和无氧呼吸
B. 分解尿素的细菌可以利用葡萄糖作为碳源
C. 乳酸菌在细胞质基质中分解乳酸为自身供能
D. 醋酸菌只有在氧气充足时才能进行旺盛的生理活动
【答案】C
【解析】
【分析】原核细胞：细胞较小，无核膜、无核仁，没有成形的细胞核；遗传物质（一个环状DNA分子）集中的区域称为拟核；没有染色体，DNA不与蛋白质结合；细胞器只有核糖体；有细胞壁，成分与真核细胞不同。
【详解】A、酵母菌属于真核生物，细胞中含有线粒体，是有氧呼吸的主要场所，酵母菌是兼性厌氧性微生物，还可以进行无氧呼吸，A正确；
B、葡萄糖的元素组成是C、H、O，分解尿素的细菌可以利用尿素或者葡萄糖作为碳源，B正确；
C、乳酸杆菌是厌氧型微生物，只能进行无氧呼吸产生乳酸，不能产生CO2，C错误；
D、醋酸菌是好氧菌，只有在氧气充足时才能进行旺盛的生命活动，D正确。
故选C。
20. 在将样品稀释涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基之前一般先进行选择培养，其主要目的是( )
A. 完全除去其他微生物
B. 没有意义，去掉这一步更好
C. 增加纤维素分解菌的浓度
D. 使纤维素分解菌充分长大
【答案】C
【解析】
【分析】分解纤维素的微生物的基本过程如下：土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落，其中选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需的微生物。
【详解】在将样品稀释涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基之前一般先进行选择培养，目的是增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需的微生物，ABD错误，C正确。
故选C。
21. 随着生物技术的发展，酶在社会生产、生活中的应用越来越广泛。下列说法错误的是（ ）
A. 利用酶生产某些化工产品，能显著降低能耗、减少污染，节约成本
B. “加酶洗衣粉”的洗涤效果与水温、酸碱度有关，与污物或衣物的性质无关
C. 用于治疗消化不良症的肠溶多酶片含有多种消化酶，但嚼服后会失去疗效
D. 要较长时间保持酶活性，各种酶制剂都应保存在低温的条件下
【答案】B
【解析】
【分析】1、酶的本质：酶是由活细胞产生的具有催化活性的有机物，其中大部分是蛋白质、少量是RNA。
2、特性：①高效性：酶的催化效率大约是无机催化剂的107～1013倍。②专一性：每一种酶只能催化一种或者一类化学反应。③酶的作用条件较温和：在最适宜的温度和pH条件下，酶的活性最高。温度和pH偏高或偏低，酶的活性都会明显降低。在过酸、过碱或温度过高条件下酶会变性失活，而在低温条件下酶的活性降低，但不会失活。
【详解】A、酶具有催化效率高的特点，利用酶生产某些化工产品，能显著降低能耗、减少污染、节约成本，A正确；
B、“加酶衣粉”的洗涤效果与水温、酸碱度有关，与污物或衣物的性质也有关，B错误；
C、消化酶的本质是蛋白质，嚼服后会失去疗效，C正确；
D、酶大多数是蛋白质，高温条件下易失活，应保存在低温条件下，抑制酶的活性，但不宜低温下使用，D正确。
故选B。
【点睛】
22. 有关“血红蛋白提取和分离”的相关叙述中，不正确的是（ ）
A. 可通过SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度
B. 将血红蛋白溶液进行透析，其目的是去除相对分子质量较小的杂质
C. 血红蛋白释放时加入有机溶剂，其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂
D. 整个过程不断用磷酸缓冲液处理，是为了维持血红蛋白的结构
【答案】C
【解析】
【分析】血红蛋白的提取和分离一般的一般步骤是样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。样品处理，它包括红细胞洗涤、血红蛋白释放、分离血红蛋白溶液；透析即是血红蛋白的粗分离，透析的目的是除去分子量较小的杂蛋白；血红蛋白释放时加入有机溶剂，其目的是溶解磷脂，加速血红蛋白的释放．样品的纯化是通过胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去．用电泳鉴定血红蛋白的纯度。
【详解】A、可通过SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度，本实验用电泳鉴定血红蛋白的纯度，A正确；
B、将血红蛋白溶液进行透析，其目的是去除相对分子质量较小的杂质，B正确；
C、血红蛋白释放时加入有机溶剂，其目的是溶解磷脂，加速血红蛋白的释放，C错误；
D、整个过程不断用磷酸缓冲液处理，是为了维持pH相对稳定，防止和血红蛋白的结构发生改变，D正确。
故选C。
23. 固定化技术实现了酶或细胞的重复利用，节约成本，还有利于产物提纯，提高产品质量。下列关于“α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测”实验的相关叙述错误的是（ ）
A. α-淀粉酶可以被固定化的原因之一是其不能溶于水
B. 筛选高效分泌α-淀粉酶枯草杆菌时培养基pH不宜高于7．5
C. 石英砂并非是α-淀粉酶的唯一介质
D. 固定化酶柱放置在4℃冰箱中保存是因为低温酶的结构不易被破坏
【答案】A
【解析】
【分析】1、在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。
2、固定化酶是将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。
【详解】A、固定化酶是将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂，而α-淀粉酶能溶于水，A错误；
B、结合分析可知，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，故筛选高效分泌α-淀粉酶枯草杆菌时培养基pH不宜高于7．5，B正确；
C、α-淀粉酶固定化可采用石英砂作载体进行物理吸附法固定制作成固定化酶柱后，淀粉溶液可流经酶柱，但淀粉酶不流出，但石英砂并非是α-淀粉酶的唯一介质，C正确；
D、酶在低温下活性被抑制，但结构相对稳定，固定化酶柱放置在4℃冰箱中保存是因为低温酶的结构不易被破坏，D正确。
故选A。
24. 传说杜康的儿子墨塔在一次酿酒时发酵过头，直至第21天开缸时，发现酒液已变酸但香气扑鼻，酸甜可口，于是他结合“廿一日”和“酉”字，给这种酸水起名为“醋”，下列有关叙述正确的是（ ）
A. 酿酒过程中发酵液出现的气体都是在酵母菌细胞的细胞质基质中产生的
B. 酿酒时糖类未耗尽，酵母菌的发酵也会停止，由pH上升和酒精含量增多导致
C. 墨塔酿酒反成醋可能是由于发酵装置密封不严造成的，若适当升温则醋味更浓
D. 统计活酵母菌数量时，可用显微镜直接计数法，统计的结果比实际数目低
【答案】C
【解析】
【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【详解】A、酵母菌是兼性厌氧型生物，也可进行有氧呼吸，在线粒体基质中产生CO2，A错误；
B、在酿酒的过程中，糖类即使未耗尽，酵母菌的发酵过程也会停止，原因可能是pH降低和酒精含量增多，对发酵起抑制作用，导致酵母菌发酵停止，B错误；
C、酒变酸是醋酸菌发酵的结果，墨塔酿酒反成醋的原因可能是：发酵装置密封不严，导致醋酸菌混入发酵液中，由于果醋发酵的温度高于果酒发酵温度，故若适当升温则醋味更浓，C正确；
D、用显微镜直接计数所统计的菌体是活菌体和死菌体的总和，统计的结果比实际数目偏多，D错误。
故选C。
25. 某兴趣小组按下图所示的方法对鲜奶中的细菌数目进行检测，当菌落数目稳定时，3个平板上的菌分别为35、33、34．有关叙述正确的是（ ）
A. 常采用高压蒸汽灭菌法对鲜奶进行灭菌
B. 调节培养基的pH应在灭菌后凝固前进行
C. 1mL该鲜奶中的细菌数约为3.4×106个
D. 用图示方法统计的结果往往比实际值偏高
【答案】C
【解析】
【分析】图中实验使用稀释涂布平板法，估算每毫升鲜奶中的细菌数目；使用稀释涂布平板法对微生物计数，数值往往偏小，原因是当两个或多个细胞连在一起时，在平板上只能观察到一个菌落。
【详解】A、实验的目的是检测鲜奶中的细菌数，若使用高压蒸汽灭菌处理鲜奶，则鲜奶就不含有细菌了，A错误；
B、调节培养基的pH应在灭菌前进行，B错误；
C、从图中可以看出涂布时添加的0.1mL的鲜奶，共经过了10×10×10×10=104倍稀释，根据公式（C/V）×稀释倍数，其中C=（35+33+34）÷3=34，V=0.1，即所以1mL鲜奶中细菌数约为=（34/0.1）×104=3.4×106个/mL，C正确；
D、使用稀释涂布平板法对微生物计数，数值往往偏小，原因是当两个或多个细胞连在一起时，在平板上只能观察到一个菌落，D错误。
故选C。
26. 下列有关酶的应用及固定化技术的叙述，错误的是
A. 溶解氧不会影响固定化酶的活性
B. 固定化酶和固定化细胞都可以被重复利用
C. 使用加酶洗衣粉时，浸泡时间不足会影响洗涤效果
D. 用海藻酸钠固定酵母细胞时，海藻酸钠溶液浓度越高，效果越好
【答案】D
【解析】
【详解】固定化酶的应用中，要控制好pH、温度，但与溶解氧无关，因为温度和PH影响酶的活性；而溶解氧不会影响酶的活性，A正确；固定化酶和固定化细胞都可以被重复利用，B正确；酶促反应需要一定的时间，使用加酶洗衣粉时，浸泡时间不足会影响洗涤效果，C正确；海藻酸钠溶液的配制是固定化酵母细胞的关键，因为如果海藻酸钠浓度过高，将很难形成凝胶珠；如果浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数量少，也会影响实验效果，D错误。
27. 如图为高果糖浆反应柱，下列有关利用固定化酶技术生产高果糖浆的说法错误的是（ ）
A. 葡萄糖与固定化葡萄糖异构酶接触，转化成的是果糖
B. 从固定化酶反应柱下端流出的不只有果糖
C. 高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、龋齿和心血管疾病
D. 酶溶解于葡萄糖溶液后，不可从糖浆中回收
【答案】D
【解析】
【分析】高果糖浆的生产需要使用葡萄糖异构酶，它能将葡萄糖转化成果糖。
【详解】A、生产过程中，将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入，使葡萄糖溶液流过反应柱，与固定化葡萄糖异构酶接触，转化成果糖，从反应柱的下端流出，A正确；
B、由于葡萄糖异构酶催化效率并非100%，因此流出的产物为葡萄糖和果糖的混合物，B正确；
C、高果糖浆是指果糖含量为42%左右的糖浆，作为蔗糖的替代品，高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、龋齿和心血管病，对人类的健康更有益，C正确；
D、使用后的酶溶解于葡萄糖溶液后，可从糖浆中回收再利用，D错误。
故选D。
28. 黄老师利用固定化酶反应柱进行澄清橙汁生产实验，下列相关叙述正确的是（ ）
A. 实验中所用的固定化果胶酶由海藻酸钠直接包埋获得
B. 为防止杂菌污染，装置制作完毕后需瞬间高温灭菌
C. 通过控制阀调节橙汁流出的速率，保证反应充分进行
D. 固定化果胶酶不可重复使用，每次生产前需重新装填反应柱
【答案】C
【解析】
【分析】固定化酶技术的应用：
1、固定化酶：固定化酶是指用物理学或化学的方法将酶与固相载体结合在一起形成的仍具有酶活性的酶复合物，在催化反应中，它以固相状态作用于底物，反应完成后，容易与水溶性反应物和产物分离，可被反复使用。
2、目前，制备固定化酶的方法主要有吸附法、交联法、包埋法等。吸附法的显著特点是工艺简便且条件温和，在生产实践中应用广泛；交联法是利用多功能试剂进行酶与载体之间的交联，在酶和多功能试剂之间形成共价键，从而得到三维的交联网架结构；包埋法是将酶包埋在能固化的载体中。
【详解】A、酶的分子较小，一般不用包埋法固定，A错误；
B、酶活性的发挥需要适宜条件，瞬间高温灭菌会使固定化酶失去活性，B错误；
C、通过控制阀调节橙汁流出的速率，让底物与酶充分接触，保证反应充分进行，C正确；
D、结合分析可知，固定化果胶酶可重复使用，D错误。
故选C。
29. 下列是有关血红蛋白提取和分离的相关操作，不正确的是（ ）
A. 血红蛋白是有色蛋白，因此在凝胶色谱分离时可以通过颜色来判断什么时候应该收集洗脱液
B. 用生理盐水重复洗涤红细胞
C. 血红蛋白释放后应低速短时间离心
D. 不断用磷酸缓冲液处理的目的是让血红蛋白处在稳定的pH范围内，以维持其结构和功能
【答案】C
【解析】
【分析】血红蛋白提取和分离实验
1、原理：凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离。
2、用磷酸缓冲液处理的目的是让血红蛋白处在稳定的pH范围内，维持其结构和功能。
3、分离血红蛋白溶液时，将搅拌好的混合液转移到离心管中，经过中速长时离心后，可明显看到试管中溶液分为4层，从上往下数，第1层为甲苯层，第2层为脂溶性物质的沉淀层，第3层为血红蛋白水溶液，第4层为杂质沉淀层．
4、气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果。
5、血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有：（1）样品处理：①红细胞的洗涤，②血红蛋白的释放，③分离血红蛋白溶液．（2）粗分离：①分离血红蛋白溶液，②透析．（3）纯化：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质．（4）纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。
6、电泳法是利用待测样品中各种分子带电性质的差异和分子本身的大小、形状不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离或鉴定。
【详解】A、血红蛋白是有色蛋白，因此在凝胶色谱分离时可以通过颜色来判断什么时候应该收集洗脱液，A正确；
B、洗涤红细胞时，应该用等渗溶液，即用生理盐水重复洗涤红细胞，B正确；
C、血红蛋白释放后应中速长时间离心，C错误；
D、不断用磷酸缓冲液处理的目的是让血红蛋白处在稳定的PH范围内，以维持其结构和功能，D正确。
故选C。
30. 下列叙述正确的是（ ）
A. 果胶酶是一种能够分解果胶的酶
B. 加酶洗衣粉目前常用的酶制剂中应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性淀粉酶
C. 高果糖浆是指果糖含量为30％的糖浆
D. 固定化酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定化
【答案】D
【解析】
【分析】1、果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得容易，而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得浑浊的果汁变得澄清。果胶酶并不特指某一种酶， 而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶。
2、固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。一般来说，酶更合适采用化学结合和物理吸附法固定化，而细胞多采用包埋法固定化。这是因为细胞体积大，而酶分子小。体积大的细胞难以被吸附或结合，而体积小的酶容易从包埋材料中漏出。
【详解】A、胶酶是分解果胶的一类酶总称，包括半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶，A错误；
B、加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉，目前常用的酶制剂有四类:蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶，其中应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶，B错误；
C、高果糖浆是将混合的葡萄糖和果糖中的葡萄糖分离出来再次进行异构化，并且如此反复多次，最后的混合物中果糖的含量可以达到70%~90%，这样的混合物就叫做高果糖浆，C错误；
D、固定化酶更适合采用化学结合和物理吸附法固定化，而细胞多采用包埋法固定化，这是因为细胞体积大，而酶分子很小，D正确。
故选D。
31. 酶为生活添姿彩。下列有关酶的说法错误的是（ ）
A. 果胶酶能分解果肉细胞壁中的果胶，提高果汁产量，使果汁变得清亮
B. 多酶片含有多种消化酶，有助于缓解人消化不良症状
C. 处理废油脂最好用脂肪酶，而不用胰蛋白酶，这是利用了酶的高效性
D. 溶菌酶在过酸、过碱、高温条件下，空间结构会遭到破坏
【答案】C
【解析】
【分析】1、果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶酯酶和果胶分解酶等。作用：果胶酶分解果胶，瓦解细胞壁和胞间层，使榨取果汁变得更容易，提高水果的出汁率。
2、酶是由活细胞产生的一类具有生物催化作用的有机物。化学本质：大多数是蛋白质，少数是RNA；作用机理：能够降低化学反应的活化能：特性：高效性、专一性、作用条件温和。
【详解】A、果胶酶分解果胶，瓦解细胞壁和胞间层，使榨取果汁变得更容易，提高水果的出汁率，A正确；
B、多酶片含有多种消化酶，口服进入消化道，有助于缓解人消化不良症状，B正确；
C、脂肪酶可处理废油脂，胰蛋白酶不可，是利用了酶的专一性，C错误；
D、酶在过酸、过碱、高温条件下，空间结构会遭到破坏，进而失去活性，D正确。
故选C。
32. 下列关于测定亚硝酸盐含量的实验操作叙述，错误的是（ ）
A. 在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应形成玫瑰红色染料
B. 制备标准显色液是为了进行目测比色，以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量
C. 制备样品处理液，加入氢氧化铝乳液的目的是除去色素等杂质，得到澄清溶液
D. 测定时所用提取剂的作用是增加亚硝酸盐的溶解度
【答案】A
【解析】
【分析】测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，再与N-1－萘基乙二胺盐酸盐结合生成玫瑰红溶液。将经过显色反应后的待测样品与标准显色液进行目测比较，即可计算出样品中的亚硝酸盐含量。
【详解】A、在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，再与N-1－萘基乙二胺盐酸盐结合生成玫瑰红溶液，A错误；
B、制备一定浓度梯度的标准显色液是为了进行目测比色，以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量，B正确；
C、氢氧化铝胶体能吸附泡菜汁液中的杂质，使泡菜汁透明澄清，以便进行后续的显色反应，制备样品处理液，加入氢氧化铝乳液的目的是除去色素等杂质，得到澄清溶液，C正确；
D、氯化镉氯化钡溶于蒸馏水后作为亚硝酸盐的提取剂 ，测定时所用提取剂的作用是增加亚硝酸盐的溶解度，D正确。
故选A。
33. 鞣质（单宁）是一种具有止血、杀菌等作用的中药成分，在植物中广泛分布。为探究鞣质对自然界中生存条件相同的甲、乙、丙三种细菌的杀伤能力，某科研小组将等量的甲、乙、丙三种细菌接种到含有适量鞣质的完全培养基和不含鞣质的完全培养基上，在相同且适宜的条件下培养一段时间，观察菌落大小，结果如图所示。下列相关说法不正确的是（ ）
A. 实验中用培养皿等玻璃器材，可以采用干热灭菌的方法
B. 由图中结果可知，鞣质对甲细菌的杀伤能力最强
C. 为排除杂菌污染，本实验无需设置对照组
D. 接种前，可以用显微镜直接计数法判断三种细菌接种量是否相等
【答案】C
【解析】
【分析】利用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的细胞计数法，这种方法可以直接测定样品中全部的细胞数目，所以一般用于单细胞微生物数量的测定，由于血球计数板上的计数室盖上盖玻片后的容积是一定的，所以可根据在显微镜下观察到的细胞数目来计算单位体积的细胞的总数目。
【详解】A、实验中用的培养皿等玻璃器材，一般选用的灭菌方法为干热灭菌；采用该灭菌方法灭菌的一般是能耐高温的、需要保持干燥的物品，A正确；
B、将含鞣质的完全培养基与对照组1中菌落的大小比较可知，甲细菌的菌落最小，说明鞣质对甲细菌的杀伤能力最强，B正确；
C、为排除杂菌污染，本实验还需设置未接种细菌的含鞣质的完全培养基和未接种细菌的不含鞣质的完全培养基作为空白对照，C错误；
D、显微镜计数法是在显微镜下直接计数的一种常用的细胞计数法，这种方法可以直接测定样品中全部的细胞数目，所以一般用于单细胞微生物数量的测定，故接种前，可以用显微镜计数法判断三种细菌接种量是否相等，D正确。
故选C。
34. 下面关于“血红蛋白提取和分离”的说法中，不正确的是（ ）
A. 采集血样后要高速短时间离心获得血细胞
B. 洗涤三次后如上清液仍有黄色，可增加洗涤次数
C. 在蒸馏水和甲苯的作用下，细胞破裂，释放出血红蛋白
D. 释放血红蛋白后再经过离心，就可以使血红蛋白和其他杂质初步分离
【答案】A
【解析】
【分析】血红蛋白的提取和分离：
1、实验原理：蛋白质的物化理性质如形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千差万别，由此提取和分离各种蛋白质。
2、分离方法：（1）凝胶色谱法（分配色谱法）：①原理：分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢。②凝胶材料：多孔性，多糖类化合物，如葡聚糖、琼脂糖。
【详解】A、采集血样后要低速短时间离心获得血细胞，否则会使淋巴细胞、血小板混杂其中，A错误；
B、重复多次洗涤血细胞，以防止血浆蛋白残留其中，B正确；
C、利用蒸馏水和甲苯的低渗特性，使得红细胞破裂释放出血红蛋白，C正确；
D、释放出血红蛋白后，离心分离细胞膜和血红蛋白，D正确。
故选A。
35. 营养缺陷型菌株是指缺乏合成某些营养物质（如氨基酸、维生素）的能力，必须在基本培养基中补充特殊营养物质才能正常生长的一类菌株，可自然产生或人工诱导获得。用一定方法诱变大肠杆菌并将其接种到甲培养皿上，一段时间后将菌落影印接种（不改变菌落位置）到乙、丙两培养皿中，进一步培养一段时间可筛选出营养缺陷型菌株，结果如图所示。下列说法正确的是（ ）
A. 将大肠杆菌接种到甲培养皿的方法为平板划线法
B. 甲丙两种培养基中均添加了特殊营养物质
C. 乙培养皿中能生长的为所需的营养缺陷型菌株
D. 甲中的部分大肠杆菌发生了基因突变或染色体变异
【答案】B
【解析】
【分析】①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过足够稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后，可形成单菌落。
【详解】A、由菌落分布情况可知，将大肠杆菌接种到甲培养皿的方法为稀释涂布平板法，A错误；
B、根据甲丙两种培养基中菌落位置可知，甲中的菌种在丙培养基中均能生长，再结合乙培养基中菌落的生长情况，可推测甲培养基和丙培养基都添加了某种特殊物质，B正确；
C、乙培养皿中不能生长的为所需的营养缺陷型菌株，C错误；
D、甲中的部分大肠杆菌发生了基因突变，不可能发生染色体变异，因为大肠杆菌不含染色体，D错误。
故选B
36. 在各种培养基中细菌的生长情况如表所示，S、C、M为简单培养基，U、V、X、Y、Z代表加入培养基的不同物质，细菌不能合成的物质是（ ）
注：表中“＋”表示能生长，“－”表示不能生长。
A. YB. VC. UD. Z
【答案】A
【解析】
【分析】培养基是按照微生物的生长需要，用人工方法配制而成的营养物，其中有些是各种微生物都必需的，大多数情况下微生物特殊营养要求配制的培养基，称选择培养基。
【详解】ABCD、比较细菌能够生长的培养基的添加物，凡添加了物质Y的培养基，细菌都能生长，反之则不能生长，说明物质Y是细菌不能合成的，A正确，BCD错误。
故选A。
37. 下列关于不同微生物的发酵作用制作食品的叙述，正确的是（ ）
A. 酸豆角以其色泽金黄、咸酸适宜、鲜香嫩脆的特有品质深受人们的喜爱。酸豆角腌制过程中，仅有厌氧的乳酸菌活动，故发酵时需营造严格的无氧环境
B. 《本草纲目拾遗》中记载：“豆腐又名菽乳，以豆腐腌过酒糟或酱制者，味咸甘心。”上述腐乳制作的原理主要是利用毛霉等微生物，毛霉中只存在一种与蛋白质合成有关的细胞器一核糖体
C. 豆瓣酱制作过程中利用的微生物主要是曲霉。发酵过程中，上层的酱发酵效果好于下层，因而常需要将下层的酱翻至上层，说明参与发酵的菌种属于厌氧型
D. 酒精发酵时，发酵液中的葡萄皮等固体物质会上浮覆盖在发酵液表面，形成“酒帽”，“酒帽”的出现会降低发酵速度，原因是葡萄皮上的菌种无法浸入发酵液
【答案】D
【解析】
【分析】1、腐乳是好氧发酵，主要用的是毛霉，是霉菌。它是利用毛霉产生的蛋白酶分解豆制品中的蛋白质，使用不易消化吸收的大分子蛋白质分解为易于吸收的多肽，并产生多种风味物质。
2、泡菜是厌氧发酵，主要用的是乳酸菌，是细菌。它是利用乳酸菌在厌氧条件下产生乳酸，使蔬菜产生酸味，同时产生多种风味物质。
3、真核生物具有各种复杂的细胞器。
【详解】A、酸豆角腌制过程中主要是厌氧菌乳酸菌的活动，也有比如酵母菌的活动，发酵时需营造严格的无氧环境，A错误；
B、腐乳制作的原理主要是利用毛霉等微生物，毛霉是种真菌，是真核生物，与蛋白质合成有关的细胞器有核糖体、内质网等，B错误；
C、上层更容易接触到氧气，如果上层的酱发酵效果好于下层，说明参与发酵的菌种属于好氧型，C错误；
D、葡萄糖皮上附着有酵母菌菌种，“酒帽”的出现导致葡萄皮上的菌种无法浸入发酵液，从而降低发酵速度，D正确。
故选D
38. 消毒和灭菌是微生物培养中常用的操作方法。下列说法正确的是（ ）
A. 微生物接种技术的方法不同，但核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度
B. 在100℃条件下煮沸5~6分钟属于灭菌方法，可杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢
C. 无菌技术中，若处理对象为液体，则只能消毒，不能灭菌
D. 高压蒸汽灭菌锅只有当压力表的压力降到一个标准大气压时，才能打开盖子
【答案】A
【解析】
【分析】消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面和内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)，灭菌是指用强烈的理化因素杀死物体表面和内部的所有微生物，包括芽孢和孢子。
【详解】A、微生物接种技术包括稀释涂布平板法和平板划线法等，虽然接种方法各不相同，但核心都是要防止杂菌污染，保证获得纯净的培养物，A正确；
B、在100℃煮沸5~6分钟属于煮沸消毒法，可杀死微生物细胞和一部分芽孢，但不属于灭菌方法，B错误；
C、无菌技术中，若处理对象为液体，则可以采用灭菌的方法，如培养液可以利用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌，C错误；
D、使用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌时，只有当压力表的压力降到零时，才能打开排气阀，拧松螺栓，打开盖子，D错误。
故选A。
39. 下列有关颜色反应的叙述，错误的是（ ）
A. 在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现蓝，绿，黄的颜色变化顺序
B. 教材中用比色法测亚硝酸盐时，会形成玫瑰红色染料
C. 细菌分解尿素后，会使培养基的碱性增强，使得加入的酚红指示剂变红
D. 刚果红可以与纤维素形成红色复合物
【答案】A
【解析】
【分析】橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与乙醇（酒精）发生化学反应，在酸性条件下，变成灰绿色；在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料；在以尿素为唯一氮源的培养基中，不能分解尿素获得氮源的细菌不能生长，而能分解尿素的细菌能利用尿素作氮源，将尿素分解为氨，使pH升高，若培养基中加入酚红指示剂，指示剂将变红；刚果红能与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物。
【详解】A、在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色，A错误；
B、在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，故用比色法测亚硝酸盐时，会形成玫瑰红色染料，B正确；
C、细菌分解尿素后产生氨，会使培养基的碱性增强，使得加入的酚红指示剂变红，C正确；
D、刚果红是一种染料，它可以与多糖物质形成红色复合物，纤维素是多糖，故刚果红可以与纤维素形成红色复合物，D正确。
故选A。
40. 下图1是血红蛋白的提取和分离流程图，图2是为用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定某血浆蛋白的结果，下列叙述中错误的是（ ）
A. 图1中①②分别代表血红蛋白的释放、凝胶色谱柱的装填
B. 为防止血液凝固，在采血容器中要预先加入抗凝血剂柠檬酸钠
C. 凝胶色谱法能除去血红蛋白溶液中相对分子质量较大的杂质
D. 根据电泳结果，可得出“提取的血浆某白蛋白一定由两条肽链组成”的结论
【答案】D
【解析】
【分析】血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有：
（1）样品处理：①红细胞的洗涤，②血红蛋白的释放，③分离血红蛋白。
（2）粗分离：①分离血红蛋白溶液，②透析。
（3）纯化：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质。
（4）纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。
【详解】A、血红蛋白的提取和分离流程为：红细胞的洗涤→血红蛋白的释放→分离血红蛋白溶液→透析→凝胶色谱柱的制作→凝胶色谱柱的装填→样品的加入和洗脱，所以①表示血红蛋白的释放，②表示凝胶色谱柱的装填，A正确；
B、在采血容器中预先加入抗凝血剂柠檬酸钠，可防止血液凝固，B正确；
C、凝胶色谱法的基本原理是根据相对分子质量的大小分离蛋白质，凝胶色谱法能除去血红蛋白溶液中相对分子质量较大的杂质，C正确；
D、电泳的原理是利用待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子的大小、形状等的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，本实验只能判断肽链的大小有两种，而不能判断其条数。由图可知，只能得出提取的血浆某白蛋白含有两种大小不同的肽链，而不一定是只有两条，D错误。
故选D。
二、填空题（本大题共6小题，共50分）
41. 填空
（1）传统的葡萄醋是以葡萄汁为原料经发酵而成的。笫一阶段是在酵母菌作用下完成，发酵瓶中装入葡萄汁时要大约留出__________空间，且温度控制在__________左右，有利于酵母菌大量繁殖；当酒精发酵开始时，要将温度严格控制在__________范围，且充气口和瓶口要封闭。第二阶段在醋酸杆菌作用下完成，此时要有充足氧气，且温度_________(填“低”或“高”）于酒精发酵。
（2）当氧气、糖源都充足时，醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成__________；当缺少糖源时，醋酸菌可将乙醇变为___________，再进一步转变为醋酸。
【答案】41. ①. 1/3##三分之一 ②. 20℃ ③. 18～25℃ ④. 高
42. ①. 醋酸 ②. 乙醛
【解析】
【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型；果酒制作的原理：在有氧条件下，葡酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖； 在无氧条件下，酵母菌进行无氧呼吸，产生酒精。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型；果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【小问1详解】
酵母菌在有氧条件下可以大量繁殖，因此发酵瓶中装入葡萄汁时要大约留出1/3空间，且温度控制在20℃左右，以便其进行有氧呼吸；酵母菌酒精发酵的适宜温度为18～25℃；醋酸发酵的菌种是醋酸杆菌，是好氧菌，需要的发酵温度较高，适宜温度是30～35℃。
【小问2详解】
当氧气、糖源都充足时，醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌可将乙醇变为乙醛，再进一步转变为醋酸。
42. 圆褐固氮菌能将大气中的氮气转化为氨，是异养需氧型的原核生物。某同学利用稀释涂布平板法从土壤中分离获得圆褐固氮菌。回答下列问题。
(1)圆褐固氮菌与硝化细菌在同化作用上的最主要区别在于___________。培养圆褐固氮菌时不能隔绝空气，其原因是______________________(答出两点)。
(2)稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌的数目，分离不同的微生物需要不同的稀释倍数，原因是_________________________________。
(3)某同学计划统计土壤样液中圆褐固氮菌的总数，他选用稀释倍数进行涂布，每个稀释倍数下都设置了3个培养皿。从对照实验及无菌操作的角度分析，还应设置的一组对照组是___________，设置对照组的目的是___________。
(4)若用固定化酶技术固定圆褐固氮菌产生的固氮酶，和一般酶制剂相比，其优点是___________，且利于产物的纯化；固定化目的菌细胞常用___________法固定化。
【答案】 ①. 能否将CO2转化为含碳有机物 ②. 圆褐固氮菌为需氧型生物，且其需要空气中的氮气作为氮源 ③. （单位体积）土壤中不同种类的微生物数量不同 ④. 接种等量无菌水的空白培养基 ⑤. 证明实验操作过程中是否被杂菌污染 ⑥. 可重复利用 ⑦. 包埋
【解析】
【分析】常用接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。
固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。
【详解】（1）圆褐固氮菌是异养生物，硝化细菌是自养生物，二者在同化作用上的最主要区别在于能否将CO2转化为含碳有机物。圆褐固氮菌为需氧型生物，且其需要空气中的氮气作为氮源，故培养圆褐固氮菌时不能隔绝空气。
（2）由于土壤中不同种类的微生物数量不同，故分离不同的微生物需要不同的稀释倍数。
（3）为了证明实验操作过程中是否被杂菌污染，应该设置空白对照组，即接种等量无菌水的空白培养基。
（4）若用固定化酶技术固定圆褐固氮菌产生的固氮酶，和一般酶制剂相比，可以重复利用，且利于产物的纯化；体积大的细胞难以被吸附或结合，故固定化目的菌细胞常用包埋法固定化。
【点睛】由于细胞体积较大，而酶分子很小；体积大的细胞难以被吸附或结合，而体积小的酶容易从包埋材料中漏出，故酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定化，而细胞多采用包埋法固定化。
43. 分中国家电研究院的洗衣机专家指出，洗衣机内部的环境非常潮湿，洗衣机使用时间越长，内部滋生微生物的机会就越大。看似干净的洗衣机，其内部隐藏着一个健康的隐形杀手。某生物兴趣小组的同学，利用内桶背面的污垢进行了相关实验室实验。
（1）培养洗衣机内部微生物的培养基中一般含有_____________
（2）鉴定洗衣机污垢中是否有菌落时要制备固体培养基，在制备完毕后要进行倒平板操作，将平板倒置。这样做的目的是___________
（3）用稀释涂布平板法统计样本菌落数时是否需要对照组？目的是？_______
（4）判断污垢中微生物的种类可以依据菌落的_______等菌落特征进行初步的鉴定。实验结束后，使用过的培养基应该进行___________处理才能倒掉，此目的是_________________。
【答案】43. 水、碳源、氮源和无机盐
44. 防止皿盖上凝结的水珠落入培养皿造成污染，还可使培养基表面的水分更好地挥发
45. 需要 因为需要判断培养基是否被杂菌污染(培养基灭菌是否合格)
46. ①. 形状、大小 ②. 灭菌 ③. 防止造成环境污染
【解析】
【分析】1、微生物的营养物质主要包括碳源、氮源、水和无机盐等，有的微生物培养基中还需要添加生长因子等物质。微生物的培养的关键是无菌操作，接种后的培养皿应该倒置培养。
2、分类或筛选微生物常用的接种方法主要有平板划线法和稀释涂布平板法；可以根据菌落的特征进行初步的鉴定或分类。稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。
【小问1详解】
培养微生物的培养基中一般含有水、无机盐、碳源和氮源等，培养洗衣机内部微生物的培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。
【小问2详解】
为防止皿盖上凝结的水珠落入培养皿造成污染，还可使培养基表面的水分更好地挥发，故鉴定洗衣机污垢中是否有菌落时要制备固体培养基，在制备完毕后要进行倒平板操作，将平板倒置。
【小问3详解】
由于需要判断培养基是否被杂菌污染，故用稀释涂布平板法统计样本菌落数时需要设置对照组。
【小问4详解】
不同微生物形成的菌落不同，故判断污垢中微生物的种类可以依据菌落的形状、大小等菌落特征进行初步的鉴定；为防止造成环境污染，使用过的培养基应该进行灭菌处理。
44. 随着新冠疫情的持续，人类消耗了大量的一次性口罩，这些口罩不及时处理会对环境造成一定的污染。某科研人员欲筛选出能高效降解一次性口罩（主要成分是由C、H两种元素组成的聚丙烯纤维）的细菌，设计了如图所示的流程。回答下列问题：

（1）筛选目的菌的培养基应以______为唯一碳源。
（2）图中“甲”指的是_______________，目的是____________ 。
（3）已知目的菌分解聚丙烯纤维需要多种酶的共同参与，如果用凝胶色谱法分离其中的酶，相对分子质量小的酶移动速度______。目的菌比酶分子大得多，工厂化降解聚丙烯纤维时，通常采用______法来固定目的菌。影响目的菌降解聚丙烯纤维效果的因素有温度、pH以及_________________等（答出两点即可）。
（4）若在3个细菌培养基平板上均接种稀释倍数为105的土壤样品0.1mL，培养一段时间，平板上菌落数分别为35个、33个、34个，则可推测每克土壤样品中的细菌数为______个。运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小，原因是_______________。
【答案】（1）聚丙烯纤维
（2） ①. 选择培养或扩大培养 ②. 提高聚丙烯纤维降解菌的浓度
（3） ①. 较慢 ②. 包埋 ③. 目的菌降解聚丙烯纤维的能力、目的菌的浓度、处理时间等
（4） ①. 3.4 ×107 ②. 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只有一个菌落
【解析】
【分析】1、培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物种和氧气的要求。
2、固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。一般来说，酶更合适采用化学结合和物理吸附法固定化，而细胞多采用包埋法固定化。这是因为细胞体积大，而酶分子小；体积大的细胞难以被吸附或结合，而体积小的酶容易从包埋材料中漏出。
【小问1详解】
根据题意，从土壤中筛选出能高效降解一次性口罩的细菌，主要成分是聚丙烯纤维，故选择培养基需加入经过处理的聚丙烯粉末作为唯一碳源。
【小问2详解】
在将样品稀释涂布到培养基之前，可以通过（甲）选择培养或扩大培养提高聚丙烯纤维降解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。
【小问3详解】
凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法，如果用凝胶色谱法分离其中的酶，相对分子质量较小的酶容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢。目的菌比酶分子大得多，工厂化降解聚丙烯纤维时通常采用包埋法来固定目的菌。影响目的菌降解聚丙烯纤维效果的因素有温度、pH以及目的菌降解聚丙烯纤维的能力、目的菌的浓度、处理时间等。
【小问4详解】
3个平板上的菌落数分别为35、33和34，平均值为34，每克土壤样品中的细菌数为34÷0.1×105=3.4×107个，运用稀释徒步平板法进行计数，统计的结果往往比实际数目偏小。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
45. 酶属于生物催化剂，在生产生活中得到广泛的应用。请回答下列问题：
（1）酶已经大规模应用于食品、化工医药等多个领域，但是在应用过程中存在一些实际问题，如__________（答出2点即可），采用固定化酶技术能很好解决有关问题，一般来说，采用的固定方法有_______。
（2）苹果营养丰富，富含果胶、淀粉和纤维素等成分。直接将苹果榨汁过滤收集得到的果汁少，而且会因________含量较高而澄清度低。果汁保存前，通常先灭菌处理，可用_______________的方法检测灭菌的效果。
（3）果胶具有降低人体内胆固醇的含量、保护肠道菌群、稳定血糖浓度、减少对重金属的吸收、防止铅中毒等作用。利用苹果皮渣可制取果胶，为提高果胶获得率，需对苹果皮渣进行热处理，其目的是_______。
（4）利用某特定微生物能分离果胶，其原理是利用该特定微生物能分解植物组织中的复合多糖体，从而使果胶从植物组织中游离出来，有效提取果胶。为分离此类优良菌株，将待选菌群用_______法接种在以____________________的培养基中进行初步筛选并计数。
【答案】45. ①. 酶常对高温、强酸、 强碱和有机溶剂等条件非常敏感，易失活、溶液中的酶很难回收，不能再次利用，提高了生产成本、反应后酶混在产物中，可能影响产品质量 ②. 化学结合法和物理吸附法
46. ①. 果胶 ②. 台盼蓝对处理后果汁中细胞染色观察或将处理后的果汁接种、培养观察,看是否有菌落生成
47. 加热使产果胶酶的微生物及果胶酶失活
48. ①. 稀释涂布平板 ②. 复合多糖体为唯一碳源
【解析】
【分析】果胶是植物细胞壁以及胞间层的主要成分之一。果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁和胞间层。在果汁生产中应用果胶酶可以提高出汁率和澄清度。
【小问1详解】
酶常对高温、强酸、 强碱和有机溶剂等条件非常敏感，易失活、溶液中的酶很难回收，不能再次利用，提高了生产成本、反应后酶混在产物中，可能影响产品质量，是酶在实际应用中的一些问题；采用固定化酶技术能很好解决有关问题，由于酶分子较小，一般来说，采用的固定方法有化学结合法和物理吸附法。
【小问2详解】
果胶含量较高，会导致澄清度低；为检测灭菌的效果，可用台盼蓝对处理后果汁中细胞染色观察（活细胞不能被染色）或将处理后的果汁接种、培养观察,看是否有菌落生成（活细胞才能形成菌落）。
【小问3详解】
酶活性的发挥需要适宜的温度，加热使产果胶酶的微生物及果胶酶失活，故为提高果胶获得率，需对苹果皮渣进行热处理。
【小问4详解】
微生物的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板，其中能够计数的是稀释涂布平板法；本过程需要分离能分解植物组织中的复合多糖体的微生物，故需要接种在复合多糖体为唯一碳源的培养基上。
46. 血红蛋白是哺乳动物红细胞内含量最多的蛋白质，在氧气多的情况下，血红蛋白与氧结合与二氧化碳分离，形成鲜红色的血液，在氧气少二氧化碳多的情况下，血红蛋白与氧气分离与二氧化碳结合形成暗红色的血液。研究表明，血红蛋白可作为天然的红色着色剂，在鲜肉、火腿等食品中使用。请分析回答：
（1）人体内血红蛋白呈现红色的原因是四条肽链均含有___________。欲对血红蛋白进行提取和鉴定，需经过样品处理、_______________、纯化和纯度鉴定四步。
（2）在血红蛋白的释放过程中需用到蒸馏水和40%体积的____，目的是使红细胞破裂释放血红蛋白；分离血红蛋白溶液时需过滤除去_______________，分离出的红色透明液体需进行透析，在透析过程中需要将透析袋放入200ml/L的______________中,透析的目的是__________。
（3）由题可知，血红蛋白的功能是负责血液中____________________的运输。某同学为验证血红蛋白的特性，利用相关材料设计了如下实验方案，请将实验方案补充完整。
①将采集的新鲜血液分装在含有抗凝剂_____________的三支试管中，混匀后分别贴上A、B、C三张标签。
②静置一段时间后，将三支试管中的血浆、白细胞和血小板倒出，只剩下红细胞。调整三支试管中的红细胞量，使之相等。
③把封装有氧气的注射器里的气体注入A试管中，把封装有二氧化碳的注射器里的气体注入B 试管中，C 试管不做任何处理，观察三支试管中的_______________。
【答案】（1） ①. 血红素 ②. 粗分离
（2） ①. 甲苯 ②. 脂溶性沉淀层 ③. 磷酸缓冲液 ④. 除去样品中分子量较小的杂质
（3） ①. O2和CO2 ②. 柠檬酸钠 ③. 颜色/颜色变化
【解析】
【分析】血红蛋白提取和分离的步骤包括：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液，即样品的处理；再经过透析去除分子量较小的杂质，即样品的粗分离；然后通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，即样品的纯化；最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。
【小问1详解】
血红蛋白呈现红色的原因是四条肽链均含有血红素。由分析可知，对血红蛋白进行提取和鉴定，需经过样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定四步。
【小问2详解】
在血红蛋白的释放过程中需用到蒸馏水和40%体积的甲苯，目的是使红细胞破裂释放血红蛋白；样品处理过程中离心后分为四层，第一层为无色透明的甲苯层，第二层为脂溶性沉淀层，第三层为血红蛋白的水溶液，第四层为其他杂质的暗红色沉淀物。分离血红蛋白溶液时需过滤除去脂溶性沉淀层，分离出的红色透明液体需进行透析，透析的目的是除去样品中分子量较小的杂质。
【小问3详解】
由题可知，血红蛋白在氧气多的情况下，血红蛋白与氧结合与二氧化碳分离，在氧气少二氧化碳多的情况下，血红蛋白与氧气分离与二氧化碳结合，故血红蛋白的功能是负责血液中O2和CO2的运输。
①柠檬酸钠作为抗凝剂具有抗凝血的作用。培养基
蛋白胨
牛肉膏
氯苯
氯化钠
硝酸铵
无机盐（无碳）
蒸馏水
I 号
10g
5g
5mg
5g
--
--
1L
II 号
--
--
50mg
5g
3g
适量
1L
处理编号
处理方法
显色结果
①
37 ℃放置0 min
加入等量双缩脲试剂
紫色
②
37 ℃放置10 min
？
③
37 ℃放置120 min
？
④
100 ℃加热5 min后，37 ℃放置120 min
紫色
培养基
生长状态
S、C、M
－
S、C、M＋V＋Z
－
S、C、M＋U＋Y
＋
S、C、M＋Z＋X
－
S、C、M＋V＋Y
＋
S、C、M＋U＋X
－
S、C、M＋Y＋Z
＋