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2024届人教版高考生物一轮复习思维进阶培优系列8围绕生物技术与工程的新情境试题课件(多项)
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这是一份2024届人教版高考生物一轮复习思维进阶培优系列8围绕生物技术与工程的新情境试题课件(多项),共14页。
案例 (2022·广东卷)“绿水逶迤去,青山相向开。”大力发展低碳经济已成为全社会的共识。基于某些梭菌的特殊代谢能力,有研究者以某些工业废气(含CO2等一碳温室气体,多来自高污染排放企业)为原料,通过厌氧发酵生产丙酮,构建一种生产高附加值化工产品的新技术。回答下列问题:(1)研究者针对每个需要扩增的酶基因(如图)设计一对____________,利用PCR技术,在优化反应条件后扩增得到目标酶基因。
(2)研究者构建了一种表达载体pMTL80k,用于在梭菌中建立多基因组合表达库,经筛选后提高丙酮的合成量。该载体包括了启动子、终止子及抗生素抗性基因等,其中抗生素抗性基因的作用是________________________,终止子的作用是__________________。(3)培养过程中发现重组梭菌大量表达上述酶蛋白时,出现了生长迟缓的现象,推测其原因可能是__________________________________,此外丙酮的积累会伤害细胞,需要进一步优化菌株和工艺才能扩大应用规模。(4)这种生产高附加值化工产品的新技术,实现了______________________,体现了经济循环的特点。从“碳中和”的角度看,该技术的优势在于____________,具有广泛的应用前景和良好的社会效益。
(1)引物 (2)作为标记基因,筛选含有目的基因的受体细胞 终止转录,使转录在所需要的地方停下来 (3)二氧化碳等气体用于大量合成丙酮,而不是用于重组梭菌的生长 (4)废物的资源化 不仅不排放二氧化碳,而且还可以消耗工业废气中的二氧化碳
[演练提升](2022·枣庄市二模)某科研小组从土壤菌株A、B中分离到同源性为93%的Bt1抗虫基因和Bt2抗虫基因的编码序列,并运用交错延伸PCR技术获得了抗虫性能强的重组Bt基因,转入烟草获得成功,过程如图所示。
(3)已知交错延伸PCR中所用引物片段均为30个核苷酸,Taq DNA聚合酶在72 ℃下的扩增速度为1000个碱基/min,本实验的循环扩增条件为:95 ℃变性30 s,50 ℃复性15 s,72 ℃延伸15 s,共80个循环。第二轮循环后所得重组型子链长度为______________个核苷酸。若将复性温度调成55 ℃,DNA扩增效率下降,甚至无法得到扩增产物,原因是______________。通过交错延伸PCR获得的重组Bt基因,同时具有Bt1和Bt2基因序列的原因是_____________________________________________________________________。
解析:(1)限制酶EcRⅠ和XmaⅠ的酶切位点不同,切出的黏性末端不同,目的基因两端的黏性末端不同,能避免单个目的基因连接成环,但不能避免两个目的基因中相同的黏性末端相连。图中所示Ti质粒部分含有抗草甘膦基因和抗卡那霉素基因,这两个基因在终止子下游,说明这两个基因中含有自身启动子,此外Ti质粒还有启动子Prla,因此Ti质粒至少含有3个启动子;复制原点是DNA开始复制的位点,是解旋酶识别和结合的位点。(2)Ti重组质粒中同时含有Bt重组基因和抗草甘膦基因(rA),因此在培养愈伤组织的培养基中添加草甘膦可以筛选含有Bt重组基因的细胞;图中生长素合成酶基因不能促进愈伤组织生根,因为生长素合成酶基因是通过成熟mRNA逆转录获得的编码区序列,自身无启动子,而启动子Prla只在烟草叶肉细胞中特异性启动基因的转录,在愈伤组织细胞中不能启动转录。
(3)95 ℃变性30 s,50 ℃复性15 s,72 ℃延伸15 s,可知一次PCR循环耗时1 min,可扩增250个碱基,第二轮循环开始模板交错,扩增所得重组型子链长度为500+引物长度,已知引物片段均为30个核苷酸,所以第二轮循环后所得重组型子链长度为530个核苷酸;若将复性温度调成55 ℃,复性温度过高会引起碱基之间的氢键断裂,导致引物不能与互补DNA链(模板)牢固结合,DNA扩增效率下降,复性温度过低可造成引物与模板错配,导致引物与模板的结合位点增加,非特异性产物增加,则无法得到扩增产物;通过交错延伸PCR获得的重组Bt基因,同时具有Bt1和Bt2基因序列的原因是第一轮以Bt1(Bt2)为模板合成的子链片段在第二轮复制时作为引物结合到Bt2(Bt1)的模板上继续合成子链,经多轮交错循环扩增,可以使产物同时含有两种基因的序列。
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