高中生物北师大版 (2019)选择性必修3 生物技术与工程第五节 发酵工程的应用练习

【特供】第五节发酵工程的应用-3随堂练习

一．单项选择

1．微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染，请分析下列操作，正确的是（    ）

A．煮沸消毒法中100℃煮沸5-6分钟可以杀死全部微生物细胞和芽孢．孢子

B．将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌

C．加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌

D．家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌

2．MRSA一般指耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，是一种引起皮肤感染的“超级细菌”，临床滥用抗生素的现象，对MRSA的流行起了一定的扩散作用。某研究小组对其进行了实验室培养和计数等操作。下列叙述错误的是（    ）

A．为防止“超级细菌”散布到环境中应对接种时常用的工具进行灼烧灭菌

B．若采用显微镜直接计数培养液中MRSA的数量则计数结果会比活菌实际值偏低

C．可采用稀释涂布平板法进行接种以对固体培养基中的超级细菌进行计数

D．为了方便后续使用，可将超级细菌菌种在4℃条件下用斜面保藏法临时保藏起来

3．下列关于无菌技术应用的叙述，正确的是（    ）

A．煮沸消毒可杀死物体内外所有微生物

B．使用后的培养基可以直接丢弃

C．紫外线只适用于表面灭菌和空气灭菌

D．金属器具只能采用灼烧灭菌法

4．培养基．培养皿．接种环．实验操作者的双手．空气．牛奶采用的灭菌或消毒方法依次是（    ）

①紫外线消毒       ②干热灭菌       ③ 灼烧灭菌     ④化学药剂消毒⑤高压蒸汽灭菌     ⑥巴氏消毒法

A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥

C．⑤②③④①⑥ D．③④②①⑥⑤

5．做“微生物的分离与培养“实验时，下列叙述错误的是（    ）

A．高压灭菌加热结束时，等待压力表指针回到零后，才能开启锅盖

B．倒平板过程中不能打开培养皿的皿盖，以防杂菌污染

C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落

D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底

6．关于微生物的分离与计数的叙述，错误的是（    ）

A．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数

B．平板划线时最后一个区域的划线不能与第一区域相连

C．接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落

D．对细菌进行计数，常采用稀释涂布平板法或显微镜直接计数

7．下表表示在不同培养基中细菌的生长繁殖情况（A．B．G．H．I．J．K为培养基的成分，“＋”表示生长，“－”表示不生长），请分析细菌不能合成下列哪种物质（    ）

A．H B．I C．J D．K

8．如图为实验室培养和纯化大肠杆菌的部分操作步骤，下列说法正确的是（    ）

A．步骤①中倒入培养基后立即盖上培养皿盖

B．步骤④中接种环只需在第一次划线前和最后一次划线完后要灼烧处理

C．将接种后的图④平板放入培养箱中培养时无需倒置

D．③步骤操作时不需要在酒精灯火焰旁进行

9．若大肠杆菌和酵母菌混合在一起，要将它们分离可采用的培养基是（    ）

A．加食盐的培养基和蛋白胨培养基 B．伊红－美蓝培养基和无氮培养基

C．加青霉素培养基和伊红－美蓝培养基 D．斜面培养基和液体培养基

10．下列有关实验的叙述中，正确的是（    ）

A．液体培养基可用于观察菌落，固体培养基可用于工业生产

B．使用苏丹Ⅲ染液检测脂肪，显色结果是呈现橘黄色

C．还原糖组织样液在加入斐林试剂后呈无色，在加热后变成砖红色

D．甲基绿和吡罗红染色剂使DNA呈现红色，使RNA呈现绿色

11．酵母菌的代谢类型是

A．自养需氧 B．异氧严格厌氧 C．异养需氧 D．异养兼性厌氧

12．下列关于倒平板．平板划线法和涂布平板法的叙述，正确的是（    ）

A．倒平板时将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上

B．平板划线法除了第一次划线需要将接种环灼烧灭菌外，以后的划线可以不用灭菌

C．应用稀释涂布平板法对微生物进行计数的估计值比实际值偏大

D．与平板划线法相比，稀释涂布平板法形成单菌落的效果更好

13．在自制酸奶的过程中，除了高温加热以外，其他灭菌方法还有（　　）

A．紫外线照射 B．真空包装 C．用保鲜膜密闭 D．添加防腐剂

14．取9个洁净培养皿，均分为三组(Ⅰ．Ⅱ．Ⅲ)，各组分别加入等量的不同培养基，每个平板均用涂布法接种0.1mL大肠杆菌菌液，37 ℃培养36 h后，统计菌落数(见下表)，以下相关叙述正确的是（　　）

A．三组实验均使用了液体培养基，以方便菌落计数

B．Ⅰ组和Ⅲ组说明大肠杆菌正常生长需要糖类物质

C．Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长

D．Ⅱ组计数结果偏小的主要原因是部分细菌死亡

15．在生产．生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。下列相关叙述不正确的是（    ）

A．玻璃和金属材质的实验器具可放入干热灭菌箱中干热灭菌

B．接种前后的接种环或涂布器都要在酒精灯的火焰上进行灼烧消毒

C．没有将高压蒸汽灭菌锅内的冷空气排尽将影响培养基的灭菌效果

D．喷洒石碳酸同时配合紫外线照射可提高对密闭空间的消毒效果

16．如图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1→2→3→4→5。下列操作方法正确的是（    ）

A．操作前只要将接种环烧红并冷却后，就可离开酒精灯，进行接种试验

B．划线操作须在火焰上进行，以免杂菌污染

C．所需菌落只能在5区域中才可以得到

D．在1．2．3．4．5区域中划线前后都要对接种环灭菌

17．下列关于无菌操作技术的说法，正确的是（    ）

A．高压蒸汽灭菌，当压力表的压力降到一个标准大气压时，就可以打开盖子

B．在100℃煮沸5-6分钟属于灭菌方法，可杀死微生物细胞和一部分芽孢

C．饮用前的鲜牛奶或使用后的液体培养基常用高压蒸汽灭菌法进行处理

D．用紫外线消毒时，适量喷洒石碳酸或煤酚皂等消毒液可以加强消毒效果

18．判断选择培养基是否起到了选择作用，需要设置的对照是（    ）

A．不接种的选择培养基 B．接种的选择培养基

C．接种的牛肉膏蛋白胨培养基 D．不接种的牛肉膏蛋白胨培养基

参考答案与试题解析

1．【答案】B

【解析】

试题分析：

消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）。灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。

解答：

A．煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢，而灭菌能杀灭环境中一切微生物，包括孢子和芽孢，A错误；

B．将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，B正确；

C．指示剂和染料可能混有微生物，因此加入培养基中的指示剂和染料也需要灭菌，C错误；

D．家庭制作葡萄酒时，要将容器进行灭菌或消毒，但是葡萄不能灭菌，因为发酵用的酵母菌来自于葡萄，D错误。

2．【答案】B

【解析】

试题分析：

微生物培养剂分离的关键是无菌操作。常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。无菌操作常用的方法主要有消毒和灭菌。据此分析作答。

解答：

A．为防止“超级细菌”散布到环境中，应对接种时常用的工具进行灼烧灭菌，A正确；

B．若采用显微镜直接计数培养液中MRSA的数量，由于无法区分死菌和活菌，故计数结果会比活菌实际值偏高，B错误；

C．可采用稀释涂布平板法进行接种以对固体培养基中的超级细菌进行计数，C正确；

D．为了方便后续使用，可将超级细菌菌种在4℃条件下用斜面保藏法临时保藏起来，D正确。

故选B。
 

3．【答案】C

【解析】

试题分析：

在微生物的实验室培养中获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括以下几个方面：

①对实验操作的空间．操作者的衣着和手进行清洁和消毒；

②将用于微生物培养的培养器皿．接种用具和培养基等进行灭菌；

③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；

④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。

解答：

A．煮沸消毒只能杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子），A错误；

B．使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，不能直接丢弃，以免污染环境，B错误；

C．紫外线灭菌是利用适当波长的紫外线能够破坏微生物机体细胞中的DNA或RNA的分子结构，造成生长性细胞死亡和（或）再生性细胞死亡，达到灭菌的效果，此法只能杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子），只适用于表面灭菌和空气灭菌，C正确；

D．金属器具可以采用灼烧灭菌法或干热灭菌，D错误。

故选C。

4．【答案】C

【解析】

试题分析：

使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞．芽孢和孢子的过程称为灭菌，常用的方法有灼烧灭菌（主要适用于金属接种工具）．干热灭菌（主要适用于需要保持干燥的玻璃器具）和高压蒸汽灭菌（主要适用于培养基的灭菌）；消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程；常用的方法有煮沸消毒法．巴氏消毒法．紫外线或化学药物消毒法等。

解答：

⑤培养基用高压蒸汽灭菌；②培养皿能耐高温，且须保持干燥，需用干热灭菌；③接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果；④实际操作者的双手用化学药剂进行消毒，如用酒精擦拭双手；①空气可用紫外线消毒；⑥巴氏消毒法用于牛奶及其制品的消毒，不会破坏其营养成分；故C正确。

故选C。

5．【答案】C

【解析】

试题分析：

高压灭菌加热结束时，需切断热源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降到零时，再打开排气阀，旋松螺栓，最后再打开盖子。由于培养菌落时需倒置培养，为了方便查看，用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上。倒平板时，左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，倒入培养基后，左手立刻盖上培养皿的皿盖，操作中应避免培养基溅到皿盖上。经火焰灭菌后的接种环应冷却后再接种，因为温度过高，会使菌落死亡。

解答：

A．高压灭菌加热结束时，应等压力表的压力降到零时，再打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，A正确；

B．倒平板过程中不能打开培养皿的皿盖，以防杂菌污染，B正确；

C．经火焰灭菌后的接种环温度很高，若此时趁热挑起待纯化菌落会使菌落死亡，C错误；

D．用记号笔标记培养皿中菌落时，由于培养菌落时需倒置培养，为了方便查看，应标记在皿底上，D正确。

故选C。

6．【答案】A

【解析】

试题分析：

常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，后者还可以用于菌落的计数。

解答：

A．需要选择菌落数在30-300的平板进行计数，A错误；
B．使用平板划线法接种时，最后一个区域的划线不能与第一区域相连，B正确；
C．通过接种划线可以获得稀释的单菌落，C正确；
D．可以用稀释涂布平板法和显微计数法对细菌进行计数，二者均有误差，D正确。
故选A。

7．【答案】C

【解析】

试题分析：

培养基是按照微生物的生长需要，用人工方法配制而成的营养物，其中有些是各种微生物都必需的，大多数情况下微生物特殊营养要求配制的培养基，称选择培养基。

解答：

比较细菌能够生长的培养基的添加物，凡添加了物质J的培养基，细菌都能生长，反之则不能生长，说明物质J是细菌不能合成的。故选C。

8．【答案】A

【解析】

试题分析：

9．【答案】C

【解析】

试题分析：

选择培养基是指一类根据特定微生物的特殊营养要求或其对某理化因素抗性的原理而设计的培养基。具有只允许特定的微生物生长，而同时抑制或阻止其他微生物生长的功能。通过选择培养得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。如缺氮培养基可以筛选固氮微生物；细菌等原核生物对青霉素敏感，不能在含青霉素的选择培养基上生存，可以用来筛选真菌；伊红一美蓝培养基可鉴定大肠杆菌。

解答：

A．金黄色葡萄球菌是耐高浓度盐的细菌，可以在此培养基上生存，而大肠杆菌和酵母菌均不能生长，在蛋白胨培养基中二者均可生存，A错误；

B．伊红一美蓝培养基能鉴定大肠杆菌；圆褐固氮菌是自生固氮微生物可以在缺氮培养基上生存，B错误；

C．加青霉素培养基能抑制大肠杆菌的生长，而伊红－美蓝培养基能鉴别大肠杆菌，从而进行筛选，C正确；

D．斜面培养基和液体培养基只要营养全面，二者都能生长，无法选择，D错误；

故选C。

10．【答案】B

【解析】

试题分析：

常用双缩脲试剂检测蛋白质（紫色），斐林试剂检测还原糖（砖红色），碘液检测淀粉（蓝色），苏丹Ⅲ染液检测油脂（橘黄色）等。双缩脲试剂是一种用于鉴定蛋白质的分析化学试剂，它是由双缩脲试剂A（氢氧化钠）和双缩脲试剂B（硫酸铜溶液）组成，氢氧化钠可以提供碱性的环境，而溶液中的铜离子会与多肽链中的肽键生成紫色的络合物。

解答：

A．固体培养基可用于观察菌落，液体培养基可用于工业生产，A错误；
B．使用苏丹Ⅲ染液检测脂肪，显色结果是呈现橘黄色，B正确；
C．还原糖组织样液在加入斐林试剂后呈蓝色，在加热后变成砖红色，C错误；
D．甲基绿和吡罗红染色剂使DNA呈现绿色，使RNA呈现红色，D错误。
故选B。

11．【答案】D

【解析】

试题分析：

解答：

酵母菌利用现成的有机物，所以是异养型，A错误。既可以进行有氧呼吸也可以进行无氧呼吸，所以是兼性厌氧型，B．C错误，D正确。

12．【答案】D

【解析】

试题分析：

微生物接种的方法中最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，前者是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种，逐步稀释分散到培养基的表面，后者是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

解答：

A．倒平板时不能把培养皿盖完全打开并放到桌面上，这样会污染培养皿中的培养基，A错误；

B．除了第一次划线需要将接种环灼烧灭菌外，以后的每一次划线前也要将接种环进行灼烧，将上次划线结束后残留的细菌杀死，使细菌尽快分散成单个，B错误；

C．应用稀释涂布平板法对微生物进行计数的估计值比实际值偏小，因为可能多个微生物在一起长成一个菌落，C错误；

D．与平板划线法相比，稀释涂布平板法分离得到单菌落的效果更好，D正确。

故选D。

13．【答案】A

【解析】

试题分析：

无菌技术的主要内容：

①对实验操作的空间．操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；

②将用于微生物培养的器皿．接种用具和培养基等器具进行灭菌；

③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；

④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

解答：

A．紫外线照射可以杀灭真菌，A正确；

B．真空包装可以防止杂菌污染，但是不能杀灭真菌，B错误；

C．用保鲜膜密闭是为了保鲜，可以防止杂菌污染，但是不能杀灭真菌，C错误；

D．添加防腐剂可以防止杂菌污染引起的腐败变质，但是不能杀灭真菌，D错误。

故选A。

14．【答案】C

【解析】

试题分析：

实验设计的原则：对照原则和单一变量原则；对比Ⅰ．Ⅱ两组，可以发现含有维生素的培养基，大肠杆菌生长好，缺少C6H12O6大肠杆菌几乎不生长。微生物培养基的成分有碳源．氮源．水．无机盐。

解答：

A．根据培养基的成可知：每个平板都含有琼脂，属于固体培养基，A错误；
B．Ⅱ组和Ⅲ组的单一变量是葡萄糖的有无，两组实验结果说明大肠杆菌正常生长需要糖类物质，B错误；
C．由分析可知：Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长，C正确；
D．Ⅱ组计数结果偏小的主要原因是涂布平板是可能出现了两个或两个以上的菌体聚集在一起的情况，D错误。
故选C。

15．【答案】B

【解析】

试题分析：

使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞．芽孢和孢子的过程称为灭菌，常用的方法有灼烧灭菌．干热灭菌和高压蒸汽灭菌。消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程，常用的方法有煮沸消毒法．巴氏消毒法．紫外线或化学药物消毒法等。

解答：

A．能耐高温的．需要保持干燥的物品，如玻璃和金属材质的实验器具可放入干热灭菌箱中干热灭菌，A正确；
B．接种前后的接种环或涂布器都要在酒精灯的火焰上进行灼烧灭菌，B错误；
C．加热初期，必须将灭菌锅内的冷空气排尽，否则将因达不到规定温度而影响灭菌的效果，C正确；
D．采用紫外线照射灭菌时，可在物体表面喷洒适量石碳酸等化学抑菌剂，以加强消毒效果，D正确。
故选B。

16．【答案】D

【解析】

试题分析：

平板划线的操作的基本步骤是：
1．右手持接种环，经火焰灭菌，待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口过火焰，将以冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口过火焰丙塞上棉塞。
2．左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处將接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面。
3．烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却（是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试），从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连。
4．将平板倒置，放入培养箱中培养。

解答：

A．在每次划线前后都要对接种环进行灼烧灭菌，冷却后，在酒精灯火焰旁边，进行接种试验，A错误；
B．接种时划线操作是在火焰周围进行，B错误；
C．在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落，C错误；
D．在1．2．3．4区域中划线前都要对接种环进行灼烧灭菌，保证每次划线的菌种来自上一区域的末端，5区域划线前都要对接种环进行灼烧灭菌目的是防止杂菌污染，1区域划线后进行灼烧灭菌是防止污染环境及操作者，D正确。
故选D。

17．【答案】D

【解析】

试题分析：

消毒和灭菌：

解答：

A．高压蒸汽灭菌，只有当压力表的压力降到0时，才能打开盖子，A错误；

B．在100℃煮沸5-6分钟属于消毒法，B错误；

C．饮用前的鲜牛奶常用巴氏消毒法，C错误；

D．用紫外线消毒时，适量喷洒石碳酸或煤酚皂等消毒液可以加强消毒效果，D正确。

故选D。

18．【答案】C

【解析】

试题分析：

对照实验是指除所控因素外其它条件与被对照实验完全对等的实验。判断选择培养基是否起到了选择作用，则接种了的选择培养基是实验组，而接种了的牛肉育蛋白胨培养基属于对照组。

解答：

将菌液稀释相同的倍数，在完全培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，完全培养基属于正常情况不作选择处理的组别，故属于对照组，即接种了的选择培养基是实验组，而接种了的牛肉育蛋白胨培养基属于对照组，C正确。
故选C。