沪科版 (2019)选修3一、动物细胞培养经历原代培养和传代培养习题

【精品】一、动物细胞培养经历原代培养和传代培养-1课时练习

一．单项选择

1．单克隆抗体具有治疗疾病．检测和研究抗原蛋白结构及分布等多种应用价值，特别是在某些传染病治疗和检测方面有其独特的优势。如图是单克隆抗体制备过程示意图，1~6代表相关过程，a~e代表相关细胞，其中c是两两融合的细胞。以下叙述错误的是（    ）

A．过程1是给小鼠注射特定抗原蛋白，以刺激小鼠能产生相应抗体的B淋巴细胞

B．过程2的促融方法可以采用电融合技术，这种技术能击穿核膜促使核融合

C．c细胞有三种，每种细胞染色体组数是相等的，e细胞是杂交瘤细胞

D．过程3是抗体检测及克隆产生阳性细胞的过程，此过程要进行两次

2．.在下列生物工程成果中,哪项技术手段与其他各项不同（    ）

A. 克隆羊“多利”的产生 B. 抗虫棉的培育

C. 番茄——马铃薯的创造 D. 单克隆抗体的制备

3． 下图为杂交瘤细胞制备示意图。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT），在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA，无法生长。下列叙述不正确的是（ ）

A. 可用灭活的仙台病毒诱导细胞融合 B. 两两融合的细胞都能在HAT培养液中生长

C. 杂交瘤细胞需进一步筛选才能用于生产 D. 细胞膜的流动性是细胞融合的基础

4．下列关于转基因生物安全性的叙述，正确的是（    ）

A．转基因作物被动物食用后，目的基因会转入动物体细胞中

B．转基因技术的应用解决了人类史上很多难题，是有利无害的

C．现在很多转基因食品包装都有警示标志，就是提示潜在的安全性

D．转基因食品比传统食品营养更丰富，因此在不久之后转基因食品会替代传统食品

5．我国科学家培育“荧光猪”的技术流程如下图所示。图中字母表示有关技术或原理，匹配正确的是

A. 农杆菌转化法 B. 动物细胞融合     C. 有丝分裂    D. 胚胎分割

6．下图是科研人员将药物与单克隆抗体连接形成的抗体—药物偶联物(ADC)的示意图，它由抗体．接头和药物三部分组成，能实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。相关叙述正确的是（    ）

A．细胞膜的选择透过性是抗体制备过程中细胞融合的基础

B．ADC能识别肿瘤细胞利用了药物特异性杀伤靶细胞的原理

C．肿瘤细胞被ADC选择性杀伤而导致的死亡属于细胞坏死

D．用放射性同位素标记的单克隆抗体可对肿瘤进行靶向治疗

7．1 型糖尿病是一种慢性自身免疫性疾病，致敏 T 细胞的错误攻击导致胰岛 B 细胞功能受损，Teplizumab 是一种单克隆抗体药物，能够靶向结合致敏 T 细胞。以下说法错误的是（    ）

A．Teplizumab 生产过程中用到了细胞融合技术

B．1 型糖尿病与细胞免疫有关

C．1 型糖尿病患者的胰岛B 细胞上具有致敏 T 细胞的受体

D．口服胰岛素可以治疗 1 型糖尿病

8．. 牛雄性胚胎中存在特异性H-Y 抗原，可在牛早期胚胎培养液中添加H-Y 单克隆抗体，筛选胚胎进行移植，以利用乳腺生物反应器进行生物制药。下列相关叙述正确的是

A. H-Y 单克隆抗体由骨髓瘤细胞分泌 B. 应选用原肠胚做雌雄鉴别

C. 鉴别后的雄性胚胎可直接做胚胎移植 D. 用H-Y 抗原免疫母牛可获得相应抗体

9．诱导山羊乳腺细胞核与去核卵细胞融合，融合细胞可被诱导成为完整个体。后有科学研究发现，向已分化的细胞中转入4种转录因子基因，能使其细胞重新成为具有分裂分化能力的诱导多能干细胞（iPSCs）。进一步分析iPSCs，发现其染色体上甲基化位置和程度发生改变（甲基化是指组成染色体的物质与甲基结合）。下列说法错误的是（　　）

A．卵细胞细胞质和4种转录因子可能诱导了细胞基因表达情况改变

B．细胞分化过程不改变细胞的基因组成，但染色体甲基化情况不同

C．以上过程所得的融合细胞和iPSCs有无限增殖与分裂的能力

D．以上研究可为等待器官移植的患者解决器官来源和免疫排斥的问题

10．.下列有关胚胎干细胞的说法正确的是

A. 来源于早期胚胎或原始性腺 B. 具有细胞体枳大，细胞核大的特点

C. 在饲养层细胞上分化旺盛 D. 体外培养增殖一定伴随分化

11．下列有关植物组织培养的叙述，正确的是

A.  将草莓的根尖伸长区细胞进行植物组织培养可获得脱毒苗
B.  二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到能稳定遗传的可育植株
C.  用人工种皮将胚状体．愈伤组织等包装起来可制成人工种子
D.  植物耐盐突变体可通过在NaCl浓度高于正常培养基的培养基上培养筛选而获得

12．为了解决杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B细胞染色体丢失的问题，研究者在单克隆抗体的制备过程中增加了一个步骤，如下图所示。除了抗原刺激之外，用EBV（一种病毒颗粒）感染动物B细胞，使其染色体核型更稳定。这样的细胞能够在HAT培养基中存活，但对乌本苷（Oua）敏感。下列相关分析错误的是（    ）

A．杂交瘤细胞具有持续产生抗EBV抗体的能力

B．杂交瘤细胞染色体丢失可能导致抗体产生能力下降

C．图中B细胞取自于抗原刺激后动物的脾脏等

D．骨髓瘤细胞应该无法在HAT选择培养基中存活

13．天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于细胞中缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是

A. 提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录等获得cDNA即得到目的基因B
B. 利用PCR扩增技术无法获取基因B
C. 利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞
D. 将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞

14．下列有关动物细胞培养的叙述错误的是（   ）

A. 培养的动物细胞大多取自动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织

B. 原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞

C. 细胞株由于遗传物质发生了改变,一般能够传到40~50代

D. 培养条件下可以无限分裂的细胞叫细胞系

15．实践表明，普通的单克隆抗体易被人体的免疫系统识别为异源蛋白而被清除。为解决这一问题，科研工作者对人源性单克隆抗体进行了研究，具体的操作过程如下：先用人的抗体基因取代小鼠的抗体基因，获得转基因小鼠；然后从接受抗原刺激的转基因小鼠体内获取B淋巴细胞，使这些B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，经过筛选之后获得杂交瘤细胞用于单克隆抗体的制备。以下叙述错误的是（    ）

A．获取转基因小鼠时，常用显微注射法将目的基因导入小鼠受精卵

B．B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合时，可以利用灭活的病毒进行诱导

C．对融合后获得的杂交瘤细胞进行培养即可获得大量的单克隆抗体

D．人源性单克隆抗体具有特异性强．灵敏度高．抗原性低等特点

16．下图所示脂质体是一种人工膜，主要由磷脂组成，下列说法不正确是（    ）

A．脂质体表面交联抗体利于靶向治疗

B．聚乙二醇利于脂质体与靶细胞膜融合

C．a和b均为极性的水溶性药物

D．脂质体可用于表达载体转化受体细胞

17．在动物细胞培养中有部分细胞可以在培养条件下无限制地传代下去，这种培养方式称之为（　）

A. 原代培养 B. 传代培养 C. 细胞株 D. 细胞系

18．下列有关现代生物技术的叙述，错误的是（    ）

A．克隆羊多利通过有性生殖的方式克服了远缘杂交不亲和的障碍

B．植物体细胞杂交利用了细胞膜的流动性

C．试管婴儿的培育体现了受精卵的全能性

D．转基因抗病毒草莓的培育需要使用植物组织培养技术

参考答案与试题解析

1．【答案】B

【解析】

单克隆抗体的制备涉及细胞融合．细胞培养和细胞筛选，从题干信息图可看出，过程1代表的是注射特异性抗原使小鼠免疫，从而获得能产生相应抗体的B淋巴细胞；过程2是将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的过程，促融方法是用灭活的仙台病毒或聚乙二醇进行介导，最先进的方法是电融合法；过程3是用卡氏瓶进行动物细胞克隆培养，此过程是克隆培养筛选后的阳性细胞，一共需要进行两次，最终获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。

解答：

A．图中过程1是通过注射抗原或抗原蛋白来获得产生相应抗体的B淋巴细胞，A正确；

B．电融合技术是用低压电流击穿细胞膜促使细胞融合，B错误；

C．c细胞有三种，分别是骨髓瘤细胞+骨髓瘤细胞．骨髓瘤细胞+B淋巴细胞．B淋巴细胞+B淋巴细胞。骨髓瘤细胞和B淋巴细胞都有两个染色体组，融合后的细胞都含有4个染色体组，且e细胞是筛选检测后的细胞，是扩大培养的杂交瘤细胞，C正确；

D．过程3是用卡氏瓶进行动物细胞克隆培养，此过程是克隆培养筛选后的阳性细胞，一共需要进行两次，D正确。

故选B。

2．【答案】B

【解析】细胞工程技术包括植物细胞工程和动物细胞过工程，其中植物细胞工程又包括植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术动物细胞工程又包括动物细胞培养（基础）．动物细胞融合．动物细胞核移植技术．单克隆抗体制备技术等，据此解答。

克隆羊是利用克隆技术繁殖的生物技术；抗虫棉是利用转基因技术培育出的转基因生物；番茄——马铃薯是利用植物体细胞杂交技术培育出的杂种生物；单克隆抗体的制备是利用动物细胞工程技术培育出的产物；其中动物细胞克隆技术．植物体细胞杂交技术和动物细胞工程技术都属于细胞工程技术，而抗虫棉是分子水平上的基因工程技术，所以符合题意的选项是B。
故选B。

3．【答案】B

【解析】A．诱导动物细胞融合的方法有电激．聚乙二醇．灭活的病毒（如灭活的仙台病毒）等，A正确；

B．两两融合的细胞包括免疫B细胞与免疫B细胞融合的具有同种核的细胞．骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合的具有同种核的细胞．免疫B细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞，骨髓瘤细胞虽然能无限增殖，但缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶，免疫B细胞虽然有次黄嘌呤磷酸核糖转移酶，但不能无限增殖，所以在HAT筛选培养液中，两两融合的具有同种核的细胞都无法生长，只有杂交瘤细胞才能生长，B错误；

C．因每个免疫B细胞只分泌一种特异性抗体，因此在HAT筛选培养液中筛选出来的众多的杂交瘤细胞所分泌的抗体，不一定都是人类所需要的，还需要进一步把能分泌人类所需要抗体的杂交瘤细胞筛选出来，C正确；

D．动物细胞融合以细胞膜的流动性为基础，D正确。

故选B。

4．【答案】C

【解析】A．动物取食转基因作物后，要经过消化吸收才能进入体内，此时基因也会被水解，因此目的基因不可能直接进入动物细胞，A错误；

B．转基因技术的应用解决了人类史上很多难题，但既有有利的一面，也有不利的一面，B错误；

C．现在很多转基因食品包装都有警示标志，就是提示潜在的安全性，让消费者谨慎选择，C正确；

D．转基因食品和传统食品各有优缺点，不久后转基因食品不会完全替代传统食品，D错误。

故选C。

5．【答案】C

【解析】A.A是显微注射技术，A不符合题意；

B.B是核移植技术，B不符合题意；

C.C是早期胚胎培养技术，细胞分裂方式为有丝分裂，C符合题意；

D.D是胚胎移植技术，D不符合题意。

故选C。

6．【答案】D

【解析】

7．【答案】D

【解析】

8．【答案】D

【解析】A.单克隆抗体由杂交瘤细胞分泌，A错误；

B.做雌雄性别鉴别应选择囊胚期的滋养层细胞，B错误；

C.由于是利用乳腺生物反应器进行生物制药，则鉴别后的雌性胚胎可直接做胚胎移植，雄性胚胎没有意义，C错误；

D.H-Y抗原免疫母牛，使其体内产生体液免疫，产生相应的浆细胞，获得相应抗体，D正确；

因此，本题答案选D。

9．【答案】C

【解析】

基因表达包括转录和翻译两个过程，其中转录过程需要RNA聚合酶的启动。

细胞分化是指细胞在生长过程中细胞的形态．结构和功能发生变化的过程，细胞分化形成了不同的组织，如动物的肌肉组织．上皮组织．神经组织和结缔组织，植物的保护组织．营养组织．分生组织和输导组织。

解答：

A．通过题干信息可知，卵细胞细胞质和4种转录因子，能使其细胞重新成为具有分裂分化能力的诱导多能干细胞（iPSCs），故可能诱导细胞基因表达情况改变，A正确；

B．题干信息可知，进一步分析iPSCs，发现其染色体上甲基化位置和程度发生改变（甲基化是指组成染色体的物质与甲基结合），故细胞分化过程不改变细胞的基因组成，但染色体甲基化情况不同，B正确；

C．题干可知山羊乳腺细胞核与去核卵细胞融合，故融合细胞和iPSCs不具有无限增殖的能力，C错误；

D．通过题干信息分析可知，以上研究可为等待器官移植的患者解决器官来源和免疫排斥的问题，D正确。

故选C。

10．【答案】A

【解析】胚胎干细胞可以从早期胚胎或原始性腺获得，A项正确；具有细胞体枳小，细胞核大的特点，B项错误；胚胎干细胞在饲养层细胞上可以维持只分裂不分化的状态，C项．D项错误。

11．【答案】D

【解析】A.将草莓的根尖脱毒苗分生区的细胞进行植物组织培养可以得到脱毒苗，故A错误；

B.二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到的是单倍体植株，这些单倍体植株高度不育，不能稳定遗传，故B错误；

C.人工种子是通过植物组织培养得到的胚状体．不定芽．顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子，故C错误；

D.只有耐盐的细胞，才能在添加适量NaCl的培养基存活，所以可通过在NaCl浓度高于正常培养基的培养基上培养筛选而获得耐盐的突变体，故D正确。

故选D。

12．【答案】A

【解析】

题图分析：图示为单克隆抗体制备过程，除了抗原刺激之外，还用EBV（一种病毒颗粒）感染动物B淋巴细胞，使其染色体核型更稳定，不易发生变异，该细胞株能够在HAT培养基中存活。

解答：

A．本实验中EBV的作用是使B细胞染色体核型更稳定，而不是刺激B细胞分化成浆细胞产生抗体，所以该杂交瘤细胞不能产生抗EBV的抗体，A错误；

B．杂交瘤细胞染色体丢失可能导致细胞发生变异，从而导致抗体产生能力下降，B正确；

C．B细胞分布在脾脏和淋巴结等免疫器官中，所以在单克隆抗体制备过程中，B细胞取自于抗原刺激后动物的淋巴结或脾脏等，C正确；

D．据图可知，骨髓瘤细胞在HAT选择培养基中死亡，D正确。

故选A。

13．【答案】A

【解析】A.要获得矮牵牛中控制蓝色色素合成的基因B，可提取矮牵牛蓝色花mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因B，A正确；
B. 因为开蓝色花的矮牵牛基因B的序列是已知的，所以该目的基因宜采用化学方法合成或用聚合酶链式反应（PCR）扩增获取基因B，B错误；
C.目的基因与质粒的连接需要用DNA连接酶，而不是DNA聚合酶，C错误；
D.目的基因需要和运载体连接后形成重组质粒再导入，而且应该用农杆菌进行感染，而不是大肠杆菌，D错误。
故选A 。

14．【答案】C

【解析】动物细胞培养过程：取动物胚胎或幼龄动物组织动--剪碎组织--用胰蛋白酶处理分散成单个细胞--制成细胞悬液--转入培养液中（原代培养）--放入二氧化碳培养箱培养--贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液--转入培养液（传代培养）--放入二氧化碳培养箱培养（95%空气和5%的CO2）．培养基的营养物质：糖．氨基酸．促生长因子．无机盐．微量元素等，还需加入血清．血浆等天然物质。细胞株：原代培养细胞传至10代左右就不容易传下去，细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞能存活传到40～50代，这部分细胞称为细胞株。细胞系：细胞株传到50左右不能再继续传代，部分细胞遗传物质改变，具有癌变细胞的特点，可以在培养条件下无限制的传代下去，这部分细胞称为细胞系。

动物胚胎或幼龄动物组织细胞分裂能力旺盛，所以用于培养的细胞多取自动物胚胎或幼龄动物，A正确；原代培养细胞传至10代左右就不容易传下去，细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，B正确；原代培养细胞中少数细胞能存活传到40～50代，这部分细胞称为细胞株，其遗传物质没有发生改变，C错误；细胞株传到50左右不能再继续传代，部分细胞遗传物质改变，具有癌变细胞的特点，可以在培养条件下无限制的传代下去形成细胞系，D正确。

15．【答案】C

【解析】

单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

解答：

A．在动物转基因技术中，常采用显微注射法将目的基因导入动物的受精卵，A正确；

B．常用灭活病毒诱导动物细胞融合，其原理是病毒表面的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，B正确；

C．用特定的选择培养基培养之后，筛选得到的杂交瘤细胞需经过克隆化培养和抗体检测，多次筛选才能获得分泌单一抗体的杂交瘤细胞，C错误；

D．经过转基因技术改造小鼠之后，获得的抗体是由人的抗体基因编码的，所以称为人源性单克隆抗体，能够有效解决鼠源性单克隆抗体被人体识别为异源蛋白的问题，即具有特异性强．灵敏度高．抗原性低等特点，D正确。

故选C。

16．【答案】C

【解析】

流动镶嵌模型的特点磷脂分子的特点是一个亲水基团的头和两个疏水基团的尾，磷脂的双分子层在水中的分布是亲水基团和水接触，疏水基团远离水。

解答：

A．脂质体表面交联抗体，提高了对靶细胞的识别，利于靶向治疗，A正确；

B．脂质体用聚乙二醇修饰，增强了脂质体的亲水性，利于脂质体与靶细胞膜融合，B正确；

C．b位于磷脂双分子层的中央，与疏水的尾部结合，则b可能是脂溶性的药物，C错误；

D．脂质体载药能力强，亲水性药物可集中在水性核心中，而疏水性药物主要分布于脂质双层内。因此脂质体可用于表达载体转化受体细胞，D正确。

故选C。
 

17．【答案】B

【解析】本题考查动物细胞培养的知识。原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。初次培养称为原代细胞培养。 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。

18．【答案】A

【解析】A．克隆羊多利是通过无性生殖的方式产生的，A错误；

B．植物体细胞杂交利用了细胞膜的结构特点：具有一定的流动性，B正确；

C．试管婴儿是体外受精和胚胎移植后形成的，发育的起点是受精卵，利用了受精卵细胞的全能性，C正确；

D．转基因抗病毒草莓先用基因工程技术将抗病毒基因导入植物细胞中，再经过植物组织培养技术的培育获得抗病毒草莓，D正确。

故选A。