2021-2022学年河北省唐山市开滦二中高二下学期第一次月考生物试题含解析

这是一份2021-2022学年河北省唐山市开滦二中高二下学期第一次月考生物试题含解析，共32页。试卷主要包含了单选题，分析图示等内容，欢迎下载使用。
河北省唐山市开滦二中2020—2021学年高二下学期
第一次月考生物试题
学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________

一、单选题
1．基因工程技术也称为DNA重组技术，其实施必须具备的四个必要条件是（　　）
A．目的基因、限制酶、载体、受体细胞
B．目的基因、工具酶、载体、受体细胞
C．重组DNA、RNA聚合酶、限制酶、连接酶
D．模板DNA、mRNA、质粒、受体细胞
【答案】B
【分析】基因工程的工具：“剪刀”——限制性核酸内切酶；“针线”——DNA连接酶；“分子运输车”——载体，包括质粒、动植物病毒、噬菌体衍生物等。
【详解】实施基因工程，需用用限制酶获取目的基因，然后用DNA连接酶连接目的基因与载体，并将基因表达载体导入受体细胞，即需要目的基因、工具酶、载体、受体细胞四个条件。
故选B。
【点睛】
2．下列有关基因工程中载体的说法，正确的是（    ）
A．基因工程的操作中最常用的载体是来自于细菌的天然质粒
B．质粒是一种独立于细菌染色体外的双链环状DNA分子
C．具有某些标记基因，以便为目的基因的表达提供条件
D．能够在宿主细胞中复制并稳定保存，以便提供大量的目的基因
【答案】D
【分析】1、载体需含有标记基因，且能够在宿主细胞中复制并稳定保存。
2、基因工程载体的种类有质粒、噬菌体、动植物病毒等。
【详解】A、基因工程的操作中最常用的载体是改造后的质粒，A错误；
B、细菌是原核生物，没有染色体，B错误；
C、标记基因是用于检验目的基因是否导入受体细胞，与目的基因的表达无关，C错误；
D、载体能将目的基因导入到受体细胞，作为载体的条件之一是能够在宿主细胞中复制并稳定保存，以便提供大量的目的基因，D正确。
故选D。
3．下列关于如图所示黏性末端的说法错误的是（    ）

A．DNA连接酶能催化磷酸基团和脱氧核糖之间形成化学键
B．甲、乙黏性末端是由不同的限制酶切割而成的
C．切割甲的限制酶也能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子
D．甲、乙黏性末端可形成重组DNA分子
【答案】C
【分析】限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂.限制酶具有特异性，即一种限制酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列。
【详解】A、DNA连接酶催化磷酸基团和脱氧核糖之间形成磷酸二酯键，A正确；
B、切割甲的限制酶的识别序列是-GAATTC-，切割乙的限制酶的识别序列是-CAATTG，所以甲、乙黏性末端是由不同的限制酶切割而成，B正确；
C、甲、乙片段形成的重组DNA分子的序列是-CAATTC-，而甲酶的识别序列是-GAATTC-，且在G和A之间切割，所以切割甲的限制酶不能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子，C错误；
D、甲和乙的黏性末端相同，都是-AATT-，可以被DNA连接酶连接形成重组DNA分子，D正确。
故选C。
4．某研究所的研究人员将生长激素基因通过质粒介导进入大肠杆菌细胞内，来表达产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因：A是抗链霉素基因，B是抗氨苄青霉素基因，且目的基因要插入到基因B中，而大肠杆菌不带有任何抗性基因。下列叙述正确的是（    ）
A．导入大肠杆菌的质粒一定为重组质粒
B．研究过程需要使用限制酶、DNA连接酶和运载体这些专门的工具酶
C．可用含氨苄青霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒
D．在含链霉素培养基中能生长的可能是符合生产要求的大肠杆菌
【答案】D
【分析】基因工程需要三种工具：限制酶、DNA连接酶以及载体。
【详解】A、导入大肠杆菌的质粒可能为重组质粒，也可能为普通质粒，A错误；
B、构建基因表达载体过程中需要限制酶和DNA连接酶，运载体不属于酶，B错误；
C、由于目的基因要插入基因B中，即抗氨苄青霉素基因被破坏，即工程菌不能抗氨苄青霉素，因此不能用含氨苄青霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒，C错误；
D、由于目的基因要插入基因B中，即抗氨苄青霉素基因被破坏，即工程菌不能抗氨苄青霉素，在含氨苄青霉素培养基中不能生长，而重组质粒中抗链霉素基因完好，能表达，在含链霉素培养基中能生长的可能是符合生产要求的大肠杆菌，D正确。
故选D。
5．图1为某种质粒简图，图2表示某外源DNA上的目的基因，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ、HindⅢ的酶切位点。下列有关叙述错误的是（    ）

A．使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理图1质粒，所得的产物中含有2个游离的磷酸基团
B．如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成的重组DNA中具有2个EcoRⅠ酶的切点
C．为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理
D．使用EcoRⅠ处理外源DNA分子时需消耗4分子H2O
【答案】A
【分析】基因工程的工具：
（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。
（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒．在构建重组Ti质粒时，必须使用限制性核酸内切酶（限制酶）切割质粒使其具有与目的基因相同的黏性末端，之后再用DNA连接酶将目的基因和质粒连接成重组质粒。
【详解】A、一个图1所示的质粒分子经BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶切割后，所得的产物中含有两段DNA分子，每条DNA分子由两条脱氧核苷酸链组成，因此含有4个游离的磷酸基团，A错误；
B、若将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后再用DNA连接酶连接，则形成的重组DNA中，目的基因两端应各含1个EcoRⅠ酶切位点，即重组DNA中EcoRⅠ酶切点有2个，B正确；
C、为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，可用两种限制酶进行切割，由于质粒和含目的基因上都含有BamHⅠ和Hind Ⅲ的酶切位点，故酶切时可使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理，C正确；
C、使用EcoRⅠ处理外源DNA分子时，有4个磷酸二酯键断裂，因此需消耗4分子H2O，D正确。
故选A。
6．如图为利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述，正确的是（    ）

A．图示②→③是基因工程的核心步骤
B．③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上
C．④的染色体上若含抗虫基因，⑤可能不具备抗虫性状
D．检测⑤的抗虫性状，常用的方法是检测其是否含有Bt蛋白
【答案】C
【分析】分析题图：图示是利用基因工程培育抗虫植物的示意图，其中①为质粒，作为运载体；②为重组质粒；③为含有重组质粒的农杆菌；④为含有目的基因的植物细胞；⑤为转基因植株。
【详解】A、图示①→②为基因表达载体的构建，才是基因工程的核心步骤，A错误；
B、③→④用农杆菌侵染植物细胞，重组Ti质粒的T-DNA片段整合到植物细胞的染色体上，B错误；
C、含有目的基因的植物细胞④的染色体上含有目的基因，但目的基因也可能不能转录或者不能翻译，或者表达的蛋白质不具有生物活性，故⑤转基因植株可能不具备抗虫性状，需要进行筛选，C正确；
D、转基因植株⑤含有Bt基因，能合成Bt蛋白杀死棉铃虫，要检测其抗虫性，常用方法是在棉地里投放棉铃虫，观察棉铃虫吃了叶片后是否死亡，D错误。
故选C。
7．腺苷脱氢酶（ADA）基因缺陷症是一种免疫缺陷病，对患者采用基因治疗的方法是：取出患者的T淋巴细胞，进行体外培养时转入正常ADA基因，再将这些细胞注入患者体内，使其免疫功能增强，能正常生活。下列相关叙述中，正确是（    ）
A．正常ADA的基因替换了缺陷基因，发生了基因突变
B．转入的ADA基因通过控制ADA的合成来改善免疫功能
C．以上基因治疗疾病的方法属于体内基因治疗
D．为保证体内有足量的携带正常基因的T淋巴细胞，应将其体外培养至无限增殖时再注入患者体内
【答案】B
【分析】基因治疗：把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，例：将腺苷酸脱氨酶（ADA）基因导入患者的T淋巴细胞，治疗腺苷脱氢酶（ADA）基因缺陷症。
【详解】A、将腺苷酸脱氨酶（ADA）基因导入患者的淋巴细胞，正常ADA基因并没有替换患者的缺陷基因，属于基因重组，A错误；
B、将腺苷酸脱氨酶（ADA）基因导入患者的淋巴细胞，转入的ADA基因通过控制ADA的合成，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，B正确；
C、根据题意“取出患者的T淋巴细胞，进行体外培养时转入正常ADA基因，再将这些细胞注入患者体内”可知，该基因治疗疾病的方法属于体外基因治疗，C错误；
D、T淋巴细胞需在体外培养至一定数量时再注入患者体内，保证体内有足量的携带正常基因的T淋巴细胞，T淋巴细胞不能无限增殖，D错误。
故选B。
8．2011年8月，吉林大学农学部奶牛繁育基地成功培育出一头携带转入赖氨酸基因的转基因克隆牛犊“织女”，从其乳汁中获得大量的赖氨酸。它的诞生标志着国际克隆技术又取得了一次重大突破。以下有关的叙述正确的是（    ）
A．利用显微注射法直接将赖氨酸基因导入牛的受精卵，使其发育成转基因牛
B．该题中赖氨酸基因表达载体的受体细胞的性染色体组成可以是XX或XY
C．人们只在“织女”的乳汁中才能获取赖氨酸，是因为只在它的乳腺细胞中含有赖氨酸基因
D．培育＂织女＂的过程中应用了核移植技术
【答案】D
【分析】转基因克隆牛犊“织女”的培育过程中涉及的技术手段有基因工程、核移植技术、早期胚胎培养、胚胎移植等。
【详解】A、将赖氨酸基因导入牛的受精卵之前，要先构建基因表达载体，再利用显微注射法将基因表达载体导入牛的受精卵，A错误；
B、该项研究的目的是从其乳汁中获得大量的赖氨酸，故基因表达载体的受体细胞的性染色体组成是XX，B错误；
C、“织女”全身细胞中都含有赖氨酸基因，但赖氨酸基因基因只在乳腺细胞中表达，C错误；
D、将含有目的基因的受精卵导入受体母牛体内时，应用了核移植技术，D正确。
故选D。
9．草甘膦是一种低毒性的广谱除草剂，能非特异性侵入并杀死所有的植物，其除草机制是抑制植物体内EPSPS酶的合成，最终导致植物死亡。科学家从一种抗草甘膦的大肠杆菌突变株中分离出EPSPS基因（控制EPSPS合成酶合成的基因）转入小麦，以提高其对草甘膦的耐受性。下列有关叙述正确的是（    ）
A．必须将EPSPS基因转入小麦的受精卵，以便获得对草甘膦耐受性高的小麦
B．可用抗原-抗体杂交的方法检测细胞中是否有EPSPS基因的表达产物
C．要筛选出含EPSPS基因的突变菌株，应在培养基中加入EPSPS酶
D．EPSPS基因导入小麦叶肉细胞的叶绿体后，该性状可随传粉过程遗传
【答案】B
【分析】基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等，标记基因可便于目的基因的鉴定和筛选。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】A、将EPSPS基因转入小麦的受精卵之前，应先构建含EPSPS基因的基因表达载体，A错误；
B、EPSPS基因的表达产物是蛋白质，可用抗原—抗体杂交的方法检测细胞中是否有EPSPS基因的表达产物，B正确；
C、EPSPS基因的突变菌株对草甘膦具有耐受性，要筛选出含EPSPS基因的突变菌株，应在培养基中加入草甘膦，C错误；
D、叶绿体中的基因通过母本遗传给后代，因此EPSPS基因导入小麦叶肉细胞的叶绿体后，该性状不能随传粉过程遗传，D错误。
故选B。
10．获得抗除草剂转基因玉米自交系A，技术路线如下图。为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用2种限制酶，选择的原则是

①Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点
②G基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点
③酶切后，G基因形成的两个黏性末端序列不相同
④酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同
A．①③ B．①④
C．②③ D．②④
【答案】A
【详解】为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用2种限制酶，则质粒内每种限制酶只有一个切割位点，①正确；含目的基因DNA内每种限制酶也只有一个切割位点，目的基因内不能有限制酶切割位点，②错误；为防止酶切产物自身环化，则酶切后的两个黏性末端序列不同，③正确、④错误。故选A。
11．对乙型肝炎病毒基因组的DNA测序得知该病毒的核心蛋白和表面抗原蛋白的氨基酸序列。下图是应用生物工程生产乙肝疫苗的示意图，据图分析下列叙述不正确的是（    ）

A．生产乙肝疫苗的过程也达到了定向改造细菌的目的
B．选用细菌作为受体细胞是因为其代谢旺盛繁殖快
C．用于生产疫苗的目的基因能编码病毒的表面抗原蛋白
D．②过程中利用Ca2+处理细菌使其成为感受态细胞，即可将重组表达载体导入所有的细菌细胞
【答案】D
【分析】分析题图：图示是应用生物工程生产乙肝疫苗的示意图。①表示获取目的基因，即从乙肝病毒中分离出有关基因（目的基因）；②表示基因表达载体的构建和将目的基因导入受体细胞；③表示采用微生物工程进行发酵。
【详解】A、生产乙肝疫苗的过程采用了基因工程技术，该技术能定向改造生物的性状，A正确；
B、选用细菌作为受体细胞是因为其具有繁殖快，遗传物质相对较少等特点，B正确；
C、用于生产疫苗的目的基因能编码病毒的表面抗原蛋白，C正确；
D、Ca2+处理的细菌并非都能成为感受态，因此并非重组表达载体都能导入所有细菌细胞中，D错误。
故选D。
12．以下不能说明细胞全能性的实验是（      ）
A．胡萝卜韧皮部细胞培育出植株 B．紫色糯性玉米种子培育出植株
C．转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株 D．番茄与马铃薯体细胞杂交后培育出植株
【答案】B
【分析】1、细胞全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能。
2、细胞具有全能性的原因是细胞具有该生物全部的遗传物质。
3、细胞的全能性以产生个体为标志，若无个体产生，不能体现细胞的全能性，如采用植物组织培养法将杂种细胞培养成杂种植株体现了植物细胞的全能性。
【详解】A、萝卜韧皮部细胞培育出植株是植物组织培养，体现了细胞的全能性，A错误；
B、紫色糯性玉米种子培育出植株是个体的正常发育，不能体现细胞的全能性，B正确；
C、通过基因工程的方法获取含抗虫基因的重组细胞，经过植物组织培养获得抗虫棉，体现了细胞的全能性，C错误；
D、番茄体细胞与马铃薯体细胞融合后培育出植株技术是植物体细胞杂交，原理是细胞膜的流动性和细胞的全能性，D错误。
故选B。
13．下列关于植物组织培养的叙述：①培养对象是单个细胞②目的全是为了获得完整植株③培养过程需要生长激素和细胞分裂素的调节④单倍体育种用到了植物组织培养技术⑤植物组织培养的全过程需要照光⑥植物细胞只要在离体状态下即可表现出全能性⑦属于植物无性繁殖技术，故细胞的遗传物质不会发生改变⑧培养基中的葡萄糖能调节渗透压，并能提供能量其中，正确的说法有（    ）
A．一项 B．两项 C．三项 D．四项
【答案】A
【分析】1、植物组织培养技术的培养条件：①在无菌条件下，②保证水、无机盐、碳源（常用蔗糖）、氮源（含氮有机物）、生长因子（维生素）等营养物质，③需要添加一些植物生长调节物质，主要是生长素和细胞分裂素，④愈伤组织再分化到一定阶段，形成叶绿体，能进行光合作用。
2、离体的细胞或组织经脱分化形成愈伤组织，再将愈伤组织转接到含有不同激素成分的培养基上，诱导其再分化生成胚状体或丛芽，进而发育成完整的小植株。
【详解】①植物组织培养的培养对象可以是单个细胞也可以是组织，①错误；
②植物组织培养的目的有的是为了获得完整植株，有的是为了获得愈伤组织和器官，②错误；
③生长激素是动物激素，植物组织培养需要的是生长素，③错误；

④单倍体育种过程中花药离体培养属于植物组织培养，④正确；
⑤植物组织培养脱分化工程不需要光照，⑤错误；
⑥植物细胞除了离体，还需要营养物质，激素等条件才能表现出全能性，⑥错误；
⑦植物组织培养属于植物无性繁殖技术，细胞可能发生基因突变从而改变遗传物质，⑦错误；
⑧培养基中的蔗糖能调节渗透压，并能提供能量，⑧错误。
故选A。
14．如图为将胡萝卜的离体组织在一定条件下培育形成试管苗的过程示意图，有关叙述正确的是（    ）

A．利用此过程获得的试管苗可能为杂合子
B．①、②过程中均发生细胞的增殖和分化
C．多倍体植株的培育需经过如图所示过程
D．对愈伤组织细胞进行处理使其发生突变，就可以得到对人们有用的新品种
【答案】A
【分析】分析题图可知，图示为植物组织培养技术。图中①是脱分化过程，②为再分化并发育为试管苗的过程。
【详解】A、分析题图可知，图示为植物组织培养技术，利用此过程获得的试管苗的基因型与亲本的基因型相同，可能为杂合子，也可能为纯合子，A正确；
B、图中①是脱分化过程，没有发生细胞分化，B错误；
C、多倍体植株的培育需利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，不需要经过组织培养，C错误；
D、对愈伤组织细胞进行处理使其发生突变，由于基因突变具有不定向性，因此不一定能得到人们有用的品种，D错误。
故选A。
15．20世纪70年代，以植物细胞克隆为代表的细胞工程诞生。随后，植物花药培养以及植物体细胞杂交技术等得以确立和发展，标志着植物细胞工程技术进入了高速发展的阶段。下列有关说法正确的是（    ）
A．可以利用植物组织培养脱分化所得到的胚状体等为材料制备人工种子
B．在培养基中加入分化诱导因子后，胡萝卜的愈伤组织就可以诱导出试管苗
C．进行植物体细胞杂交的实验，不必考虑亲本细胞的生殖隔离问题
D．利用灭活的病毒能诱导植物原生质体融合的原理是细胞膜具有流动性
【答案】C
【分析】人工种子是指通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子。在一定的营养和激素等条件下，植物细胞可以脱分化形成愈伤组织，将愈伤组织转接到含有不同激素成分的培养基上，就可以诱导其再分化生成胚状体或丛芽。
【详解】A、由叶组织块经脱分化形成愈伤组织，再分化后形成胚状体为材料制备人工种子，A错误；
B、分化诱导因子能诱导胚胎干细胞分化，但不能诱导愈伤组织细胞分化，B错误；
C、植物体细胞杂交技术能够克服远缘杂交不亲和的障碍，故在进行植物体细胞杂交的实验，不必考虑亲本细胞的生殖隔离问题 ，C正确；
D、诱导植物原生质体融合不能使用灭活的病毒，灭活病毒只能诱导动物细胞的融合，D错误。
故选C。
16．细胞工程中，选择合适的生物材料是成功的关键。下列选择不合理的是（    ）
A．选择一定大小的植物茎尖进行组织培养，可获得抗病毒植株
B．选择胚胎细胞作为核供体进行核移植，可提高克隆动物的成功率
C．选择幼龄动物的细胞进行培养，有利于获得大量细胞
D．选择植物的愈伤组织进行细胞培养，可实现细胞产物的工厂化生产
【答案】A
【分析】1、动物细胞核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为克隆个体。2、选用去核卵（母）细胞的原因：卵（母）细胞大，容易操作；卵（母）细胞质多，营养丰富；含有促使细胞全能性表达的物质。3、植物组织培养技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
【详解】A、茎尖等分生区组织几乎不含病毒，因此选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗，不是抗毒植株，A错误；
B、胚胎细胞分化程度低，全能性高，用它做材料可提高克隆动物的成功率，B正确；
C、幼龄动物细胞分化程度低，分裂旺盛，利于培养大量细胞，C正确；
D、愈伤组织细胞分裂旺盛，工厂化生产细胞产品，通常培育到愈伤组织，D正确。
故选A。
17．我国首例“虎狮兽”2002年在南京红山动物园诞生，利用了雄虎的精子和雌狮卵子体外受精而产生，对此下列说法正确的是（    ）
A．在体外将雄虎的精子放入人工配制的获能液中进行化学药物诱导使其获能
B．从雌狮卵巢中采集的卵母细胞应立即与精子共同放入培养液使其完成受精
C．将体外受精得到的受精卵移入母体子宫后，由母体来承担妊娠和育仔任务
D．雄虎和雌狮经有性繁殖产生的虎狮兽是不育的二倍体动物
【答案】D
【分析】体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精，据此分析作答。
【详解】A、若采用体外受精技术，采集的精子需要经过获能处理，可将采集到的雄虎精子放在人工配制的获能液中进行处理（人工配制的获能液叫培养法，而非化学诱导），A错误；
B、从雌狮卵巢中采集的卵母细胞应培养成熟（减数第二次分裂中期）才能与获能的精子共同放入培养液受精形成受精卵，B错误；
C、胚胎移植时应选择培养到一定时期的胚胎（通常是桑椹胚/桑葚胚或囊胚），而不是受精卵，C错误；
D、雄虎和雌狮是两个物种，两者经有性繁殖产生的虎狮兽是不育的二倍体动物，D正确。
故选D。
18．甘草酸是中药甘草中的主要活性成分。为了快速检测甘草酸，科研人员利用细胞工程技术制备了抗甘草酸的单克隆抗体，其基本操作过程如图。相关叙述正确的是（    ）

A．细胞甲是能够产生抗甘草酸抗体的B淋巴细胞
B．若小鼠骨髓瘤细胞和B淋巴细胞的染色体数均为40，则杂交瘤细胞的DNA分子数为80
C．过程④利用选择培养基筛选出了分泌所需抗体的杂交瘤细胞
D．过程⑤无论在体内还是体外进行，细胞丁都可大量增殖
【答案】D
【分析】一、克隆抗体的制备过程：
1、细胞来源：B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖。
2、杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。
3、两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。
4、提取单克隆抗体：从培养液或小鼠腹水中提取。
二、分析图示：①为注射抗原，诱导产生具有免疫能力的B淋巴细胞；②为将具有免疫能力的B细胞和骨髓瘤细胞融合；③用选择性培养基获得杂交瘤细胞；④用抗体检测和克隆培养得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞；⑤为提取单克隆抗体。
【详解】A、抗体是由浆细胞产生的，故细胞甲为浆细胞或已免疫的B淋巴细胞，A错误；
B、小鼠骨髓瘤细胞和B淋巴细胞的染色体数均为40，融合后形成的杂交瘤细胞染色体数目为80，由于细胞质中也有DNA，所以杂交瘤细胞的DNA分子数大于80，B错误；
C、过程③用选择性培养基获得杂交瘤细胞，过程④用抗体检测和克隆培养得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞，C错误；
D、细胞丁为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能够增殖又能产生抗体，过程⑤无论在体内还是体外进行，细胞丁都可大量增殖，D正确。
故选D。
19．如图所示，动物克隆繁殖的基本过程：

①该过程体现了核移植和胚胎移植等细胞工程技术，所培育的子代动物为克隆动物②卵细胞体积大，有利于与外界环境进行物质交换，能激发细胞核的全能性并提供营养③子代动物的性状和性别和提供甲细胞的动物完全相同④甲细胞若是体细胞，其实验难度较大，原因是分化后的体细胞的基因组成缺乏完整性⑤代孕的雌性动物要服用免疫抑制药物以避免对移入的胚胎发生免疫排斥
以上说法不正确的有（    ）
A．两项 B．三项 C．四项 D．五项
【答案】D
【分析】动物核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体，核移植得到的动物称克隆动物。
【详解】①克隆动物的培育过程中，涉及核移植技术和胚胎移植技术，但胚胎移植技术属于胚胎工程，①错误；
②卵细胞体积大，但其相对表面积小，不利于细胞与环境进行物质交换，②错误；
③子代动物与提供甲细胞的动物性状大体相同，但由于受细胞质基因及环境因素的影响等，因而性状不完全相同，③错误；
④甲细胞若是体细胞，其实验难度较大，根本原因是动物体细胞是高度分化的细胞，全能性受到抑制，④错误；
⑤代孕的雌性动物对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，故无需使用免疫抑制药物，⑤错误。
故选D。
20．下列关于哺乳动物精子和卵子的发生正确的是（    ）
A．精子形成过程是连续的，一个精原细胞经过减数分裂可直接产生四个精子
B．哺乳动物进入初情期后，在其卵巢中开始出现大大小小的卵泡
C．卵子发生的减数第二次分裂和精卵结合的场所是相同的
D．精子的头部主要含细胞核，中心体发育成它的顶体
【答案】C
【分析】哺乳动物精子和卵子发生的不同点：（1）精子的减数两次分裂是连续的，场所唯一（MⅠ和MⅡ的场所都是睾丸）；而卵子的两次分裂是不连续的，场所不唯一。（MⅠ场所在卵巢，MⅡ场所在输卵管中）（2）精子和卵子发生的时间不同：精子的发生是从初情期一直到生殖机能衰退；多数哺乳动物卵子的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前完成的；MⅠ是在雌性动物排卵前后完成的，MⅡ是在受精过程中完成的；（3）精子的形成过程需要变形；卵细胞的形成过程不需要变形。
【详解】A、一个精原细胞经过减数分裂后可直接产生4个精细胞，精细胞还需要经过变形才能成为精子，A错误；
B、卵泡的形成和在卵巢内的储备，是在胎儿时期完成的，B错误；
C、卵子产生过程中的减数第二次分裂是在精子和卵子结合的过程中完成的，即在受精作用过程中完成的，因此它们的场所是相同的，C正确；
D、精子的头部主要含细胞核，高尔基体发育为它的顶体，D错误。
故选C。
21．采用胚胎工程技术可以实现某良种动物的快速繁殖，下列叙述正确的是（    ）
A．利用胚胎分割技术可产生同卵多胎或同卵双胎，它们具有相同的遗传物质且没有形态学差异
B．获能的精子和发育成熟的卵子在发育培养液中可完成体外受精
C．将动物在特定光控周期条件下饲养并饲喂有关激素，可促进其超数排卵
D．胚胎移植快速繁殖优良种畜的过程中可能发生突变和基因重组
【答案】D
【分析】1、胚胎移植的生理基础（1）供体与受体相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境；（2）胚胎在早期母体中处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能；（3）子宫不对外来胚胎发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。（4）胚胎遗传性状不受受体任何影响。2、胚胎分割存在的问题：胚胎分割的分数越多，操作的难度越大，移植的成功率也越低。
【详解】A、分割的胚胎细胞有相同的遗传物质，但生物的性状还受环境因素的影响，因此发育成的个体有形态学的差异，A错误；
B、在实施体外受精时，获能的精子与培养成熟的卵子，一般情况下都可以在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精作用，B错误；
C、促性腺激素有促进超数排卵的作用，但促性腺激素的化学本质是蛋白质，不能饲喂，C错误；
D、胚胎移植中的早期胚胎若是有性生殖产生的，则胚胎移植快速繁殖优良种畜的过程中可能发生突变和基因重组，D正确。
故选D。
22．芦笋是雌雄异株植物，雄株性染色体为XY，雌株为XX；其幼茎可食用，雄株产量高。以下为两种培育雄株的技术路线。有关叙述错误的是（　　）

A．形成愈伤组织可通过添加植物生长调节剂进行诱导
B．幼苗乙和丙的形成均经过脱分化和再分化过程
C．雄株丁的亲本的性染色体组成分别为XY、XX
D．与雄株甲不同，雄株丁培育过程中发生了基因重组
【答案】C
【分析】本题考查的知识点是近几年高考的热点问题。在高中生物试题中常见的育种方式有杂交育种、诱变育种、单倍体育种、多倍体育种，基因工程育种，细胞工程育种等。学生应掌握各种育种方式的原理、方法、优点。
【详解】生长素与细胞分裂素的使用比例影响植物细胞的发育方向，当二者比值高时，有利于根的分化，抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成；比例适中时，促进愈伤组织的形成，因为生长素和细胞分裂素相对应的植物生长调节剂也有相应的效果，所以可以通过添加植物生长调节剂进行诱导，A正确；幼苗乙与幼苗丙的形成是花药离体培养形成单倍体植株的过程，此过程的原理是植物组织培养，因此需要经过脱分化与再分化的过程，B正确；花粉是经过减数分裂产生的，其配子含有X染色体或Y染色体，经过花药离体培养，得到单倍体，再经过秋水仙素处理后得到的植株乙与丙的基因型为XX或YY，因此雄株丁的亲本的基因型分别为XX、YY，C错误；雄株甲是通过无性繁殖形成的，形成过程中不会进行减数分裂，因此也不会发生基因重组；雄株乙是通过有性生殖形成的，形成过程中经过了减数分裂，因此会发生基因重组，D正确。
【点睛】解答本题需要学生掌握常见的几种育种方式及其所遵循的原理，要注意雄株甲是通过无性繁殖的方式进行育种，此过程不会发生基因重组，另外需要明确单倍体育种需要经过植物的组织培养过程。
23．以下关于胚胎发育的说法不正确的是（    ）
A．原肠胚时滋养层细胞发育成胎儿的胎膜和胎盘
B．囊胚期的细胞出现了细胞分化，遗传物质发生改变
C．囊胚期内细胞团和滋养层细胞差异是转录水平上的差异引起的
D．桑椹胚的各细胞结构功能基本相同
【答案】B
【分析】胚胎发育过程：
（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；
（2）桑葚胚：32个细胞左右的胚胎[之前所有细胞都能发育成完整胚胎，属全能细胞]；
（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔[注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化]；
（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。[细胞分化在胚胎期达到最大限度]
【详解】A、滋养层细胞在原肠胚时期发育成胎儿的胎膜和胎盘等结构，A正确；
B、囊胚期细胞分化形成内细胞团和滋养层细胞，但遗传物质不发生改变，B错误；
C、细胞分化的实质是基因的选择性表达的结果，即转录水平上的调控，C正确；
D、桑葚胚时期细胞还没有发生分化，所以该时期的各细胞结构功能基本相同，D正确。
故选B。
24．试管婴儿、试管苗和克隆羊三者均属于生物工程技术的杰出成果，下面叙述正确的是（    ）
A．都需细胞工程的技术支持 B．都能保持母本性状属于无性生殖
C．都充分体现了体细胞的全能性 D．都可能发生突变和基因重组
【答案】A
【分析】1、试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。
2、植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性，即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能；培养过程的顺序是离体植物器官、组织或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，再分化形成根、芽等器官进而形成新的植物体。
3、动物核移植是将将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎。这个新的胚胎最终发育为动物个体，核移植得到的动物称克隆动物。
【详解】A、试管婴儿涉及到的技术是体外受精和胚胎移植，属于胚胎工程的技术，胚胎工程需要动物细胞工程的技术支持，通过植物组织培养获得试管苗，以及核移植和胚胎移植获得的克隆羊属于细胞工程的相关技术，A正确；
B、试管婴儿属于有性生殖，具有两个亲本的遗传特性，植物组织培养获得试管苗，属于无性生殖，克隆羊属于无性生殖，遗传特性主要来源于供体细胞，B错误；
C、试管婴儿体现受精卵的全能性，试管苗体现植物体细胞的全能性，克隆羊体现动物体细胞的细胞核具有全能性，C错误；
D、植物组织培养获得试管苗和克隆羊都属于无性生殖，不能发生基因重组，D错误。
故选A。
25．小鼠胚胎干细胞可诱导成能分泌胰岛素的胰岛样细胞。将胰岛样细胞移植给患糖尿病小鼠，可使其血糖恢复正常水平。下列叙述正确的是（    ）
A．胚胎干细胞诱导形成胰岛样细胞的过程，需要激发其所有全能性
B．体外培养胚胎干细胞时，要利用含95﹪O2和5﹪CO2的混合气体的培养箱
C．小鼠胚胎干细胞可来自于对囊胚的某些细胞的分离培养
D．利用饲养层细胞来培养胚胎干细胞，可以使其分化成相应的组织细胞
【答案】C
【分析】动物培养条件：
（1）无菌无毒环境：无菌--对培养液和所有培养用具进行无菌处理；在细胞培养液中添加一定量的抗生素；无毒-一定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对自身造成危害。
（2）营养：成分：所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分。培养基类型：合成培养基（将细胞所需的营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基）。
（3）温度和pH：哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜，多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。
（4）气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。O2：是细胞代谢所必需的 CO2主要作用是维持培养液的pH。
【详解】A、胚胎干细胞诱导为胰岛样细胞的过程为细胞分化，并不需要激发胚胎干细胞的所有全能性，A错误；
B、体外培养胚胎干细胞时，要利用含95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱，B错误；
C、小鼠胚胎干细胞可来自对囊胚内细胞团的分离培养，C正确；
D、将胚胎干细胞置于饲养层细胞上进行培养，其目的是维持细胞不分化的状态，D错误。
故选C。
26．为达到相应目的，必须通过分子检测的是（    ）
A．携带链霉素抗性基因受体菌的筛选
B．产生抗人白细胞介素-8抗体的杂交瘤细胞的筛选
C．转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定
D．镰刀形细胞贫血症的诊断
【答案】B
【分析】分子水平上检测的目的和方法为：1、用DNA分子杂交技术，检测目的基因是否存在。2、用分子杂交法检测mRNA是否成功转录。3、用抗原——抗体杂交技术检测目的基因是否成功表达成相应的蛋白质。
【详解】A、携带链霉素抗性基因受体菌的筛选，可用含链霉素的培养基进行培养，能存活的即含有相应的抗性基因，A错误；
B、产生抗人白细胞介素-8抗体的杂交瘤细胞的筛选，细胞水平的筛选只能选出杂交瘤细胞，如筛选出产生特异性抗体的杂交瘤细胞，必须用抗原-抗体杂交法从分子水平上进一步检测，B正确；
C、转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定，属于个体生物学水平的鉴定，需要做抗虫的接种实验来确定，C错误；
D、镰刀形细胞贫血症的诊断的红细胞形态与正常的红细胞形态不同，可以直接用显微镜进行观察，D错误。
故选B。
27．下图是一种“生物导弹”的作用原理示意图，没有与肿瘤细胞结合的“生物导弹”一段时间后被机体清除。阿霉素是一种抗肿瘤药，可抑制DNA和RNA的合成，对正常细胞也有一定毒性。下列相关说法错误的是（    ）

A．单克隆抗体是由杂交瘤细胞合成和分泌的
B．活化阿霉素能抑制细胞中的DNA复制和转录过程
C．在治疗中，应先注射非活化的磷酸阿霉素，再注射生物导弹
D．单克隆抗体特异性强，能减轻阿霉素对正常细胞的伤害
【答案】C
【分析】1、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
2、单克隆抗体的作用：（1）作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点。（2）用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”。
【详解】A、单克隆抗体是由杂交瘤细胞合成和分泌的，具有特异性强，灵敏度高等特点，A正确；
B、根据题意可知，“阿霉素可抑制DNA和RNA的合成”，因此活化阿霉素能抑制细胞中的DNA复制和转录过程，B正确；
C、在治疗中，应将非活化磷酸阿霉素和生物导弹同时注射，单克隆抗体能与肿瘤细胞特异性结合，而碱性磷酸酶将非活化磷酸阿霉素转化成活化磷酸阿霉素，进而治疗癌症，C错误；
D、单克隆抗体特异性强，阿霉素能定位杀死癌细胞，从而减轻阿霉素对正常细胞的伤害，D正确。
故选C。
28．“筛选”是生物工程中常用的技术手段，下列关于筛选的叙述中正确的有几项（    ）
①基因工程中用同种限制性核酸内切酶切割运载体和目的基因，酶切产物用DNA连接酶连接，为了保证成功率，需将获得的产物筛选后导入受体细胞②植物体细胞杂交过程中，要在经过植物组织培养得到的所有植株中筛选出杂种植株③单克隆抗体制备过程中，在完成细胞融合后，经过两次筛选得到的是针对目标抗原的抗体检验为阳性的杂交瘤细胞④为了快速繁殖无子西瓜，需筛选出特定染色体组数的体细胞才能进行组织培养
A．一项 B．2项 C．3项 D．4项
【答案】A
【分析】1、基因工程中标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
2、单克隆抗体制备的两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。
【详解】①基因工程中用同种限制性核酸内切酶切割运载体和目的基因，将酶切产物用DNA连接酶连接，由于连接产物存在目的基因和目的基因的连接体、运载体和运载体的连接体以及目的基因和运载体的连接体，为了保证成功率，需将获得的产物导入受体细胞，然后对受体细胞再进行筛选，即选择出导入重组质粒的受体细胞再继续培养，①错误；
②植物体细胞杂交过程中，可在原生质体融合后去除为融合的和自身融合的类型，再进行植株组织培养，②错误；
③单克隆抗体制备的过程中，在完成细胞融合后，第一次筛选出的是杂交瘤细胞，去除了未融合的细胞和自身融合的细胞，第二次筛选出的是针对目标抗原的抗体检验为阳性的杂交瘤细胞，即第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，③正确；
④为了快速繁殖无子西瓜，可采用植物组织培养的方法，不需要筛选特定染色体组数的体细胞就能进行组织培养，④错误。
故选A。
29．雄性哺乳动物的Y染色体上含有特异性H-Y抗原基因和SRY基因。以下方法不可以作为早期胚胎性别鉴定的手段的是（    ）
A．利用H-Y单克隆抗体进行检测
B．利用B超技术进行检测鉴定
C．可以制备SRY基因探针进行检测
D．胚胎滋养层取部分细胞进行染色体组型的分析
【答案】B
【分析】雄性哺乳动物Y染色上含有特异性H-Y抗原基因和SRY基因。若要鉴定早期胚胎的性别，可以检测Y染色体是否存在，或者Y染色体上特有的基因。
【详解】A、H-Y抗原基因存在于Y染色体上，利用H-Y单克隆抗体进行检测，可以检测H-Y蛋白的存在与否，从而检测H-Y抗原基因的存在与否，进而检测到Y染色体是否存在，该方法能够检测性别，A不符合题意；
B、B超看的是外观，早期胚胎不能用B超技术进行检测鉴定性别，B符合题意；
C、制备SRY基因探针进行检测，可以检测SRY基因，进而检测Y染色体，C不符合题意；
D、胚胎滋养层取部分细胞进行染色体组型的分析，可以检测Y染色体，D不符合题意。
故选B。
30．基因工程产物可能存在着一些安全性问题，但不必担心的是（　　）
A．三倍体转基因鲤鱼与正常鲤鱼杂交，进而导致自然种群被淘汰
B．载体的标记基因可能指导合成有利于抗性进化的产物
C．目的基因本身编码的产物可能会对人体产生毒性
D．目的基因通过花粉的散布转移到其他植物体内，从而可能打破生态平衡
【答案】A
【解析】1、转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。
2、生物安全问题：①转基因植物扩散到种植区外变成野生种或杂草；②转基因植物竞争能力强，可能成为“入侵的外来物种”；③转基因植物的外源基因与细菌或病毒杂交，重组出有害的病原体；④可能使杂草成为有抗除草剂基因的“超级杂草”。
【详解】A、三倍体转基因鲤鱼不能产生可育配子，不能与正常鲤鱼杂交，所以不必担心自然种群被淘汰，A正确；
B、运载体的标记基因（如抗生素基因）可能指导合成有利于抗性进化的产物，如抗除草剂的杂草，需要担心，B错误；
C、目的基因（如杀虫基因）本身编码的产物可能会对人体产生毒性，需要担心，C错误；
D、目的基因通过花粉的散布转移到其他植物体内，造成基因污染，从而可能打破生态平衡，需要担心，D错误。
故选A。
【点睛】

二、综合题
31．番茄红素具有一定的药用价值，但普通番茄合成的番茄红素易发生转化（如图甲），科学家设计了一种重组DNA（质粒三），该DNA能表达出双链RNA（发卡），番茄细胞能识别侵入的双链RNA并将该双链RNA及具有相同序列的单链RNA一起降解，从而提高果实中番茄红素的含量（如图乙）。请分析回答下列问题：

(1)目的基因可以从反转录法构建的_____________文库中获取；若在体外快速大量获得目的基因或含有目的基因的“片段A”，可以采用_____________技术，该技术的原理是_____________，所需要的酶是_____________酶，在设计引物序列时的主要依据是_____________。
(2)根据材料和图甲推知，转录出“发卡”的DNA片段实际上是两个反向连接的_____________基因，上述过程通过阻止该基因在细胞内的_____________（填“转录”或“翻译”），提高了果实中番茄红素的含量。
(3)为保证图中的片段A反向连接，处理已开环质粒所用的限制酶是_____________。
(4)去磷酸化是去掉黏性末端最外侧游离的磷酸基团。对已开环的质粒二两端去磷酸化的主要作用是阻止其_____________，该DNA分子仍可以和目的基因连接，形成缺少_____________个磷酸二酯键的重组质粒，随后在细胞中被修复。
【答案】(1)     cDNA     PCR     DNA双链复制     Taq（热稳定DNA聚合）     目的基因或含目的基因的“片段A”的DNA的一段已知核苷酸序列
(2)     番茄红素环化酶     翻译
(3)Ecl和BamHⅠ
(4)     自身环化（自身成环）     2##两

【分析】分析图一：番茄红素可以转化为胡萝卜素。
分析图二：图二位重组DNA（质粒三）的构建过程，该质粒能表达出双链RNA（发卡），番茄细胞可以识别侵入的双链RNA并将该双链RNA及具有相同序列的单链RNA一起降解，提高了果实中番茄红素的含量。
【详解】（1）cDNA文库中的基因是由mRNA反转录得到的，不含启动子、终止子的对应序列。在体外快速大量获得目的基因或含有目的基因的“片段A”可以采用PCR技术，该技术的原理是DNA双链复制，PCR技术所需的酶是Taq（热稳定的DNA聚合），在引物设计时，往往在目的基因或含目的基因的“片段A”的DNA的一段已知核苷酸序列进行引物设计。
（2）根据图二可知，目的基因是番茄红素环化酶基因，因此表达出“发卡”的DNA片段实际上是两个反向连接的番茄红素环化酶基因；“发卡”能导致双链RNA、mRNA被降解，而mRNA为翻译的模板，因此“发卡”阻止了其在细胞内的翻译过程，所以提高了果实中番茄红素的含量。
（3）为保证第二个目的基因片段反向连接，应该用两种限制酶切割，由图可知，第二个目的基因片段两侧的限制酶识别序列为Ecl 和 BamHⅠ，因此处理已开环质粒所用的两种限制酶是Ecl 和BamHⅠ。
（4）去磷酸化是去掉黏性末端最外侧游离的磷酸基团，对已开环的质粒二两端去磷酸化的主要作用是阻止其自身成环（自身环化）；构建重组质粒三时，要用限制酶Ecl 和 BamHⅠ切割，这样会去除黏性末端最外侧缺少磷酸基团的脱氧核苷酸，因此形成的重组质粒缺少2个磷酸二酯键。
32．如图为某生物工程部分操作流程的简略示意图，请回答问题：

(1)在基因工程中，若图中的A和B分别代表目的基因和载体，那么：
①则C代表_____________，C的组成除了目的基因外，还必须有_____________、_____________、_____________等。
②由A、B→C的过程需要的工具酶是_____________。
③若D为动物细胞，则将C导入D的常用方法是_____________。
(2)若图中的A和B分别代表两个不同的植物体细胞，则此流程简图代表的是_____________技术。
①由A、B→C的过程先要利用酶解法去除细胞壁，再诱导_____________融合，体细胞融合完成标志是_____________。
②由C→D的过程还要进行_____________，该过程证明了_____________。
③利用这项细胞工程技术进行育种的优点是____。
(3)在单克隆抗体制备过程中，若图中A为小鼠B细胞，那么：
①在获得此细胞之前，小鼠已被注射了_____________，目的为_____________。
②由A、B→C过程的理论基础是_____________，C细胞的特点是_____________；
③从C中筛选出的D细胞是_____________，选择出它的方法是_____________培养和_____________检测。之后，在对D进行培养以制备单克隆抗体。
④这种方法制备单克隆抗体的过程需要利用_____________和_____________技术。
⑤所制备的单克隆抗体和传统的血清抗体相比的优点是_____________。
(4)在培育试管动物时，若A、B分别代表成熟的卵子和获能的精子，那么：
①由A、B→C过程为_____________过程，此过程的标志是_____________。
②由C→D采用的技术为_____________，培养过程中使用的培养液除含有一些无机盐和有机盐外，还需添加维生素、激素、______、______等营养成分，以及血清等物质。
③为了提高胚胎的利用率，得到同卵双胎或同卵多胎，需利用_____________技术；若D处于囊胚期，要注意_____________，原因为_____________。
【答案】(1)     基因表达载体     启动子     终止子     标记基因     限制酶、DNA连接酶     显微注射法
(2)     植物体细胞杂交     原生质体     再生出新的细胞壁     植物组织培养     植物细胞具有全能性     克服远缘杂交不亲和的障碍
(3)     某种抗原     获得能够产生特定抗体的B淋巴细胞     细胞膜的流动性     即能在体外培养条件下无限增殖，又能产生特异性抗体     能产生所需抗体的杂交瘤细胞     克隆化     抗体     动物细胞融合     动物细胞培养     特异性强、灵敏度高、并可大量制备
(4)     受精     在卵细胞膜和透明带之间发现两个极体     早期胚胎培养     氨基酸     核苷酸     胚胎分割     将内细胞团均等分割     否则会影响到胚胎的恢复和进一步发育

【分析】1、哺乳动物精子和卵子发生的不同点：
（1）精子的减数两次分裂是连续的，场所唯一（MⅠ和MⅡ的场所都是睾丸）；而卵子的两次分裂是不连续的，场所不唯一．（MⅠ场所在卵巢，MⅡ场所在输卵管中）
（2）精子和卵子发生的时间不同：精子的发生是从初情期一直到生殖机能衰退；多数哺乳动物卵子的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前完成的；MⅠ是在雌性动物排卵前后完成的，MⅡ是在受精过程中完成的；
（3）精子的形成过程需要变形；卵细胞的形成过程不需要变形．
2、体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精．
（1）卵母细胞的采集和培养①主要方法是：用促性腺激素处理，使其超数排卵，然后，从输卵管中冲取卵子． ②第二种方法：从已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞或直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞．
（2）精子的采集和获能①收集精子的方法：假阴道法、手握法和电刺激法．②对精子进行获能处理：包括培养法和化学诱导法．
（3）受精：在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程．
【详解】（1）①若图中的A和B分别代表目的基因和载体，那么C代表基因表达载体，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等，标记基因可便于目的基因的鉴定和筛选。
②基因工程的工具酶有限制酶、DNA连接酶。
③将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法。
（2）若图中的A和B分别代表两个不同的植物体细胞，则此流程简图代表的是植物体细胞杂交技术。
①诱导植物体细胞融合之前先要用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，因为细胞壁会阻碍细胞间的杂交，再诱导原生质体的融合，融合完成的标志是产生新的细胞壁。
②将融合的杂种细胞经过脱分化形成愈伤组织，经过植物组织培养得到完整的杂种植株，该过程体现了植物细胞具有全能性。
③植物体细胞杂交技术能克服远缘杂交不亲和的障碍。
（3）①首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生特定抗体的B淋巴细胞。
②用骨髓瘤细胞与已免疫的B淋巴细胞融合，细胞融合的理论基础是细胞膜的流动性，C细胞即能在体外培养条件下无限增殖，又能产生特异性抗体。
③若该过程是制备单克隆抗体的过程，在A、B到C的过程中，A细胞为骨髓瘤细胞，B细胞为能产生抗体的B淋巴细胞，那么D细胞称为杂交瘤细胞细胞，筛选出该类细胞后还需进行克隆化培养和抗体检测。
④制备单克隆抗体的过程需要利用动物细胞融合和动物细胞培养技术。
⑤单克隆抗体最主要的优点是特异性强、灵敏度高，并可大量制备。
（4）①A、B分别代表成熟的卵子和获能的精子，由A、B→C过程为受精过程，当观察到卵细胞膜与透明带之间存在两个极体时，说明卵子已完成受精。
②由C→D采用的技术为早期胚胎培养，培养过程中使用的培养液中所需营养物质与体内基本相同，例如需要有维生素、激素、氨基酸、核苷酸等，还需加入血清、血浆等天然成分。
③获得同卵双胎或多胎，需要用胚胎分割技术处理发育到桑葚胚期或囊胚期的早期胚胎，对囊胚进行处理时，要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。