高中生物人教版 (新课标)选修1《生物技术实践》课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课时练习

课后训练

1．在培养基中加入尿素（唯一氮源），以分离出能分解尿素的细菌，这种加入尿素的培养基在功能上属于（　　）。

A．选择培养基

B．固体培养基

C．液体培养基

D．半固体培养基

2．测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养；而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释，其原因是（　　）。

A．细菌个体小，真菌个体大

B．细菌易稀释，真菌不易稀释

C．细菌在土壤中含量比真菌高

D．随机的，没有原因

3．在本实验操作中对使用的平板和试管要进行标记，以下说法正确的是（　　）。

A．对培养皿仅需注明培养基的种类即可

B．一般在使用之后进行标记

C．由于试管用的较多，只需对试管进行标记即可

D．标记的目的主要是为了防止实验中平板、试管等的混淆

4．在涂布平板操作时错误的是（　　）。

A．将涂布器在酒精灯火焰上灼烧，直到烧红

B．取少量菌液滴加在培养基表面

C．将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃待酒精燃尽后，冷却8～10 s再用

D．涂布时可转动培养皿，使涂布均匀

5．实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应，用3种细菌在事先准备好的琼脂块平板上画3条等长的平行线（3条线均与下图中的链霉素带接触），将平板置于37 ℃条件下恒温培养3天，结果如图所示。从实验结果分析以下叙述，不正确的是（　　）。

A．链霉素能阻止结核菌的生长

B．链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效

C．链霉素对结核菌比对伤寒杆菌更有效

D．链霉素可以用于治疗伤寒病人

6．下表表示某培养基的配方，下列叙述正确的是（　　）。

A．从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于选择培养基

B．培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨

C．该培养基缺少提供生长因子的物质

D．对培养基调节至合适的pH后就可以接种菌种使用

7．某一种细菌的变异菌株不需要从环境中摄取现成的亮氨酸就能生长，此菌株对链霉素敏感。要想筛选出该变异菌株，选用的培养基类型是（　　）。

A．加亮氨酸，不加链霉素

B．不加亮氨酸，加链霉素

C．加亮氨酸，加链霉素

D．不加亮氨酸，不加链霉素

8．下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是（　　）。

A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板

B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上

C．将实验组和对照组平板倒置，37 ℃恒温培养24～48小时

D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数

9．下面是探究如何从土壤中分离自生固氮菌与计数的实验。

实验原理：农田的表层土壤中，自生固氮菌的含量比较多。将用表土制成的稀泥浆，接种到无氮培养基上进行培养。在这种情况下，只有自生固氮菌才能生长繁殖。用这种方法，可以将自生固氮菌与其他细菌分离开来。

材料用具：农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、盛9 mL无菌水的试管、无菌吸管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛90 mL无菌水的锥形瓶、恒温箱。

方法步骤：

（1）倒平板。分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板，应在________操作。

（2）制备土壤稀释液。取土样10 g加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。用无菌吸管吸取上清液1 mL，转至9 mL的无菌水的大试管中，依次稀释到107倍稀释度。

（3）涂布。按照由101～108倍稀释度的顺序分别吸取0.1 mL进行平板涂布，每个稀释度下，无氮培养基应至少涂布________个平板，牛肉膏蛋白胨培养基涂布________个平板。

（4）培养。放入恒温箱内，在28～30 ℃下培养3～4 d。

（5）细菌的计数。当菌落数目稳定时，选取菌落数在________的平板进行计数。如果测试的平均值为50，则每克样品中的菌落数是________（稀释度是105倍）。

预期结果：相同稀释度下，牛肉膏蛋白胨平板上的菌落数________（填“多于”或“少于”）无氮培养基上的数目，原因是________________________________________________。

参考答案

1. 答案：A

解析：选择培养基是从功能上对培养基进行分类的，B、C、D三项所述的培养基是根据培养基的物理状态进行分类的。题述培养基能分离出以尿素为唯一氮源的细菌，是一种选择培养基。

2. 答案：C

解析：土壤中的微生物大约70%～90%是细菌，真菌的含量要比细菌少。样品的稀释度越高，在平板上生成的菌落数目就越少。在实际操作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数在30～300之间，适于平板计数，所以细菌的稀释倍数要高于真菌的稀释倍数。

3. 答案：D

解析：本实验使用的平板和试管较多，为避免混淆，最好在使用前就做好标记。标记时要注明培养基种类、培养日期以及平板上培养样品的稀释度等。

4. 答案：A

5. 答案：D

解析：链霉素能阻止霍乱菌和结核菌的生长繁殖，不能阻止伤寒杆菌的生长繁殖，链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效，而且它不能用于治疗感染伤寒杆菌的病人。

6. 答案：B

解析：从配方可知，该培养基为鉴别培养基，用于鉴别大肠杆菌；碳源主要是葡萄糖，蛋白胨主要是氮源，但同时又可以为大肠杆菌提供生长因子；该培养基在使用前不仅要调节pH，而且要进行严格的灭菌。

7. 答案：D

8. 答案：D

解析：检测土壤中细菌总数，用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板，取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上，将实验组和对照组平板倒置，37 ℃恒温培养24～48小时，在确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300的一组平板为代表进行计数。所以D项错误。

9. 答案：步骤：（1）火焰旁

（3）3　1

（5）30～300　5×107　预期结果：多于　无氮培养基上能生存繁殖的仅是土壤中的固氮菌，而牛肉膏蛋白胨培养基上几乎允许土壤中所有菌类生存