生物专题3 植物的组织培养技术课题2 月季的花药培养学案

同步练习

1. 某小组同学为了从土壤中分离出以尿素为氮源的微生物而进行了实验。请回答与此实验相关的问题：

（1）土壤中的一些微生物体内含有      酶 能通过降解尿素作为其生长的氮源，可用 

     作为指示剂检测该酶所催化的反应。

（2）配制培养基是，以      作为凝固剂。对培养基进行灭菌时，由于加入了葡萄糖，灭菌压强为      ，时间为      ，而对于唯一氮源尿素应采取         进行灭菌。

（3）将土样用       稀释到10∧-4,10∧-5两个浓度，用       分离法将每个浓度的土样个0.1mL分别接种到培养基中。

2.  某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难以理解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如图所示。请分析回答问题。

                                   污水池中污泥样品

                                               初选

                                                     候选菌

                                               接种

         重

复

         多

         次

          ，                                       ……

         直

         至

         获

         得             振荡培养若干天后，测定各瓶中化合物A的含量

         目

         的                             选择

         菌                            接种

                                        接种

                                                        接种

                                                  固体培养基           

（1）培养基中加入化合物A的目的是筛选         这种培养基属于       培养基。

（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的              实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是            。

（3）培养若干天后，应选择培养瓶中的化合物A含量         的培养液，接入新的培养瓶中连续培养，使“目的菌”的数量          。

（4）转入固体培养基时，常采用         ，获得单菌落后继续筛选。

（5）若研究“目的菌”的生长规律，将单个菌落进行液体培养，可采用         的方法进行计数，以时间为横坐标，以          为纵坐标，绘制生长曲线。

（6）实验结束后，使用过的培养基应该进行         处理后，才能倒掉。

3.下面是有关“大肠杆菌的培养与分离”实验的相关问题，请回答：

（1）大肠杆菌是革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌。本实验的内容是用         培养基（通用的细菌培养基）扩大培养大肠杆菌。培养后再在固体平面培养基上进行         随后培养基上便会形成一个个单独的           。

（2）我们在利用微生物时，常常要求所利用的微生物不被其他微生物污染。因此，在培养微生物时必须进行          。在操作过程中，需对培养基和培养皿进行           （填“消毒”或“灭菌”）；操作者的双手需要进行清洗和         （填“消毒”或“灭菌”）；空气中的细菌可以用紫外线杀灭。

（3）培养大肠杆菌时，其正确方法步骤是               （  ）

A．灭菌、培养基的配制、搁置斜面、划线分离、培养

B．培养基的配制、灭菌、搁置斜面、划线分离、培养

C．划线分离、灭菌、培养基的配制、搁置斜面、培养

D．培养基的配制、划线分离、灭菌、搁置斜面、培养

（4）在培养大肠杆菌时，能够判断培养基灭菌是否成功的方法是

（5）在微生物培养实验完成后，使用过的培养基和培养物必须经过       处理后才能丢掉。

4.要获得能够分泌脲酶的细菌的菌种，某生物兴趣小组的同学设计了以下培养和筛选的途径：

（1）获得菌种：要获得较多的能够分泌脲酶的细菌，可从含有机质丰富特别是有动物粪便的土壤中选取土样，原因是                                           ；同时最好取5~25cm处的浅层土样，说明这类细菌的代谢类型应该为             葡萄糖：0.05g       。

（2）将土样加入无菌水中配制成悬液，并配制如右图所示          NaCl:0.24g

培养基，其中尿素在培养基中必须是作为保证微生物生长的唯一     K2HPO4:0.24g

       。向培养基中添加尿素的方法是                          琼脂糖：1.0g

                              从物理性质看，该培养基属于     酚红：0.5g

              。                                             水：30mL

                                                                       尿素：20mL（含2g脲） 

（3）利用酚红指示剂可检测出一个中的细菌是否能分泌脲酶，原理是

脲酶能使                                            ，结果是菌落周围培养基呈黄色。因为添加了特定指示剂，该培养基应该属于        培养基。

(4)为获取能分泌脲酶的单菌落，必须将土壤样液进行稀释，并取少量稀释土壤液以     

方法接种于培养基上，培养皿在培养箱中培养时必须倒置，原因是

                                           。

（5）等菌落形成后，选取相应菌落中的细菌作为菌种，并扩增。

5.白僵菌高孢粉是国家林业局推广的高效生物杀虫剂之一，应用于多种林木和农作物害虫的防治。白僵菌分生孢子在寄主表皮、气孔或消化道上，遇适宜条件开始萌发，生出芽管。同时产生脂肪酶、蛋白酶、几丁质酶等溶解昆虫的表皮，通过芽管入侵虫体，在虫体内生长繁殖，消耗寄主体内养分，产生各种毒素，形成大量菌丝和孢子，布满虫体全身。请回答下面的问题：

(1)从自然菌样中筛选较理想生产用菌种的一般步骤是：采集菌样     富集培养

             性能测定。白僵菌的菌样应从           中采集。   

（2）分离白僵菌菌种的培养基属于       培养基。在配制白僵菌培养基时常加入蔗糖、硫酸铵、硝酸钾等成分，蔗糖属于        营养物质。

（3）白僵菌纯培养常用的接种方法是           和          。

（4）分离和培养过程中，为了          ，培养基和接种工具都要进行         处理，利用高温可以使微生物的        、       等物质发生变性。

6.有些细菌可分解原油，  而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：

⑴在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 ______________   为唯一碳源的固体培养 基上，从功能上讲，该培养基属于__________   培养基。 [来源:学科网]

⑵纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即  ____ 和 ______   。

⑶为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力 ________  。 [来源:Z§xx§k.Com]

⑷通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、______________和 __________________   。无菌技术要求试验操作应在酒精灯                      。

11 年山东卷）34.（8 分）（生物—生物技术实验）

7.研究发现柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用，两者的提取及应用如

图所示。

柚皮             糊状液体           柚皮精油

                                                         抑菌试验

    乳酸菌A          培养液             乳酸菌素

（1）柚皮易焦糊，宜采用____________法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过 ___________除去其中的固体杂质。

（2）筛选乳酸菌 A 时可选用平板划线法或____________接种。对新配制的培养基灭菌时 所用的设备是_______________。实验前需对超净工作台进行____________处理。

（3）培养基镇南关的尿素可为乳酸菌 A 生长提供______________。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度___________。

（4）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的______________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

8.菊花组织培养的大致过程如下图所示。请回答下列问题：

         菊花植株体  A   未开花的幼嫩枝条    B    遇上组织

                D                                       C

                              试管幼苗[来源:学科网]

（1）外植体的消毒：选择生长旺盛的枝条的嫩枝，冲洗干净。用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为70%的         中浸泡10min，再放入5%的次氯酸钠溶液中浸泡         ，然后用另一5%的次氯酸钠溶液浸泡         ，最后在超净台上用无菌水清洗，将茎的切断培养在生芽培养基中。

（2）菊花组织培养过程中，启动细胞分裂、B           （填名称）、C           的关键激素是                   。通过B过程产生的愈伤组织细胞与枝条韧皮部细胞形态结构         （填“相同”、“不同”），其根本原因是                   。

（3）该实验操作成功的关键是无菌技术，所以要对外植体、超净工作台等消毒，对培养基或培养器具等          ，实验操作过程都要在                 旁进行。

9.酶是生物体内各种化学反应的催化剂，具有高度的专一性和高效性。α-淀粉酶在淀粉糖浆、低聚糖、啤酒、烘培食品、面制品等的生产方面具有十分广阔的市场前景。回答下列相关问题：

（1）为提高酶的利用率以及产品纯度，一般需要对酶进行固定化处理，即将酶用物理或化学方法固定在           介质上，具体方法有吸附法、共价偶联法、        、法和交联法。α-淀粉酶通常是利用          进行固定的，介质一般为         。[来源:学&科&网Z&X&X&K]

（2）利用α-淀粉酶固定化柱进行淀粉水解实验时，应注意控制反应液的        ，以保证反应充分。对流出的液体用             检测，为了便观察到的颜色变化明显，可采用  

           后再观察的方法。若呈现          色，说明淀粉被水解成糊精。[来源:学|科|网]

（3）利用α-淀粉酶固化柱进行淀粉水解实验时，实验前用10倍体积的蒸馏水洗涤反应柱，洗涤的目的是                   。实验后用10倍体积的蒸馏水洗涤反应柱，洗涤的目的是                 。

10.回答有关“泡菜的腌制和亚硝酸的测定”方面的问题：

（1）泡菜腌制过程中起主要作用的微生物是假丝酵母和         。腌制的原理是在     条件下，微生物利用菜中的         类物质和其他营养物质进行发酵，产生有机酸和醇类物质。

（2）制作泡菜的盐水需煮沸并冷却后方可使用，煮沸的目的是                 ，冷却后使用的目的是                  。

（3）我国卫生标准规定，亚硝酸盐残留量在酱腌菜中不得超过20mg.kg-1。因此，必须对腌制的泡菜进行亚硝酸盐含量的测定。测定的原理是：亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生      反应，产生的物质再与N-1-萘胺基乙二胺偶联，形成       色产物，可用光电比色法定量。

（4）通过测定，可以发现在泡菜腌制过程中，亚硝酸盐的含量变化情况是              。实践证明，在泡菜腌制过程中控制好腌制的时间、      用量和          ，能减少亚硝酸盐的含量。

11.回答下列关于洗衣粉的问题：

（1）洗衣粉中的表面活性剂有             和                    两种类型。一般表面活性剂中含有疏水基团和           ，在洗涤过程中起           和通透作用，使脂肪类物质进入水中。

（2）洗衣粉中所加的酶一般都是           ，除了添加蛋白酶外，还可添加淀粉酶     半纤维素酶、果胶酶、        等。

（3）为了防止           的异味，在加酶洗涤剂中必定会添加           ；加酶洗衣粉除了具有表面活性剂的作用外，还有各种          作用，更有利于去除污渍。

1.答案： 脲  酚红  琼脂糖  500g/cm2  30min  G6玻璃砂漏斗  无菌水  涂布

2.答案 目的菌  选择   化合物A  异养需氧型   减少   增加  划线  定期取样  细菌数目的对数  灭菌

3.答案  LB液体  划线分离  菌落  无菌操作  灭菌  消毒  B  将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生  灭菌

4.答案  土壤中含有尿素，有利于该类细菌生长  异养需氧型  氮源  其他成分灭菌冷却后，在无菌条件下用玻璃砂芯漏斗过滤加尿素的溶液   固体培养基   培养基中尿素分解为NH3，使周围的PH 升高   紫   鉴定   涂布   防止冷凝后的水珠从皿盖上落入培养基，造成污染

5.纯种分离  感病昆虫尸体  选择  C源 划线分离  涂布分离  防止杂菌污染  灭菌  蛋白质  DNA

6.【答案】⑴原油 选择 ⑵平板划线法   稀释涂布平板法 ⑶强。⑷干热灭菌法  高压蒸汽灭菌法  火焰 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。

7.答案（1）压榨   过滤（2）稀释涂布平板法（或稀释混合平板法）   高压蒸汽灭菌锅   消毒（3）氮源    越慢（4）直径（或大小）

8.答案 乙醇  5min  5min  脱分化  再分化  细胞分裂素和生长素  不同  基因的选择性表达  灭菌  酒精灯的火焰

9.  非水溶性  包埋  吸附法  石英砂  流速  KI-I2  稀释  红  除去未吸附的游离淀粉酶  洗去残留的反应物和产物

10.答案  乳酸菌  无氧  糖  杀灭杂菌  保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响  重氮化  紫红 先增加后减少  食盐  温度

11.答案  阴离子表面活性剂  非离子型表面活性剂  亲水基团  乳化  出提物  纤维素酶  脂肪酶  粗提酶  香料  水解