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【生物】福建省泉州市泉港区一中2018-2019学年高二下学期期末考试试题（解析版）
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福建省泉州市泉港区一中2018-2019学年
高二下学期期末考试试题
一、选择题
1.限制性内切酶的作用实际上就是把DNA上某些化学键打断，一种能对GAATTC专一识别的限制酶，打断的化学键是
A. G与A之间的键 B. G与C之间的键
C. T与A之间的键 D. 磷酸与脱氧核糖之间的键
【答案】D
【解析】
【分析】
限制性内切酶是基因工程中常用的工具酶，被称为切割DNA的分子手术刀，它们能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，从而使其露出黏性末端或平末端。
【详解】一种能对GAATTC专一识别的限制酶，它能打断鸟嘌呤脱氧核苷酸与腺嘌呤脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，两个核苷酸之间是磷酸基团与脱氧核糖之间形成的磷酸二酯键，故D项正确。
2.下列关于蛋白质工程说法，错误的是
A. 蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的二代基因工程
B. 实施蛋白质工程的基本途径必须从预期蛋白质功能出发
C. 蛋白质工程实施过程中可对关键氨基酸直接置换或增删
D. 构建基因表达载体也是蛋白质工程的核心步骤
【答案】C
【解析】
试题分析：蛋白质工程中真正的操作对象仍然是基因，即对基因的修饰或原有记忆的改造，不是对蛋白质的结构或者氨基酸的结构进行改造，所以C错。
考点：本题考查蛋白质工程的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
3.SRY基因为Y染色体上的性别决定基因，可用SRY－PCR法鉴定胚胎性别，其基本程序如下图。相关说法不合理的是
A. 提取滋养层细胞的DNA作为扩增模板
B. 用SRY探针进行检测依据的原理是DNA分子杂交
C. 新合成的DNA含有胚胎细胞全部的遗传信息
D. SRY探针能与雄性胚胎样品中的DNA配对
【答案】C
【解析】
试题分析：SRY-PCR法鉴定胚胎性别是提取滋养层细胞的DNA，以SRY基因为模板，利用PCR技术扩增相关基因，再加入SRY基因探针进行检测提取DNA中是否存在SRY基因。若存在，则原细胞中含有Y染色体，该胚胎将来发育为雄性，反之，则发育为雌性。由于基因探针的检测原理就是DAN单链发生碱基互补配对的过程，所以A、B、D正确。由于PCR扩增过程只用了一个基因引物，所以只能是扩增了部分基因，不能包括细胞全部基因，C错。
4.下面关于多聚酶链式反应(PCR)的叙述正确的是
A. PCR过程中只需要两个引物分子
B. PCR的循环过程分为变性、复性和延伸三步
C. PCR扩增仪需保持在37°C以维持Taq酶最佳活性
D. PCR过程中边解旋边复制
【答案】B
【解析】
【分析】
PCR是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。通过这一技术，可以在短时间内大量扩增目的基因。
【详解】A、PCR过程中需要两种引物，引物的数目需要根据扩增的次数确定，A错误；
B、PCR的循环过程分为高温变性（DNA双链打开）、复性（模板链与引物结合）和延伸（合成子链）三步，B正确；
C、PCR扩增仪温度会达到90-95℃，C错误；
D、PCR过程中，在变性阶段打开双链，延伸阶段合成子链，故先解旋再复制，D错误。
故选B。
5. 制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括 ( )
①细胞培养 ②细胞融合 ③胚胎移植 ④细胞核移植
A. ①② B. ①③
C. ②③ D. ③④
【答案】A
【解析】
本题考查单克隆抗体的制备原理。制备单克隆抗体时，首先采用细胞融合技术得到杂交瘤细胞，再采用动物细胞培养技术获得能产生所需抗体的细胞群。
6.下列对动物细胞培养的有关叙述正确的是
A. 动物细胞培养的目的是获得优良性状动物个体
B. 动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散
C. 细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过程中
D. 动物细胞融合和植物体细胞杂交的原理相同
【答案】B
【解析】
【分析】
动物细胞培养是从动物体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
【详解】A、动物细胞培养的目的是获得多个动物细胞，A错误；
B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理使细胞分散，B正确；
C、细胞的癌变发生于传代培养的过程中，C错误；
D、动物细胞融合原理是细胞膜的流动性，植物体细胞杂交的原理的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，D错误。
故选B。
7.“设计试管婴儿”与“试管婴儿”，均用到了下列哪些生物技术手段
① 胚胎移植技术 ② 体外受精技术 ③ 植入前遗传学诊断技术 ④ DNA重组技术
A. ①②③ B. ②③④ C. ①② D. ③④
【答案】C
【解析】
【分析】
试管婴儿和设计试管婴儿均属于有性生殖，经过体外受精，早期胚胎培养、胚胎移植等过程，试管婴儿主要解决不孕夫妇的生育问题，设计试管婴儿主要用于白血病、贫血病的治疗。
【详解】试管婴儿和设计试管婴儿均需要经过体外受精、胚胎移植，后者还需要经过遗传学诊断，二者不需要用到DNA重组技术。综上所述，ABD不符合题意，C符合题意。
故选C。
8.下列关于胚胎工程的叙述正确的是
A. 胚胎移植中的受体和供体需同期发情处理
B. 胚胎移植中的受体和供体应都是优良品种
C. 胚胎可通过体外培养直接获得新个体
D. 通过胚胎分割技术获得的多个个体，性别可以不同
【答案】A
【解析】
受精卵在体外培养可以得到早期胚胎，且早期胚胎必须进行胚胎移植；通过胚胎分割技术，得到的多个个体来源于同一个受精卵，性别一致。
9.下列关于限制酶的说法，正确的是
A. 限制酶广泛存在于真核生物中，其化学本质是蛋白质
B. 不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端
C. 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列
D. 限制酶识别的序列均由6个核苷酸组成
【答案】C
【解析】
【分析】
限制酶能识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
【详解】A、限制酶主要存在于原核生物中，其化学本质是蛋白质，A错误；
B、不同的限制酶切割DNA后会形成黏性末端或平末端，B错误；
C、一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，且在特定的位点打开磷酸二酯键，C正确；
D、切割质粒的限制性核酸内切酶均能特异性地识别核苷酸序列，但识别的核苷酸序列不一定是6个，D错误。
故选C。
【点睛】一种限制酶只能识别一种特定的序列，产生的末端可能为黏性末端或平末端。
10.如图为某二倍体植株花药中的花粉在适宜培养基上形成完整植株的过程。下列有关叙述正确的是
A. 过程①②表示脱分化，过程③表示再分化
B. 过程①②需要避光，过程③需要照光
C. 过程①②③说明花粉细胞具有全能性
D. 过程③获得的完整植株可正常交配产生后代
【答案】C
【解析】
【分析】
由图可知，①脱分化、②再分化、③移栽。
【详解】A、过程①表示脱分化，过程②表示再分化，A错误；
B、过程①脱分化需要避光，过程②③需要照光，B错误；
C、过程①②③经过组织培养发育成完整植株，说明花粉细胞具有全能性，C正确；
D、过程③获得的完整植株属于单倍体，高度不育，不能产生后代，D错误。
故选C。
11.下列有关胚胎发育的说法中，不正确的是
A. 胚胎从透明带内伸展出来的过程称为孵化
B. 卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加
C. 胚胎发育到囊胚期时出现囊胚腔
D. 原肠胚时期胚胎进一步分化出内、外胚层
【答案】B
【解析】
【分析】
早期胚胎发育主要包括：受精卵→4细胞→8细胞→桑椹胚→囊胚→原肠胚等。
【详解】A、囊胚进一步扩大，胚胎从透明带内伸展出来的过程称为孵化，A正确；
B、卵裂期胚胎中细胞数目增多，有机物总量会减少，B错误；
C、胚胎发育到囊胚期时出现囊胚腔，囊胚期还具有内细胞团、滋养层等结构，C正确；
D、原肠胚时期胚胎进一步分化出内、外胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔，D正确。
故选B。
12.精子获能的常用化学物质是下列哪一种
A. 氯化钙溶液 B. 肝脏研磨液
C. 肝素溶液 D. 胰蛋白酶液
【答案】C
【解析】
【分析】
收集精子的方法：假阴道法、手握法和电刺激法。
精子获能的方法：培养法和化学诱导法。
【详解】精子获能常用一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液处理。综上所述，ABD不符合题意，C符合题意。
故选C。
13. 下列关于转基因生物安全性的叙述中，错误的是
A. 我国已经对转基因食品和转基因农产品强制实施了产品标识制度
B. 国际上大多数国家都在转基因食品标签上警示性注明可能危害
C. 开展风险评估、预警跟踪和风险管理是保障转基因生物安全的前提
D. 目前对转基因生物安全性的争论主要集中在食用安全性和环境安全性上
【答案】B
【解析】
转基因食品、产品上都要标注原料来自转基因生物；转基因食品上只标明原料来自转基因生物，并未标明其危害；为了保障现代生物技术的安全性，需要开展风险评估、预警跟踪等措施；主要是食物安全和环境安全，另外还有生物安全问题。
【考点定位】考查现代生物技术安全性相关知识，属于考纲理解层次，难度中等。
14.下列关于蛋白质工程应用的叙述正确的是
A. 基因工程和蛋白质工程产生的变异都是可遗传的
B. 蛋白质工程和基因工程的目的是获得人类需要的蛋白质，所以二者没有区别
C. 只有利用蛋白质工程才可以在大肠杆菌细胞中得到人的胰岛素
D. 在相关酶、氨基酸和适宜的温度、pH条件下，干扰素可以大量自我合成
【答案】A
【解析】
【分析】
蛋白质工程：是指以蛋白质分子的结构规律及与其生理功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。
【详解】A、基因工程和蛋白质工程产生的变异属于基因重组，属于可遗传变异，A正确；
B、蛋白质工程和基因工程的目的是获得人类需要的蛋白质，基因工程生产的蛋白质是自然界存在的，蛋白质工程可以生产自然界不存在的蛋白质，B错误；
C、利用基因工程就可以在大肠杆菌细胞中得到人的胰岛素，C错误；
D、干扰素属于蛋白质，由基因控制合成，不能自我复制合成，D错误。
故选A。
15.下列受体细胞与导入方法的匹配，正确的是
A. 棉花细胞——花粉管通道法 B. 羊受精卵——基因枪法
C. 大肠杆菌——农杆菌转化法 D. 农杆菌——农杆菌转化法
【答案】A
【解析】
【分析】
将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。
（1）将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；
（2）将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；
（3）将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法（Ca2+处理法）。
【详解】将目的基因导入棉花细胞内常用花粉管通道法，A正确；显微注射技术是将目的基因导入动物细胞最有效的方法，B错误；Ca2+处理法能使大肠杆菌、农杆菌细胞的生理状态发生改变，使之成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态，故将目的基因导入大肠杆菌，应采用感受态细胞法（Ca2+处理法），C错误，D错误。故选A。
【点睛】本题考查基因工程的原理及技术，要求考生识记基因工程的原理、工具及操作步骤，明确受体细胞不同时，导入目的基因的方法也不同，再结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记层次的考查。
16.下列有关胚胎干细胞及生物技术的叙述中正确的是
①小鼠胚胎干细胞(ES)无法由囊胚的内细胞团细胞分离培养获得
②自体干细胞移植通常不会引起免疫排斥反应
③囊胚的滋养层细胞具有发育全能性
④胚胎干细胞在体外培养能增殖但不能被诱导分化
⑤胚胎干细胞在形态上表现为体积小、细胞核大、核仁明显
A. ①③ B. ②③ C. ②⑤ D. ①④
【答案】C
【解析】
【分析】
胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，形态上，表现为体积小，细胞核大，核仁明显；功能上，具有发育的全能性，即可以分化成成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养条件下，ES细胞可以增殖而不发生分化。
【详解】①小鼠胚胎干细胞(ES)可以由囊胚的内细胞团或原始性腺分离培养获得，①错误；
②自体干细胞移植通常不会引起免疫排斥反应，②正确；
③囊胚的滋养层细胞会发育成胎膜、胎盘，不具有发育全能性，③错误；
④胚胎干细胞在体外培养能增殖，也可以被诱导分化，④错误；
⑤胚胎干细胞在形态上表现为体积小、细胞核大、核仁明显，⑤正确。
综上所述，ABD不符合题意，C符合题意。
故选C。
17.腺苷酸脱氨酶(ADA)基因缺陷症是一种免疫缺陷病，对患者采用基因治疗的方法是：取出患者的白细胞，进行体外培养时转入正常ADA基因，再将这些白细胞注射入患者体内，使其免疫功能增强，能正常生活。下列有关叙述中，正确的是
A. 正常ADA基因替换了患者的缺陷基因
B. 正常ADA基因通过控制ADA的合成来影响免疫功能
C. 白细胞需在体外培养10代以后再注射入患者体内
D. 腺苷酸脱氨酶(ADA)基因缺陷症属于获得性免疫缺陷病
【答案】B
【解析】
【分析】
基因治疗指把正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，这是治疗遗传病的最有效的手段。
【详解】A、因治疗是用正常ADA基因替换了患者的缺陷基因的作用，而非替换基因本身，A错误；
B、ADA是人体免疫系统发挥正常功能所必需的，正常ADA基因通过控制ADA的合成来影响免疫功能，B正确；
C、应该选择体外培养10代以内的白细胞，C错误；
D、腺苷酸脱氨酶(ADA)基因缺陷症属于先天性免疫缺陷病，D错误。
故选B
18.以下关于胚胎干细胞的叙述不正确的是
A. ES细胞的分离和培养可以应用于基础生物学、畜牧学和医学等方面
B. ES细胞可用于治疗帕金森综合征、青少年型糖尿病和老年痴呆症等
C. 现已经通过诱导ES细胞的定向分化成功治愈癌症、心脑血管疾病和某些组织器官的损伤
D. ES细胞是研究体外细胞分化的理想材料
【答案】C
【解析】
试题分析：1、胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺．胚胎干细胞的特点：具有胚胎细胞的特性，体积较小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物任何一种组织细胞．
2、胚胎干细胞的主要用途是：
①可用于研究哺乳动物个体发生和发育规律；
②是在体外条件下研究细胞分化的理想材料．ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中，能够维持不分化的状态．在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡机理提供了有效的手段；
③可以用于治疗人类的某些顽疾，如帕金森综合症、糖尿病、老年痴呆症、肝衰竭、新衰竭、成骨不良；
④培育各种组织器官，用于器官移植，解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题．
解：A、ES细胞的分离和培养可以应用于基础生物学、畜牧学和医学等方面，A正确；
B、ES细胞可用于治疗人类的某些顽疾，如帕金森综合征、青少年型糖尿病和老年痴呆症等，B正确；
C、诱导ES细胞的定向分化治疗癌症、心脑血管疾病和某些组织器官的损伤，还处于临床试验阶段，C错误；
D、ES细胞是在体外条件下研究细胞分化的理想材料，D正确．
故选：C．
考点：胚胎干细胞的来源及分化．
19. 在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是
A. 用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸
B. 用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体
C. 将重组DNA分子导入烟草原生质体
D. 用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞
【答案】A
【解析】
限制性核酸内切酶切割的是DNA，而烟草花叶病毒的遗传物质为RNA，所以A错误；目的基因与运载体的连接由DNA连接酶催化连接，B正确；受体细胞为植物细胞，所以可以是烟草原生质体，C正确；目的基因为抗除草剂基因，所以未成功导入目的基因的细胞不具有抗除草剂的能力，筛选的时候应该用含除草剂的培养基筛选转基因细胞，D正确。
20.下图表示一人工种子，下列有关叙述不正确的是( )
A. 人工种子一般用离体的植物细胞通过组织培养技术获得
B. 胚状体是人工种子最重要的结构
C. 同一批次的人工种子可以保证具有相同的基因型
D. 胚状体是由未分化的、具有分裂能力的细胞组成
【答案】D
【解析】
【分析】
人工种子是指以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子。人工种子的结构：由胚状体、作为保护外壳的人工种皮和提供发育所需营养的人工胚乳三部分构成。
【详解】人工种子是指通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子，A正确；胚状体是人工种子最重要的结构，将来发育成完整的植株，B正确；同一批次的人工种子是由同一组织细胞培养形成的，而同一组织细胞具有相同的基因，因此同一批次的人工种子可以保证具有相同的基因型，C正确；胚状体是由愈伤组织再分化形成的，因此其是由已经分化的、具有分裂能力的细胞构成，D错误。
【点睛】解答本题的关键是识记植物组织培养的过程和原料，掌握植物组织培养技术的相关应用，明确植物组织培养的不同阶段有不同的应用，进而能结合所学的知识准确答题。
21.关于植物组织培养的再分化，说法错误的是
A. 再分化过程中，不同细胞内合成了功能不同的特异性蛋白质
B. 脱分化与再分化二者使用的培养基主要是激素用量及比例的不同
C. 再分化过程在实验室或植物组织培养车间进行，需要避光处理
D. 再分化过程中，核遗传物质没有发生改变，但mRNA有变化
【答案】C
【解析】
【分析】
已分化的细胞，当受到创伤或进行离体培养(也受到创伤)时，已停止分裂的细胞又重新恢复分裂，细胞改变原有的分化状态，失去原有结构和功能，成为具有未分化特性的愈伤组织的过程称脱分化，又称去分化。将脱分化产生的愈伤组织继续培养，又可以重新分化形成芽和根等器官，这个过程叫再分化。
【详解】再分化的实质是分化的过程，细胞内的基因选择性表达，不同细胞内合成了功能不同的特异性蛋白质，A正确；决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，因此脱分化与再分化二者使用的培养基主要是激素用量及比例的不同，B正确；形成愈伤组织时要进行避光处理，但再分化过程是形成根和芽等营养器官。芽的形成需要光照的参与，才能形成叶绿素(叶绿素的形成过程需要光照)，所以再分化过程需要光照，C错误；再分化的实质是细胞分化，分化过程是基因选择性表达的过程，该过程中核遗传物质没有发生改变，但mRNA有变化，D正确。
故选C。
22.我国科学家以雌性猕猴胎儿成纤维细胞为核供体，成功克隆出两只猕猴，成为全球首例细胞克隆灵长类动物。有关叙述错误的是
A. 培育出的两只猕猴均为雌性
B. 若取猕猴的体细胞核进行克隆则难度明显较高
C. 这项技术证明高度分化的动物体细胞具有全能性
D. 克隆猕猴的成功为大量培育灵长类遗传病模型动物提供可能
【答案】C
【解析】
【分析】
核移植指将动物一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体，该动物称为克隆动物。
【详解】A、培育出的两只猕猴以雌性猕猴胎儿成纤维细胞为核供体，故均为雌性，A正确；
B、体细胞分化程度高，恢复其全能性相对较难，故取猕猴的体细胞核进行克隆则难度明显较高，B正确；
C、核移植只能证明高度分化的动物体细胞的细胞核具有全能性，C错误；
D、克隆猕猴的成功为大量培育灵长类遗传病模型动物提供可能，即通过核移植获得模型动物，D正确。
故选C。
23.下列有关胚胎工程的说法，正确的是
A. 成熟的精子即具有了受精能力
B. 排卵是指卵泡从卵巢中排出
C. 1个卵泡中能形成1个成熟的卵子
D. 不同动物精子的大小与动物体型的大小有关
【答案】C
【解析】
【分析】
本题考查胚胎工程的相关知识，重点考查体内受精技术，要求考生识记体内受精的具体过程，能结合所学的知识准确判断各选项．
【详解】成熟的精子并不一定具有受精能力，必须获能后才具备受精能力，A错误；排卵是指卵子从卵泡中排出，而不是指卵泡从卵巢中排出，B错误；1个卵泡中能形成1个成熟的卵子，C正确；不同动物精子的大小与动物体型的大小无关，D错误．
24.下列关于细胞工程的叙述中，正确的是
A. 动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖组织培养可获得脱毒苗
B. 动物细胞融合与植物体细胞杂交都能形成杂种个体
C. 动物细胞培养应在含5%CO2的恒温箱中进行，CO2可为细胞提供碳源
D. 动物细胞培养中两次使用胰蛋白酶的作用不同
【答案】A
【解析】
【分析】
植物体细胞杂交可用于作物育种，动物细胞融合可用于单克隆抗体的制备；动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒。胰蛋白酶可使组织细胞分离，形成细胞悬液。
【详解】动物细胞培养可用于检测有毒物质毒性强弱，茎尖没有受到病毒侵染，通过培养可得到脱毒植株，A正确；动物细胞融合最主要的用途是制做单克隆抗体，而不是形成动物个体，B错误；动物细胞培养应在含5%CO2的恒温箱中培养，CO2可调节培养液的pH，C错误；动物细胞培养中，第一次和第二次使用胰蛋白酶结果都是得到细胞悬液，D错误。
故选A。
25.下列有关哺乳动物精子和卵细胞的发生以及受精作用的叙述，正确的是
A. 采集到的精子和卵细胞相遇即可发生受精作用
B. 排卵就是排出成熟卵细胞的过程
C. 卵细胞形成时的分裂过程均在卵巢内完成
D. 卵子受精的标志是在卵黄膜和透明带之间观察到两个极体
【答案】D
【解析】
【分析】
受精包括受精前的准备阶段和受精阶段：准备阶段1-精子获能，刚刚排出的精子，不能立即与卵子受精，必须在雌性动物生殖道发生相应的生理变化后，才能获得受精能力；准备阶段2-卵子的准备，动物排出的可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到减数第二次分裂中期时，才具备与精子受精的能力。
卵细胞形成过程，其中减数第一次分裂是在雌性动物排卵前后完成的，场所在卵巢；减数第二次分裂是在受精过程中完成的，场所在输卵管中。
受精作用完成的标志：在卵黄膜和透明带之间的间隙可以观察到两个极体。
【详解】A、刚采集的精子不能立刻与卵子受精，必须发生相应的生理变化获能后，才能获得受精能力，错误；
B、排卵时排出的细胞多为次级卵母细胞，成熟度不同，且并非成熟卵细胞，错误；
C、卵子形成时，其减数第二次分裂是在输卵管中进行的，并非卵巢，错误；
D、当在卵细胞膜和透明带的间隙可以观察到两个极体时，说明卵子已经完成了受精，这是判断卵子是否受精的重要标志，正确。
故选D。
26.受精时防止多精入卵的两道屏障是
①顶体反应 ②精子穿越放射冠 ③透明带反应 ④卵细胞膜反应
A. ①② B. ②③ C. ③④ D. ②④
【答案】C
【解析】
【分析】
受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。
【详解】防止多精入卵的第一道屏障是透明带反应，即③；防止多精入卵的第二道屏障是卵黄膜封闭作用，即④。C正确，ABD错误。故选C。
27.下图为利用玉米的幼苗芽尖细胞（基因型为BbTt）进行实验的示意图。下列有关叙述错误的是
A. 实现过程①需要在无菌条件下进行
B. 植株C的染色体数为植株A的一半
C. 植株A与B基因型相同概率是1/4
D. 过程②③都有染色体复制和着丝点分裂的变化
【答案】C
【解析】
【分析】
由图可知，①植物组织培养，②减数分裂产生花粉，③有丝分裂。
植株A的基因型为BbTt；B经过单倍体育种获得，基因型为：BBTT、BBtt、bbTT、bbtt；C为单倍体植株，基因型为：BT、Bt、bT、bt。
【详解】A、过程①表示植物组织培养，需要在无菌条件下进行，A正确；
B、植株C是由花粉直接发育而来，故染色体数为植株A的一半，B正确；
C、植株A的基因型为：BbTt，B的基因型为：BBTT、BBtt、bbTT、bbtt，二者相同的概率是0，C错误；
D、②减数分裂产生花粉，③有丝分裂，都有染色体复制和着丝点分裂的变化，D正确。
故选C。
28.来源于细菌的蓝色色素（谷氨酰胺蓝靛素）合成酶基因在白色玫瑰的花瓣中成功表达，观察到玫瑰花瓣呈现蓝色。下列相关叙述错误的是
A. 目的基因为谷氨酰胺蓝靛素基因
B. 花瓣中的蓝色化合物是谷氨酰胺蓝靛素
C. 可利用农杆菌转化法将目的基因导入玫瑰细胞
D. 构建基因表达载体是培育蓝色玫瑰的核心步骤
【答案】A
【解析】
【分析】
基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
【详解】目的基因为谷氨酰胺蓝靛素合成酶基因，A错误；花瓣中的蓝色化合物是谷氨酰胺蓝靛素，B正确；由分析可知，根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法，C正确；基因工程有四个步骤，其中构建基因表达载体是培育蓝色玫瑰的核心步骤，D正确．
【点睛】本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．
29.如图是胚胎干细胞分离途径示意图。下列说法错误的是
A. 图中a所示细胞将发育成胎儿的各种组织
B. 胚胎干细胞可以增殖而不发生分化
C. 胚胎干细胞是由原肠胚或原始生殖腺中分离出来的一类细胞
D. 利用胚胎干细胞培育的人造器官可以用于器官移植
【答案】C
【解析】
【分析】
1、哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来；
2、具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。
【详解】A、图中a所示细胞为内细胞团细胞，将来能够发育成胎儿的各种组织，A正确；
B、在体外培养的条件下，胚胎干细胞可以增殖而不发生分化，B正确；
C、由图可知胚胎干细胞源于早期胚胎（囊胚）或从原始性腺中分离出来，C错误；
D、利用胚胎干细胞培育的人造器官，解决目前临床上存在的供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题，D正确。
故选C。
30.为了增加菊花花色类型，研究者从其他植物中克隆出花色基因C（图1），拟将其与质粒（图2）重组，再借助农杆菌导入菊花中。
下列操作与实验目的不符的是（ ）
A. 用限制性核酸内切酶 EcoR I和连接酶构建重组质粒
B. 用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞
C. 在培养基中添加卡那霉素，筛选被转化的菊花细胞
D. 用分子杂交方法检测C基因是否整合到菊花染色体上
【答案】C
【解析】
【分析】
1、基因工程的基本工具：分子手术刀”--限制性核酸内切酶（限制酶）、“分子缝合针”--DNA连接酶、“分子运输车”--载体。
2、基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的获取，②基因表达载体的构建，③将目的基因导入受体细胞，④目的基因的检测与鉴定。
3、标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因。
4、目的基因的检测和表达
（1）首先要检测 转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA分子杂交技术。
（2）其次还要检测 目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与 mRNA杂交。
（3）最后检测 目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取 蛋白质，用相应的 抗体进行抗原-抗体杂交。
（4）有时还需进行 个体生物学水平的鉴定．如 转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。
【详解】据图分析可知，在目基因的两端、启动子和终止子之间都有限制性核酸内切酶EcoRⅠ的切割位点，因此可以用限制性核酸内切酶EcoRⅠ切割目的基因和运载体，之后再用DNA连接酶连接形成基因表达载体，A正确；将目的基因导入到植物细胞，常用农杆菌转化法，可以将目的基因C导入到农杆菌的Ti质粒的T-DNA段，之后再用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞中染色体上的DNA上，B正确；图2中显示标记基因时潮霉素抗性基因，应该在培养基中添加潮霉素，筛选被转化的菊花细胞，C错误；要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA分子杂交技术，D正确；故选C。
【点睛】本题以增加菊花花色类型为材料背景，考查基因工程的相关知识，意在考查学生的识图能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题和解决问题的能力。
31.下列表示抗凝血酶乳腺生物反应器的制备过程，下列说法正确的是
A. 其中①表示受精卵
B. 其中②表示性别为雄性的胚胎
C. 常用基因枪法将基因导入受体细胞
D. 在②发育的任何阶段都可以进行胚胎移植
【答案】A
【解析】
【分析】
由图可知，①是动物的受精卵，②是早期胚胎（桑椹胚或囊胚）。
【详解】A、图中受体细胞为动物细胞，故①表示受精卵，A正确；
B、该过程是为了制备乳腺生物反应器，故②表示雌性的胚胎，B错误；
C、常用显微注射法将目的基因导入动物细胞，C错误；
D、常在桑椹胚或囊胚期进行胚胎移植，D错误。
故选A。
32.如图表示哺乳动物胚胎发育过程的几个阶段，下列相关描述正确的是
A. 图中3是透明带，7是原肠腔
B. 发育的先后顺序是A→C→B
C. 1部位细胞将来发育成胎儿的各种组织
D. A、B、C时期的细胞都具有发育的全能性
【答案】A
【解析】
【分析】
1、胚胎发育过程：
（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；
（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎；
（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔[注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化]；
（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔 [细胞分化在胚胎期达到最大限度] 。
2、分析题图：图示表示哺乳动物胚胎发育过程的几个阶段，图中A表示桑椹胚时期；B表示囊胚期，其中1为滋养层，2为内细胞团，3为透明带，4为囊胚腔；C为原肠胚，其中5为外胚层，6为滋养层，7为原肠腔，8为内胚层。
【详解】由以上分析可知，图中3是透明带，7是原肠腔，A正确；图中A是桑椹胚，B是囊胚，C是原肠胚，胚胎发育的先后顺序为A→B→C，B错误；图B中1是滋养层，2是内细胞团，将来发育成胎儿各种组织的是内细胞团，滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，C错误；桑椹胚和囊胚中内细胞团细胞具有发育的全能性，原肠胚时期已经分化，不具有发育的全能性，即C时期的细胞不具有全能性，D错误。
故选A。
【点睛】本题结合哺乳动物胚胎发育过程的几个阶段图解，考查动物胚胎发育的过程，要求考生识记动物胚胎发育的具体过程，能准确判断图中胚胎所处的时期及各结构的名称，再结合所学的知识准确判断各选项。
33.为给工厂化繁殖脱毒甘薯苗提供技术支持，科研人员利用植物组织培养技术研究甘薯茎尖（外植体）大小对诱导分化苗和脱毒苗的影响，结果如下表，下列相关叙述错误的是（ ）
A. 不同培养阶段培养基中激素种类和比例应适时调整
B. 脱分化过程中应给予充足光照使其进行光合作用
C. 可利用病毒cDNA制作探针对甘薯苗进行病毒检测
D. 0．3～0．5mm 大小的茎尖有利于脱毒甘薯苗的培养
【答案】B
【解析】
【分析】
植物组织培养包括脱分化和再分化阶段，该过程需要提供营养、生长素、细胞分裂素等条件。
【详解】不同培养阶段培养基中激素种类和比例应适时调整，如生长素与细胞分裂素的比例升高，利用根的分化；比例下降，利于芽的分化，A正确；脱分化过程中不需要光照，B错误；可利用病毒cDNA制作探针对甘薯苗进行病毒检测，C正确；由图可知，0.3～0.5mm 大小的茎尖，脱毒苗的数目最多，故有利于脱毒甘薯苗的培养，D正确。故选B。
34.将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米细胞，可以提高玉米中的赖氨酸含量；更换赖氨酸形成过程中的天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的个别氨基酸，使两种酶的活性提高，也可以提高玉米中的赖氨酸含量。以上两种技术分别属于( )
A. 基因工程、基因工程 B. 蛋白质工程、蛋白质工程
C. 基因工程、蛋白质工程 D. 蛋白质工程、基因工程
【答案】C
【解析】
【分析】
1、蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）
2、蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因）以上是蛋白质工程特有的途径；以下按照基因工程的一般步骤进行。（注意：目的基因只能用人工合成的方法）
【详解】将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米细胞属于基因工程，富含赖氨酸的蛋白质是自然界中已有的蛋白质，基因工程只是把该蛋白质基因从一种生物转入玉米体内，并使之合成该蛋白质；更换赖氨酸合成过程中的天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的个别氨基酸，是对自然界中已有的蛋白质进行改造，属于蛋白质工程。故选C。
35.在DNA测序工作中，需要将某些限制酶的限制位点在DNA上定位，使其成为DNA分子中的物理参照点，这项工作叫做“限制酶图谱的构建”。假设有以下一项实验：用限制酶Hind Ⅲ、BamH Ⅰ及两者的混合物分别降解一个4 kb(1 kb即1千个碱基对)大小的线性DNA分子，降解产物分别进行凝胶电泳，在电场的作用下，降解产物分开，如甲图所示：
据此构建这两种限制酶在该DNA分子上的“限制酶图谱”如乙图，请判断相关的标示正确的是
A. 2.8 B. Hind Ⅲ
C. 0.3 D. BamH Ⅰ
【答案】C
【解析】
试题分析：从图像可看出，A 1.8；B BamH；C 0.3；D hind.故选C。
考点：本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。
二．填空题
36.基因工程中，需要使用限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。
（1）根据已知条件和图回答：
①上述质粒用限制酶________切割，目的基因用限制酶________切割。
②将切下的目的基因片段插入质粒的切口处，还要加入适量的________。
③请指出质粒上至少要有一个标记基因的理由是_________________________________。
（2）不同生物的基因可以拼接的结构基础是_______________________________________。
（3）大肠杆菌是首先成功表达外源基因的宿主菌，但不能表达结构复杂的蛋白质，哺乳类细胞、昆虫细胞表达系统虽然能表达结构复杂的哺乳类细胞蛋白，但操作复杂，表达水平低，不宜推广使用。基因工程中常选用酵母菌作为受体细胞，请从细胞结构等方面分析用酵母菌作受体细胞能克服上述不足的理由是___________________________________________。
【答案】 (1). Ⅰ (2). Ⅱ (3). DNA连接酶 (4). 检测重组质粒(或目的基因)是否导入受体细胞 (5). DNA结构基本相同 (6). ①单细胞真核生物，含有加工、修饰蛋白质的内质网和高尔基体；②繁殖速度快，能很快得到大量的目的基因；③培养成本低；④容易培养
【解析】
【分析】
根据“限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—”可知，限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ的识别序列虽然不同，但可以产生相同的黏性末端，且限制酶Ⅰ的识别序列内部存在限制酶Ⅱ的识别序列和切点。
【详解】（1）①上述质粒同时存在限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ的识别序列，且两个标记基因中均存在-GATC-的序列，必须保证至少一个标记基因的完整性，故不能用限制酶Ⅱ切割该质粒，而应该用限制酶Ⅰ切割质粒，目的基因两端均存在-GATC-的序列，故需要用限制酶Ⅱ切割。
②需要用DNA连接酶将切下的目的基因与质粒进行连接。
③质粒上的标记基因的作用：可以用于筛选目的基因是否导入受体细胞。
（2）由于不同生物的DNA结构基本相同，故不同生物的基因可以拼接。
（3）基因工程中常选用酵母菌作为受体细胞，是因为它是单细胞真核生物，含有加工、修饰蛋白质的内质网和高尔基体；繁殖速度快，能很快得到大量的目的基因；培养成本低；容易培养等。
【点睛】构建基因表达载体时，需要用到限制酶和DNA连接酶，前者负责打开磷酸二酯键，后者负责催化磷酸二酯键的形成。
37.有性生殖的生物产生后代需进行受精作用，植物体细胞杂交要进行原生质体的融合，单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合，可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程，请据图回答相关问题：
（1）若a，b分别是基因型为Hhrr、hhRr的两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800 lx时都不能生长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞，较为简便的筛选方法是______________________________。
（2）若a，b表示两种植物体的细胞，则采用化学法形成c时，一般是用_____作为诱导剂。由d细胞形成杂种植株的原理是_________，这种育种方法的优点是____________________。
（3）若a，b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则d细胞的特点是______________________。在特定的________________上培养以获得d细胞，再经____________培养和________检测，然后筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
（4）下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来，顺序是______________________________。
【答案】 (1). 在大于800lx光照条件下培养 (2). PEG (3). 植物细胞的全能性 (4). 克服了不同生物远源杂交不亲和的障碍 (5). 既能无限增殖，又能产生特定的抗体 (6). 选择培养基 (7). 克隆化 (8). 专一抗体（阳性） (9).
【解析】
【分析】
植物体细胞杂交指将不同种的植物细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。
动物细胞融合，又称细胞杂交，指将两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，融合后形成具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。
【详解】（1）若a，b分别是基因型为Hhrr、hhRr的两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。则a有2种可能性，即Hr、hr；b有两种可能性，即hR、hr，融合形成的杂种细胞可能为：HhRr、Hhrr、hhRr、hhrr，由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800 lx时都不能生长。故在大于800lx光照条件下培养，只有HhRr的杂种细胞可以存活，故可以从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞。
（2）若a，b表示两种植物体的细胞，可以用PEG作为诱导剂。由d细胞形成杂种植株的过程中需要用到组织培养技术，原理是植物细胞的全能性。植物体细胞杂交可以克服远缘杂交不亲和的障碍。
（3）若a，b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则d细胞为杂交瘤细胞，它既能无限增殖，又可以产生专一抗体。获得d细胞需要在特定的选择培养基上进行筛选，只有杂交瘤细胞可以存活，再经克隆化培养和专一抗体检测（筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞），然后筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
（4）单克隆抗体制备过程中，先用特定抗原对小鼠进行免疫，获得已免疫的B细胞，与骨髓瘤细胞进行融合，获得杂交瘤细胞，经过两次筛选后，获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，经过体外或体内培养，可以获得大量的单克隆抗体，过程图如下：
。
【点睛】杂交瘤细胞的特点：既能无限增殖，又能产生专一抗体；
单克隆抗体的特点：特异性强，灵敏度高，可大量制备。
38.下图表示利用胚胎干细胞(简称ES细胞)所作的一系列研究，请据图分析回答下列问题：
（1）过程Ⅰ表示胚胎干细胞的体外培养，在培养液中需要加入水、无机盐、葡萄糖、氨基酸以及天然成分________等物质。
（2）过程Ⅱ表示将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响的因素，这项研究利用了胚胎干细胞具有________的特点。在哺乳动物胚胎发育过程中，囊胚将进一步发育成________。
（3）过程Ⅲ中的褐毛基因转入胚胎干细胞前需构建________，需要的工具酶是________。
（4）克隆转基因小鼠常用的技术手段有________、细胞培养和________。
【答案】 (1). 动物血清 (2). 发育的全能性 (3). 原肠胚 (4). 重组DNA(或重组载体) (5). 限制酶、DNA连接酶 (6). 核移植 (7). 胚胎移植
【解析】
【分析】
胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，形态上，表现为体积小，细胞核大，核仁明显；功能上，具有发育的全能性，即可以分化成成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养条件下，ES细胞可以增殖而不发生分化。
动物细胞培养的条件：无菌、无毒的环境；营养条件；适宜的温度和pH；95%空气+5%二氧化碳的气体环境。
【详解】（1）过程Ⅰ表示胚胎干细胞的体外培养，在培养液中需要加入水、无机盐、葡萄糖、氨基酸，还需要加入血清、血浆等天然成分。
（2）胚胎干细胞具有发育的全能性，可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞，故可以将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响的因素。在哺乳动物胚胎发育过程中，囊胚将进一步发育，内细胞团表层的细胞形成外胚层，下方细胞形成内胚层，此时的胚胎叫原肠胚。
（3）过程Ⅲ中的褐毛基因转入胚胎干细胞前需构建基因表达载体，需要用到限制酶和DNA连接酶。
（4）克隆转基因小鼠可以采用核移植技术，该过程会用到核移植、细胞培养和胚胎移植。
【点睛】核移植属于无性生殖，试管动物属于有性生殖。
39.阅读下面的相关材料，回答问题：
材料甲 马铃薯是种植广泛的农作物，但病毒侵染后容易导致产量大幅度下降，培育脱毒和抗毒的马铃薯品种是提高产量的有效方法。
材料乙 最近，由于我国从美国进口大量转基因食品而引发了国民的关注和争论。网友们热议转基因食品可能带来的利弊。
材料丙 随着我国经济的高速发展，污染日益严重，进而影响了生态系统的平衡，导致很多城市出现雾霾天气，保证社会—经济—生态协调发展受到人们的广泛关注。
（1）若要通过转基因技术获得抗病毒的马铃薯植株，采用最多的方法是将病毒复制酶基因插入到________中的Ti质粒的________上，构建出________后，将其导入到马铃薯体细胞中，筛选出成功转化的马铃薯体细胞后，再通过________技术形成完整植株。马铃薯的________含病毒极少或无病毒，因此可将此结构经人工培养获得脱毒苗。
（2）对转基因生物安全性的争论主要集中在________、生物安全和环境安全三个方面。
（3）一般来说，生态工程的主要任务是对已被破坏的生态环境进行修复，对造成环境污染和破坏的生产方式进行改善，并提高生态系统的生产力。与传统的工程相比具有少消耗、多效益、________等特点。保证社会—经济—生态协调发展体现了生态工程的________原理。
【答案】 (1). 农杆菌 (2). T-DNA (3). 基因表达载体 (4). 植物组织培养 (5). 分生区附近(或茎尖) (6). 食物安全 (7). 可持续 (8). 整体性
【解析】
【分析】
基因工程的操作步骤：获取目的基因；构建基因表达载体；把目的基因导入受体细胞；目的基因的检测和鉴定。
转基因技术的安全性问题主要集中在：生物安全、食物安全和环境安全。
【详解】（1）若要通过转基因技术获得抗病毒的马铃薯植株的过程中，需要通过农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞中，首先将病毒复制酶基因插入到农杆菌的Ti质粒的T-DNA上，构建出基因表达载体后，再让农杆菌去侵染马铃薯细胞，含目的基因的马铃薯体细胞通过植物组织培养技术可以形成完整植株。马铃薯的茎尖含病毒极少或无病毒，因此可将此结构经人工培养获得脱毒苗。
（2）对转基因生物安全性的争论主要集中在食物安全、生物安全和环境安全三个方面。
（3）生态工程的的特点有：少消耗、多效益、可持续等。保证社会—经济—生态协调发展，不仅考虑到自然生态系统的规律，还要考虑到经济和社会等系统的影响力，体现了生态工程的整体性原理。
【点睛】把目的基因导入动物细胞常用：显微注射法；把目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；把目的基因导入微生物细胞常用钙离子处理法。
高二下学期期末考试试题
一、选择题
1.限制性内切酶的作用实际上就是把DNA上某些化学键打断，一种能对GAATTC专一识别的限制酶，打断的化学键是
A. G与A之间的键 B. G与C之间的键
C. T与A之间的键 D. 磷酸与脱氧核糖之间的键
【答案】D
【解析】
【分析】
限制性内切酶是基因工程中常用的工具酶，被称为切割DNA的分子手术刀，它们能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，从而使其露出黏性末端或平末端。
【详解】一种能对GAATTC专一识别的限制酶，它能打断鸟嘌呤脱氧核苷酸与腺嘌呤脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，两个核苷酸之间是磷酸基团与脱氧核糖之间形成的磷酸二酯键，故D项正确。
2.下列关于蛋白质工程说法，错误的是
A. 蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的二代基因工程
B. 实施蛋白质工程的基本途径必须从预期蛋白质功能出发
C. 蛋白质工程实施过程中可对关键氨基酸直接置换或增删
D. 构建基因表达载体也是蛋白质工程的核心步骤
【答案】C
【解析】
试题分析：蛋白质工程中真正的操作对象仍然是基因，即对基因的修饰或原有记忆的改造，不是对蛋白质的结构或者氨基酸的结构进行改造，所以C错。
考点：本题考查蛋白质工程的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
3.SRY基因为Y染色体上的性别决定基因，可用SRY－PCR法鉴定胚胎性别，其基本程序如下图。相关说法不合理的是
A. 提取滋养层细胞的DNA作为扩增模板
B. 用SRY探针进行检测依据的原理是DNA分子杂交
C. 新合成的DNA含有胚胎细胞全部的遗传信息
D. SRY探针能与雄性胚胎样品中的DNA配对
【答案】C
【解析】
试题分析：SRY-PCR法鉴定胚胎性别是提取滋养层细胞的DNA，以SRY基因为模板，利用PCR技术扩增相关基因，再加入SRY基因探针进行检测提取DNA中是否存在SRY基因。若存在，则原细胞中含有Y染色体，该胚胎将来发育为雄性，反之，则发育为雌性。由于基因探针的检测原理就是DAN单链发生碱基互补配对的过程，所以A、B、D正确。由于PCR扩增过程只用了一个基因引物，所以只能是扩增了部分基因，不能包括细胞全部基因，C错。
4.下面关于多聚酶链式反应(PCR)的叙述正确的是
A. PCR过程中只需要两个引物分子
B. PCR的循环过程分为变性、复性和延伸三步
C. PCR扩增仪需保持在37°C以维持Taq酶最佳活性
D. PCR过程中边解旋边复制
【答案】B
【解析】
【分析】
PCR是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。通过这一技术，可以在短时间内大量扩增目的基因。
【详解】A、PCR过程中需要两种引物，引物的数目需要根据扩增的次数确定，A错误；
B、PCR的循环过程分为高温变性（DNA双链打开）、复性（模板链与引物结合）和延伸（合成子链）三步，B正确；
C、PCR扩增仪温度会达到90-95℃，C错误；
D、PCR过程中，在变性阶段打开双链，延伸阶段合成子链，故先解旋再复制，D错误。
故选B。
5. 制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括 ( )
①细胞培养 ②细胞融合 ③胚胎移植 ④细胞核移植
A. ①② B. ①③
C. ②③ D. ③④
【答案】A
【解析】
本题考查单克隆抗体的制备原理。制备单克隆抗体时，首先采用细胞融合技术得到杂交瘤细胞，再采用动物细胞培养技术获得能产生所需抗体的细胞群。
6.下列对动物细胞培养的有关叙述正确的是
A. 动物细胞培养的目的是获得优良性状动物个体
B. 动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散
C. 细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过程中
D. 动物细胞融合和植物体细胞杂交的原理相同
【答案】B
【解析】
【分析】
动物细胞培养是从动物体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
【详解】A、动物细胞培养的目的是获得多个动物细胞，A错误；
B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理使细胞分散，B正确；
C、细胞的癌变发生于传代培养的过程中，C错误；
D、动物细胞融合原理是细胞膜的流动性，植物体细胞杂交的原理的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，D错误。
故选B。
7.“设计试管婴儿”与“试管婴儿”，均用到了下列哪些生物技术手段
① 胚胎移植技术 ② 体外受精技术 ③ 植入前遗传学诊断技术 ④ DNA重组技术
A. ①②③ B. ②③④ C. ①② D. ③④
【答案】C
【解析】
【分析】
试管婴儿和设计试管婴儿均属于有性生殖，经过体外受精，早期胚胎培养、胚胎移植等过程，试管婴儿主要解决不孕夫妇的生育问题，设计试管婴儿主要用于白血病、贫血病的治疗。
【详解】试管婴儿和设计试管婴儿均需要经过体外受精、胚胎移植，后者还需要经过遗传学诊断，二者不需要用到DNA重组技术。综上所述，ABD不符合题意，C符合题意。
故选C。
8.下列关于胚胎工程的叙述正确的是
A. 胚胎移植中的受体和供体需同期发情处理
B. 胚胎移植中的受体和供体应都是优良品种
C. 胚胎可通过体外培养直接获得新个体
D. 通过胚胎分割技术获得的多个个体，性别可以不同
【答案】A
【解析】
受精卵在体外培养可以得到早期胚胎，且早期胚胎必须进行胚胎移植；通过胚胎分割技术，得到的多个个体来源于同一个受精卵，性别一致。
9.下列关于限制酶的说法，正确的是
A. 限制酶广泛存在于真核生物中，其化学本质是蛋白质
B. 不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端
C. 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列
D. 限制酶识别的序列均由6个核苷酸组成
【答案】C
【解析】
【分析】
限制酶能识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
【详解】A、限制酶主要存在于原核生物中，其化学本质是蛋白质，A错误；
B、不同的限制酶切割DNA后会形成黏性末端或平末端，B错误；
C、一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，且在特定的位点打开磷酸二酯键，C正确；
D、切割质粒的限制性核酸内切酶均能特异性地识别核苷酸序列，但识别的核苷酸序列不一定是6个，D错误。
故选C。
【点睛】一种限制酶只能识别一种特定的序列，产生的末端可能为黏性末端或平末端。
10.如图为某二倍体植株花药中的花粉在适宜培养基上形成完整植株的过程。下列有关叙述正确的是
A. 过程①②表示脱分化，过程③表示再分化
B. 过程①②需要避光，过程③需要照光
C. 过程①②③说明花粉细胞具有全能性
D. 过程③获得的完整植株可正常交配产生后代
【答案】C
【解析】
【分析】
由图可知，①脱分化、②再分化、③移栽。
【详解】A、过程①表示脱分化，过程②表示再分化，A错误；
B、过程①脱分化需要避光，过程②③需要照光，B错误；
C、过程①②③经过组织培养发育成完整植株，说明花粉细胞具有全能性，C正确；
D、过程③获得的完整植株属于单倍体，高度不育，不能产生后代，D错误。
故选C。
11.下列有关胚胎发育的说法中，不正确的是
A. 胚胎从透明带内伸展出来的过程称为孵化
B. 卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加
C. 胚胎发育到囊胚期时出现囊胚腔
D. 原肠胚时期胚胎进一步分化出内、外胚层
【答案】B
【解析】
【分析】
早期胚胎发育主要包括：受精卵→4细胞→8细胞→桑椹胚→囊胚→原肠胚等。
【详解】A、囊胚进一步扩大，胚胎从透明带内伸展出来的过程称为孵化，A正确；
B、卵裂期胚胎中细胞数目增多，有机物总量会减少，B错误；
C、胚胎发育到囊胚期时出现囊胚腔，囊胚期还具有内细胞团、滋养层等结构，C正确；
D、原肠胚时期胚胎进一步分化出内、外胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔，D正确。
故选B。
12.精子获能的常用化学物质是下列哪一种
A. 氯化钙溶液 B. 肝脏研磨液
C. 肝素溶液 D. 胰蛋白酶液
【答案】C
【解析】
【分析】
收集精子的方法：假阴道法、手握法和电刺激法。
精子获能的方法：培养法和化学诱导法。
【详解】精子获能常用一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液处理。综上所述，ABD不符合题意，C符合题意。
故选C。
13. 下列关于转基因生物安全性的叙述中，错误的是
A. 我国已经对转基因食品和转基因农产品强制实施了产品标识制度
B. 国际上大多数国家都在转基因食品标签上警示性注明可能危害
C. 开展风险评估、预警跟踪和风险管理是保障转基因生物安全的前提
D. 目前对转基因生物安全性的争论主要集中在食用安全性和环境安全性上
【答案】B
【解析】
转基因食品、产品上都要标注原料来自转基因生物；转基因食品上只标明原料来自转基因生物，并未标明其危害；为了保障现代生物技术的安全性，需要开展风险评估、预警跟踪等措施；主要是食物安全和环境安全，另外还有生物安全问题。
【考点定位】考查现代生物技术安全性相关知识，属于考纲理解层次，难度中等。
14.下列关于蛋白质工程应用的叙述正确的是
A. 基因工程和蛋白质工程产生的变异都是可遗传的
B. 蛋白质工程和基因工程的目的是获得人类需要的蛋白质，所以二者没有区别
C. 只有利用蛋白质工程才可以在大肠杆菌细胞中得到人的胰岛素
D. 在相关酶、氨基酸和适宜的温度、pH条件下，干扰素可以大量自我合成
【答案】A
【解析】
【分析】
蛋白质工程：是指以蛋白质分子的结构规律及与其生理功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。
【详解】A、基因工程和蛋白质工程产生的变异属于基因重组，属于可遗传变异，A正确；
B、蛋白质工程和基因工程的目的是获得人类需要的蛋白质，基因工程生产的蛋白质是自然界存在的，蛋白质工程可以生产自然界不存在的蛋白质，B错误；
C、利用基因工程就可以在大肠杆菌细胞中得到人的胰岛素，C错误；
D、干扰素属于蛋白质，由基因控制合成，不能自我复制合成，D错误。
故选A。
15.下列受体细胞与导入方法的匹配，正确的是
A. 棉花细胞——花粉管通道法 B. 羊受精卵——基因枪法
C. 大肠杆菌——农杆菌转化法 D. 农杆菌——农杆菌转化法
【答案】A
【解析】
【分析】
将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。
（1）将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；
（2）将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；
（3）将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法（Ca2+处理法）。
【详解】将目的基因导入棉花细胞内常用花粉管通道法，A正确；显微注射技术是将目的基因导入动物细胞最有效的方法，B错误；Ca2+处理法能使大肠杆菌、农杆菌细胞的生理状态发生改变，使之成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态，故将目的基因导入大肠杆菌，应采用感受态细胞法（Ca2+处理法），C错误，D错误。故选A。
【点睛】本题考查基因工程的原理及技术，要求考生识记基因工程的原理、工具及操作步骤，明确受体细胞不同时，导入目的基因的方法也不同，再结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记层次的考查。
16.下列有关胚胎干细胞及生物技术的叙述中正确的是
①小鼠胚胎干细胞(ES)无法由囊胚的内细胞团细胞分离培养获得
②自体干细胞移植通常不会引起免疫排斥反应
③囊胚的滋养层细胞具有发育全能性
④胚胎干细胞在体外培养能增殖但不能被诱导分化
⑤胚胎干细胞在形态上表现为体积小、细胞核大、核仁明显
A. ①③ B. ②③ C. ②⑤ D. ①④
【答案】C
【解析】
【分析】
胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，形态上，表现为体积小，细胞核大，核仁明显；功能上，具有发育的全能性，即可以分化成成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养条件下，ES细胞可以增殖而不发生分化。
【详解】①小鼠胚胎干细胞(ES)可以由囊胚的内细胞团或原始性腺分离培养获得，①错误；
②自体干细胞移植通常不会引起免疫排斥反应，②正确；
③囊胚的滋养层细胞会发育成胎膜、胎盘，不具有发育全能性，③错误；
④胚胎干细胞在体外培养能增殖，也可以被诱导分化，④错误；
⑤胚胎干细胞在形态上表现为体积小、细胞核大、核仁明显，⑤正确。
综上所述，ABD不符合题意，C符合题意。
故选C。
17.腺苷酸脱氨酶(ADA)基因缺陷症是一种免疫缺陷病，对患者采用基因治疗的方法是：取出患者的白细胞，进行体外培养时转入正常ADA基因，再将这些白细胞注射入患者体内，使其免疫功能增强，能正常生活。下列有关叙述中，正确的是
A. 正常ADA基因替换了患者的缺陷基因
B. 正常ADA基因通过控制ADA的合成来影响免疫功能
C. 白细胞需在体外培养10代以后再注射入患者体内
D. 腺苷酸脱氨酶(ADA)基因缺陷症属于获得性免疫缺陷病
【答案】B
【解析】
【分析】
基因治疗指把正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，这是治疗遗传病的最有效的手段。
【详解】A、因治疗是用正常ADA基因替换了患者的缺陷基因的作用，而非替换基因本身，A错误；
B、ADA是人体免疫系统发挥正常功能所必需的，正常ADA基因通过控制ADA的合成来影响免疫功能，B正确；
C、应该选择体外培养10代以内的白细胞，C错误；
D、腺苷酸脱氨酶(ADA)基因缺陷症属于先天性免疫缺陷病，D错误。
故选B
18.以下关于胚胎干细胞的叙述不正确的是
A. ES细胞的分离和培养可以应用于基础生物学、畜牧学和医学等方面
B. ES细胞可用于治疗帕金森综合征、青少年型糖尿病和老年痴呆症等
C. 现已经通过诱导ES细胞的定向分化成功治愈癌症、心脑血管疾病和某些组织器官的损伤
D. ES细胞是研究体外细胞分化的理想材料
【答案】C
【解析】
试题分析：1、胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺．胚胎干细胞的特点：具有胚胎细胞的特性，体积较小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物任何一种组织细胞．
2、胚胎干细胞的主要用途是：
①可用于研究哺乳动物个体发生和发育规律；
②是在体外条件下研究细胞分化的理想材料．ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中，能够维持不分化的状态．在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡机理提供了有效的手段；
③可以用于治疗人类的某些顽疾，如帕金森综合症、糖尿病、老年痴呆症、肝衰竭、新衰竭、成骨不良；
④培育各种组织器官，用于器官移植，解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题．
解：A、ES细胞的分离和培养可以应用于基础生物学、畜牧学和医学等方面，A正确；
B、ES细胞可用于治疗人类的某些顽疾，如帕金森综合征、青少年型糖尿病和老年痴呆症等，B正确；
C、诱导ES细胞的定向分化治疗癌症、心脑血管疾病和某些组织器官的损伤，还处于临床试验阶段，C错误；
D、ES细胞是在体外条件下研究细胞分化的理想材料，D正确．
故选：C．
考点：胚胎干细胞的来源及分化．
19. 在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是
A. 用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸
B. 用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体
C. 将重组DNA分子导入烟草原生质体
D. 用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞
【答案】A
【解析】
限制性核酸内切酶切割的是DNA，而烟草花叶病毒的遗传物质为RNA，所以A错误；目的基因与运载体的连接由DNA连接酶催化连接，B正确；受体细胞为植物细胞，所以可以是烟草原生质体，C正确；目的基因为抗除草剂基因，所以未成功导入目的基因的细胞不具有抗除草剂的能力，筛选的时候应该用含除草剂的培养基筛选转基因细胞，D正确。
20.下图表示一人工种子，下列有关叙述不正确的是( )
A. 人工种子一般用离体的植物细胞通过组织培养技术获得
B. 胚状体是人工种子最重要的结构
C. 同一批次的人工种子可以保证具有相同的基因型
D. 胚状体是由未分化的、具有分裂能力的细胞组成
【答案】D
【解析】
【分析】
人工种子是指以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子。人工种子的结构：由胚状体、作为保护外壳的人工种皮和提供发育所需营养的人工胚乳三部分构成。
【详解】人工种子是指通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子，A正确；胚状体是人工种子最重要的结构，将来发育成完整的植株，B正确；同一批次的人工种子是由同一组织细胞培养形成的，而同一组织细胞具有相同的基因，因此同一批次的人工种子可以保证具有相同的基因型，C正确；胚状体是由愈伤组织再分化形成的，因此其是由已经分化的、具有分裂能力的细胞构成，D错误。
【点睛】解答本题的关键是识记植物组织培养的过程和原料，掌握植物组织培养技术的相关应用，明确植物组织培养的不同阶段有不同的应用，进而能结合所学的知识准确答题。
21.关于植物组织培养的再分化，说法错误的是
A. 再分化过程中，不同细胞内合成了功能不同的特异性蛋白质
B. 脱分化与再分化二者使用的培养基主要是激素用量及比例的不同
C. 再分化过程在实验室或植物组织培养车间进行，需要避光处理
D. 再分化过程中，核遗传物质没有发生改变，但mRNA有变化
【答案】C
【解析】
【分析】
已分化的细胞，当受到创伤或进行离体培养(也受到创伤)时，已停止分裂的细胞又重新恢复分裂，细胞改变原有的分化状态，失去原有结构和功能，成为具有未分化特性的愈伤组织的过程称脱分化，又称去分化。将脱分化产生的愈伤组织继续培养，又可以重新分化形成芽和根等器官，这个过程叫再分化。
【详解】再分化的实质是分化的过程，细胞内的基因选择性表达，不同细胞内合成了功能不同的特异性蛋白质，A正确；决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，因此脱分化与再分化二者使用的培养基主要是激素用量及比例的不同，B正确；形成愈伤组织时要进行避光处理，但再分化过程是形成根和芽等营养器官。芽的形成需要光照的参与，才能形成叶绿素(叶绿素的形成过程需要光照)，所以再分化过程需要光照，C错误；再分化的实质是细胞分化，分化过程是基因选择性表达的过程，该过程中核遗传物质没有发生改变，但mRNA有变化，D正确。
故选C。
22.我国科学家以雌性猕猴胎儿成纤维细胞为核供体，成功克隆出两只猕猴，成为全球首例细胞克隆灵长类动物。有关叙述错误的是
A. 培育出的两只猕猴均为雌性
B. 若取猕猴的体细胞核进行克隆则难度明显较高
C. 这项技术证明高度分化的动物体细胞具有全能性
D. 克隆猕猴的成功为大量培育灵长类遗传病模型动物提供可能
【答案】C
【解析】
【分析】
核移植指将动物一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体，该动物称为克隆动物。
【详解】A、培育出的两只猕猴以雌性猕猴胎儿成纤维细胞为核供体，故均为雌性，A正确；
B、体细胞分化程度高，恢复其全能性相对较难，故取猕猴的体细胞核进行克隆则难度明显较高，B正确；
C、核移植只能证明高度分化的动物体细胞的细胞核具有全能性，C错误；
D、克隆猕猴的成功为大量培育灵长类遗传病模型动物提供可能，即通过核移植获得模型动物，D正确。
故选C。
23.下列有关胚胎工程的说法，正确的是
A. 成熟的精子即具有了受精能力
B. 排卵是指卵泡从卵巢中排出
C. 1个卵泡中能形成1个成熟的卵子
D. 不同动物精子的大小与动物体型的大小有关
【答案】C
【解析】
【分析】
本题考查胚胎工程的相关知识，重点考查体内受精技术，要求考生识记体内受精的具体过程，能结合所学的知识准确判断各选项．
【详解】成熟的精子并不一定具有受精能力，必须获能后才具备受精能力，A错误；排卵是指卵子从卵泡中排出，而不是指卵泡从卵巢中排出，B错误；1个卵泡中能形成1个成熟的卵子，C正确；不同动物精子的大小与动物体型的大小无关，D错误．
24.下列关于细胞工程的叙述中，正确的是
A. 动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖组织培养可获得脱毒苗
B. 动物细胞融合与植物体细胞杂交都能形成杂种个体
C. 动物细胞培养应在含5%CO2的恒温箱中进行，CO2可为细胞提供碳源
D. 动物细胞培养中两次使用胰蛋白酶的作用不同
【答案】A
【解析】
【分析】
植物体细胞杂交可用于作物育种，动物细胞融合可用于单克隆抗体的制备；动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒。胰蛋白酶可使组织细胞分离，形成细胞悬液。
【详解】动物细胞培养可用于检测有毒物质毒性强弱，茎尖没有受到病毒侵染，通过培养可得到脱毒植株，A正确；动物细胞融合最主要的用途是制做单克隆抗体，而不是形成动物个体，B错误；动物细胞培养应在含5%CO2的恒温箱中培养，CO2可调节培养液的pH，C错误；动物细胞培养中，第一次和第二次使用胰蛋白酶结果都是得到细胞悬液，D错误。
故选A。
25.下列有关哺乳动物精子和卵细胞的发生以及受精作用的叙述，正确的是
A. 采集到的精子和卵细胞相遇即可发生受精作用
B. 排卵就是排出成熟卵细胞的过程
C. 卵细胞形成时的分裂过程均在卵巢内完成
D. 卵子受精的标志是在卵黄膜和透明带之间观察到两个极体
【答案】D
【解析】
【分析】
受精包括受精前的准备阶段和受精阶段：准备阶段1-精子获能，刚刚排出的精子，不能立即与卵子受精，必须在雌性动物生殖道发生相应的生理变化后，才能获得受精能力；准备阶段2-卵子的准备，动物排出的可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到减数第二次分裂中期时，才具备与精子受精的能力。
卵细胞形成过程，其中减数第一次分裂是在雌性动物排卵前后完成的，场所在卵巢；减数第二次分裂是在受精过程中完成的，场所在输卵管中。
受精作用完成的标志：在卵黄膜和透明带之间的间隙可以观察到两个极体。
【详解】A、刚采集的精子不能立刻与卵子受精，必须发生相应的生理变化获能后，才能获得受精能力，错误；
B、排卵时排出的细胞多为次级卵母细胞，成熟度不同，且并非成熟卵细胞，错误；
C、卵子形成时，其减数第二次分裂是在输卵管中进行的，并非卵巢，错误；
D、当在卵细胞膜和透明带的间隙可以观察到两个极体时，说明卵子已经完成了受精，这是判断卵子是否受精的重要标志，正确。
故选D。
26.受精时防止多精入卵的两道屏障是
①顶体反应 ②精子穿越放射冠 ③透明带反应 ④卵细胞膜反应
A. ①② B. ②③ C. ③④ D. ②④
【答案】C
【解析】
【分析】
受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。
【详解】防止多精入卵的第一道屏障是透明带反应，即③；防止多精入卵的第二道屏障是卵黄膜封闭作用，即④。C正确，ABD错误。故选C。
27.下图为利用玉米的幼苗芽尖细胞（基因型为BbTt）进行实验的示意图。下列有关叙述错误的是
A. 实现过程①需要在无菌条件下进行
B. 植株C的染色体数为植株A的一半
C. 植株A与B基因型相同概率是1/4
D. 过程②③都有染色体复制和着丝点分裂的变化
【答案】C
【解析】
【分析】
由图可知，①植物组织培养，②减数分裂产生花粉，③有丝分裂。
植株A的基因型为BbTt；B经过单倍体育种获得，基因型为：BBTT、BBtt、bbTT、bbtt；C为单倍体植株，基因型为：BT、Bt、bT、bt。
【详解】A、过程①表示植物组织培养，需要在无菌条件下进行，A正确；
B、植株C是由花粉直接发育而来，故染色体数为植株A的一半，B正确；
C、植株A的基因型为：BbTt，B的基因型为：BBTT、BBtt、bbTT、bbtt，二者相同的概率是0，C错误；
D、②减数分裂产生花粉，③有丝分裂，都有染色体复制和着丝点分裂的变化，D正确。
故选C。
28.来源于细菌的蓝色色素（谷氨酰胺蓝靛素）合成酶基因在白色玫瑰的花瓣中成功表达，观察到玫瑰花瓣呈现蓝色。下列相关叙述错误的是
A. 目的基因为谷氨酰胺蓝靛素基因
B. 花瓣中的蓝色化合物是谷氨酰胺蓝靛素
C. 可利用农杆菌转化法将目的基因导入玫瑰细胞
D. 构建基因表达载体是培育蓝色玫瑰的核心步骤
【答案】A
【解析】
【分析】
基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
【详解】目的基因为谷氨酰胺蓝靛素合成酶基因，A错误；花瓣中的蓝色化合物是谷氨酰胺蓝靛素，B正确；由分析可知，根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法，C正确；基因工程有四个步骤，其中构建基因表达载体是培育蓝色玫瑰的核心步骤，D正确．
【点睛】本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．
29.如图是胚胎干细胞分离途径示意图。下列说法错误的是
A. 图中a所示细胞将发育成胎儿的各种组织
B. 胚胎干细胞可以增殖而不发生分化
C. 胚胎干细胞是由原肠胚或原始生殖腺中分离出来的一类细胞
D. 利用胚胎干细胞培育的人造器官可以用于器官移植
【答案】C
【解析】
【分析】
1、哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来；
2、具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。
【详解】A、图中a所示细胞为内细胞团细胞，将来能够发育成胎儿的各种组织，A正确；
B、在体外培养的条件下，胚胎干细胞可以增殖而不发生分化，B正确；
C、由图可知胚胎干细胞源于早期胚胎（囊胚）或从原始性腺中分离出来，C错误；
D、利用胚胎干细胞培育的人造器官，解决目前临床上存在的供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题，D正确。
故选C。
30.为了增加菊花花色类型，研究者从其他植物中克隆出花色基因C（图1），拟将其与质粒（图2）重组，再借助农杆菌导入菊花中。
下列操作与实验目的不符的是（ ）
A. 用限制性核酸内切酶 EcoR I和连接酶构建重组质粒
B. 用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞
C. 在培养基中添加卡那霉素，筛选被转化的菊花细胞
D. 用分子杂交方法检测C基因是否整合到菊花染色体上
【答案】C
【解析】
【分析】
1、基因工程的基本工具：分子手术刀”--限制性核酸内切酶（限制酶）、“分子缝合针”--DNA连接酶、“分子运输车”--载体。
2、基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的获取，②基因表达载体的构建，③将目的基因导入受体细胞，④目的基因的检测与鉴定。
3、标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因。
4、目的基因的检测和表达
（1）首先要检测 转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA分子杂交技术。
（2）其次还要检测 目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与 mRNA杂交。
（3）最后检测 目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取 蛋白质，用相应的 抗体进行抗原-抗体杂交。
（4）有时还需进行 个体生物学水平的鉴定．如 转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。
【详解】据图分析可知，在目基因的两端、启动子和终止子之间都有限制性核酸内切酶EcoRⅠ的切割位点，因此可以用限制性核酸内切酶EcoRⅠ切割目的基因和运载体，之后再用DNA连接酶连接形成基因表达载体，A正确；将目的基因导入到植物细胞，常用农杆菌转化法，可以将目的基因C导入到农杆菌的Ti质粒的T-DNA段，之后再用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞中染色体上的DNA上，B正确；图2中显示标记基因时潮霉素抗性基因，应该在培养基中添加潮霉素，筛选被转化的菊花细胞，C错误；要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA分子杂交技术，D正确；故选C。
【点睛】本题以增加菊花花色类型为材料背景，考查基因工程的相关知识，意在考查学生的识图能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题和解决问题的能力。
31.下列表示抗凝血酶乳腺生物反应器的制备过程，下列说法正确的是
A. 其中①表示受精卵
B. 其中②表示性别为雄性的胚胎
C. 常用基因枪法将基因导入受体细胞
D. 在②发育的任何阶段都可以进行胚胎移植
【答案】A
【解析】
【分析】
由图可知，①是动物的受精卵，②是早期胚胎（桑椹胚或囊胚）。
【详解】A、图中受体细胞为动物细胞，故①表示受精卵，A正确；
B、该过程是为了制备乳腺生物反应器，故②表示雌性的胚胎，B错误；
C、常用显微注射法将目的基因导入动物细胞，C错误；
D、常在桑椹胚或囊胚期进行胚胎移植，D错误。
故选A。
32.如图表示哺乳动物胚胎发育过程的几个阶段，下列相关描述正确的是
A. 图中3是透明带，7是原肠腔
B. 发育的先后顺序是A→C→B
C. 1部位细胞将来发育成胎儿的各种组织
D. A、B、C时期的细胞都具有发育的全能性
【答案】A
【解析】
【分析】
1、胚胎发育过程：
（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；
（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎；
（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔[注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化]；
（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔 [细胞分化在胚胎期达到最大限度] 。
2、分析题图：图示表示哺乳动物胚胎发育过程的几个阶段，图中A表示桑椹胚时期；B表示囊胚期，其中1为滋养层，2为内细胞团，3为透明带，4为囊胚腔；C为原肠胚，其中5为外胚层，6为滋养层，7为原肠腔，8为内胚层。
【详解】由以上分析可知，图中3是透明带，7是原肠腔，A正确；图中A是桑椹胚，B是囊胚，C是原肠胚，胚胎发育的先后顺序为A→B→C，B错误；图B中1是滋养层，2是内细胞团，将来发育成胎儿各种组织的是内细胞团，滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，C错误；桑椹胚和囊胚中内细胞团细胞具有发育的全能性，原肠胚时期已经分化，不具有发育的全能性，即C时期的细胞不具有全能性，D错误。
故选A。
【点睛】本题结合哺乳动物胚胎发育过程的几个阶段图解，考查动物胚胎发育的过程，要求考生识记动物胚胎发育的具体过程，能准确判断图中胚胎所处的时期及各结构的名称，再结合所学的知识准确判断各选项。
33.为给工厂化繁殖脱毒甘薯苗提供技术支持，科研人员利用植物组织培养技术研究甘薯茎尖（外植体）大小对诱导分化苗和脱毒苗的影响，结果如下表，下列相关叙述错误的是（ ）
A. 不同培养阶段培养基中激素种类和比例应适时调整
B. 脱分化过程中应给予充足光照使其进行光合作用
C. 可利用病毒cDNA制作探针对甘薯苗进行病毒检测
D. 0．3～0．5mm 大小的茎尖有利于脱毒甘薯苗的培养
【答案】B
【解析】
【分析】
植物组织培养包括脱分化和再分化阶段，该过程需要提供营养、生长素、细胞分裂素等条件。
【详解】不同培养阶段培养基中激素种类和比例应适时调整，如生长素与细胞分裂素的比例升高，利用根的分化；比例下降，利于芽的分化，A正确；脱分化过程中不需要光照，B错误；可利用病毒cDNA制作探针对甘薯苗进行病毒检测，C正确；由图可知，0.3～0.5mm 大小的茎尖，脱毒苗的数目最多，故有利于脱毒甘薯苗的培养，D正确。故选B。
34.将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米细胞，可以提高玉米中的赖氨酸含量；更换赖氨酸形成过程中的天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的个别氨基酸，使两种酶的活性提高，也可以提高玉米中的赖氨酸含量。以上两种技术分别属于( )
A. 基因工程、基因工程 B. 蛋白质工程、蛋白质工程
C. 基因工程、蛋白质工程 D. 蛋白质工程、基因工程
【答案】C
【解析】
【分析】
1、蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）
2、蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因）以上是蛋白质工程特有的途径；以下按照基因工程的一般步骤进行。（注意：目的基因只能用人工合成的方法）
【详解】将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米细胞属于基因工程，富含赖氨酸的蛋白质是自然界中已有的蛋白质，基因工程只是把该蛋白质基因从一种生物转入玉米体内，并使之合成该蛋白质；更换赖氨酸合成过程中的天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的个别氨基酸，是对自然界中已有的蛋白质进行改造，属于蛋白质工程。故选C。
35.在DNA测序工作中，需要将某些限制酶的限制位点在DNA上定位，使其成为DNA分子中的物理参照点，这项工作叫做“限制酶图谱的构建”。假设有以下一项实验：用限制酶Hind Ⅲ、BamH Ⅰ及两者的混合物分别降解一个4 kb(1 kb即1千个碱基对)大小的线性DNA分子，降解产物分别进行凝胶电泳，在电场的作用下，降解产物分开，如甲图所示：
据此构建这两种限制酶在该DNA分子上的“限制酶图谱”如乙图，请判断相关的标示正确的是
A. 2.8 B. Hind Ⅲ
C. 0.3 D. BamH Ⅰ
【答案】C
【解析】
试题分析：从图像可看出，A 1.8；B BamH；C 0.3；D hind.故选C。
考点：本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。
二．填空题
36.基因工程中，需要使用限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。
（1）根据已知条件和图回答：
①上述质粒用限制酶________切割，目的基因用限制酶________切割。
②将切下的目的基因片段插入质粒的切口处，还要加入适量的________。
③请指出质粒上至少要有一个标记基因的理由是_________________________________。
（2）不同生物的基因可以拼接的结构基础是_______________________________________。
（3）大肠杆菌是首先成功表达外源基因的宿主菌，但不能表达结构复杂的蛋白质，哺乳类细胞、昆虫细胞表达系统虽然能表达结构复杂的哺乳类细胞蛋白，但操作复杂，表达水平低，不宜推广使用。基因工程中常选用酵母菌作为受体细胞，请从细胞结构等方面分析用酵母菌作受体细胞能克服上述不足的理由是___________________________________________。
【答案】 (1). Ⅰ (2). Ⅱ (3). DNA连接酶 (4). 检测重组质粒(或目的基因)是否导入受体细胞 (5). DNA结构基本相同 (6). ①单细胞真核生物，含有加工、修饰蛋白质的内质网和高尔基体；②繁殖速度快，能很快得到大量的目的基因；③培养成本低；④容易培养
【解析】
【分析】
根据“限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—”可知，限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ的识别序列虽然不同，但可以产生相同的黏性末端，且限制酶Ⅰ的识别序列内部存在限制酶Ⅱ的识别序列和切点。
【详解】（1）①上述质粒同时存在限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ的识别序列，且两个标记基因中均存在-GATC-的序列，必须保证至少一个标记基因的完整性，故不能用限制酶Ⅱ切割该质粒，而应该用限制酶Ⅰ切割质粒，目的基因两端均存在-GATC-的序列，故需要用限制酶Ⅱ切割。
②需要用DNA连接酶将切下的目的基因与质粒进行连接。
③质粒上的标记基因的作用：可以用于筛选目的基因是否导入受体细胞。
（2）由于不同生物的DNA结构基本相同，故不同生物的基因可以拼接。
（3）基因工程中常选用酵母菌作为受体细胞，是因为它是单细胞真核生物，含有加工、修饰蛋白质的内质网和高尔基体；繁殖速度快，能很快得到大量的目的基因；培养成本低；容易培养等。
【点睛】构建基因表达载体时，需要用到限制酶和DNA连接酶，前者负责打开磷酸二酯键，后者负责催化磷酸二酯键的形成。
37.有性生殖的生物产生后代需进行受精作用，植物体细胞杂交要进行原生质体的融合，单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合，可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程，请据图回答相关问题：
（1）若a，b分别是基因型为Hhrr、hhRr的两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800 lx时都不能生长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞，较为简便的筛选方法是______________________________。
（2）若a，b表示两种植物体的细胞，则采用化学法形成c时，一般是用_____作为诱导剂。由d细胞形成杂种植株的原理是_________，这种育种方法的优点是____________________。
（3）若a，b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则d细胞的特点是______________________。在特定的________________上培养以获得d细胞，再经____________培养和________检测，然后筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
（4）下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来，顺序是______________________________。
【答案】 (1). 在大于800lx光照条件下培养 (2). PEG (3). 植物细胞的全能性 (4). 克服了不同生物远源杂交不亲和的障碍 (5). 既能无限增殖，又能产生特定的抗体 (6). 选择培养基 (7). 克隆化 (8). 专一抗体（阳性） (9).
【解析】
【分析】
植物体细胞杂交指将不同种的植物细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。
动物细胞融合，又称细胞杂交，指将两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，融合后形成具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。
【详解】（1）若a，b分别是基因型为Hhrr、hhRr的两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。则a有2种可能性，即Hr、hr；b有两种可能性，即hR、hr，融合形成的杂种细胞可能为：HhRr、Hhrr、hhRr、hhrr，由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800 lx时都不能生长。故在大于800lx光照条件下培养，只有HhRr的杂种细胞可以存活，故可以从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞。
（2）若a，b表示两种植物体的细胞，可以用PEG作为诱导剂。由d细胞形成杂种植株的过程中需要用到组织培养技术，原理是植物细胞的全能性。植物体细胞杂交可以克服远缘杂交不亲和的障碍。
（3）若a，b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则d细胞为杂交瘤细胞，它既能无限增殖，又可以产生专一抗体。获得d细胞需要在特定的选择培养基上进行筛选，只有杂交瘤细胞可以存活，再经克隆化培养和专一抗体检测（筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞），然后筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
（4）单克隆抗体制备过程中，先用特定抗原对小鼠进行免疫，获得已免疫的B细胞，与骨髓瘤细胞进行融合，获得杂交瘤细胞，经过两次筛选后，获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，经过体外或体内培养，可以获得大量的单克隆抗体，过程图如下：
。
【点睛】杂交瘤细胞的特点：既能无限增殖，又能产生专一抗体；
单克隆抗体的特点：特异性强，灵敏度高，可大量制备。
38.下图表示利用胚胎干细胞(简称ES细胞)所作的一系列研究，请据图分析回答下列问题：
（1）过程Ⅰ表示胚胎干细胞的体外培养，在培养液中需要加入水、无机盐、葡萄糖、氨基酸以及天然成分________等物质。
（2）过程Ⅱ表示将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响的因素，这项研究利用了胚胎干细胞具有________的特点。在哺乳动物胚胎发育过程中，囊胚将进一步发育成________。
（3）过程Ⅲ中的褐毛基因转入胚胎干细胞前需构建________，需要的工具酶是________。
（4）克隆转基因小鼠常用的技术手段有________、细胞培养和________。
【答案】 (1). 动物血清 (2). 发育的全能性 (3). 原肠胚 (4). 重组DNA(或重组载体) (5). 限制酶、DNA连接酶 (6). 核移植 (7). 胚胎移植
【解析】
【分析】
胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，形态上，表现为体积小，细胞核大，核仁明显；功能上，具有发育的全能性，即可以分化成成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养条件下，ES细胞可以增殖而不发生分化。
动物细胞培养的条件：无菌、无毒的环境；营养条件；适宜的温度和pH；95%空气+5%二氧化碳的气体环境。
【详解】（1）过程Ⅰ表示胚胎干细胞的体外培养，在培养液中需要加入水、无机盐、葡萄糖、氨基酸，还需要加入血清、血浆等天然成分。
（2）胚胎干细胞具有发育的全能性，可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞，故可以将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响的因素。在哺乳动物胚胎发育过程中，囊胚将进一步发育，内细胞团表层的细胞形成外胚层，下方细胞形成内胚层，此时的胚胎叫原肠胚。
（3）过程Ⅲ中的褐毛基因转入胚胎干细胞前需构建基因表达载体，需要用到限制酶和DNA连接酶。
（4）克隆转基因小鼠可以采用核移植技术，该过程会用到核移植、细胞培养和胚胎移植。
【点睛】核移植属于无性生殖，试管动物属于有性生殖。
39.阅读下面的相关材料，回答问题：
材料甲 马铃薯是种植广泛的农作物，但病毒侵染后容易导致产量大幅度下降，培育脱毒和抗毒的马铃薯品种是提高产量的有效方法。
材料乙 最近，由于我国从美国进口大量转基因食品而引发了国民的关注和争论。网友们热议转基因食品可能带来的利弊。
材料丙 随着我国经济的高速发展，污染日益严重，进而影响了生态系统的平衡，导致很多城市出现雾霾天气，保证社会—经济—生态协调发展受到人们的广泛关注。
（1）若要通过转基因技术获得抗病毒的马铃薯植株，采用最多的方法是将病毒复制酶基因插入到________中的Ti质粒的________上，构建出________后，将其导入到马铃薯体细胞中，筛选出成功转化的马铃薯体细胞后，再通过________技术形成完整植株。马铃薯的________含病毒极少或无病毒，因此可将此结构经人工培养获得脱毒苗。
（2）对转基因生物安全性的争论主要集中在________、生物安全和环境安全三个方面。
（3）一般来说，生态工程的主要任务是对已被破坏的生态环境进行修复，对造成环境污染和破坏的生产方式进行改善，并提高生态系统的生产力。与传统的工程相比具有少消耗、多效益、________等特点。保证社会—经济—生态协调发展体现了生态工程的________原理。
【答案】 (1). 农杆菌 (2). T-DNA (3). 基因表达载体 (4). 植物组织培养 (5). 分生区附近(或茎尖) (6). 食物安全 (7). 可持续 (8). 整体性
【解析】
【分析】
基因工程的操作步骤：获取目的基因；构建基因表达载体；把目的基因导入受体细胞；目的基因的检测和鉴定。
转基因技术的安全性问题主要集中在：生物安全、食物安全和环境安全。
【详解】（1）若要通过转基因技术获得抗病毒的马铃薯植株的过程中，需要通过农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞中，首先将病毒复制酶基因插入到农杆菌的Ti质粒的T-DNA上，构建出基因表达载体后，再让农杆菌去侵染马铃薯细胞，含目的基因的马铃薯体细胞通过植物组织培养技术可以形成完整植株。马铃薯的茎尖含病毒极少或无病毒，因此可将此结构经人工培养获得脱毒苗。
（2）对转基因生物安全性的争论主要集中在食物安全、生物安全和环境安全三个方面。
（3）生态工程的的特点有：少消耗、多效益、可持续等。保证社会—经济—生态协调发展，不仅考虑到自然生态系统的规律，还要考虑到经济和社会等系统的影响力，体现了生态工程的整体性原理。
【点睛】把目的基因导入动物细胞常用：显微注射法；把目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；把目的基因导入微生物细胞常用钙离子处理法。
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