安徽省滁州市2026年高三压轴卷生物试卷含解析

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1．考生要认真填写考场号和座位序号。
2．试题所有答案必须填涂或书写在答题卡上，在试卷上作答无效。第一部分必须用2B 铅笔作答；第二部分必须用黑色字迹的签字笔作答。
3．考试结束后，考生须将试卷和答题卡放在桌面上，待监考员收回。
一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)
1．油菜素内酯（BR）可提高水稻对真菌（细胞壁成分为几丁质）的抗性。为研究其分子机制，科研工作者用BR对水稻进行了处理，并检测了实验组和对照组水稻叶片几丁质酶的活性，结果如图1所示；同时提取了实验组和对照组水稻细胞中总RNA进行反转录，并对其产物进行PCR后电泳处理，结果如图2所示（18S为参照）。据图分析，下列说法不正确的是
A．BR可以提高水稻体内几丁质酶的活性
B．BR可以提高水稻细胞中几丁质酶基因的转录水平
C．BR可以提高水稻对真菌细胞壁的水解作用
D．BR可增加水稻细胞中18S基因的表达量
2．下列关于细胞呼吸的叙述，正确的是（ ）
A．树根长期浸水进行无氧呼吸对植物生长不利
B．香蕉宜在无氧、干燥、低温的环境中贮藏
C．用透气的纱布包扎伤口可避免组织细胞缺氧死亡
D．在利用酵母菌酿酒过程中，为了增加产量要持续通氧
3．调查发现，某地红粒小麦的穗发芽率明显低于白粒小麦。为探究这两个品种小麦穗发芽率出现差异的原因，某同学进行了如表所示实验。下列有关该实验的叙述，错误的是（ ）
（注：用小麦种子加蒸馏水研磨、过滤后制成提取液，并去除提取液中的B物质；“+”数目越多表示蓝色越深）
A．C处加样应为0.5ml的蒸馏水，D应为相同且适宜的温度
B．去除提取液中B物质的目的是排除种子中原有的淀粉对结果造成干扰
C．制备提取液时，应选取穗发芽时间相同、质量相等的红粒或白粒小麦种子
D．该实验研究的是外界环境因素对两个小麦品种穗发芽率差异的影响
4．下列实验材料或方法可以达到相应实验目的的是（ ）
A．用鸡血液中的红细胞提取细胞膜B．用洋葱根尖分生区细胞观察染色体联会
C．用黑光灯诱捕法调查群落丰富度D．用标志重捕法调查水西沟镇的臭鼬数量
5．用纸片扩散法测定某病原菌对各种抗生素敏感性的实验，是在某病原菌均匀分布的平板上，铺设含有不同种抗生素的纸片后进行培养。图示为培养的结果，其中抑菌圈是在纸片周围出现的透明区域。下列分析正确的是
A．在图示固体培养基上可用平板划线法或涂布法接种病原菌
B．未出现抑菌圈可能是病原菌与抗生素接触后发生抗性变异
C．形成的抑菌圈较小的原因可能是微生物对药物较敏感
D．不同抗生素在平板上的扩散速度不同会对实验结果造成影响
6．大肠杆菌R1质粒上的hk基因和sk基因与细胞死亡相关，若毒蛋白得以表达，大肠杆菌将裂解死亡。下列相关叙述正确的是（ ）
A．过程①酶识别序列的基本单位是核糖核苷酸
B．过程②和③遵循的碱基互补配对方式不同
C．过程③能阻止核糖体与hkmRNA的结合
D．过程④酶降解的是DNA分子
7．运动是健康生活的重要组成部分。下列关于人体剧烈运动和有氧运动的说法错误的是（ ）
A．剧烈运动过程中主要通过分解乳酸提供能量
B．有氧运动中呼出的二氧化碳都来自于线粒体
C．运动过程中释放的能量大部分以热能形式散失
D．细胞质基质和线粒体都参与了有氧呼吸过程
8．（10分）下列关于糖的说法，不正确的是( )
A．存在于ATP中而不存在于DNA中的糖是核糖
B．存在于叶绿体中而不存在于线粒体中的糖是葡萄糖
C．存在于动物细胞中而不存在于植物细胞中的糖是糖原
D．在体内发生淀粉→麦芽糖→葡萄糖过程的生物一定是植物，而不是动物
二、非选择题
9．（10分）质粒A和质粒B各自有一个限制酶EcR I和限制酶BamH I的识别位点，两种酶切割DNA产生的黏性末端不同。限制酶EcR I剪切位置旁边的数字表示其与限制酶BamH I剪切部位之间的碱基对数(bp)。在含有质粒A和B的混合溶液中加入限制酶EcR I和BamH I，令其反应充分；然后，向剪切产物中加入DNA连接酶进行反应，再将其产物导入大肠杆菌中。（实验中不考虑：无ri的质粒；拥有两个或以上ri的质粒；两个或以上质粒同时进入大肠杆菌；三个或以上DNA片段发生连接）请回答下列问题：
（1）只拥有质粒A的大肠杆菌________（填“可以”或“不可以”）在含有氨苄青霉素及乳糖作为唯一碳元素来源的培养基中生存？说明理由____________。
（2）DNA连接酶进行反应后，存在________种大小不同的质粒，有________种质粒使大肠杆菌能够在含有氨苄青霉素及乳糖作为唯一碳源的培养基中生存。
（3）绿色荧光蛋白基因是标记基因一种，标记基因的功能是________。
（4）质粒导入大肠杆菌通常要用________处理，其作用是________。
10．（14分）回答下列与“生物技术”相关的问题：
（1）生物技术是应用自然科学及工程学的原理，以________________作为反应器，将物料进行加工，以提供产品为社会服务的技术。例如，以_____________为反应器制酒，以______________为反应器制醋，以转基因的大肠杆菌为反应器生产_________________，以植物_________________为反应器生产试管幼苗。
（2）生物工程主要包括___________、发酵工程、蛋白质工程、酶工程和基因工程5中。其中，实施基因工程需要具备4个条件：___________、基因的分离、基因载体、__________。
（3）发酵技术就目前而言都是一次性的，每次都需要经过“________________→接种→发酵→____________”这样一个周而复始的流程。任何一种发酵产品都要经过一系列酶促反应，都是生化反应的产物。例如，用糯米酿酒，就是使用微生物在一定条件下，经过一系列酶促反应获得产物的结果，是一个从淀粉→糖→酒→醋的变化过程。首先，糯米中的淀粉在有氧和温度较高的条件下水解成糖，这一过程是由酒曲中的黑根霉或黑曲霉中的_____________完成的。然后，在较低温度和无氧的条件下酵母开始生长，经过糖酵解和____________反应，产生了乙醇，使酒味越来越浓。如果存放时间过长，发酵物的酒味将变淡并有些变酸，这是因为醋杆菌将乙醇氧化成____________的结果。
（4）为什么就储存的时间愈长愈好？________________________________。
11．（14分）（生物——选修3：现代生物技术专题）苏云金芽孢杆菌产生的Bt毒蛋白在害虫的消化道内能被降解成有毒的多肽，最终造成害虫死亡，因此Bt基因广泛用于培育转基因抗虫植物。
(1)培育转基因抗虫棉所需的目的基因来自________的基因组，再通过PCR技术扩增。PCR反应中温度呈现周期性变化，其中加热到90～95℃的目的是______， 然后冷却到55—60℃使引物与互补DNA链结合，继续加热到70～75℃，目的是___________。
(2)限制酶主要是从_______中获得，其特点是能够识别DNA分子某种________，并在特定位点切割DNA。
(3)科研人员培育某品种转基因抗虫棉的过程中，发现植株并未表现抗虫性状。可能的原因是________。（至少答两点）
(4)在基因表达载体中，目的基因的首端和尾端必须含有_______这样目的基因才能准确表达。
12．下图是基因工程中获取目的基因和构建重组质粒的过程，请回答下列有关问题：

（1）①分析上图可知，构建重组DNA分子最好选用_____限制酶，理由是____。
②科学家已经测出某种酶的氨基酸序列，因此可以通过 _____方法来获取目的基因，获得目的基因后，常利用____在体外将其大量扩增；
（2）将目的基因导入感受态细胞的处理方法是 ___。真核细胞作为受体细胞的优势是 ____。
（3）若将某种酶的氨基酸顺序进行重新排列，其催化能力能有效提高，生产上述高效酶的现代生物工程技术是____。
（4）胚胎工程只是指对动物的____所进行的多种显微操作和处理技术。虽然转基因技术和细胞工程在动植物都有广泛应用。
（5）生态工程是实现循环经济最重要的手段之一，请写出它遵循的基本原理______（至少答二项）。
参考答案
一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)
1、D
【解析】
根据题意可知，该实验目的为研究油菜素内酯（BR）提高水稻对真菌（细胞壁成分为几丁质）的抗性的机制。实验因变量检测几丁质酶的活性，图1可知，实验组的酶活性比对照组的高出很多；图2可知，实验组中CHA1基因的表达比对照组高，而两组的18S基因表达量相差不大。
【详解】
A. 图1可知，BR可以提高水稻体内几丁质酶的活性，A正确；
B. 图2可知， BR可以提高水稻细胞中几丁质酶基因（CHA1基因）的转录水平，B正确；
C. BR可以提高水稻体内几丁质酶的活性，进而提高水稻对真菌细胞壁（主要成分为几丁质）的水解作用，C正确；
D. 图2可知，实验组中CHA1基因的表达比对照组高，而两组的18S基因表达量相差不大，D错误。
2、A
【解析】
1.酶的活性受温度影响，低温能降低细胞中酶的活性，使细胞代谢活动降低，有机物的消耗减少。水果在充足的氧气条件下，能进行有氧呼吸，细胞代谢旺盛，有机物消耗多；而在低氧条件下，有氧呼吸较弱，又能抑制无氧呼吸，所以细胞代谢缓慢，有机物消耗少．适宜的湿度能保证水果水分的充分储存，从而保证水果肉质鲜美．因此在低温、低氧、适宜的湿度条件下，最有利于水果保鲜。
2.用透气的纱布包扎伤口可避免制造无氧环境，从而抑制破伤风杆菌的代谢。
3.如果稻田中的氧气不足，水稻根的细胞就会进行酒精发酵，时间长了，酒精就会对根细胞产生毒害作用，使根系变黑、腐烂，所以水稻要定期排水。
【详解】
A、树根长期浸水进行无氧呼吸产生的酒精对细胞造成毒害，对植物生长不利，A正确；
B、水果的保鲜应在低温、低氧、适宜的湿度下进行，B错误；
C、用透气的纱布包扎伤口是防止破伤风杆菌等厌氧菌的繁殖，C错误；
D、酵母菌属于兼性厌氧菌，在利用酵母菌酿酒过程中，为了增加产量可以前期适当进行通氧，增加酵母菌的数量，发酵后期必须无氧的条件下才能进行酒精发酵，D错误。
故选A。
3、D
【解析】
根据表格数据分析可知实验的单一变量是小麦籽粒，则“加样”属于无关变量，应该保持相同且适宜，所以步骤①中加入的C是0.5mL蒸馏水作为对照；加入缓冲液的目的是调节PH，实验的因变量是显色结果，颜色越深，说明淀粉被分解得越少，种子的发芽率越低。
【详解】
A、根据表格数据分析可知实验的单一变量是小麦籽粒，则“加样”和温度均属于无关变量，应该保持相同，所以步骤①中加入的C是0.5mL蒸馏水作为对照，D为相同且适宜的温度，A正确；
B、B物质为小麦种子中原有淀粉，去除B的目的是排除种子中原有的淀粉对结果造成干扰，保证实验的准确性，B正确；
C、穗发芽时间和质量均为无关变量，应保持相同，C正确；
D、该实验研究的是种子中淀粉的分解量对两个小麦品种穗发芽率差异的影响，D错误。
故选D。
本题主要考查了探究淀粉分解量与穗发芽率的关系等相关知识，考查对知识的理解和记忆能力，实验设计和分析能力。
4、D
【解析】
哺乳动物成熟的红细胞没有细胞器膜和核膜，常用来作为提取纯净细胞膜的实验材料。群落的丰富度是指群落中物种数目的多少。
【详解】
A、鸡的红细胞中含有细胞膜、细胞器膜和核膜，用鸡血液中的红细胞不能提取到纯净的细胞膜，可用哺乳动物的红细胞来提取细胞膜，A错误；
B、联会发生在减数第一次分裂前期，而洋葱根尖分生区细胞进行的是有丝分裂，染色体不会出现联会，B错误；
C、用黑光灯诱捕法只能调查某些有趋光性的昆虫的数量，不能调查没有趋光性的生物数量，故不能用其调查群落的丰富度，C错误；
D、标志重捕法可用于调查活动能力强、活动范围广的生物的种群密度，故可用标志重捕法调查水西沟镇的臭鼬数量，D正确。
故选D。
5、D
【解析】
纸片扩散法是药敏试验一种常用的方法，它将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片所含的药物吸取平板中的水分溶解后便不断向纸片周围区域扩散，形成递减的梯度浓度，在纸片周围抑菌浓度范围内的细菌生长被抑制，形成透明的抑菌圈，据此答题。
【详解】
A、在图示固体培养基上用稀释涂布平板法进行接种病原菌，A错误；
B、病原菌发生抗性变异在接触之前，B错误；
C、微生物对药物较敏感形成的抑菌圈应较大，C错误；
D、纸片所含的药物吸取平板中的水分溶解后便不断向纸片周围区域扩散，不同抗生素在平板上的扩散速度不同会对实验结果造成影响，D正确。
故选D。
6、C
【解析】
分析题图：hk基因和sk基因都位于大肠杆菌的Rl质粒上，其中hk基因能编码产生一种毒蛋白，会导致自身细胞裂解死亡，而sk基因转录产生的skmRNA能与hkmRNA结合，这两种mRNA结合形成的结构能被酶降解，从而阻止细胞死亡。
【详解】
A、过程①表示的是转录过程，需要的酶是RNA聚合酶，识别DNA上的启动子，其识别序列的基本单位是脱氧核糖核苷酸，A错误；
B、过程②和③遵循的碱基互补配对方式相同，都是RNA和RNA配对，B错误；
C、过程③能阻止核糖体与hkmRNA的结合，C正确；
D、过程④酶降解的是skmRNA与hkmRNA结合形成的双链RNA分子，D错误。
故选C。
此题主要考查的是细胞内遗传信息的传递有关的知识，根据图中的信息，分析出基因表达是如何在进行调控是解题的关键。
7、A
【解析】
细胞呼吸的方式包括有氧呼吸和无氧呼吸：
（1）在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量；
（2）在无氧条件下，反应式如下：C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量；C6H12O62C3H6O3+能量。
【详解】
A、人体在剧烈运动时所需的能量部分由有机物经无氧呼吸分解产生乳酸时提供，而不是分解乳酸提供，A错误；
B、有氧呼吸过程的第二阶段，在线粒体基质中丙酮酸与水反应生成二氧化碳和【H】，故有氧运动中呼出的二氧化碳都来自于线粒体，B正确；
C、运动过程中释放的能量大部分以热能形式散失，少部分储存在ATP中，C正确；
D、有氧呼吸第一阶段在细胞质基质中进行，第二、三阶段发生在线粒体中，细胞质基质和线粒体都参与了有氧呼吸过程，D正确。
故选A。
8、D
【解析】
蔗糖是植物细胞中特有的二糖，乳糖是动物细胞中特有的二糖；淀粉和糖原分别是植物细胞和动物细胞中的储能物质，纤维素是植物细胞壁的成分，纤维素一般不作为能源物质。葡萄糖是叶绿体光合作用的产物，而葡萄糖不能进入线粒体中，必须在细胞质基质中分解成丙酮酸才能进入线粒体中。五碳糖中的核糖是构成RNA的原料，另外ATP中也含有核糖，DNA中含有的五碳糖是脱氧核糖。
【详解】
ATP中的糖是核糖，DNA中的糖是脱氧核糖；叶绿体中可合成葡萄糖，葡萄糖在细胞质基质分解成丙酮酸才能进入线粒体，所以线粒体中不存在葡萄糖；糖原是动物细胞中特有的多糖，不存在于植物细胞中；淀粉可在动物体内分解成麦芽糖，然后进一步分解成葡萄糖被吸收，故ABC正确，D错误。
本题考查糖的分布，解决本题的关键是对糖进行分类，并且弄清楚糖具体在哪些生物体内存在，也就是将糖的分布具体化。
二、非选择题
9、可以 质粒A含有氨苄青霉素抗性基因，使大肠杆菌能够在含有氨苄青霉素的培养基中生存，还含有半乳糖苷酶基因，使大肠杆菌合成半乳糖苷酶，并水解乳糖获得能量和碳源 4 2 供重组DNA的选择和鉴定 Ca2+ 使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态
【解析】
由图可知，质粒A含有氨苄青霉素抗性基因和半乳糖苷酶基因，用EcR I和BamH I酶切后，形成2000bp（含amp）和1000bp(含lac)两段；质粒B含氨苄青霉素抗性基因、四环素抗性基因和绿色荧光蛋白基因，用EcR I和BamH I酶切后，形成3000bp（含amp、gfp）和2500bp(含tet)两段。由题干“两种酶切割DNA产生的黏性末端不同”可知，酶切后质粒自身两端不能连接。
【详解】
（1）由质粒A图可知，只拥有质粒A的大肠杆菌可以在含有氨苄青霉素及乳糖作为唯一碳元素来源的培养基中生存，因为质粒A含有氨苄青霉素抗性基因，使大肠杆菌能够在含有氨苄青霉素的培养基中生存，还含有半乳糖苷酶基因，使大肠杆菌能合成半乳糖苷酶，并水解乳糖获得能量和碳源。
（2）DNA连接酶进行反应后，由于实验中不考虑：无ri的质粒；拥有两个或以上ri的质粒；两个或以上质粒同时进入大肠杆菌；三个或以上DNA片段发生连接，因此可存在4种大小不同的质粒，即质粒A两个片段连接3000bp（2000bp+1000bp）、质粒A含ri的片段和质粒B不含ri的片段连接4500bp(2000bp+2500bp)、质粒A不含ri的片段和质粒B含ri的片段连接4000bp(1000bp+3000bp)、质粒B两个片段连接5500bp(3000bp+2500bp)，有2种质粒使大肠杆菌能够在含有氨苄青霉素及乳糖作为唯一碳源的培养基中生存，即质粒A两个片段连接3000bp和质粒A不含ri的片段和质粒B含ri的片段连接4000bp的质粒。
（3）标记基因的功能是供重组DNA的选择和鉴定。
（4）质粒导入微生物细胞用感受态细胞法，用Ca2+处理大肠杆菌，增加细胞壁的通透性，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。
答题关键在于掌握DNA重组技术的基本工具和基因工程的操作顺序，将所学知识与题干信息结合综合运用。
10、微生物、动物、植物 酵母 醋化醋杆菌 干扰素 愈伤组织 细胞工程 工具酶 受体 培养基灭菌 提取 淀粉酶 乙醇发酵 乙酸 长时间储存，醇氧化成酸，醇和酸又生成酯，不同的酯有不同的香味。发酵时间越长，产生的各种酯类物质越多，使得酒味醇厚，芳香扑鼻
【解析】
1.生物技术是指人们以现代生命科学为基础，结合其他基础科学的科学原理，采用先进的科学技术手段，按照预先的设计改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需产品或达到某种目的。生物技术是人们利用微生物、动植物体对物质原料进行加工，以提供产品来为社会服务的技术。它主要包括发酵技术和现代生物技术。因此，生物技术是一门新兴的，综合性的学科。
2.所谓生物工程，一般认为是以生物学(特别是其中的微生物学、遗传学、生物化学和细胞学)的理论和技术为基础，结合化工、机械、电子计算机等现代工程技术，充分运用分子生物学的最新成就，自觉地操纵遗传物质，定向地改造生物或其功能，短期内创造出具有超远缘性状的新物种，再通过合适的生物反应器对这类"工程菌"或"工程细胞株"进行大规模的培养，以生产大量有用代谢产物或发挥它们独特生理功能一门新兴技术。生物工程包括基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程、生物电子工程、生物反应器、灭菌技术以及新兴的蛋白质工程等，其中，基因工程是现代生物工程的核心。基因工程（或称遗传工程、基因重组技术）就是将不同生物的基因在体外剪切组合，并和载体（质粒、噬菌体、病毒）的DNA连接，然后转入微生物或细胞内，进行克隆，并使转入的基因在细胞或微生物内表达，产生所需要的蛋白质。
3.发酵技术是指人们利用微生物的发酵作用，运用一些技术手段控制发酵过程，大规模生产发酵产品的技术，称为发酵技术。
【详解】
（1）根据以上分析可知，生物技术是应用自然科学及工程学的原理，以微生物、动植物体作为反应器，将物料进行加工，以提供产品为社会服务的技术。例如以酵母菌为反应器的制酒，利用醋酸杆菌发酵进行制醋，以转基因的大肠杆菌为反应器生产某些药物，如干扰素和胰岛素等，利用植物组织培养技术形成愈伤组织经过再分化形成试管苗。
（2）生物工程包括基因工程、蛋白质工程、细胞工程、酶工程和发酵工程等，其中，实施基因工程需要具备4个条件：需要工具酶如限制酶和DNA连接酶、需要分离目的基因、构建基因表达载体和将目的基因导入受体细胞。
（3）发酵技术是指人们利用微生物的发酵作用，运用一些技术手段控制发酵过程，微生物发酵的关键是做到无菌，因此发酵的流程：培养基灭菌→接种→发酵→提取产物。根据题意淀粉水解为糖需要酶的催化作用，因此糯米中的淀粉在有氧和温度较高的条件下水解成糖，这一过程是由酒曲中的黑根霉或黑曲霉中的淀粉酶催化完成的，然后酵母菌利用糖为底物经过糖酵解和乙醇发酵反应，产生乙醇，使酒味越来越浓。如果存放时间过长，在有氧条件下乙醇会被醋酸杆菌氧化成乙酸，因此发酵物的酒味将变淡并有些变酸。
（4）根据第（3）问分析可知乙醇存放时间过长会引起醋酸杆菌的发酵生产乙酸，醇和酸又生成酯，不同的酯有不同的香味。发酵时间越长，产生的各种酯类物质越多，使得酒味醇厚，芳香扑鼻。
本题考查现代生物技术的知识点，要求学生掌握生物技术、生物工程的内容和操作，把握基因工程的操作步骤和操作工具，掌握微生物发酵的过程及其产物，特别是掌握果酒和果醋的发酵过程及其二者之间的关系，能够利用所学的知识点理解酒存放时间越长越香醇的原因，识记常见的微生物的发酵产物及生物工程的产物，这是该题考查的重点。
11、苏云金芽孢杆菌DNA解链（变性、解旋、受热变性后解链为单链） 在DNA聚合酶作用下进行延伸（Taq酶从引物起始进行互补链的合成） 原核生物（或微生物） 特定的核苷酸序列 所转的基因未成功导入 导入的基因未能准确表达 启动子和终止子
【解析】
(1)培育转基因抗虫棉所需的目的基因来自苏云金芽孢杆菌的基因组。PCR反应中加热到90～95℃的目的是使DNA解链（变性、解旋、受热变性后解链为单链）。冷却后继续加热到70～75℃，目的是在DNA聚合酶作用下从引物开始延伸子链（Taq酶从引物起始进行互补链的合成）。
(2)限制酶主要是从原核生物（或微生物）中获得，其特点是能够识别DNA分子某种特定的核苷酸序列，并在特定位点切割DNA。
(3)科研人员培育某品种转基因抗虫棉的过程中，发现植株并未表现抗虫性状。可能是所转的基因未成功导入，也可能是导入的基因未能准确表达。
(4)在基因表达载体中，目的基因的首端和尾端必须含有启动子和终止子，这样目的基因才能准确表达。
12、BamHI和PstI 提高重组DNA分子的比例（防止自身的黏性末端连接和防止目的基因与载体反向连接） 化学合成 PCR技术 Ca2+处理细胞，使之转化为感受态细胞 含有的内质网和高尔基体可对蛋白质进行加工和修饰 蛋白质工程（或在基因工程基础上，延伸出来的第二代基因工程） 配子或早期胚胎 系统学和工程学原理、物种多样性原理
【解析】
基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因—DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA—分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质—抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】
（1）①由图示可知，质粒和外源DNA中共同含有且不会破坏目的基因的限制酶是BamHI和PstI，因此构建重组DNA分子最好选用BamHI和PstI限制酶，这样可以防止自身的黏性末端连接，防止目的基因与载体反向连接。
②由于已经测出该酶的氨基酸序列，故可推测出相应的RNA和DNA的序列，因此可以通过化学合成方法来获取目的基因。获得目的基因后，常利用 PCR技术在体外将其大量扩增。
（2）受体细胞是微生物，将目的基因导入受体细胞，常用Ca2+处理细胞，使之转化为感受态细胞，真核细胞作为受体细胞的优势是细胞中含有内质网和高尔基体，可对蛋白进行加工和修饰。
（3）若将某种酶的氨基酸顺序进行重新排列，实质是对其基因进行改造，使其催化能力能有效提高，该技术属于蛋白质工程。
（4）胚胎工程只是指对动物的配子或早期胚胎所进行的多种显微操作和处理技术。
（5）生态工程遵循的基本原理有：物质循环再生原理、系统学和工程学原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理。
本题考查基因工程、胚胎工程和生态工程原理的相关知识，要求考生识记基因工程的操作工具及具体的操作步骤，掌握各步骤中的相关细节，能结合题干信息准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查。
步骤 分组
红粒管
白粒管
对照管
①
加样
0.5mL提取液
0.5mL提取液
C
②
加缓冲液（mL）
1
1
1
③
加淀粉溶液（mL）
1
1
1
④
温度为D下保温相同适宜时间，终止酶促反应，冷却至常温，加适量碘液显色
显色结果
+++
+
++++