第十单元　第52课时　动物细胞工程-2027年高考生物一轮复习课件（含讲义及答案）

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1.阐明动物细胞培养的条件和过程。2.阐明动物细胞核移植的原理和过程。3.阐明动物细胞融合的概念。4.概述细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术。5.简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值。
考点二　动物细胞融合技术与单克隆抗体
考点三　动物体细胞核移植技术和克隆动物
1.动物细胞培养的概念从动物体中取出相关的组织，将它分散成 ，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞 的技术。
2.动物细胞培养的条件
比较动物细胞培养和植物组织培养(1)动物细胞培养一般用液体培养基，植物组织培养一般用固体培养基。(2)动物细胞培养的原理是细胞增殖，植物组织培养的原理是植物细胞的全能性。(3)动物细胞培养的目的是使细胞数量增多并不是培养至完整个体，而植物组织培养的目的是获取完整植株个体。
3.动物细胞培养的过程(1)细胞贴壁：体外培养的大多数动物细胞往往 在培养瓶的瓶壁上。(2)接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面____ 时，细胞通常会停止 。(3)原代培养： 之前的细胞培养，即动物组织经处理后的 。(4)传代培养： 后的细胞培养。
①分散成单细胞的原因：解除细胞生长和增殖的限制，保证细胞所需要的营养供应，保证细胞内有害代谢产物及时排出。②分瓶培养前，悬浮培养的细胞直接离心收集，贴壁细胞需要用胰蛋白酶等处理后离心收集。
4.干细胞培养及其应用
源于选择性必修3 P46“相关信息”：科学家已尝试采用多种方法来制备iPS细胞，包括借助载体将 导入细胞中，直接将特定蛋白导入细胞中或者用 等来诱导形成iPS细胞。iPS细胞最初是由成纤维细胞转化而来的，后来发现已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导为iPS细胞。
(1)当病毒达到一定数量时会影响细胞的增殖(2023·辽宁，7)(2)进行动物细胞培养时，血清应经过高温处理后加入培养基(2022·湖北，6)
提示　血清经过高温处理后，其中的活性成分变性，失去原有功能。
(3)培养心肌细胞的时候既需要氧气也需要二氧化碳(2022·江苏，14)
考向一　动物细胞培养1.(2025·广东，5)将人眼睑成纤维细胞传代培养后，再培养形成支架，在该支架上接种人口腔黏膜上皮细胞，培养一段时间后分离获得上皮细胞片层，可用于人工角膜的研究。上述过程不涉及A.制备细胞悬液B.置于5%CO2等适宜条件下培养C.离心收集细胞D.用胰蛋白酶消化支架后分离片层
2.(2024·黑吉辽，14)从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间点检测细胞数目，结果如图。下列叙述正确的是A.传代培养时，培养皿需密封防止污染B.选取①的细胞进行传代培养比②更合理C.直接用离心法收集细胞进行传代培养D.细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大有关
动物细胞融合技术与单克隆抗体
PEG融合法、电融合法和灭活病
源于选择性必修3 P48“相关信息”：灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构。灭活病毒诱导细胞融合的原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。
2.单克隆抗体的制备(1)传统抗体的获得①方法
②缺点：产量低、 低、 差。
(2)单克隆抗体的制备及优点①制备过程
第一次筛选出多种杂交瘤细胞；第二次筛选出既能分泌所需特异性抗体，又能迅速大量增殖的杂交瘤细胞。
②单克隆抗体的优点a.能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生 结合(特异性强、灵敏度高)。b.可以 制备。(3)单克隆抗体的应用①被广泛用作 试剂，在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要的作用。②运载 ，形成抗体—药物偶联物，实现对肿瘤细胞的 杀伤。③用于 。
(1)有的病毒经灭活处理后，可用于细胞工程中介导动物细胞的融合(2020·浙江6月选考，15)(2)将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞(2021·江苏，11)
提示　若仅考虑细胞两两融合的情况，将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导融合后的细胞不都是杂交瘤细胞，还有融合的具有同种核的细胞。
(3)甲状旁腺激素(PTH)水平是人类多种疾病的重要诊断指标。研究者制备单克隆抗体用于快速检测PTH，判断有关制备过程的叙述是否正确：①利用抗原－抗体结合的原理筛选杂交瘤细胞(2023·北京，12)②筛选能分泌多种抗体的单个杂交瘤细胞(2023·北京，12)
提示　由于一个B淋巴细胞经分化后只能分泌一种抗体，故筛选出的单个杂交瘤细胞也只能产生一种抗体。
(4)我国科研团队研制出全球首个以尿液中的抗原为靶标的戊肝诊断试剂盒，该试剂盒还可用于其他类型病毒性肝炎的检测
提示　抗体具有特异性，所以戊肝诊断试剂盒只能用于戊肝的检测，不能用于其他类型病毒性肝炎的检测。
理解单克隆抗体的制备过程及应用长春新碱(VCR)能够干扰肿瘤细胞的有丝分裂，也会影响正常细胞的增殖和分裂，导致药物副作用的发生。H18杂交瘤细胞产生的抗人肝癌单克隆抗体HAb18对于人体肝癌的诊断和靶向治疗具有重要的意义。回答下列问题：(1)抗人肝癌单克隆抗体HAb18的制备过程中，需要向小鼠体内注射肝癌细胞悬液，其目的是_____________________________________________ 。
刺激机体发生免疫应答，从而得到能产生特定抗体
(2)资料：①细胞合成DNA包括D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。②免疫的B淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但它不能分裂增殖，其本身也不能在体外长期存活。③鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，但它能不断分裂增殖。如果它的D途径被阻断的话，它会因不能合成DNA而死亡。根据上述资料，利用特定的选择培养基筛选杂交瘤细胞的具体方法是在培养基中加入 进行培养，一段时间后收集存活细胞。原理是_____ 可以阻断DNA的D合成途径，所以未融合的骨髓瘤细胞及骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞融合形成的细胞不能在该培养基生长，而未融合的B淋巴细胞及B淋巴细胞和B淋巴细胞融合形成的细胞不能长期存活，只有_____ 的细胞才可以在培养基中长期存活与繁殖。
巴细胞和骨髓瘤细胞融合
(3)将VCR与抗人肝癌单克隆抗体HAb18通过接头连接形成抗体—药物偶联物(ADC)，可实现对肝癌细胞的特异性杀伤，ADC的作用机制如图。据图分析，ADC的抗体可以______________________________________ ；药物VCR通过 从而 ，阻断肝癌细胞分裂，诱导肝癌细胞凋亡。
发挥靶向运输作用，携带VCR与肝癌细胞特
考向二　动物细胞融合技术与单克隆抗体3.(2025·甘肃，16)肿瘤坏死因子α(TNF－α)是一种细胞因子，高浓度时可以引发疾病。研究者利用细胞工程技术制备了TNF－α的单克隆抗体，用于治疗由TNF－α引发的疾病，制备流程如图。下列叙述正确的是
A.①是从小鼠的血液中获得的骨髓瘤细胞B.②含未融合细胞、同种核及异种核融合细胞C.③需用特定培养基筛选得到大量的杂交瘤细胞D.④需在体外或小鼠腹腔进行克隆化培养和抗体检测
4.(2021·山东，15)一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗p72的单抗，也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是A.注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响大B.单抗制备过程中通常将分离出的浆细胞与骨髓瘤细胞融合C.利用该小鼠只能制备出一种抗p72的单抗D.p72部分结构改变后会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况
酶联免疫吸附试剂盒检测原理未标记的单抗先结合固相抗原(包被在板子上或存在于样本中)，再加入标记有酶的二抗(抗抗体，如抗鼠IgG)，二抗结合一抗上的恒定区，洗去未结合物后加底物显色，原理如图所示。该方法常用于检测抗体(如自身抗体、病原体抗体)。而双抗体夹心法常用于检测大分子抗原，其原理与以上不同之处是：将一种单抗固定在固相载体上作为“捕获抗体”。
动物体细胞核移植技术和克隆动物
1.动物细胞核移植技术的概念和类型(1)概念将动物一个细胞的 移入去核的 中，使这个重新组合的细胞发育成 ，继而发育为 的技术。(2)原理： 。(3)类型：哺乳动物核移植可分为 核移植和 核移植，其中 核移植较易成功。
动物体细胞核具有全能性
源于选择性必修3 P52“相关信息”：减数分裂Ⅱ中期(MⅡ期)卵母细胞中的“核”其实是纺锤体—染色体复合物。文中所说的“去核”是去除该复合物。
2.体细胞核移植的过程
源于选择性必修3 P54“相关信息”：目前动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作法。也有人采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法。这些方法是在没有穿透卵母细胞透明带的情况下去核或使其中的DNA变性。
3.体细胞核移植技术的应用前景和存在的问题
理解动物体细胞核移植的过程及应用培育克隆猴的流程如图所示。请结合示意图回答问题：(1)在将体细胞的核移植到卵母细胞之前，必须先对卵母细胞进行去核操作的原因是什么？
提示　为了使核移植的胚胎或动物的核遗传物质全部来自体细胞供体动物。
(2)右述体细胞核移植技术培育的克隆猴没有实现对体细胞供体动物进行100%的复制，其原因是克隆动物绝大部分DNA来自体细胞供体(核供体)动物的细胞核，但其线粒体中的DNA同时来自核供体细胞和 。所以，克隆猴不是对核供体动物进行完全相同的复制。此外，即便动物的遗传基础完全相同，但动物的发育及一些行为、习性的形成与 也有很大关系。
(3)在此过程中，灭活的仙台病毒所起的作用是 。(4)为了调节相关基因的表达，提高胚胎的发育率和妊娠率，研究人员将组蛋白去甲基化酶 KDM4D的mRNA注入了重构胚，KDM4D的mRNA翻译的组蛋白去甲基化酶能 ；同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA处理该重构胚，TSA可以抑制组蛋白脱乙酰酶的作用，从而____________________ 。
降低组蛋白的甲基化水平
考向三　动物体细胞核移植技术和克隆动物5.(2021·辽宁，13)如图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，下列叙述正确的是A.后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定B.过程①需要提供95%空气和5%CO2的混合气体C.过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理D.过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植
6.(2025·四川部分学校一模)我国研究人员率先利用某组蛋白去甲基化酶(KDM4D)的mRNA，通过调控重构胚相关基因表达，解决了体细胞克隆猴胚胎发育率低这一技术难点，培育出了第一批灵长类动物——食蟹猴，流程如图所示。下列叙述正确的是
A.动物胚胎细胞核移植的难度明显高于体细胞核移植B.②过程目的是确保克隆动物的遗传物质全部来自供体细胞C.⑤过程需用物理或化学方法激活才能完成细胞分裂和发育进程D.KDM4D的mRNA能降低组蛋白甲基化水平，提高克隆猴胚胎发育率
一、基础排查1.实验小鼠皮肤成纤维细胞培养的基本过程如图所示。科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞获得一种类似胚胎干细胞的细胞，称为诱导多能干细胞(简称iPS 细胞)。判断下列叙述是否正确。
(1)应使用加入血清等一些天然成分的液体培养基来培养皮肤细胞(　　)(2)培养液需要定期更换，以便提供营养和清除代谢废物(　　)
(3)应在含有95%的O2和5%的CO2培养箱中培养，CO2用于维持培养液的pH(　　)
提示　应在含有95%空气和5% CO2的混合气体的CO2培养箱中培养，CO2的主要作用是维持培养液的pH。
(4)图中丙和丁分别表示的是原代培养和传代培养，其培养原理不同(　　)
提示　丙培养细胞1是原代培养，丁培养细胞2是传代培养，二者培养原理相同，都为细胞的增殖。
(5)体外培养的细胞既能贴壁生长又能悬浮生长，都会发生接触抑制现象(　　)
提示　体外培养的动物细胞可以分为两大类：一类能贴壁生长，一类能悬浮生长。贴壁生长的细胞会发生接触抑制现象，悬浮生长的细胞不会。
(6)传代培养时，悬浮培养的细胞直接用离心法收集，不需要再用酶处理(　　)
(7)iPS细胞是只能由成纤维细胞诱导形成的类似胚胎干细胞的一种细胞(　　)
提示　iPS细胞可由成纤维细胞诱导形成，也可由其他的细胞诱导形成，如已分化的T细胞、B细胞。
(8)利用iPS 细胞分化形成的器官进行自体移植后将引发机体产生细胞免疫(　　)
提示　利用iPS细胞分化形成的器官进行自体移植，可避免机体产生细胞免疫。
(9)iPS 细胞较传统胚胎干细胞，具有细胞来源广泛、较少涉及伦理道德问题等优点(　　)
2.判断下列关于动物细胞融合、单克隆抗体的制备及应用的叙述(1)动物细胞融合过程中既有细胞膜的融合也有核膜的融合(　　)(2)用灭活的病毒诱导融合利用了细胞膜的流动性(　　)(3)单克隆抗体可对目的基因是否成功表达进行检测与鉴定(　　)(4)单抗制备时至少需要2次筛选，第2次筛选常用选择培养基进行(　　)
提示　单克隆抗体制备过程中至少需要2次筛选，第1次筛选通常用特定的选择培养基筛选，第2次筛选利用96孔板培养，在每个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测，经多次筛选得到足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。
(5)杂交瘤细胞在培养过程中有接触抑制现象，需要用胰蛋白酶处理(　　)
提示　杂交瘤细胞具有骨髓瘤细胞无限增殖的特征，培养过程中一般无接触抑制现象，不需要用胰蛋白酶处理。
(6)将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖，可以从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体(　　)(7)单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，产量高(　　)(8)抗体—药物偶联物可定向清除肿瘤细胞，发挥杀伤作用的主要是单克隆抗体(　　)
提示　抗体—药物偶联物作用机制是利用单克隆抗体特异性识别肿瘤细胞后，药物作用于肿瘤细胞，使肿瘤细胞被清除。
3.判断下列关于动物细胞核移植技术的叙述(1)哺乳动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植(　　)(2)卵母细胞需要培养至M Ⅱ期再去核(　　)(3)卵母细胞去核的实质是去除细胞中的纺锤体—染色体复合物(　　)(4)梯度离心是在没有穿透卵母细胞透明带的情况下去核的(　　)(5)用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程(　　)(6)克隆动物的遗传物质全部来自供体的体细胞核(　　)
提示　克隆动物的遗传物质大部分来自供体的体细胞核，其细胞质中的遗传物质有一部分来自去核的卵母细胞。
(7)用体细胞核移植技术克隆出大熊猫，体现了动物细胞核具有全能性(　　)(8)体细胞核移植技术培育动物可在保持优良性状的同时提高遗传的多样性(　　)
提示　体细胞核移植技术培育动物可保持优良性状，但不能提高遗传的多样性。
二、要语必背1.(选择性必修3 P44)细胞贴壁：细胞贴附在培养瓶的瓶壁上的现象。2.(选择性必修3 P44)接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖的现象。3.(选择性必修3 P44)细胞在培养过程中分裂受阻的原因：悬浮培养的细胞会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻；对于贴壁细胞来说，除上述因素外，还会因为接触抑制而停止分裂增殖。4.(选择性必修3 P49)杂交瘤细胞的特点是既能大量增殖，又能产生足够数量的特定抗体。
5.(选择性必修3 P50)单克隆抗体的优点是能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备。6.(选择性必修3 P54)体细胞核移植技术中必须先去掉受体卵母细胞的细胞核的原因是保证体细胞核移植动物的核遗传物质全部来自供体细胞。7.(选择性必修3 P54)通过体细胞核移植技术培育的克隆动物，不是对体细胞供体动物进行了100%的复制，原因是克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核，其核外还有少量的DNA，即线粒体中的DNA一部分来自受体卵母细胞。此外，动物的一些行为、习性的形成与所处环境有很大关系。
精练高频考点提升关键能力
(1)不需要　使细胞接触处的磷脂分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合　(2)未融合的亲本细胞　融合的具有同种核的细胞　(3)通过抗体检测呈阳性来获得分泌所需抗体的杂交瘤细胞
(1)动物细胞培养、动物细胞核移植技术　(2)显微操作法　(M Ⅱ期卵母细胞中的)纺锤体—染色体复合物　胰蛋白酶或胶原蛋白酶　(3)CD　(4)iPS细胞具有与胚胎干细胞类似的分裂和分化能力，在特定条件诱导下能定向分化为特定的组织器官　桑葚胚　C
一、选择题1.(2025·成都二模)悬浮细胞分离培养法可用于分离流感病毒。下列叙述错误的是A.原代培养时，悬浮细胞培养的气体环境为95%的空气和5%的CO2B.传代培养时，悬浮培养的细胞需要先用胰蛋白酶处理再离心收集C.悬浮培养的细胞会因密度过大、代谢物积累等因素而分裂受阻D.培养过程中分裂期的细胞染色体平均分配，没有同源染色体联会
2.(2025·蚌埠二模)如图为动物细胞培养流程，下列叙述正确的是A.动物细胞培养和植物组织培养的理论 基础都是细胞的全能性，都需要无菌、 离体培养
B.用胰蛋白酶对剪碎的动物组织进行处理，使其分散成单个细胞后进行培养为 传代培养C.原代培养过程中，贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶处理，然后进行分瓶 培养D.传代培养需要适宜的温度和pH等，传代培养的细胞最接近体内细胞的生长 特性
3.(2025·湖北，6)利用犬肾细胞MDCK扩增流感病毒，生产流感疫苗，具有标准化、产量高等优点。但MDCK细胞贴壁生长的特性不利于生产规模的扩大，严重制约疫苗的生产效率。研究人员通过筛选，成功获得一种无成瘤性的(多代培养不会癌变)、可悬浮培养的MDCK细胞——XF06。下列叙述错误的是A.XF06悬浮培养可提高细胞密度，进而提升生产效率B.细胞贴壁生长特性的改变是流感病毒感染所导致C.可采用离心技术从感染病毒的细胞裂解液中分离出流感病毒D.采用无成瘤性细胞生产疫苗，是为了避免疫苗中有致瘤DNA的污染
4.(2025·安徽，14)细胞工程技术已在生物制药和物种繁育等领域得到了广泛应用。下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是A.从动物体内取出组织，用胰蛋白酶处理后直接培养的细胞称为传代细胞B.将特定基因或特定蛋白导入已分化的T细胞，可将其诱导形成iPS细胞C.将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合，经诱导融合的细胞即为能分泌所需 抗体的细胞D.采用胚胎分割技术克隆动物常选用桑葚胚或囊胚，因这两个时期的细 胞未发生分化
5.(2023·海南，7)某团队通过多代细胞培养，将小鼠胚胎干细胞的Y染色体去除，获得XO胚胎干细胞，再经过一系列处理，使之转变为有功能的卵母细胞。下列叙述错误的是A.营养供应充足时，传代培养的胚胎干细胞不会发生接触抑制B.获得XO胚胎干细胞的过程发生了染色体数目变异C.XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化D.若某濒危哺乳动物仅存在雄性个体，可用该法获得有功能的卵母细胞 用于繁育
6.(2025·芜湖模拟)我国科学家团队利用化学重编程技术在体外将患者体细胞诱导成iPS(诱导多能干细胞)细胞，并将iPS细胞诱导分化成衍生胰岛B细胞，将衍生胰岛B细胞移植到1型糖尿病患者体内，使患者摆脱了对外源胰岛素的依赖，下列叙述正确的是A.已经分化的T细胞和B细胞也可能被诱导为iPS细胞B.诱导衍生胰岛B细胞的过程中没有基因的选择性表达C.诱导后的衍生胰岛B细胞可以再分化成其他细胞D.iPS细胞类似于成体干细胞，具有组织特异性
7.(2024·海南，7)海南龙血树具有药用和观赏价值，可利用植物组织培养技术产生愈伤组织，进而获得该种植株。动物细胞融合技术可将骨髓瘤细胞和产生特定抗体的B淋巴细胞融合形成杂交瘤细胞，进而制备单克隆抗体。下列有关这两种技术的叙述，正确的是A.利用的原理均是细胞的全能性B.使用的培养基均需添加葡萄糖和血清C.培养时的温度和pH均相同D.产生的愈伤组织细胞或杂交瘤细胞均具有增殖能力
8.(2025·宜昌模拟)为降低乳腺癌化疗副作用，科研人员在单克隆抗体技术基础上构建抗体－药物偶联物(ADC)，ADC通常由单克隆抗体、接头和药物组成，制备和治疗过程如图1和图2。已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。小鼠淋巴细胞中有这两种途径，但一般不分裂，而骨髓瘤细胞中没有S途径，却能分裂。
下列叙述错误的是A.图1过程对小鼠进行免疫处理后，应该从该小鼠的脾脏中获取B淋巴细胞B.若①是在含氨基蝶呤试管中促融，只考虑两两融合，则试管中能增殖的细胞只有2种C.图1中a和b分别是单克隆抗体和药物，两部分通过接头结合在一起，从而获得ADCD.图2中ADC进入癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出药物最终作用于细 胞核
9.(2022·山东，15)如图所示，将由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列叙述错误的是A.双抗可同时与2种抗原结合B.利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞C.筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原D.同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞
10.(2025·武汉二模)抗体药物偶联物(ADC)是一种由单克隆抗体、细胞毒性药物和接头偶联而成的靶向抗癌药物。ADC进入体内后，与肿瘤抗原形成ADC—抗原复合物，进入肿瘤细胞，释放药物发挥作用导致肿瘤细胞死亡。下列叙述错误的是A.ADC识别抗原后，ADC—抗原复合物通过胞吞进入靶细胞内部B.DNA抑制剂类靶向抗癌药物导致肿瘤细胞死亡属于细胞坏死C.来自溶酶体的酶特异性地水解接头从而释放出细胞毒性药物D.靶向同一抗原上不同位点的双特异性ADC可以提高治疗效果
A.对牛乙注射促性腺激素是为了收集更多的卵母细胞B.卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅰ中期进行C.培养牛甲的体细胞时应定期更换培养液D.可用PCR技术鉴定犊牛丁是否为转基因牛
11.(2025·山东，14)利用动物体细胞核移植技术培育转基因牛的过程如图所示，下列叙述错误的是
12.(2025·马鞍山一模)抗人绒毛膜促性腺激素(HCG)单克隆抗体的研制对于早孕检测和某些肿瘤的检测等具有广阔的应用前景，如图为其生产大致流程。在不同的条件下，该单克隆抗体与HCG结合能力有差异。下列叙述错误的是
A.注射HCG的目的是获得能产生特定抗体的B淋巴细胞B.制备细胞悬液时应取小鼠脾脏剪碎并用胰蛋白酶处理C.筛选1的目的是筛选出抗HCG抗体呈阳性的杂交瘤细胞D.抗HCG抗体可以筛选混合物中的HCG并使之纯化
13.(2025·合肥二模)科研人员将奶山羊的离体组织剪成1 mm3组织块，均分为a、b、c三组，分别用表中的三种方法消化后，分离出细胞并测定其细胞密度和细胞活率(具有生理活性的细胞所占的比例)；将细胞悬液调至相同密度后，在适宜条件下培养并检测细胞增殖能力。
相关检测结果如图所示，
下列分析正确的是A.消化之后的操作是离心后弃上清液→加入培养基→滤除组织残留→加入培养基B.向培养基中添加的动物血清和抗生素等物质，能为细胞的生长提供必需的营养C.a组处理效果较差，原因可能是胰蛋白酶破坏了细胞膜蛋白，细胞的损伤较大D.两步酶消化法兼顾效果及操作简便性，所获细胞在传代培养中遗传稳定性最高
二、非选择题14.(2023·湖北，22节选)某病毒对动物养殖业危害十分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋白A为抗原来制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，其主要技术路线如图所示。
(1)与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的脾细胞(含浆细胞)________(填“需要”或“不需要”)通过原代培养扩大细胞数量；添加脂溶性物质PEG可促进细胞融合，该过程中PEG对细胞膜的作用是__________________________________________________________。
磷脂分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合
(2)在杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的选择培养基(如HAT培养基)，该培养基对__________________和_______________________生长具有抑制作用。
融合的具有同种核的细胞
(3)单克隆抗体筛选中，将抗体与该病毒外壳蛋白进行杂交，其目的是_________________________________________________。
通过抗体检测呈阳性来获得分泌所需抗体的杂交瘤细胞
15.(2025·豫西北教研联盟二模)我国科研人员利用多种现代生物技术，在猪的体内培育出了一个“人—猪嵌合中期肾”，且维持到胚胎第28天(实验过程如图1所示)，该研究实现了世界首例人源化肾脏异种再生的壮举。回答下列问题：
(1)据图1分析，在“人源化中肾”的培养过程中，运用了__________________________________等动物细胞工程的技术(答出2点即可)。
(2)过程②常用的去核方法为______________，所谓的“核”实际上是__________________________________________。过程③中，获得单细胞悬液时，猪胚胎剪碎后需用______________________处理。
期卵母细胞中的)纺锤体—染色体复合
(3)过程④运用基因编辑技术(见图2，Cas9蛋白在向导RNA引导下，切割目标DNA双链)敲除成纤维细胞中的猪肾发育的关键基因SIX1，可以为后续人iPS细胞的生长和分化提供更合适的生存环境。下列对该过程的分析，正确的有________。(多选)
A.Cas9蛋白由相关基因指导在核糖体上合成，向导RNA可在逆转录酶催化下 合成B.Cas9蛋白识别并切割SIX1基因特定位点的磷酸二酯键，其作用方式与限制酶 相同C.向导RNA的部分序列是根据SIX1基因设计的，其双链区遵循碱基互补配对原则D.敲除SIX1基因的猪胚胎可避免猪细胞与人iPS细胞竞争肾脏发育的环境
(4)过程⑧中，选用iPS细胞作为肾脏供体细胞的原因是________________________________________________________________________________________。在早期胚胎阶段，猪胚胎的细胞尚未完全分化成各种类型的细胞和组织，细胞之间的连接
类似的分裂和分化能力，在特定条件诱导下能定向分化为特定的组织器官
iPS细胞具有与胚胎干细胞
较松散，这使得导入的人iPS细胞较容易在猪胚胎中整合，胚胎的可塑性也较强，据此判断在构建嵌合胚胎过程中，可在猪胚胎发育至__________(填“桑葚胚”或“囊胚”)期注射人源供体细胞。
合适的培养基是提高iPS细胞嵌合能力的关键，下列叙述错误的是______。A.培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等营养 物质B.为保证体外培养细胞处于无菌、无毒的环境，除无菌操作外，培养液 还需定期更换C.动物细胞应放入含5%CO2培养箱中培养，CO2的主要作用是刺激细胞 呼吸D.维持动物细胞体外生存必须有适宜的温度、pH和渗透压等环境条件