【备考2026】高考生物一轮复习资源：第10单元 第52课时 动物细胞工程（课件）

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1.阐明动物细胞培养的条件和过程。2.阐明动物细胞核移植的原理和过程。3.阐明动物细胞融合的概念。4.概述细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术。5.简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值。
考点三　动物体细胞核移植技术和克隆动物
考点二　动物细胞融合技术与单克隆抗体
1.动物细胞培养的概念从动物体中取出相关的组织，将它分散成 ，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞 的技术。
2.动物细胞培养的条件
动物细胞培养一般用液体培养基，植物组织培养一般用固体培养基。
3.动物细胞培养的过程
(1)细胞贴壁：体外培养的大多数动物细胞往往 在培养瓶的瓶壁上。(2)接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面 时，细胞通常会停止 。(3)原代培养： 之前的细胞培养，即动物组织经处理后的 。(4)传代培养： 后的细胞培养。
4.干细胞培养及其应用
源于选择性必修3 P46“相关信息”科学家已尝试采用多种方法来制备iPS细胞，包括借助载体将 导入细胞中，直接将特定蛋白导入细胞中或者用 等来诱导形成iPS细胞。iPS细胞最初是由成纤维细胞转化而来的，后来发现已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导为iPS细胞。
(1)营养供应充足时，传代培养的胚胎干细胞不会发生接触抑制(2023·海南，7A)(　　)
提示　传代培养的胚胎干细胞会发生接触抑制。
(2)进行动物细胞培养时，血清应经过高温处理后加入培养基(2022·湖北，6C)(　　)
提示　血清经过高温处理后，其中的活性成分变性，失去原有功能。
(3)培养心肌细胞的时候既需要氧气也需要二氧化碳(2022·江苏，14B)(　　)
考向一　动物细胞培养1.(2024·黑吉辽，14)从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间点检测细胞数目，结果如图。下列叙述正确的是A.传代培养时，培养皿需密封防止污染B.选取①的细胞进行传代培养比②更合理C.直接用离心法收集细胞进行传代培养D.细胞增长进入平台期可能与细胞密度过 大有关
2.(2025·福州一中模拟)干眼症是由泪液分泌减少导致的眼睛干涩的病症。将有关基因导入已分化的体细胞获得诱导多能干细胞(iPS细胞)，进而培养得到眼结膜组织，可分泌泪液成分“黏液素”，有望治疗干眼症。下列相关说法错误的是A.导入的基因能促使已分化的体细胞恢复分裂能力B.利用iPS细胞获得眼结膜组织时应加入分化诱导因子C.iPS细胞核移植比体细胞核移植更容易表现全能性D.利用ES细胞治疗人类疾病的前景优于iPS细胞
动物细胞融合技术与单克隆抗体
PEG融合法、电融合法和灭活
2.单克隆抗体的制备(1)传统抗体的获得①方法
②缺点：产量低、 低、 差。
(2)单克隆抗体的制备及优点①制备过程
②单克隆抗体的优点a.能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生 结合(特异性强、灵敏度高)。b.可以 制备。(3)单克隆抗体的应用①被广泛用作 试剂，在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要的作用。②运载 ，形成抗体—药物偶联物，实现对肿瘤细胞的 杀伤。③用于 。
(1)有的病毒经灭活处理后，可用于细胞工程中介导动物细胞的融合(2020·浙江6月选考，15A)(　　)(2)将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞(2021·江苏，11D)(　　)
提示　若仅考虑细胞两两融合的情况，将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导融合后的细胞不都是杂交瘤细胞，还有B细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞等。
(3)甲状旁腺激素(PTH)水平是人类多种疾病的重要诊断指标。研究者制备单克隆抗体用于快速检测PTH，判断有关制备过程的叙述是否正确：①利用抗原－抗体结合的原理筛选杂交瘤细胞(2023·北京，12C)(　　)②筛选能分泌多种抗体的单个杂交瘤细胞(2023·北京，12D)(　　)
提示　由于一个B细胞经分化后只能分泌一种抗体，故筛选出的单个杂交瘤细胞也只能产生一种抗体。
(4)我国科研团队研制出全球首个以尿液中的抗原为靶标的戊肝诊断试剂盒，该试剂盒还可用于其他类型病毒性肝炎的检测(　　)
提示　抗体具有特异性，所以戊肝诊断试剂盒只能用于戊肝的检测，不能用于其他类型病毒性肝炎的检测。
理解单克隆抗体的制备过程及应用长春新碱(VCR)能够干扰肿瘤细胞的有丝分裂，也会影响正常细胞的增殖和分裂，导致药物副作用的发生。H18杂交瘤细胞产生的抗人肝癌单克隆抗体HAb18对于人体肝癌的诊断和靶向治疗具有重要的意义。回答下列问题：(1)抗人肝癌单克隆抗体HAb18的制备过程中，需要向小鼠体内注射肝癌细胞悬液，其目的是 。(2)单克隆抗体被广泛用作诊断试剂的原因是___________________________________________________________________________________。
刺激机体发生免疫应答，从而得到能产生特定抗体的B淋巴细胞
单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备
(3)资料：①细胞合成DNA包括D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。②免疫的B淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但它不能分裂增殖，其本身也不能在体外长期存活。③鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，但它能不断分裂增殖。如果它的D途径被阻断的话，它会因不能合成DNA而死亡。根据上述资料，利用特定的选择培养基筛选杂交瘤细胞的具体方法是在培养基中加入 进行培养，一段时间后收集存活细胞。原理是 可以阻断DNA的D合成途径，所以未融合的骨髓瘤细胞及融合的骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞不能在该培养基生长，而未融合的B淋巴细胞及融合的B淋巴细胞和B淋巴细胞不能长期存活，只有 的细胞才可以在培养基中长期存活与繁殖。
B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合
(4)将VCR与抗人肝癌单克隆抗体HAb18通过接头连接形成抗体—药物偶联物(ADC)，可实现对肝癌细胞的特异性杀伤，ADC的作用机制如图。据图分析，ADC的抗体可以_______________________________________ ；药物VCR通过 从而 ，阻断肝癌细胞分裂，诱导肝癌细胞凋亡。
发挥靶向运输作用，携带 VCR 与肝癌细胞特
考向二　动物细胞融合技术与单克隆抗体3.(2021·山东，15)一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗p72的单抗，也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是A.注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响大B.单抗制备过程中通常将分离出的浆细胞与骨髓瘤细胞融合C.利用该小鼠只能制备出一种抗p72的单抗D.p72部分结构改变后会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况
4.(2023·湖北，22节选)某病毒对动物养殖业危害十分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋白A为抗原来制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，其主要技术路线如图所示。回答下列问题：
(1)与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的脾细胞(含浆细胞)______(填“需要”或“不需要”)通过原代培养扩大细胞数量；添加脂溶性物质PEG可促进细胞融合，该过程中PEG对细胞膜的作用是____________________________________________________________。
分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合
(2)在杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的选择培养基(如HAT培养基)，该培养基对___________________和_______________________生长具有抑制作用。
融合的具有同种核的细胞
(3)单克隆抗体筛选中，将抗体与该病毒外壳蛋白进行杂交，其目的是_________________________________________________。
通过抗体检测呈阳性来获得分泌所需抗体的杂交瘤细胞
动物体细胞核移植技术和克隆动物
1.动物细胞核移植技术的概念和类型(1)概念将动物一个细胞的 移入去核的 中，使这个重新组合的细胞发育成 ，继而发育为 的技术。(2)原理： 。(3)类型：哺乳动物核移植可分为 核移植和 核移植，其中 核移植较易成功。
动物体细胞核具有全能性
2.体细胞核移植的过程
目前动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作法。也有人采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法。这些方法是在没有穿透卵母细胞透明带的情况下去核或使其中的DNA变性。
3.体细胞核移植技术的应用前景和存在的问题
理解动物体细胞核移植的过程及应用培育克隆猴的流程如图所示。请结合图示回答问题：(1)在将体细胞的核移植到卵母细胞之前，必须先对卵母细胞进行去核操作的原因是什么？
提示　为了使核移植的胚胎或动物的核遗传物质全部来自体细胞供体动物。
(2)上述体细胞核移植技术培育的克隆猴没有实现对体细胞供体动物进行100%的复制，其原因是克隆动物绝大部分DNA来自体细胞供体(核供体)动物的细胞核，但其线粒体中的DNA同时来自核供体细胞和___________ 。所以，克隆猴不是对核供体动物进行完全相同的复制。此外，即便动物的遗传基础完全相同，但动物的发育及一些行为、习性的形成与 也有很大关系。(3)在此过程中，灭活的仙台病毒所起的作用是 。
(4)为了调节相关基因的表达，提高胚胎的发育率和妊娠率，研究人员将组蛋白去甲基化酶 Kdm4d的mRNA注入了重构胚，Kdm4d的mRNA翻译的组蛋白去甲基化酶能 ；同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA处理了它，TSA可以抑制组蛋白脱乙酰酶的作用，从而 。
降低组蛋白的甲基化水平
提高组蛋白的乙酰化水平
考向三　动物体细胞核移植技术和克隆动物5.(2021·辽宁，13)如图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述正确的是A.后代丁的遗传性状由甲和 丙的遗传物质共同决定B.过程①需要提供95%空气 和5%CO2的混合气体C.过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理D.过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植
6.(2024·武汉模拟)如图为体细胞克隆猴“中中”和“华华”的培育流程，为建立动物模型、研究疾病机理带来光明前景。下列叙述错误的是A.过程①将成纤维细胞 注射到去核的卵母细 胞中，说明细胞膜的 控制作用是相对的B.卵子细胞质中含有促使成纤维细胞核全能性表达的物质C.中中、华华的性别由成纤维细胞的遗传物质决定D.“去核”去除的是纺锤体—染色体复合物
A.应使用加入血清等一些天然成分的液体培养基来培养皮肤细胞B.培养液需要定期更换，以便提供营养和清除代谢废物C.应在95%的O2和5%的 CO2培养箱中培养，培养液中的CO2用于维持pH
一、过教材1.实验小鼠皮肤成纤维细胞培养的基本过程如图所示。科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞获得一种类似胚胎干细胞的细胞，称为诱导多能干细胞(简称iPS 细胞)。下列叙述正确的是
D.图中丙和丁分别表示的是原代培养和传代培养，其培养原理不同E.体外培养的细胞既能贴壁生长又能悬浮生长，都会发生接触抑制现象F.传代培养时，悬浮培养的细胞直接用离心法收集，不需要再用酶处理G.iPS细胞是只能由成纤维细胞诱导形成的类似胚胎干细胞的一种细胞H.利用iPS细胞分化形成的器官进行自体移植后将引发机体产生细胞免疫I.iPS细胞较传统胚胎干细胞，具有细胞来源广泛、较少涉及伦理道德问 题等优点
2.下列关于动物细胞融合、单克隆抗体的制备及应用的叙述中，不正确的是A.动物细胞融合过程中既有细胞膜融合也有核膜的融合B.用灭活的病毒诱导融合利用了细胞膜的流动性C.单克隆抗体可对目的基因是否成功表达进行检测与鉴定D.单抗制备时至少需要2次筛选，第2次筛选常用选择培养基进行E.杂交瘤细胞在培养过程中有接触抑制现象，需要用胰蛋白酶处理F.可以从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体G.单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，产量高H.抗体—药物偶联物可定向清除肿瘤细胞，发挥杀伤作用的主要是单克隆抗体
3.下列关于动物细胞核移植技术的叙述，正确的是A.哺乳动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植B.卵母细胞需要培养至M Ⅱ期再去核C.卵母细胞去核的实质是去除细胞中的纺锤体—染色体复合物D.梯度离心是在没有穿透卵母细胞透明带的情况下去核的E.用物理或化学方法激活重构胚，使其完成分裂和发育进程F.克隆动物的遗传物质全部来自供体的体细胞核G.用体细胞核移植技术克隆出大熊猫，体现了动物细胞核具有全能性H.核移植技术培育动物可在保持优良性状的同时提高遗传的多样性
二、过高考(2020·全国Ⅰ，38节选)为研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。
回答下列问题：(1)上述实验前必须给小鼠甲注射病毒A，该处理的目的是_____________ 。
生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞
(2)为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。图中筛选1所采用的培养基属于 ，使用该培养基进行细胞培养的结果是 。图中筛选2含多次筛选，筛选所依据的基本原理是 。
只有杂交瘤细胞能够生存
抗原与抗体的反应具有特异性
(1)一种抗原中包含多种抗原决定簇　(2)既能大量增殖，又能产生足够数量的特定抗体　PEG(或聚乙二醇)　相同　特定的选择培养基　克隆化培养　纯度高、特异性强、灵敏度高　(3)选用腺瘤细胞、鳞状细胞瘤细胞分别与B淋巴细胞融合后选择能产生单一抗体的杂交瘤细胞，取等量的杂交瘤细胞在体外培养相同的时间，检测抗体的数量
一、选择题1.(2024·武汉模拟)体外培养动物细胞时常需要提供一个类似该细胞在生物体内的环境条件，培养方式可分为悬浮培养和贴壁培养。下列叙述正确的是A.悬浮培养一般使用液体培养基B.贴壁培养一般使用固体培养基C.悬浮培养会发生接触抑制现象D.血液中淋巴细胞适合贴壁培养
2.(2024·张家口模拟)科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞，获得了类似胚胎干细胞的一种细胞，将它称为诱导多能干细胞(简称iPS细胞)，iPS细胞增殖分化后可形成多种组织细胞，用于多种疾病的治疗。如图为该技术的实验示意图，下列有关说法错误的是A.体外培养小鼠成纤维细胞 和iPS细胞时，定期更换 培养液可以清除细胞的代 谢物B.选取的小鼠成纤维组织需经胃蛋白酶或胶原蛋白酶处理成单个细胞后制成细胞悬液C.iPS细胞用于疾病治疗时存在分化为肿瘤细胞的风险D.若iPS细胞取自病人，经诱导并移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应
3.(2024·安阳一模)研究人员诱导肺上皮干细胞增殖分化可生成不同肺类器官。肺类器官可自组装或与成熟体细胞组装成肺类装配体，过程如图所示。下列叙述正确的是A.为提供无菌的环境，培养肺类装配 体时应对细胞进行灭菌处理B.在培养肺上皮干细胞和体细胞时， 培养液中通常需要加入血清C.培养肺类装配体时，需提供含95% O2和5%CO2的气体环境D.在组装肺类装配体的培养过程中， 运用了动物细胞融合技术
4.(2024·孝感模拟)新开发药物X具有抗癌效果好、副作用小等优点，某小组拟通过培养小鼠肝癌细胞(甲)和正常肝细胞(乙)对其抗癌效果进行验证。下列说法正确的是A.培养甲和乙时均会出现明显的接触抑制现象B.在进行细胞培养时，应拧紧培养瓶盖进行培养C.需另设一种抗癌药物进行实验才能达到实验目的D.在培养液中不加抗生素对实验结果没有影响
5.据报道，我国科研人员在太空中进行细胞电融合实验，获得烟草黄花品种叶肉细胞与烟草革新一号叶肉细胞的杂交细胞，又成功完成小鼠淋巴细胞和人骨髓瘤细胞杂交实验。下列相关叙述不正确的是A.两个电融合实验中，融合前都需用一定浓度的特定酶预处理实验材料B.细胞经电融合处理后，需进一步筛选，以淘汰未融合细胞和多核细胞C.电融合处理后的烟草细胞经组织培养，可获得具双亲优良性状的植株D.经电融合获得的人、鼠杂交瘤细胞，培养过程中体现了细胞的全能性
A.已免疫的B淋巴细胞在HAT培养基中可大量增殖B.用该培养基筛选出的能产抗体的杂交瘤细胞有多种C.HAT培养基是选择培养基，可以满足部分细胞的生存D.杂交瘤细胞中，“核苷酸→DNA”主要发生于分裂间期
6.(2024·毕节一模)如图所示，核苷酸合成有两条途径，物质A可以阻断其中的全合成途径。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。现用加入了H、A、T三种物质的HAT培养基来筛选杂交瘤细胞。下列相关说法错误的是
7.(2025·唐山开学考试)在某药物研发过程中，需制备抗细胞膜蛋白N的抗体，流程如图所示。下列叙述错误的是A.取脾组织之前应用蛋白N对 健康小鼠进行免疫B.将培养B 淋巴细胞的培养瓶 置于培养箱并通入无菌氧气C.将杂交瘤细胞转入96孔板时， 每个孔中尽量只接种一个细胞D.将药物与抗蛋白N的单克隆抗体结合，可实现特异性治疗
8.(2024·邢台一模)为解决杂交瘤细胞在传代培养过程中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失问题，研究者将抗原刺激后的B淋巴细胞用EBV(一种病毒颗粒)感染，获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞。EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对乌本苷(Oua)敏感，骨髓瘤细胞不能在HAT培养基中存活，但对Oua不敏感。如图表示操作过程，下列有关分析错误的是
A.B淋巴细胞来源于抗原刺激后动物的脾脏B.HAT培养基可去除未与EBV转化细胞融合的骨髓瘤细胞和自身融合的 骨髓瘤细胞C.杂交瘤细胞染色体丢失可能会导致抗体的产生能力下降D.杂交瘤细胞具有持续产生抗EBV抗体的能力
9.(2022·山东，15)如图所示，将由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是A.双抗可同时与2种抗原结合B.利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞C.筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原D.同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞
10.(2024·海南，7)海南龙血树具有药用和观赏价值，可利用植物组织培养技术产生愈伤组织，进而获得该种植株。动物细胞融合技术可将骨髓瘤细胞和产生特定抗体的B淋巴细胞融合形成杂交瘤细胞，进而制备单克隆抗体。下列有关这两种技术的叙述，正确的是A.利用的原理均是细胞的全能性B.使用的培养基均需添加葡萄糖和血清C.培养时的温度和pH均相同D.产生的愈伤组织细胞或杂交瘤细胞均具有增殖能力
11.(2025·芜湖检测)乳腺癌化疗的药物在杀伤肿瘤细胞的同时还会对健康细胞造成伤害，为降低药物对患者的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体—药物偶联物(ADC)，过程如图所示。下列相关说法正确的是
A.对过程①形成的融合细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选， 就可以获得能分泌所需抗体的细胞B.ADC通常由抗体、接头和药物三部分组成，ADC起作用时会被细胞吞 噬，并在溶酶体内被分解后释放药物C.经步骤③筛选得到的杂交瘤细胞具有的特点是能准确识别抗原的细微 差异并能大量制备D.ADC能降低乳腺癌治 疗药物的副作用，原 因是药物能特异性地 作用于乳腺癌细胞，避免其他细胞受损
12.(2024·天津北辰模拟)治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义，流程如图。下列相关叙述错误的是A.核移植前需将卵母细胞培 养到M Ⅱ期B.题述过程体现出动物细胞 具有全能性C.获得的组织器官移植给个体B一般不发生免疫排斥反应D.胚胎干细胞需经过基因的选择性表达才能产生出所需的组织器官
13.(2024·新余一模)如图为培育体细胞克隆猴的流程。据图分析，下列叙述错误的是A.将成纤维细胞注入去核卵母细胞前， 用灭活的仙台病毒短暂处理的目的 是利于细胞融合B.图中克隆猴的细胞质基因来自猴A 和猴BC.组蛋白的甲基化和乙酰化不利于重 构胚完成细胞分裂和发育过程D.体细胞克隆猴的成功便于建立某些 疾病模型和药物筛选
14.(2024·邯郸月考)体细胞核移植技术在畜牧业、医药卫生、拯救濒危动物等方面有着广泛的应用前景。下列关于动物细胞核移植技术应用的叙述，错误的是A.哺乳动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植的B.克隆动物与供核动物的遗传性状完全相同，原因是遗传物质主要分布 在细胞核中C.利用体细胞核移植技术培育的转基因克隆动物，可作为生物反应器生 产医用蛋白D.以患者作为供体培育的人核移植胚胎干细胞，经过诱导分化能形成相 应的细胞、组织或器官，将它们移植给患者时可避免发生免疫排斥反应
二、非选择题15.(2024·商丘一模)抗原决定簇特指抗原分子上能够与抗体结合位点发生特异性结合并决定抗原特异性的部位。现用某种抗原处理小鼠(出生后即在无菌室中生存)获得多克隆抗体和单克隆抗体的过程如图所示。回答下列问题：
(1)一种抗原刺激小鼠使其产生免疫反应，从脾脏获取的B淋巴细胞可分泌多种抗体的原因是______________________________。
(2)在单克隆抗体的制备过程中，利用了杂交瘤细胞________________________________________的特点，B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合时，常采用的方法为灭活病毒诱导法、电融合法和______________融合法，动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理______(填“相同”或“不同”)。由融合细胞到产生单克隆抗体需要多次筛选，第一次筛选通常采用_________________筛选出杂交瘤细胞，对上述过程得到的杂交瘤细胞要进行___________和抗体检测，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。与多克隆抗体相比，单克隆抗体的优势为___________________________(写出2点)。
既能大量增殖，又能产生足够数量的特定抗体
高、特异性强、灵敏度高
(3)现有腺瘤细胞和鳞状细胞瘤细胞两种瘤细胞，某同学欲探究选用不同种的瘤细胞与B淋巴细胞杂交对产生单克隆抗体数量的影响，请写出实验思路：___________________________________________________________________________________________________________________________________________。
选用腺瘤细胞、鳞状细胞瘤细胞分别与B淋巴细胞融合后选择能产生单一抗体的杂交瘤细胞，取等量的杂交瘤细胞在体外培养相同的时间，检测抗体的数量