2027年高考生物一轮复习 突破练习含答案 065-课时作业42 微生物的培养技术及应用（教用）

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1．（2025·江苏淮安质检）下列关于灭菌、消毒、无菌操作的叙述，正确的是（ ）
A. 配制培养基、倒平板、接种均需要在酒精灯火焰旁进行
B. 可用高压蒸汽灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌
C. 为防止杂菌污染，应将配制好的选择培养基分装到培养皿中进行高压蒸汽灭菌
D. 为防止蛋白质变性，不能使用高压蒸汽灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌
【答案】B
【解析】倒平板、接种均需要在酒精灯火焰旁进行，配制培养基不需要在酒精灯火焰旁进行，A错误；实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等可以使用湿热灭菌法如高压蒸汽灭菌法进行灭菌，以防止杂菌污染，B正确；为了防止杂菌污染，应将配制好的选择培养基分装到锥形瓶中再进行高压蒸汽灭菌，C错误；变性蛋白质仍可为微生物提供氮源等，可以利用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，D错误。
2．农作物秸秆以及草、木屑等富含大量纤维素，但被利用的机会很少，效率低。科学工作者正致力于研究怎样将农业废弃物、木材及生长更为迅速的草本植物转化为种类繁多的生物燃料（甚至是航空柴油），其中重要的一个环节是要获得能高效分解纤维素的微生物。对下列配方的分析，不合理的是（ ）
A. 该培养基是一个选择培养基，不能分解纤维素的微生物无法在此生存
B. 在该培养基中加入刚果红，无法挑选出分解纤维素的微生物
C. 虽然有纤维素粉，但该培养基按成分属于人工合成培养基
D. 将该培养液中培养的微生物接种到固体培养基上培养，出现的菌落可能不止一种
【答案】A
【解析】该配方中纤维素不是唯一碳源，还有酵母膏存在，不能分解纤维素但是能利用纤维素分解产物和酵母膏的微生物也能在该培养基中生存，A错误。
3．（2025·山东德州三模）TCBS琼脂培养基（盐度较高）是一种用于选择性分离致病性弧菌（如霍乱弧菌、副溶血弧菌）的培养基，其关键成分如表所示。溴麝香草酚蓝为酸碱指示剂，酸性时为黄色，碱性时为蓝色。已知蔗糖代谢会产生乳酸，在碳源不足的情况下，乳酸可被继续分解供能。研究人员将某水体涂布于TCBS琼脂培养基上，24h后观察到平板上出现了黄色和蓝色两种菌落。48h后观察到黄色菌落变蓝。下列说法错误的是（ ）
A. 为避免杂菌污染，应该在培养基灭菌之前调pH
B. 该培养基能抑制不耐盐细菌的生长，但不能抑制真菌的生长
C. 不同颜色菌落的出现说明不同弧菌利用蔗糖的能力不同
D. 黄色菌落一段时间后变蓝与乳酸被分解供能有关
【答案】B
【解析】该培养基盐度较高，能抑制不耐盐细菌的生长，由于真菌培养的最适pH为酸性，该培养基pH为8.6，因此能抑制真菌的生长，B错误。
4．（2025·广东揭阳模拟）某种含氮有机物的除草剂，在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明。其在土壤中不易降解，长期使用会污染土壤，破坏生态环境。为修复被破坏的生态环境，按如图选育能降解该除草剂的细菌。下列叙述正确的是（ ）
A. 有透明圈的菌落能够利用除草剂中的氮源，应扩大培养
B. 图中Ⅱ划线5个区域，接种环需要灼烧灭菌5次
C. 实验过程中需要将培养基调至中性或弱酸性
D. 图中接种方法为平板划线法，可对细菌进行计数
【答案】A
【解析】如果某个菌落周围出现透明圈，说明该菌落能够降解除草剂获得氮源进行生长，该菌落应该被扩大培养用于后续的降解实验或应用，A正确；图中Ⅱ划线5个区域，接种环需要灼烧灭菌6次，B错误；在培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性，C错误；平板划线法不能用于计数，D错误。
5．某兴趣小组试图从土壤中分离能分解聚苯乙烯的细菌，相关流程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 若稀释倍数都为10，则x应为8
B. 接种时应在酒精灯火焰旁进行，可将培养皿盖完全打开
C. 将涂布器放在火焰上燃烧后立即进行涂布
D. 应至少涂布三个平板，求菌落数的平均值
【答案】D
【解析】若稀释倍数都为10，则x应为18，A错误；接种时应在酒精灯火焰旁进行，但不能将培养皿盖完全打开，B错误；将涂布器放在火焰上燃烧，等冷却后再进行涂布，C错误。
6．（2025·江苏卷·11）从种植草莓的土壤中分离致病菌，简易流程如下：制备土壤悬液、分离、纯化、鉴定。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 制备的培养基可用紫外线照射进行灭菌
B. 将土样加入无菌水混匀，梯度稀释后取悬液加入平板并涂布
C. 连续划线时，接上次划线的起始端开始划线
D. 鉴定后的致病菌，可接种在斜面培养基上，并在室温下长期保存
【答案】B
【解析】紫外线照射只能起到消毒作用，不能起到灭菌效果，制备的培养基通常采用高压蒸汽灭菌（湿热灭菌），A错误；稀释涂布平板法是分离菌种的常用方法，从土壤中分离致病菌，可将土样加入无菌水混匀，梯度稀释后取悬液接种于平板上并涂布，B正确；平板划线时，每次划线应从上一次划线的末端开始，而不是从上一次划线的起始端开始，C错误；将目的菌接种到斜面培养基上，并在4℃左右的环境下保存，而非常温下保存，D错误。
7．（2026·四川巴中模拟）研究人员欲从自然发酵的传统腐乳中筛选出新的毛霉菌株改良腐乳风味。该过程需利用酪素培养基，其原理是在培养基中添加酪素，如果菌株能产生蛋白酶并分泌到胞外，则能将酪素降解形成透明圈（如图所示）。如表为8种毛霉菌株分别接种到酪素培养基培养后测得的H/C值（透明圈直径与菌落直径的比值）。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 毛霉与乳酸菌在结构上的主要区别是有无以核膜为界限的细胞核
B. 培养基中添加的酪素主要给毛霉提供碳源、氮源和维生素等营养成分
C. 该酪素培养基需要添加琼脂且pH调至中性
D. 据表初步筛选出的具有高蛋白酶活力的菌株编号为②⑤⑧
【答案】C
【解析】该培养基上能长成菌落，因此从物理状态来看，该培养基属于固体培养基，需要添加琼脂，培养霉菌时一般将pH调至酸性，C错误；H/C值越大说明毛霉降解蛋白质的能力越强，据此初步筛选出的三种具有高蛋白酶活力的菌株编号为②⑤⑧，D正确。
8．（2025·山东聊城三模）研究人员欲筛选对抗生素有抗性、能高效降解淀粉的微生物以降解餐余垃圾，进行的操作如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 餐余垃圾浸出液在接种前通常需要进行高压蒸汽灭菌处理
B. 可用稀释涂布平板法将餐余垃圾浸出液接种在X培养基上
C. X培养基含有淀粉和抗生素，Y培养基是不含琼脂的液体培养基
D. 图中降解淀粉最高效的微生物是⑤，可根据菌落特征初步判断微生物类型
【答案】A
【解析】餐余垃圾浸出液中含有目的菌，因此不能对其进行高压蒸汽灭菌处理，A错误。
9．（2025·黑吉辽蒙卷·4）科研人员通过稀释涂布平板法筛选出高耐受且降解金霉素(C22H23ClN2O8)能力强的菌株，旨在解决金霉素过量使用所导致的环境污染问题。下列叙述错误的是（ ）
A. 以金霉素为唯一碳源可制备选择培养基
B. 逐步提高培养基中金霉素的浓度有助于获得高耐受的菌株
C. 配制选择培养基时，需确保pH满足实验要求
D. 用接种环将菌液均匀地涂布在培养基表面
【答案】D
【解析】稀释涂布平板法中应用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面，而接种环用于平板划线，D错误。
10．（2025·湖北襄阳模拟）（14分）苹果树腐烂病由真菌感染引起，是限制苹果产量的重要因素之一，目前该病以化学防治为主。为了开发生物防治的途径，研究者拟从土壤中分离筛选出能抑制苹果树腐烂病菌生长的芽孢杆菌，实验流程如图1。
图1
（1） 分离筛选土壤中的芽孢杆菌。图1中①取5g土壤加入45mL无菌水中充分振荡得到10−1的土壤悬液。进行系列稀释后用_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 法进行接种，每个浓度重复3次。将接种后的平板_ _ _ _ ，以防止_ _ _ _ _ _ _ _ 造成污染。37℃条件下培养24小时，然后计数。该方法计数的结果比实际值_ _ _ _ ，原因是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 。
（2） 筛选能抑制苹果树腐烂病菌生长的芽孢杆菌。图1中，应取直径为5mm的_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 的菌落移置于A处，B处接种_ _ _ _ _ _ _ _ 。培养3～5天，测量并计算抑菌率。筛选出抑菌率最高的菌株，抑菌效果如图2。请将抑菌率的计算公式补充完整：抑菌率(%)=_ _ _ _ _ _ _ _ /(D−5)×100%（用图2中字母表示）。
图2
【答案】（1） 稀释涂布平板；倒置；冷凝水滴落；偏小；当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
（2） 苹果树腐烂病菌；芽孢杆菌；(D−d)培养基组成
提供主要的营养物质
纤维素粉5g
碳源
NaNO31g
氮源、无机盐
KCl0.5g；KH2PO40.9g；
Na2HPO4⋅7H2O1.2g；
MgSO4⋅7H2O0.5g
无机盐
酵母膏0.5g
生长因子、碳源、氮源
水解酪素0.5g
氮素、生长因子
将上述物质溶解后，蒸馏水定容至1000mL
水
配方（每升）
酵母粉
蛋白胨
蔗糖
氯化钠
琼脂
溴麝香草酚蓝
pH
含量
5g
10g
20g
10g
15g
0.04g
8.6
菌株编号
①
②
③
④
⑤
⑥
⑦
⑧
H/C值
3.75
5.8
1.50
4.33
5.42
3.08
3.90
5.33