【备考2026】高考生物一轮复习资源：第10单元 课时练50 微生物的培养技术与应用（课时精练）（学生版）

这是一份【备考2026】高考生物一轮复习资源：第10单元 课时练50 微生物的培养技术与应用（课时精练）（学生版），共8页。试卷主要包含了选择题，非选择题等内容，欢迎下载使用。
选择题1～5题，每小题6分，6～9题，每小题7分，共58分。
一、选择题
1．(2024·随州一模)从海水样本中分离粘质沙雷氏菌时，所用的海生菌肉汤培养基的成分如表所示。下列叙述错误的是( )
A.蛋白胨只为粘质沙雷氏菌提供碳源，该菌生长需要多种微量元素
B．若从牛肉膏、硫酸铵、硝酸钾中筛选优质氮源，每次应只添加其中一种
C．该培养基应在灭菌前调节pH，其不能用于分离粘质沙雷氏菌获得单菌落
D．该培养基添加了NaCl，具有抑制某些微生物生长的作用，属于选择培养基
2．(2024·重庆联考)熔喷布的主要成分是聚丙烯，会对环境造成污染。某科研小组从土壤中分离到一种能分解聚丙烯的细菌。下列说法正确的是( )
A．配制固体培养基时，需要在无菌的环境中进行
B．制备培养基时需要先将培养基的pH调节至中性或弱碱性
C．从土壤中分离能分解聚丙烯的细菌，可采用平板划线法进行分离与计数
D．纯化培养时，在培养皿皿盖做标记后倒置在恒温培养箱中静置培养
3．纤维素、半纤维素、木质素参与构成植物细胞壁。可从白蚁的肠道中分离木质素分解菌来降解利用木质素，已知木质素降解过程使苯胺蓝培养基脱色。以下说法错误的是( )
A．以木质素为唯一碳源，用稀释涂布平板法分离木质素分解菌
B．脱色圈直径与菌落直径比值越小，木质素分解菌分解效果越好
C．在选择培养基上挑选出菌落后，再通过平板划线法进一步纯化
D．除了白蚁肠道，还可从腐烂的树皮表面分离出木质素分解菌
4．(2024·黄冈一模)某实验小组通过控制苯浓度，对从污泥处理厂的活性污泥中筛选获得的苯降解菌进行驯化培养，挑选出合适的培养条件，同时驯化培养出较好的苯降解菌，培养的实验结果如表所示。下列有关叙述错误的是( )
A.该实验中驯化苯降解菌的培养基中应该加入适量的琼脂
B．第①组几乎没有菌落的原因可能是苯浓度过高对细菌产生了毒性
C．第④组菌落数目少的原因可能是培养基中的碳源的含量不足
D．由该实验可知，20 g·L－1的苯浓度是培养苯降解菌的最适浓度
5．(2025·马鞍山模拟)为检验某品牌冰激凌中大肠杆菌含量是否超标，研究小组利用配制的伊红－亚甲蓝琼脂培养基进行检测。下列有关叙述正确的是( )
A．检测中用到的接种方法为平板划线法
B．配制培养基，高压蒸汽灭菌后，调节pH
C．检测中应设一个不接种的平板作为阴性对照和一个接种大肠杆菌的平板作为阳性对照
D．检测的培养基为固体培养基，大肠杆菌在该培养基上会形成红色且有金属光泽的菌落
6．(2024·三明一模)圆褐固氮菌可独立固定空气中的氮气，且能够分泌生长素。巨大芽孢杆菌可将有机磷降解为可溶性磷。二者组合可将有机厨余垃圾迅速分解为水和二氧化碳。为制备分解有机厨余垃圾的微生物菌剂，某科研小组对两种菌种进行了最佳接种比例的探究实验，得出如图实验结果。下列说法错误的是( )
A．圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌在生长过程中都需要氮源
B．统计活菌数量可采用稀释涂布平板法
C．处理有机厨余垃圾，两种菌种的最佳接种比例为1∶2
D．两种菌种的组合菌剂还可制成微生物肥料施用到土壤中，提高农作物的产量
7．(2025·四川部分学校联考)工业生产中常用谷氨酸棒状杆菌的高丝氨酸营养缺陷型菌作为赖氨酸的发酵菌株。科研人员将紫外线照射处理过的野生谷氨酸棒状杆菌菌液(原菌液)，经过程①(稀释10倍)接种在培养基甲上培养，菌落数目不再增加时如图中甲平板。过程②表示向培养基甲中添加某种物质，继续培养。下列叙述正确的是( )
A．菌落A是诱变产生的高丝氨酸营养缺陷型菌种
B．培养基甲是一种选择培养基，过程②向甲中添加赖氨酸
C．经过程①取0.2 mL菌液涂布得到甲平板所示结果，则原菌液未突变菌株数量约为450个/mL
D．发酵结束后，将过滤得到的固体物质进行干燥即可获得赖氨酸产品
8．(2024·重庆，13)养殖场粪便是农家肥的重要来源，其中某些微生物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3，影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物。兴趣小组按图示进行实验获得目的菌株，下列叙述正确的是( )
A．①通常在等比稀释后用平板划线法获取单个菌落
B．②挑取在2种培养基上均能生长的用于后续的实验
C．③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙
D．粪便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的减少
9．(2024·湖北宜荆荆恩四市联考)营养缺陷型菌株是突变后某些酶被破坏，导致代谢过程中某些合成反应不能进行的菌株。如图是科研人员利用影印法(用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培养基上)初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程。下列相关说法错误的是( )
A．①过程接种方法为稀释涂布平板法，接种后的培养皿不能立即进行倒置培养
B．进行②过程的顺序是先将丝绒布“复印”至完全培养基上，再“复印”至基本培养基上
C．氨基酸缺陷型菌株应从基本培养基上没有、完全培养基上对应位置有的菌落中挑选
D．统计菌落种类和数量时要每隔一定时间观察统计一次，直到各类菌落数目稳定为止
二、非选择题
10．(14分)(2024·西安一模)聚苯乙烯是一种无色透明的热塑性塑料，常被用来制作承受开水温度的一次性容器等。但聚苯乙烯对人体具有一定的致癌性，且聚苯乙烯在自然状态下很难被分解，采用填埋的方法对其进行处理会对土壤环境造成很大的污染。科研人员从黄粉虫肠道中发现一些能够降解聚苯乙烯的微生物，并将之分离出来，相关过程如图所示。回答下列问题：
(1)为了获取能够降解聚苯乙烯的微生物，培养基中需要加入水、碳源、______________(填2种)等基本成分，其中碳源是__________。配制好的培养基常采用__________法进行灭菌。
(2)通过选择培养可以_____________________________________________________________
___________________________________________，从而能够确保从样品中分离到能够降解聚苯乙烯的微生物。将选择培养获取的微生物接种在固体培养基上，据图分析，图中的接种方法是________________________________________________________________________。
(3)科研人员获取了三株微生物YT1、YT2、C1，将等量的三种微生物分别接种在含聚苯乙烯的液体培养基中，培养60天后检测聚苯乙烯的降解率，结果如表所示。
①据表分析，可以得出的实验结论是______________________________________________
________________________________________________________________________。
②为了进一步培养出更高效的能够降解聚苯乙烯的微生物，研究人员将YT1和C1菌株混合培养，一段时间后，筛选出C2菌株，其降解率比上述三种菌株高，经检测发现是菌株C1的基因整合了菌株YT1的部分基因从而提高了对聚苯乙烯的降解效果，该过程发生的变异是__________。
11．(14分)(2024·内江一模)金黄色葡萄球菌是一种常见的食源性致病菌，广泛分布于自然界。某研究人员以金黄色葡萄球菌为指示菌，探究菌株A对金黄色葡萄球菌的抑菌(会出现抑菌圈)机理。回答下列问题：
(1)在培养基制备过程中，对培养基进行灭菌常采用的方法是____________________；使用该方法时，为了达到良好的灭菌效果，除了先要把灭菌锅内原有的冷空气彻底排除外，还需注意的事项有____________________________________________________________________。
(2)若菌株A为好氧性微生物，为获得足够的发酵液，则需要采用________(填“静置”或“摇床振荡”)培养。培养过程中，可采用稀释涂布平板法计数活菌数量，其计数的原理是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(3)在探究菌株A对金黄色葡萄球菌的抑菌机理时，该研究人员作出了这样的假设：菌株A通过分泌某种化学物质来抑制金黄色葡萄球菌的生长繁殖。请利用以下材料设计实验证明该假设成立。
实验材料设备：含菌株A的发酵液、无菌水、含金黄色葡萄球菌的指示培养基(已打有大小相同的两个孔)、离心机等。
①完善实验思路：用离心机______________________________________________________，取适量且等量的________，分别接种到含有金黄色葡萄球菌的指示培养基的两个孔中，一段时间后，观察是否出现抑菌圈。
②预期结果：__________________________________________________________。
12．(14分)(2024·天津河西模拟)近年来，水环境中发现的不同程度的抗生素残留，不仅威胁水生生物的生存，还会损害微生物的生态平衡。氧氟沙星(OFL)(C18H20FN3O4)是一种人工合成的广谱抗菌的氟喹诺酮类药物，某实验小组成功地从废水环境样品中分离得到能降解OFL的菌株X。筛选分离的操作过程如图所示。回答下列问题：
(1)利用细菌处理去除废水中的抗生素，这种方法的不足之处是__________________________ _____________________________________，因此需要筛选抗生素优势降解菌株。
(2)筛选能够降解OFL的菌株时，富集培养基中需要加入____________作为唯一碳源或氮源。用于培养菌株X的固体培养基含有水、蛋白胨、酵母提取物和琼脂等成分，其中蛋白胨主要为菌株X提供碳源、氮源和____________。
(3)过程Ⅱ、Ⅲ所利用的接种方法是____________。过程Ⅱ中的总稀释次数为8次，在过程Ⅲ中，可以每隔24 h统计一次菌落的数目，选取__________________________________________
时的记录作为结果，三个培养基中长出的菌落数量分别是145、163、154，故推测A中细菌的数量为________个·mL－1。
(4)该实验小组欲进一步探究初始OFL浓度对菌株X降解OFL能力的影响，请补充实验思路：配制等量的含一系列浓度梯度的OFL的液体培养基，将培养基灭菌后，在培养基中接种_____________________________________________________，计算出OFL去除率。
答案精析
1．A [培养基中的蛋白胨可为粘质沙雷氏菌提供碳源、氮源和维生素等，A错误；筛选最佳氮源时，培养基中每次应只添加牛肉膏、硫酸铵、硝酸钾中的一种，B正确；该培养基应在灭菌前调节pH，该培养基没有添加琼脂，是液体培养基，不能分离出粘质沙雷氏菌的单菌落，C正确；选择培养基是允许特定种类的微生物生长、同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基，该培养基中添加了NaCl，能抑制某些不耐盐的微生物的生长，属于选择培养基，D正确。]
2．B [配制固体培养基时，不需要在无菌的环境中进行，因为培养基配制好之后会进行灭菌，A错误；平板划线法只能对微生物进行分离，不能计数，C错误；纯化培养时，在培养皿皿底做标记后倒置在恒温培养箱中静置培养，这样方便观察，D错误。]
3．B [木质素降解过程使苯胺蓝培养基脱色，脱色圈直径与菌落直径比值越大，说明菌落周围的木质素被分解得越多，分解效果越好，B错误。]
4．D [若要培养菌落，通常在培养基中加入适量琼脂制成固体培养基，A正确；第①组苯浓度过高，可能超出了细菌所能承受的范围，对细菌产生毒性，抑制其生长和繁殖，导致几乎没有菌落，B正确；第④组苯浓度过低，提供的碳源不足，可能无法满足细菌生长所需，导致菌落数目少，C正确；仅根据这几组实验数据，不能确定20 g·L－1的苯浓度就是培养苯降解菌的最适浓度，还需要更多更小浓度梯度的实验来进一步确定，D错误。]
5．C [平板划线法不能用来计数，检测中用到的接种方法为稀释涂布平板法，A错误；配制培养基时，应先调节pH，再进行高压蒸汽灭菌，B错误；检测中应设一个不接种的平板作为阴性对照和一个接种大肠杆菌的平板作为阳性对照，以此来对比反映冰激凌中大肠杆菌及其数量，C正确；检测的培养基为固体培养基，大肠杆菌在该培养基上会形成深紫色且有金属光泽的菌落，D错误。]
6．C [虽然培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，圆褐固氮菌的氮源来自空气中的氮气，巨大芽孢杆菌的氮源来自培养基，A正确；实验的因变量是有机垃圾的分解量(以二者的有效菌落数为指标)，接种量比例为1∶2的有效菌落数小于接种量为1∶1的有效菌落数，故接种量比例1∶1时分解有机厨余垃圾的能力强，C错误；植物在生长的过程中要吸收一定量的含N、P的无机盐和二氧化碳等营养物质，圆褐固氮菌可独立固定空气中的氮气，且能够分泌生长素，巨大芽孢杆菌可将有机磷降解为可溶性磷，二者能为植物提供含N、P的无机盐和二氧化碳等营养物质，故两菌种的组合菌剂可制成微生物肥料施用到土壤中，提高农作物的产量，D正确。]
7．C [野生菌种经紫外线照射，与甲平板相比，乙平板上菌落多，说明过程②往培养基中添加的物质是丝氨酸，新出现的菌落为高丝氨酸营养缺陷型菌种，即菌落A是野生型菌种，菌落B为高丝氨酸营养缺陷型菌种，A错误；结合图分析可知，甲平板上只有菌落A，过程②向培养基甲中添加高丝氨酸后出现B菌落，这说明培养基甲中缺少高丝氨酸，是一种选择培养基，B错误；过程①取0.2 mL菌液进行涂布后得到的甲平板上有9个菌落，所以菌液稀释10倍后每毫升中有未突变的菌株9÷0.2＝45(个)，紫外线照射处理后的菌液中未突变的菌株数量约为450个/mL，C正确；发酵结束后，将发酵产品采取适当的提取、分离和纯化措施来获得赖氨酸产品，D错误。]
8．C [平板划线法不需要稀释，A错误；由图可知，②筛选不能在以尿素为唯一氮源的培养基上生长，而能在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌株用于后续的实验，B错误；所筛选出的菌株之所以不能利用尿素，可能是由于不产生脲酶或能分泌脲酶抑制剂，所以③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙，C正确；由图可知，甲不产生脲酶而乙可以产生脲酶，且乙同时分泌脲酶抑制剂，粪便中可能还含有其他能产生脲酶的菌株，粪便中添加菌株乙能抑制其他菌株产生的脲酶活性，所以粪便中添加菌株乙比甲更有利于NH3的减少，D错误。]
9．B [进行②过程培养时，为了防止将完全培养基中特定营养成分带入基本培养基，应先将丝绒布“复印”至基本培养基上，再“复印”至完全培养基上，B错误。]
10．(1)氮源、无机盐 聚苯乙烯 湿热灭菌(高压蒸汽灭菌)
(2)抑制其他微生物生长的同时保证目的微生物的生长，增加目的微生物的浓度 稀释涂布平板法 (3)①YT1、YT2、C1均可降解聚苯乙烯，YT1的降解能力最强，YT2的降解能力最弱 ②基因重组
解析 (2)题图中的选择培养应配制以聚苯乙烯为唯一碳源的选择培养基，且图中培养基为液体培养基，因此通过选择培养可以达到抑制其他微生物生长的同时保证目的微生物的生长，增加目的微生物的浓度的目的。题图中固体培养基上菌落分布较均匀，可判断接种方法是稀释涂布平板法。(3)①题表中实验自变量为不同菌株，因变量为聚苯乙烯的降解率，根据数据可知，三种不同菌株均可在一定程度上降解聚苯乙烯，其中降解能力大小关系为YT1＞C1＞YT2。②菌株C1的基因整合了菌株YT1的部分基因产生了C2菌株，C1和YT1中不同基因重新组合，经繁殖发育为新菌株C2，该过程发生的变异是基因重组。
11．(1)高压蒸汽灭菌 在压力为100 kPa、温度为 121 ℃的条件下，维持15～30 min (2)摇床振荡 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌 (3)对含菌株A的发酵液进行离心 上清液和无菌水 接种上清液出现抑菌圈，接种无菌水无抑菌圈，则证明菌株A通过分泌某种化学物质来抑制金黄色葡萄球菌的生长繁殖
解析 (2)菌株A为好氧性微生物，需要采用摇床震荡培养，以增加溶氧量、并与营养物质充分接触。培养过程中，可采用稀释涂布平板法计数活菌数量，其计数的原理是当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
12．(1)抗生素会抑制细菌的生长繁殖 (2)OFL 维生素 (3)稀释涂布平板法 菌落数目稳定 1.54×1011
(4)等量的菌株X，检测OFL的降解程度
解析 (1)抗生素会抑制细菌的生长繁殖，需要筛选抗生素优势降解菌株来处理废水中的抗生素。(2)筛选能够降解OFL的菌株时，富集培养基中需要加入OFL作为唯一碳源或氮源；蛋白胨主要为菌株X提供碳源、氮源和维生素。(3)过程Ⅱ、Ⅲ利用的接种方法是稀释涂布平板法，选取菌落数目稳定时的记录作为结果；A中细菌的数量为(145＋163＋154)÷3×108÷0.1＝1.54×1011(个·mL－1)。
蛋白胨5.00 g·L－1
MgCl2 5.90 g·L－1
NaHCO3 0.16 g·L－1
酵母提取物1.00 g·L－1
Na2SO4 3.24 g·L－1
KBr 0.08 g·L－1
柠檬酸铁 0.10 g·L－1
CaCl2 1.80 g·L－1
SrCl2 34.00 g·L－1
NaCl 19.45 g·L－1
KCl 0.55 g·L－1
H3BO3 22.00 g·L－1
组别
加入苯浓度/(g·L －1)
菌落数/个
菌落密度/(个·L－1)
①
200
几乎无
几乎无
②
20
60
1 200
③
2
54
1 120
④
0.2
24
450
菌株
YT1
YT2
C1
聚苯乙烯的降解率/%
0.75
0.39
0.63