四川省2024_2025学年高二生物下学期期中检测试题含解析

这是一份四川省2024_2025学年高二生物下学期期中检测试题含解析，共23页。试卷主要包含了请将答案正确填写在答题卡上等内容，欢迎下载使用。
考试时间：75 分钟
注意事项：
1．答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息
2．请将答案正确填写在答题卡上
一、单选题（共 20 题，每小题 3 分，共 60 分）
1. 如图为某地的生态工程建设模式图，下列说法正确的是（ ）
A. 该生态系统的最大优点是遵循循环原理，同时实现能量的多级利用
B. 该生态工程种植不同的农作物、果树、苗木，饲养牛、猪、鸡等多种畜禽，主要体现了生态工程的协调
原理
C. 该生态系统通过加长食物链来达到物质循环利用和再生的目的
D. 该养殖模式完全可以自给自足，无需人为补充能量
【答案】A
【解析】
【分析】生态工程遵循着整体、协调、循环、自生等生态学基本原理
【详解】A、据图可知，该生态系统的最大优点在于遵循循环原理，通过将废弃物（如人畜粪便、秸秆等）
转化为资源（如沼气、肥料），实现物质循环利用，同时，通过多级利用能量（如农作物→家畜→沼气→肥
料），提高能量利用效率，A 正确；
B、物种繁多而复杂的生态系统具有较高的抵抗力稳定性，可以在有限的资源条件下，产生或容纳更多的生
物量，提高系统生产力，可见，该生态工程种植不同的农作物、果树、苗木，饲养牛、猪、鸡等多种畜禽，
主要体现了生态工程的自生原理，B 错误；
C、物质循环利用主要通过分解者（如微生物）将有机物分解为无机物，无机物再由生产者合成为有机物，
第 1页/共 23页
进入生物群落被利用，而不是依靠加长食物链实现的，C 错误；
D、该养殖模式通常需要人为补充能量（如饲料、肥料、燃料等），难以完全自给自足，D 错误。
故选 A。
2. 为完成生态环境的保护任务，政府部门梳理出十大重点工作，包括增蓝天、保碧水、护净土、优生态等。
下列有关措施的叙述错误的是（ ）
A. 控制工业煤炭消费、减少微生物分解作用，可实现增蓝天
B. 减少生活污水排放，加强污染河流的治理，有助于保碧水
C. 开展重金属污染防控，加强农业用药管理，有助于护净土
D. 实施退耕还林还草工程，推进河湖生态修复，有助于优生态
【答案】A
【解析】
【分析】生态系统所具有的保持或恢复自身结构和功能相对稳定的能力，称为生态系统的稳定性。生态系
统之所以能维持相对稳定，是由于生态系统具有自我调节能力。该能力的基础是负反馈调节。
【详解】A、微生物的分解作用属于正常生命活动，若减少，将不利于生态系统的物质循环，A 错误；
B、减少生活污水排放，加强河流污染防治，可以降低水污染程度，有助于保碧水，B 正确；
C、重金属、农药和化肥等是进入土壤的主要污染物，土壤的污染物主要通过生物富集作用，对生物造成危
害，开展重金属污染防控，加强农业用药污染防治，有助于护净土，C 正确；
D、实施退耕还林还草工程，推进河湖生态修复，可增加物种的多样性，提高生态系统的自我调节能力，有
助于优生态，D 正确。
故选 A。
3. 下列关于生态足迹的叙述，正确的是（ ）
A. 生态足迹是指在现有技术条件下，维持某一人口单位生存所需的生产资源
B. 饮食中多摄入蔬菜，降低肉食比例，可提高能量传递效率，减小生态足迹
C. 人口不断增长后产生的废弃污染物需被生态系统吸纳和消化，会增加生态足迹
D. 提高资源利用率，发展循环经济，加强生态系统的修复可停止生态足迹的扩大
【答案】C
【解析】
【分析】生态足迹：又叫生态占用，指在现有技术条件下，维持某一人口单位（一个人、一个城市、一个
国家或全人类）生存所需的生产资源和吸纳废物的土地及水域面积。生态足迹越大，代表人类所需的资源
越多，对生态和环境的影响越大。
第 2页/共 23页
【详解】A、生态足迹是指在现有技术条件下，维持某一人口单位（一个人、一个城市、一个国家或全人类）
生存所需的生产资源和吸纳废物的土地及水域的面积，而不仅仅是生产资源，A 错误；
B、饮食中多摄入蔬菜，降低肉食比例，可减少能量在食物链中的损耗，使更多能量被人类利用，但能量传
递效率是由生态系统本身的特性决定的，一般在 10% - 20%之间，不会因饮食结构的改变而提高，B 错误；
C、人口不断增长，产生的废弃污染物增多，需要更多的土地及水域等生态系统来吸纳和消化这些污染物，
也就意味着需要更多的生态空间，从而会增加生态足迹，C 正确；
D、提高资源利用率，发展循环经济，加强生态系统的修复等措施可以减缓生态足迹的扩大速度，但由于人
口增长、经济发展等因素的存在，很难完全停止生态足迹的扩大，D 错误。
故选 C。
4. 如图为泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量与腌制时间、盐浓度的关系曲线。下列叙述合理的是（ ）
A. 腌制过程中，坛中溶液量增多的主要原因是细胞呼吸产生了水
B. 三种盐浓度下，盐浓度越高，亚硝酸盐含量的峰值出现得越早
C. 泡菜腌制 16 天时可适量食用，因为此时亚硝酸盐的含量较低
D. 盐浓度越高，亚硝酸盐含量越低，故腌制泡菜时盐浓度越高越好
【答案】C
【解析】
【分析】制作泡菜所使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型，乳酸菌在无氧条件下，将有机物分
解成乳酸，从而使泡菜出现独特的风味，过程中亚硝酸盐的含量先增加再减少。
【详解】A、腌制过程中，坛中出现溶液量增多现象的主要原因是蔬菜在盐水中失水，A 错误；
B、据图可知，三种盐浓度下，5%NaCl 下亚硝酸盐含量的峰值最大，且峰值出现最早，但该浓度是处理浓
度中的最低浓度，B 错误；
C、从图中可以看到，泡菜腌制 16 天时，三种盐浓度下亚硝酸盐的含量都较低，此时可适量食用，C 正确；
D、据图可知，并非盐浓度越高，相同时间后亚硝酸盐含量越低，且腌制泡菜时盐浓度过高会抑制乳酸菌的
发酵，导致产生的乳酸过少，所以腌制泡菜时盐浓度并不是越高越好，D 错误。
第 3页/共 23页
故选 C。
5. 酸笋是螺蛳粉的灵魂，腌酸笋季节在春季。当竹子出笋后，长出约 30cm 高时便可砍下，剥去笋壳，切
成块或是切成笋丝、笋片，放于陶罐中，清水过面，撒上适量食盐，置于阴凉处一个月左右，酸味即出，
便可随食随取。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 制作酸笋所需菌种的代谢类型是异养厌氧型
B. “清水过面”是为了创造无氧环境，减少杂菌污染
C. 为保证发酵成功，不能将鲜笋用沸水泡烫
D. 泡菜腌制过程中可以加入抗生素来抑制杂菌生长
【答案】D
【解析】
【分析】泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
【详解】A、酸笋制作依靠微生物发酵，在无氧环境下进行，说明制作酸笋所需菌种在无氧条件下能生存并
代谢，其代谢类型是异养厌氧型，A 正确；
B、“清水过面”能在陶罐内形成液封，阻挡空气进入，从而创造无氧环境，同时也能减少外界杂菌进入，降
低杂菌污染的可能性，B 正确；
C、若用沸水泡鲜笋，会杀死鲜笋表面及内部的微生物，而这些微生物是发酵制作酸笋所必需的，没有它们
发酵就无法成功，所以不能用沸水泡鲜笋，C 正确；
D、泡菜腌制过程中加入抗生素，虽然能抑制杂菌生长，但同时也会抑制参与发酵的有益微生物，导致发酵
无法正常进行，所以不能加入抗生素，D 错误。
故选 D。
6. 染料废水是一种难处理的工业废水。研究发现活性污泥中能筛选出对蓝色的 2BLN 染料（C14H9CIN2O4）
废水具有高效脱色能力的菌株﹐它们通过降解具生物毒性的分散蓝 2BLN 而降低废水危害。下图表示目标
菌株 GN—1 的筛选和脱色实验流程。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 培养基甲、乙、丙均为选择培养基，作用相同
B. 培养基乙中应以 2BLN 为唯一的碳源或氮源
C. 向培养基乙进行接种时应采用稀释涂布平板法或平板划线法
第 4页/共 23页
D. 所示菌落①至④中，菌落②或④的脱色能力最强
【答案】B
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：
①平板划线法：通过接种环在固体培养基表面连续划线操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
经过数次划线后培养，可以分离得到单菌落，这种接种方法称为平板划线法。
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、培养基甲、乙、丙均为选择培养基，培养基甲的作用是选择和扩大培养 GN—1 菌种；培养基
乙是固体培养基，作用是分离、纯化和选择菌种，培养基丙的作用是脱色实验、检验目的菌的脱色率，三
者作用不完全相同，A 错误；
B、培养基乙是选择培养基，应当以分散蓝 2BLN 为唯一氮源或碳源，B 正确；
C、向培养基乙进行接种时应采用稀释涂布平板法，C 错误；
D、透明圈越大说明该菌落中 菌株降解分散蓝 2BLN 的能力越强，故应该选取菌落③，D 错误。
故选 B。
7. 研究人员对布氏田鼠盲肠中的纤维素分解菌进行分离、鉴定，过程如图。下列说法正确的是（ ）
A. ①②③应在 95%空气和 5%氧气的气体环境中倒置培养
B. ①②③中的培养基是以纤维素为唯一碳源的选择培养基
C. 通过比较透明圈大小可知，甲、乙分解纤维素的能力相同
D. 若①②③菌落数分别为 20、37、39，则内容物中纤维素分解菌密度为 1.6×107 个/mL
【答案】B
【解析】
【分析】刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现
以纤维素分解菌为中心的透明圈，因此可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
【详解】A、分析题意，菌株是从盲肠中分离的厌氧细菌，故在平板培养时需置于厌氧环境中，A 错误；
第 5页/共 23页
B、筛选纤维素分解菌需要以纤维素为唯一碳源，B 正确；
C、需要根据菌落和透明圈之间的直径作比较来判断分解能力的大小，乙的分解能力大于甲的。C 错误；
D、若①②③菌落数分别为 20（舍弃）、37、39，则平均菌落数是 38，内容物中纤维素分解菌密度为 C/V×
M=38/0.2×105=1.9×107 个/mL，D 错误。
故选 B。
8. 谷氨酸除用于制造味精外，还可以用来治疗神经衰弱以及配制营养注射液等，我国的谷氨酸发酵在产量、
质量等方面已有了较大的提高。下列关于谷氨酸发酵的叙述，错误的是（ ）
A. 产谷氨酸量高的菌种可通过诱变育种或基因工程育种获得
B. 在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法可直接得到谷氨酸
C. 发酵过程的 pH 应控制为中性或弱碱性，不能呈现酸性
D. 发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，要随时了解发酵进程
【答案】B
【解析】
【分析】发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵，产物的分离、提
纯等方面；发酵工程以其生产条件温和、原料来源丰富且价格低廉、产物专一、废弃物对环境的污染小和
容易处理等特点，在食品工业、医药工业和农牧业等许多领域得到了广泛的应用，形成了规模庞大的发酵
工业。
【详解】A、用于发酵的菌种可以从自然界中筛选，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得，A 正确；
B、如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，即可
得到产品；但谷氨酸得获得不能采用过滤、沉淀等方法分离，B 错误；
C、环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成。例如，谷氨酸的发酵生产，
在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸，在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和 N-乙酰谷氨酰胺，C 正确；
D、发酵罐内的发酵是发酵过程的中心环节，要随时了解发酵进程，以便适时调整发酵条件，D 正确。
故选 B。
9. 苦参是中国传统中药，苦参产生的苦参碱具有调节免疫、抗癌等作用。科研人员利用苦参下胚轴进行育
苗和生物碱提取，过程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
第 6页/共 23页
A. 过程①和过程②需要适宜的温度和一定的营养条件，一般不需要光照
B. 愈伤组织由未分化的一团薄壁细胞组成，能重新分化成芽、根等器官
C. 次生代谢物苦参碱不是苦参基本生命活动所必需的，在细胞中含量很少
D. 通过植物细胞培养获得苦参碱的过程和获得苦参幼苗的过程均体现了植物细胞的全能性
【答案】D
【解析】
【分析】植物组织培养技术： 1、过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→
植株（新植体）。 2、原理：植物细胞的全能性。 3、条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、
适时的光照、pH 和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。 4、
植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖，作物脱毒等）、作物新品种的培育（单倍体
育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
【详解】A、过程①发生的是细胞的脱分化，过程②是愈伤组织的扩大培养，两过程需要适宜的温度和一定
的营养条件，不需要光照，A 正确；
B、愈伤组织是无定型状态，具有高度液泡化的薄壁细胞，已失去分化的特征，能重新分化成芽、根等器官，
B 正确；
C、苦参碱是苦参的次生代谢物，次生代谢物不是生物生长所必需的，一般在特定的组织或器官中，并在一
定的环境和时间条件下才进行，C 正确；
D、由工厂化细胞培养提取苦参碱的过程不需要完整的苦参植株，只需要进行细胞增殖在苦参细胞中提取就
可以，并未体现细胞的全能性，D 错误。
故选 D。
10. 育种工作者利用不同的方法进行了如下四组实验，下列叙述错误的是（ ）
A. 图Ⅰ过程由番茄韧皮部细胞形成幼苗 A 的过程依据的原理是植物细胞的全能性
第 7页/共 23页
B. 图Ⅱ过程中，从花粉形成幼苗 B 所进行的细胞分裂方式是减数分裂
C. 图Ⅲ、Ⅳ过程中均需对材料进行去壁处理
D. 图Ⅳ育种方式称为植物体细胞杂交
【答案】B
【解析】
【分析】题图分析：Ⅰ表示将番茄韧皮细胞进行植物组织培养形成植株 A 的过程；Ⅱ表示先花药离体培养
形成单倍体（幼苗 B），再用秋水仙素处理得到纯合体植株 B 的过程，属于单倍体育种；Ⅲ表示花粉细胞融
合形成细胞 A，再采用植物组织培养得到植株 C 的过程；Ⅳ表示采用植物体细胞杂交技术得到杂种植株 D
的过程。
【详解】A、图Ⅰ过程由番茄韧皮细胞形成幼苗 A 的过程，该过程用到了植物组织培养技术，需要经过脱
分化和再分化两个关键步骤，该过程依据的原理是植物细胞全能性，A 正确；
B、Ⅱ过程中，从花粉形成幼苗 B 所进行的细胞分裂方式是有丝分裂，B 错误；
C、Ⅲ、Ⅳ过程都存在植物细胞融合，首先都需要用酶去除细胞壁，获得原生质体，C 正确；
D、图Ⅳ过程存在植物体细胞融合以及杂种细胞发育成植物体，该育种方式称为植物体细胞杂交，D 正确。
故选 B。
11. 下图 1 为某单克隆抗体的制备流程，图 2 为图 1 过程②的具体操作。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 图 1 中制备细胞悬液时可采用机械方法或用胰蛋白酶处理
B. 过程②中筛选出的杂交瘤细胞还需要抗原刺激才能产生特异性抗体
C. 用多孔玻璃板培养和筛选杂交瘤细胞时，每个孔中尽量只接种 1 个细胞
D. 出现阳性反应的原因是抗原与抗体发生了特异性的结合
【答案】B
第 8页/共 23页
【解析】
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免
疫的 B 淋巴细胞；诱导 B 细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛
选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培
养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、图中制备细胞悬液时可采用机械方法或用胰蛋白酶（胶原蛋白酶）处理将组织分散成单个细胞，
A 正确；
B、图 1 中②为第二次筛选，筛选出的细胞具有既能无限增殖、又能产生特异性抗体的特征，无需抗原刺激
就能产生特异性抗体，B 错误；
C、为筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞，具体做法是：将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔的细胞玻璃板
上，尽量使每孔细胞不超过一个，通过培养让其增殖，C 正确；
D、图 2 表示过程②，取一定稀释倍数的杂交瘤细胞悬液加入到多孔玻璃板中，在适宜条件下培养，然后利
用抗原与抗体特异性结合的原理进行抗体检测，出现阳性反应的原因是抗原与抗体发生了特异性的结合，D
正确。
故选 B。
12. 克隆动物常用的核移植方法主要有细胞质内注射法和透明带下注射法。前者是用微型注射针将供体细胞
核吸出并注入去核卵母细胞质内；后者是直接将供体细胞注入去核卵母细胞透明带内，然后促使两个细胞
融合。“中中”和“华华”是两只出生在我国的克隆猴，下图是它们的培育流程简图。下列说法错误的是
（ ）
A. 体细胞克隆猴的成功将有效缩短我国基于克隆猴疾病模型的药物的研发周期
B. 供体细胞注入去核卵母细胞透明带内后需经诱导才能形成重构胚
C. “中中”和“华华”的遗传性状由图中的胎猴和母猴以及环境共同决定
D. 相比之下，细胞质内注射法对供体细胞核和卵母细胞的损伤更小
【答案】D
第 9页/共 23页
【解析】
【分析】动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育
成一个新的胚胎。在体外将采集到的卵母细胞培养到减数第二次分裂中期才成熟，可以通过显微操作技术
去除卵母细胞的细胞核和第一极体，核移植时，对提供细胞核和细胞质的奶牛不需要进行同期发情处理，
使用电刺激等方法可以激活重组细胞使其完成细胞分裂和发育。
【详解】A、克隆猴成功可在短时间内获得大量遗传背景相同的实验猴，能有效缩短基于克隆猴疾病模型药
物的研发周期，A 正确；
B、供体细胞注入去核卵母细胞透明带内后，还需要电融合法诱导才能使两细胞融合形成重构胚，B 正确；
C、“中中”和“华华”是由透明带下注射法形成的，核 DNA 均来自供体细胞，但质 DNA 来自去核卵母细胞和
供体细胞，因此“中中”和“华华”的遗传性状由图中的胎猴和母猴以及环境共同决定，C 正确；
D、相比细胞质内注射法，透明带下注射法不抽取供体细胞的细胞核，操作简单且对供体细胞核损伤小，同
时注射的位置是卵母细胞外的透明带，对卵母细胞的损伤更小，D 错误。
故选 D。
13. 下列有关体内受精及胚胎早期发育的叙述，错误的是（ ）
A. 精子获能是指精子摆脱精浆中物质的抑制获得受精的能力
B. 防止多精入卵的两道屏障是顶体反应和卵细胞膜反应
C. 多数哺乳动物的第一极体不进行减数分裂Ⅱ，故受精的细胞只看到两个极体
D. 胚胎开始分化的时期是囊胚期
【答案】B
【解析】
【分析】动物排出的可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到减数
第二次分裂中期时，才具备与精子受精的能力。卵母细胞的采集和培养：（1）主要方法是：用促性腺激素
处理，使其超数排卵，然后，从输卵管中冲取卵子；（2）第二种方法：从已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细
胞或直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。精子的采集和获能：（1）收集精子的方法：假阴道法、手握
法和电刺激法；（2）对精子进行获能处理：包括培养法和化学诱导法。
【详解】A、精子获能是指精子摆脱精浆中物质的抑制获得受精的能力，体外受精时采集到的成熟的精子需
要进行获能处理，A 正确；
B、防止多精入卵受精的两道屏障是透明带反应和卵黄膜封闭作用，B 错误；
C、多数哺乳动物的第一极体不进行减数分裂Ⅱ，故受精的细胞只看到两个极体，一个是第一极体，另一个
是次级卵母细胞受精时排出的一个第二极体，C 正确；
第 10页/共 23页
D、胚胎发育过程中，开始分化的时期是囊胚期，D 正确。
故选 B。
14. 下列关于“试管牛”培育流程的叙述，错误的是（ ）
A. 过程①可对供体母牛注射促性腺激素，使其排出更多的卵子
B. 过程②体外受精依赖于精、卵细胞的识别和细胞膜的流动性
C. 过程③的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
D. 代孕母牛需要进行同期发情处理，在过程③后无需进行妊娠检测
【答案】D
【解析】
【分析】分析题图：图示为“试管牛”的培养流程，其中①表示卵母细胞的采集和培养，②表示体外受精，③
表示胚胎移植。
【详解】A、在“试管牛”培育流程中，过程①为获取卵母细胞，对供体母牛注射促性腺激素，能够使其超数
排卵，排出更多的卵子，A 正确；
B、过程②是体外受精，精、卵细胞的识别依赖于细胞膜表面的糖蛋白等物质，而受精过程中精、卵细胞膜
的融合依赖于细胞膜的流动性，B 正确；
C、过程③是胚胎移植，其实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，C 正确；
D、代孕母牛需要进行同期发情处理，以使供体和受体的生理状态相同，利于胚胎移植。在过程③胚胎移植
后，需要进行妊娠检测，以确定胚胎是否在代孕母牛子宫内正常着床和发育，D 错误。
故选 D。
15. 关于“DNA的粗提取与鉴定”和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”的实验操作，下列说法错误的是（
）
A. 可以用蒸馏水使鸡的血细胞涨破，来获取富含 DNA 的滤液
B. 将提取的白色丝状物溶于 2ml/L 的 NaCl 溶液中，再加二苯胺试剂并进行沸水浴，用于鉴定 DNA
C. 电泳鉴定实验中，将温热的琼脂糖溶液迅速倒入模具后再加入核酸染料
D. 电泳时，接通电源后，待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时，停止电泳
第 11页/共 23页
【答案】C
【解析】
【分析】DNA 粗提取和鉴定的原理：（1）DNA 的溶解性：DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度 NaCl 溶液
中溶解度不同；DNA 不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。（2）DNA 的鉴定：在沸水浴的条
件下，DNA 遇二苯胺会被染成蓝色。
【详解】A、鸡血细胞含有 DNA，可以用蒸馏水使鸡 血细胞涨破，来获取富含 DNA 的滤液，A 正确；
B、将提取的白色丝状物溶于 2ml/L 的 NaCl 溶液中，再加二苯胺试剂并进行沸水浴，与 DNA 反应呈蓝色，
用于鉴定 DNA，B 正确；
C、电泳鉴定实验中，应该在微波炉中融化琼脂糖，稍冷却后加入核酸染料混匀，然后再将温热的琼脂糖溶
液迅速倒入模具，C 错误；
D、电泳时，接通电源后，待指示剂溴酚蓝前沿迁移接近凝胶边缘时，停止电泳，D 正确。
故选 C。
16. 双脱氧终止法常用来对 DNA 进行测序。其原理如图，在 4 支试管中分别加入 4 种脱氧核苷三磷酸（dNTP
）和 1 种双脱氧核苷三磷酸（ddNTP）；ddNTP 可以与 dNTP 竞争核苷酸链延长位点，并终止 DNA 片段的
延伸。在 4 支试管中 DNA 链将会分别在 A、C、G 及 T 位置中止，并形成不同长度的 DNA 片段。这些片
段随后可被电泳分开并显示出来。相关叙述错误的是（ ）
A. 这种测序方法需要引物和耐高温的 DNA 聚合酶
B. 电泳图谱中的箭头所指的 DNA 片段以胞嘧啶结尾
C. 测得未知 DNA 的序列为 5′—TCAGCTCGAATC—3′
D. ddNTP 与 dNTP 竞争的延长位点是核苷酸链的 3′末端
【答案】B
【解析】
【分析】PCR 技术：1、概念：PCR 全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定 DNA 的核酸合成
技术；2、原理：DNA 复制；3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物；4、
第 12页/共 23页
条件：模板 DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定 DNA 聚合酶(Taq 酶)；5、过程：①高温变性：DNA
解旋过程(PCR 扩增中双链 DNA 解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开)；低温复性：引物结合到
互补链 DNA 上；③中温延伸：合成子链。
【详解】A、PCR 是一种体外扩增 DNA 的技术，与细胞内 DNA 复制相似，需要一定的条件，主要包括 Taq
酶（耐高温的 DNA 聚合酶）、引物，dNTP、一定的（含 Mg2+）缓冲液和 DNA 模板，A 正确；
B、电泳图谱中的箭头所指的 DNA 片段以鸟嘌呤（G）结尾，B 错误；
C、由图可知：由下往上读出的序列是 GATTCGAGCTGA，所以原来的互补序列是 3’→5’：CTAAGCTCGACT，
测得未知 DNA 的序列为 5＇-TCAGCTCGAATC-3＇，C 正确；
D、DNA 的延伸，是通过前一个 dNTP 的 3 位碳上的羟基官能团与后一位 dNTP 的 5 位碳上的磷酸基团反
应形成磷酸二酯键来实现的。而 ddNTPs 的三位碳上没有羟基官能团，也就不能形成磷酸二酯键，从而终止
DNA 的合成。ddNTP 与 dNTP 竞争的延长位点是核苷酸链的 3’末端，D 正确。
故选 B。
17. 转基因抗虫棉的 Bt 蛋白在细胞质积累，可能与内源蛋白相互作用，产生非期望效应。C 蛋白能结合纤
维素，科研人员将 C 基因与 Bt 基因连接构建融合基因（如图）导入棉花细胞。相关叙述正确的是（ ）
A. 使用 DNA 聚合酶催化 C 基因和 Bt 基因连接
B. 选择引物 2 和 4 进行 PCR 以确定基因正确连接
C. 可通过花粉管通道法将融合基因导入棉花细胞
D. 融合基因表达可促进 Bt 蛋白在细胞膜定向积累
【答案】C
【解析】
【分析】基因工程需要四个步骤：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细
胞、目的基因的检测与鉴定；构建基因表达载体就是要让基因在受体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代；
同时，使目的基因能够表达和发挥作用，这一步是基因工程的核心工作。
【详解】A、DNA 聚合酶的功能是催化 DNA 链的延伸（如 PCR 中），而连接两个基因需要的是 DNA 连接
酶（如 T4 DNA 连接酶），因此使用 DNA 连接酶催化 C 基因和 Bt 基因连接，A 错误；
B、PCR 检测融合基因时，需选择位于两个基因外侧的引物（如 C 基因上游和 Bt 基因下游），确保仅当基
第 13页/共 23页
因正确连接时才能扩增出目标片段，因此选择引物 1 和 4 进行 PCR 才可以确定基因正确连接，B 错误；
C、花粉管通道法通过将外源 DNA 直接导入花粉管，利用受精过程将基因整合到胚胎细胞中，因此可通过
花粉管通道法将融合基因导入棉花细胞，C 正确；
D、C 蛋白能结合纤维素（主要存在于细胞壁），融合基因表达后，Bt 蛋白通过与 C 蛋白的结合被定向至细
胞壁附近，减少细胞质中的积累，从而避免非期望效应，D 错误。
故选 C。
18. 一种天然蛋白 t-PA 能高效降解因血浆纤维蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和脑血栓的急救药，但是心梗
患者注射大剂量的 t-PA 会诱发颅内出血。研究证实，将 t-PA 第 84 位的半胱氨酸（密码子：ACA）换成丝
氨酸（密码子：UCU），能显著降低其诱发出血的副作用。据此，先对天然 t-PA 基因的碱基序列进行改造，
然后再采取传统的基因工程方法表达该改造后的基因，可制造出性能优异的改良 t-PA 蛋白。下列说法正确
的是（ ）
A. 改造后的基因中决定第 84 位丝氨酸的模板链的碱基序列应设计为 AGA
B. 构建重组质粒时需要选用限制酶 XmaⅠ和 NheⅠ切割质粒 pCLY11
C. 使用 T4DNA 连接酶不能将 t-PA 改良基因与质粒 pCLY11 连接
D. 成功导入重组质粒的受体细胞在含有新霉素的培养基上能存活，且呈现蓝色
【答案】A
【解析】
【分析】1、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用 PCR 技术扩增和人工合成；
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记
基因等；
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方
第 14页/共 23页
法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将
目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；
（4）目的基因的检测与鉴定：
分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的 DNA 是否插入目的基因——DNA 分子杂交技术；②检测
目的基因是否转录出了 mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原—抗体杂交
技术；
个体水平上 鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等；
2、蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出的第二代基因工程，因为是对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白
质，所以必须通过基因修饰或基因合成实现。通过蛋白质工程生产出来的蛋白质更加符合人类生产和生活
的需要。
【详解】A、由题意可知，是将 t-PA 第 84 位的半胱氨酸（密码子：ACA）换成丝氨酸（密码子：UCU），
丝氨酸密码子为 UCU，根据碱基互补配对原则，模板链碱基序列为 AGA，A 正确；
B、根据碱基互补配对原则，t-PA 基因的左端黏性末端为 CCGG-，为 XmaⅠ酶切得到，t-PA 基因的右端黏
性末端为 GATC-，为 BglⅡ酶切得到，质粒需要用相同的酶进行酶切以得到与目的基因相同的黏性末端，因
此质粒需选用限制酶 XmaⅠ和 BglⅡ切割质粒 pCLY11，B 错误；
C、T4DNA 连接酶能连接黏性末端，还可以连接平末端，使用 T4DNA 连接酶能将 t-PA 改良基因与质粒
pCLY11 连接，C 错误；
D、t-PA 能高效降解因血浆纤维蛋白凝聚而成的血栓，成功转入重组质粒的受体细胞在培养基上会出现具有
抗性的白色菌落，D 错误。
故选 A。
19. 生物技术是以现代生命科学理论为基础，在个体、细胞分子水平上研究及制造产品或改造动物、植物、
微生物等，并使其具有所期望的品质和特性。下列叙述错误的是（ ）
A. 生物武器是用微生物、毒素、抗生素及重组致病菌等来形成杀伤力
B. 将基因编辑技术应用于生殖性克隆，不符合人类伦理道德
C. 转基因生物可能会破坏生态平衡
D. 干细胞培养在临床医学等领域前景广泛，但也可能面临安全性问题
【答案】A
【解析】
【分析】生物技术是一门涉及对生物进行研究和改造的学科。干细胞培养具有很大的应用潜力，但也存在
一些潜在的安全风险。基因改造可以改善蛋白质的性质，提高其稳定性。基因编辑技术在生殖性克隆方面
第 15页/共 23页
存在伦理道德问题。
【详解】A 、生物武器是用微生物、毒素及重组致病菌等来形成杀伤力，抗生素是一种用于治疗疾病的药
物，不是用于制造生物武器的成分，A 错误；
B、将基因编辑技术应用于生殖性克隆，会引发一系列伦理道德问题，不符合人类伦理道德，B 正确；
C、转基因生物可能具有更强 生存竞争能力，可能会破坏原有的生态平衡，C 正确；
D、干细胞培养在临床医学等领域前景广泛，比如用于治疗一些疑难疾病，但由于干细胞的分化和增殖等特
性，也可能面临安全性问题，如免疫排斥、肿瘤形成等，D 正确。
故选 A。
20. 目的基因 A 含有 100 对碱基，其中腺嘌呤占 30%，现利用目的基因 A 片段两侧的特异性序列设计引物
I、引物Ⅱ，用 PCR 技术扩增该目的基因，结构如下图所示。PCR 扩增共循环 50 次。下列说法错误的是（ ）
A. PCR 仪实质上是一台温度自动调控仪器，循环 50 次理论上复制 50 代
B. 含目的基因 A 的 DNA 片段经 PCR 循环 50 次，需要两种引物共 250 个
C. PCR 过程与体内 DNA 复制的方式相同，但是只需要一种酶的参与
D. 若只考虑目的基因 A，经 PCR 循环 50 次需要鸟嘌呤(250-1)×40 个
【答案】B
【解析】
【分析】PCR 技术：（1）概念：PCR 全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定 DNA 的核酸合
成技术。（2）原理：DNA 复制。（3）前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。（4）
条件：模板 DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定 DNA 聚合酶（Taq 酶）。（5）过程：①高温变性：
DNA 解旋过程（PCR 扩增中双链 DNA 解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；②低温复性：引
物结合到互补链 DNA 上；③中温延伸：合成子链。
【详解】A、PCR 的实质是 DNA 的半保留复制，该过程需经过高温变性、低温复性、中温延伸，PCR 仪实
质上是一台温度自动调控仪器，循环 50 次理论上复制 50 代，A 正确；
B、含目的基因 A 的 DNA 片段经 PCR 循环 50 次，产生 250 个子代 DNA，每个 DNA 分子需要 2 个引物，
亲本 DNA 除外，故需要两种引物共 251-2 个，B 错误；
C、PCR 过程与体内 DNA 复制的方式相同，都是半保留复制，但是只需要耐高温聚合酶的参与，C 正确；
第 16页/共 23页
D、由题意可知，目的基因 A 含有 100 对碱基，其中腺嘌呤占 30%，则 G 占 20%，为 40 个，若只考虑目的
基因 A，经 PCR 循环 50 次需要鸟嘌呤(250-1)×40 个，D 正确。
故选 B。
二、非选择题（共 4 小题，共 40 分）
21. 近期报道，在宜昌狱亭污水处理厂“排污口”附近，一个 90 亩的生态湿地已经建成并成功投入使用，日
均处理“污水”能力可达 2 万吨。宜昌还计划在樟村坪镇等 5 个污水处理厂的“排污口”附近建设人工湿地，栽
培芦苇、蒲草、黑藻等本土植物，并引入鲤鱼、草鱼等水生动物。据此分析回答问题：
（1）生活污水的处理一般有过滤、沉淀、厌氧发酵、氧化池氧化、脱氮磷等流程。收集的污泥加工成有机
肥后施放到农田，可为农作物的光合作用提供___________和无机盐，该人工湿地生态系统每天能处理的污
水量是一定的，说明生态系统的______________。
（2）人工湿地在改善水质、蓄洪防旱等方面具有重要作用，这体现了生物多样性的___________价值。
（3）“无废弃物农业”是我国古代传统农业的辉煌成就之一，主要体现生态工程的___________原理。
（4）在进行生态工程建设时，一定要因地制宜植树种草，这种做法主要遵循生态工程的___________原理。
【答案】（1） ①. 二氧化碳 ②. 自我调节能力是有限的
（2）间接 （3）循环
（4）协调
【解析】
【分析】初生演替是指一个从来没有被植物覆盖的地面，或者是原来存在过植被，但是被彻底消灭了的地
方发生的演替；次生演替是指原来有的植被虽然已经不存在，但是原来有的土壤基本保留，甚至还保留有
植物的种子和其他繁殖体的地方发生的演替。
【小问 1 详解】
收集的污泥加工成有机肥后施放到农田，有机肥会被土壤中的分解者分解，分解后会形成二氧化碳和无机
盐等无机物。而农作物进行光合作用时，需要二氧化碳作为原料参与光合作用的暗反应阶段，同时也需要
无机盐来保证自身的生长发育等生理过程，所以能为农作物的光合作用提供二氧化碳和无机盐。生态系统
具有自我调节能力，但是这种能力是有一定限度的，就像这个人工湿地生态系统，它每天能处理的污水量
是固定的、有限的，这就表明了生态系统自我调节能力是有限的。
【小问 2 详解】
生物多样性的价值分为直接价值、间接价值和潜在价值。间接价值是对生态系统起重要调节作用的价值，
即生态功能。潜在价值是目前人类不清楚的价值。人工湿地在改善水质、蓄洪防旱等方面对生态系统起到
了重要的调节功能，所以体现的是生物多样性的间接价值。
第 17页/共 23页
【小问 3 详解】
我国古代先民正是依靠“无废弃物农业”保证了土壤的肥力，改善了土壤结构，培育了土壤微生物，实现了土
壤养分如氮、磷、钾及微量元素的循环利用，主要体现生态工程的循环原理。
【小问 4 详解】
在进行生态工程建设时，由于不同地区的气候、地形、土壤等自然条件不同，以及社会经济发展水平等差
异，所以一定要因地制宜植树种草，充分考虑环境承载力，这种做法主要遵循生态工程的协调原理。
22. Ⅰ.酸雨主要是大气中所含的 SO2 造成的。研究人员为了获得用于烟气脱硫的脱硫细菌，进行了相关实验。
回答下列问题：
第一步：采集菌种：在某热电厂烟囱周围区域采集土样，取样用的小铁铲和盛装土样的信封在使用前都需
要灭菌。将采集的土样进行稀释处理后，接种到培养基上进行培养。
第二步：分离目的菌：将目的菌转移到含少量无菌水的锥形瓶中，边搅拌边持续通入 SO2，驯化几分钟后接
种到固体培养基上，待长出菌落后再重复上述步骤，并逐步延长通 SO2 的时间，与此同时逐步降低培养基
的 pH。由此分离得到的目的菌具有较强的_______的能力。
第三步：活菌计数：为获得大量目的菌用于生产，在培养过程中需连续取样进行计数。
第四步：检测目的菌对抗生素的敏感性：取该单菌落适当稀释后的液体 2 滴，接种于固体培养基表面，并
用涂布器使菌液均匀分布。在 37℃培养箱中培养 24 小时后，将大小相同且分别含有不同抗生素的圆纸片均
匀置于该平板的不同位置，再培养一段时间，结果如下图所示（圆纸片周围的白色区域表示没有菌落分布），
据此实验结果推测，五种抗生素中对该菌抑制作用最强的是______（填数字和名称）。
Ⅱ.我国美食文化源远流长，其中利用发酵技术制作的各种特色食品，如泡菜、果醋等充分展示了中国人民
的勤劳智慧。请回答下面有关发酵工程的问题：
（1）补全第二步横线处的内容______。
（2）补全第四步横线处的内容______。
第 18页/共 23页
（3）泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有温度、______（答 2 点即可）。
（4）在果酒制作的基础上继续制作果醋，需改变的条件是：①______②______。
（5）果醋家庭作坊式制作转向大型工厂化生产需要解决的实际问题有：________（答 2 点即可）。
【答案】（1）利用 SO2、耐酸
（2）⑤青霉素 （3）食盐用量、腌制时间等
（4） ①. 不断通入氧气 ②. 温度调整为 30-35℃
（5）原料的来源与选择，菌种的选育与培养，发酵条件的自动化控制，发酵产品质量的检测与控制，成本
价格等
【解析】
【分析】在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个单个菌落就是一个纯化的
细菌菌落。微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，
划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最
后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经
培养后可形成单个菌落。
【小问 1 详解】
根据提供信息：通入 SO2，逐步降低培养基的 pH，在这种环境下筛选出的目的菌具有利用 SO2、耐酸的特
点。
【小问 2 详解】
从图中可知，抑菌圈越大说明该抗生素对细菌的抑制作用越强。观察图中五种抗生素形成的抑菌圈，青霉
素周围的抑菌圈最大，所以对该菌抑制作用最强的抗生素是青霉素。
【小问 3 详解】
在泡菜制作过程中，影响亚硝酸盐含量的因素有很多，其中食盐用量和腌制时间是比较重要的因素。食盐
用量过低，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加；腌制时间过短，亚硝酸盐含量也较高，随着腌制
时间延长，亚硝酸盐含量会先增加后降低，所以横线处的内容为食盐用量、腌制时间等。
【小问 4 详解】
果酒制作是利用酵母菌无氧呼吸产生酒精，而果醋制作是利用醋酸菌在有氧条件下将酒精转化为醋酸；同
时醋酸菌生长的适宜温度是 30−35℃，而酵母菌发酵产生果酒的适宜温度一般是 18−25℃，所以需改变的
条件是：不断通入氧气，温度调整为 30-35℃。
【小问 5 详解】
果醋家庭作坊式制作转向大型工厂化生产需要考虑多方面实际问题。原料方面，要解决原料的来源与选择
第 19页/共 23页
问题，保证原料的供应和质量；菌种方面，要进行菌种的选育与培养，获得优良菌种；生产过程控制方面，
要实现发酵条件的自动化控制、发酵产品质量的检测与控制；另外成本价格等也是需要考虑的。
23. 为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体—药物偶联物
（ADC），过程如图 1 所示。
（1）本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自______。
（2）步骤①常用方法包括_______融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。
（3）步骤②的细胞必须经过步骤③______和______才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，符合要求的杂交
瘤细胞的特点是________。
（4）研究发现，抗体—药物偶联物（ADC）通过将具有生物活性的小分子药物与单克隆抗体结合，实现了
对肿瘤细胞的选择性杀伤，其在患者体内的作用如图 2 所示。ADC 依靠______（填“a”或“b”）最终作用于
乳腺癌细胞的______，导致细胞凋亡。与直接使用抗肿瘤药物相比，构建抗体—药物偶联物（ADC）对人
体的副作用更小，原因是______。
【答案】（1）人的乳腺癌细胞
（2）PEG/聚乙二醇
（3） ①. 克隆化培养 ②. 抗体检测 ③. 既能大量增殖，又能产生特定抗体
（4） ①. b ②. 细胞核 ③. 将药物送到肿瘤部位，对肿瘤进行特异性杀伤
【解析】
【分析】由图 1 可知，①表示动物细胞的融合，②表示利用选择培养基筛选杂交瘤细胞，③表示克隆化培
养和专一抗体检测。由图 2 可知，ADC 不识别正常细胞，识别并结合乳腺癌细胞。
第 20页/共 23页
【小问 1 详解】
要生产乳腺癌的单克隆抗体，应该选择人的乳腺癌细胞作为抗原对小鼠进行免疫处理。
【小问 2 详解】
分析图 1 可知，①表示动物细胞的融合，常用化学药物 PEG 处理，诱导细胞融合；病毒表面含有的糖蛋白
和一些酶能够与细胞膜上糖蛋白发生作用，使细胞相互凝聚，细胞膜上的蛋白质和脂质分子重新排布，细
胞膜打开，细胞发生融合。
【小问 3 详解】
②表示利用选择培养基筛选杂交瘤细胞，杂交瘤细胞产生的抗体不一定是需要的，故需要进行③克隆化培
养和抗体检测；符合要求的杂交瘤细胞的特点是杂交瘤细胞具有无限增殖，且能产生特定抗体；杂交瘤细
胞可以在体外或小鼠腹腔内培养。
【小问 4 详解】
由图可知，ADC 进入乳腺癌细胞，溶酶体可以将 ADC 水解，释放出的药物 b 进入细胞质基质，最终作用
于细胞核，引起乳腺癌细胞的凋亡。因为将药物送到肿瘤部位，对肿瘤进行特异性杀伤（靶点清楚，毒副
作用小），故与直接使用抗肿瘤药物相比，构建抗体—药物偶联物（ADC），对人体的副作用更小。
24. 聚合酶链式反应（PCR）是一种用于扩增特定 DNA 片段的分子生物学技术，它可看作生物体外的特殊
DNA 复制，PCR 的最大特点是能使微量的 DNA 大幅增加。回答下列问题：
（1）利用 PCR 扩增 DNA 时，子链 DNA 的延伸方向是_______；若一个基因在 PCR 中经过 n 轮循环，则
需要________种引物，理论上共需要消耗_______个引物。
（2）反向 PCR 是通过已知序列设计引物对未知序列进行扩增的技术，其过程如图 1 所示。据图 1 中的过程
①②可知，碱基序列 L 左侧和 R 右侧的部分碱基序列应_______；其中已知序列如图 2 所示，请写出需要的
引物序列：________（写出 6 个碱基即可）。
第 21页/共 23页
（3）利用电泳鉴定 PCR 产物时，在凝胶中 DNA 分子的迁移速率与_______（答出 1 点）等有关。电泳鉴
定的结果如图 3 所示，请分析产生这个结果的可能原因：_______（答出 2 点）。
【答案】（1） ①. 5'→3' ②. 2 ③. 2n+1-2
（2） ①. 相同 ②. 5'-GCCTCT-3'，5'-ATAGTT-3'（顺序可颠倒）
（3） ①. 凝胶的浓度、DNA 分子的大小和构象（答出 1 点即可） ②. 引物设计不合理，它们与非
目的序列有同源性或容易聚合形成二聚体；复性温度过低；TaqDNA 聚合酶的质量不好（答出 2 点且合理即
可）
【解析】
【分析】PCR 技术：
1、概念： PCR 全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定 DNA 的核酸合成技术。
2、原理： DNA 复制。
3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。
第 22页/共 23页
4、条件：模板 DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定 DNA 聚合酶( Taq 酶) 。5,过程：①高温变性：
DNA 解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链 DNA 上；③中温延伸：合成子链。 PCR 扩增中双链 DNA
解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。
【小问 1 详解】
PCR 扩增时，应分别以 DNA 的两条链为模板合成新的子链 DNA，DNA 复制时子链的延伸方向为 5'→3'。
DNA 有 2 条单链，所以需要 2 种引物，一个基因在 PCR 中经过 n 轮循环，一共得到 2n 个 DNA，总共有 2n
+1 条单链，除去 2 条模板链，每条新的单链都需要 1 个引物，故理论上共需要消耗（2n+1-2）个引物。
【小问 2 详解】
根据图 1 可知，要将 DNA 片段 L 和 R 相连接，这两个片段被限制酶切割后需要有相同的黏性末端，所以 L
左侧和 R 右侧需要有相同的碱基序列。由于是反向 PCR，所以引物的方向是已知基因序列由中间向两侧的
5'→3'方向，模板为已知基因序列由中间向两侧的 3'→5'方向片段，再根据碱基互补配对原则可写出引物，
即 5'-GCCTCT-3'，5'-ATAGTT-3'。
【小问 3 详解】
利用电泳鉴定 PCR 产物时，在凝胶中 DNA 分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA 分子的大小和构象等有关；
根据电泳出的条带数量和长度可判断 PCR 的准确性，图 3 显示待测样品扩增结果不止一个条带，可能的原
因有：引物设计不合理，它们与非目的序列有同源性或容易聚合形成二聚体；复性温度过低；TaqDNA 聚合
酶的质量不好等。
第 23页/共 23页