人教版高中生物选修3 1-2《微生物的培养技术及应用》学与练 无答案

这是一份人教版高中生物选修3 1-2《微生物的培养技术及应用》学与练 无答案，共26页。
1.2.1微生物的培养技术及应用Part1目标任务：对接课标，了解目标Part2预习导学：自主梳理+预习检测，掌握基本知识点Part3探究提升：代入情景+典例精讲，深入学习知识要点 酵母菌的纯培养Part4网络梳理：建立知识间的联系Part5强化训练：必刷经典试题，能力提升内容导航自主梳理微生物的基本培养技术研究和应用微生物的前提是 。在实验室培养微生物，一方面要为人们需要的微生物提供合适的 条件;另一方面要确保 无法混入，并将 。一、培养基的配制1．概念：人们按照微生物对______的不同需求，配制出供其_______的营养基质。2. 作用：用以 、 、 、 微生物或积累其代谢物——培养基。3．种类： 、 ；微生物在琼脂固体培养基表面或内部生长，可以形成肉眼可见的 。4．培养基的组成：各种培养基一般都含有 、 、 和无机盐等营养物质，此外还需要满足微生物生长对 、 以及 的需求。例如培养乳酸杆菌时，需要添加 ；培养霉菌时需要将培养基调至 ；培养细菌时需要将培养基调至 ；培养厌氧微生物时需要提供 的条件。二、无菌技术1．获得纯净的微生物培养物的关键：防止 。无菌技术应围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括 和 。2.消毒(1)概念：指使用较为 的物理、化学或 等方法杀死物体表面或内部 微生物。(2)适用对象：操作的 、操作者的 和手等。(3)常用方法： 消毒（在 消毒 或 处理 ，可以杀死牛奶中的绝大多数微生物且基本不会破坏牛奶的营养成分）、 消毒（在100℃煮沸5-6分钟）等。3.灭菌(1)概念：指使用 的理化方法杀死物体内外 的微生物，包括 和 。(2)适用对象：用于微生物培养的 、 用具和 等。(3)常用方法： 灭菌（微生物的接种工具，如 、 、 或其他金属工具， 、 等易被污染的部位）、 灭菌（耐高温的和 的物品）和 （ 的效果最好，一般用于 的灭菌）灭菌等。三、微生物的纯培养1.概念：在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的 的群体称为培养物。由 繁殖所获得的微生物群体称为 ，获得 的过程就是纯培养。 2.纯培养步骤： 、 、 、 预习检测（限时10分钟）1．下列不属于微生物生长所需营养物质的是（    ）A．琼脂 B．碳源 C．氮源 D．无机盐2．琼脂在培养基中的作用是（    ）A．碳源 B．氮源 C．凝固剂 D．生长因子3．下列叙述正确的是（    ）A．微生物的培养基中都必须加入碳源、氮源、无机盐、水及特殊营养物质B．无菌技术包括对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌C．微生物的生长除受营养因素影响外，还受pH、氧气、渗透压的影响D．固体培养基中的琼脂可为微生物的生长提供能量4．消毒和灭菌是两个不同的概念。下列哪些事物适用于消毒处理？（    ）①皮肤②饮用水③牛奶④注射器⑤培养皿⑥接种环⑦培养基⑧果汁⑨接种室⑩手术刀A．①②③⑧⑨ B．④⑤⑥⑦⑩ C．①②③④⑧ D．以上全部5．微生物培养都需要无菌操作，下列不适宜干热灭菌的是（    ）A．吸管 B．培养皿C．金属用具 D．用于培养的微生物6．如图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是（    ）A．对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌处理B．步骤①待培养基温度降至40℃左右进行倒平板操作C．步骤③每次划线前和划线后都需要对接种环灼烧灭菌D．步骤③划线结束后在皿盖上标注菌种及接种日期等信息7．采用平板法培养微生物的过程中，使微生物均匀分布在培养基上需要用到的工具是（    ）A．接种环 B．涂布器 C．接种针 D．移液管8．下图为平板划线法接种微生物的示意图，下列说法错误的是（    ）A．观察或比较各种细菌菌落形态的最佳区域是④B．划线时要注意不能将④区域的划线与①区域相连C．每次划线后，都应将接种环放在酒精灯火焰上灼烧D．划线结束时即可看到划线末端出现不连续单菌落探究提升► 酵母菌的纯培养【情景材料】分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，这就是菌落。采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。下面，我们尝试在马铃薯琼脂培养基上进行酵母菌的纯培养。目的要求1.学会配制培养酵母菌的培养基并倒平板。2.学会进行无菌操作3.尝试通过平板划线操作来获得纯化的酵母菌菌落材料用具酵母菌培养液、马铃薯、葡萄糖(或蔗糖 )、琼脂、蒸馏水、天平、小刀、纱布.烧杯、锥形瓶、棉塞、牛皮纸(或报纸).皮筋、培养皿、接种环、酒精灯、超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、干热灭菌箱和恒温地养箱等。方法步骤1.制备培养基配制培养基 称取去皮的马铃薯200g.切成小块，加水1000 mL，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入20 g葡萄糖(也可用蔗糖代替)、15~20g琼脂用蒸留水定容至1000mL。灭菌 将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，再放入高压蒸汽灭菌锅中，在压力为100 kPa、温度为121C的条件下，灭菌15~30 min。将58套培养皿包成一包用几层牛皮纸包紧，放入干热灭菌箱内，在160~170C灭菌2h。倒平板 待培养基冷却至50C左右时在酒精灯火焰附近倒平板。倒平板的具体操作步骤如下。制作传统泡菜是利用植物体表面天然的乳酸菌来进行发酵的。发酵期间，乳酸会不断积累，当它的质量分数为0.4%~0.8%时，泡菜的口味、品质最佳。2.接种和分离酵母菌通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养，可以分离得到单菌落。3.培养酵母菌完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放人28C左右(培养温度因酵母菌种类的不同而稍有差异)的恒温培养箱中培养。【问题探究】1.为什么倒平板和接种整个过程要在酒精灯火焰旁进行？2.平板冷却凝固后，要将平板倒放过来的原因。3.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？4.怎么确定所倒平板未被杂菌污染或灭菌彻底？5.取菌种前、每次划线前、接种结束后接种环都要进行灼烧灭菌原因分别是什么？6.在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线的原因？7.在第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线的原因是？8.为什么最后一次划线与第一次的划线不能相连？要点归纳1.培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。2.培养基按照物理性质可分为液体培养基 半固体培养基和固体培养基。在液体培养基中加入凝固剂琼脂（是从红藻中提取的一种多糖，在配制培养基中用作凝固剂）后，制成琼脂固体培养基。微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。根据菌落的特征可以判断是哪一种菌。液体培养基应用于工业或生活生产，固体培养基应用于微生物的分离和鉴定，半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。3.按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。4.碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的物质。如CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳源。5.氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如N2、NH3、NO3-、NH4+（无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。只有固氮微生物才能利用N2。6.菌和消毒的主要方法和应用范围7.无菌技术可用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还能有效避免操作者自身被微生物感染。8.做好消毒和灭菌工作后，要注意避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。为了避免周围环境中微生物的污染，接下来许多操作都应在超净工作台上并在酒精灯火焰附近进行。（酒精灯火焰附近是无菌区域，在其附近操作可以避免周围环境中微生物的污染。）【注意问题】高压蒸汽灭菌的2个注意点(1)高压蒸汽灭菌开始之前要将锅内的冷空气排尽。因为空气的膨胀压大于水蒸气的膨胀压，所以，当水蒸气中含有空气时，在同一压力下，含空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度。(2)灭菌完毕后，要待压力降到0时才能打开排气阀。否则会导致锅内压力突然下降，使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口，造成棉塞沾染培养基而发生污染。典例精讲【例1】获取纯净微生物的关键在于无菌技术，主要包括消毒和灭菌。下列关于无菌技术的叙述错误的是（    ）A．牛奶一般通过100℃煮沸5~6min来消毒B．紫外线照射30min可以杀死物体表面的微生物C．吸管和培养皿通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌D．接种环、试管口、棉塞通过灼烧灭菌法进行灭菌【例2】下列有关细菌纯化培养的说法，不正确的是（    ）A．实验操作者接种前要用70％的酒精棉球擦手消毒B．每次划线后接种环要在酒精灯火焰上灼烧灭菌C．培养基上的单个菌落都是一个细菌细胞的克隆D．分离并纯化硝化细菌时，培养基中需要添加氮源无需添加碳源【例3】下列关于实验室培养和纯化酵母菌过程中的部分操作，说法错误的是（    ）A．紫外线照射前，适量喷洒石炭酸等消毒液，可以加强消毒效果B．配制培养基、倒平板、接种均需要在酒精灯火焰旁进行C．连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面D．转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线【例4】下列有关微生物培养基制备的叙述，正确的是（    ）A．培养基配方中都含有碳源、氮源、水、无机盐及琼脂等成分B．在微生物的实验室培养中，培养皿可用体积分数为70%的酒精擦拭灭菌C．在熔化琼脂时，需要控制火力并不断搅拌，以免发生糊底D．倒平板时需将培养基冷却至室温，再在酒精灯火焰旁倒平板【例5】下列关于平板划线法和稀释涂布平板法的叙述，错误的是（    ）A．倒平板操作应等培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近进行B．这两种方法均需同时将接种的平板和未接种的平板倒置进行培养C．这两种方法都能在固体培养基上得到单菌落D．用平板划线法分离菌种，划线五个区域，接种环需要灼烧灭菌5次【例6】防止杂菌入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是（　　）A．实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒B．无菌技术中，若处理对象为液体，则只能消毒，不能灭菌C．若培养皿皿盖和皿底之间溅有培养基，则不宜用此培养基培养大肠杆菌D．使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境【例7】为了观察手掌上附着的微生物，某同学制作培养基，将自己的手掌在配制的牛肉膏蛋白胨固体培养基上轻轻按压后，盖上培养皿盖，将平板倒置放在恒温培养箱中培养48h，结果如图所示。与此实验相关的叙述错误的是（　　）  A．培养结果显示出手掌上布满了菌落B．待灭菌后的培养基冷却至50℃左右后，再进行倒平板C．在超净工作台上和酒精灯火焰旁进行操作，是为了防止杂菌污染D．手掌在牛肉膏蛋白胨固体培养基上轻轻按压属于接种操作【例8】如图为平板划线法接种微生物的示意图。下列说法正确的是（    ）  A．倒平板后需要间歇晃动培养皿，以保证表面平整B．划线时，将培养皿盖完全打开后再进行划线C．每次划线后，都要将接种环放在酒精灯火焰上灼烧D．观察或比较各种细菌菌落形态的最佳区域是①1．关于微生物的营养，下列说法正确的是（    ）A．同一种物质不可能既作为碳源又作为氮源B．凡是碳源都能提供能量C．除水以外的无机物仅提供无机盐D．无机氮源也可能提供能量2．培养微生物需要提供适宜的培养基。下列关于培养微生物的培养基的叙述，错误的是（    ）A．培养基为目标微生物提供适宜的生长环境B．培养基的成分需根据微生物的代谢特点而定C．培养基需满足各种微生物生长繁殖的需求D．培养基通常需包含水、无机盐、碳源、氮源等营养物质3．下列有关微生物的纯培养、分离及计数的叙述，正确的是（    ）A．培养基配方中都含有碳源、氮源、水、无机盐及琼脂等成分B．用纤维素为唯一氮源的培养基可以选择分离出尿素分解菌C．用稀释涂布平板法统计的样品活菌数目往往与实际数目多D．平板划线法通过连续划线将聚集的菌种分散，但不宜用于计数4．下表是培养某种微生物的培养基配方，以下说法正确的是（    ）A．该培养基中含有碳源、氮源、水和无机盐四类物质B．该培养基可用来培养硝化细菌，不能用来培养酵母菌C．该培养基在培养硝化细菌时，需要密封D．要用该培养基培养酵母菌，需要加入葡萄糖作为氮源5．下图为微生物实验室培养的有关操作，下列叙述正确的是（    ）A．图中接种方法是平板划线法，培养霉菌时需将培养基的pH调至中性或弱碱性B．图示操作的正确步骤是：d→b→f→a→e→c→h→gC．步骤d为灭菌操作，需将接种工具灼烧至变红，本次操作一共进行了5次步骤dD．该过程使用的是固体培养基，接种前需要对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和灭菌6．无菌技术是获得纯净微生物培养物的关键。下列相关叙述正确的是（　　）A．实验过程中所有器皿、培养基及生物材料均需进行灭菌处理B．酒精能使细胞中的蛋白质变性失活，70%的酒精用来灭菌效果最好C．试管口、瓶口等易被污染的部位，接种时可通过火焰灼烧来灭菌D．不耐高温的牛奶可使用巴氏消毒法，其优点是能够杀死全部微生物，保留牛奶风味7．灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是（    ）A．为了防止杂菌污染，应将配制好的选择培养基分装到培养皿中再进行高压蒸汽灭菌B．配制培养基、倒平板、接种均需要在酒精灯火焰旁进行C．为防止蛋白质变性，不能用高压蒸汽灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌D．可用干热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌8．研究人员采用下图所示方法获得高耐酒精的高产醋酸菌，相关叙述错误的是（　　）  A．制备的醋酸菌培养基属于液体培养基B．接种时所用的甘蔗渣需灭菌处理C．振荡培养可使菌体与营养物质充分接触D．纯化培养过程可采用稀释涂布平板法接种9．分散的微生物在适宜的固体培养基表面繁殖形成的肉眼可见的、有一定形态结构的细胞群体，称为纯培养物。获取纯培养物的常用方法是平板划线法和稀释涂布平板法。下列有关这两种方法的说法，错误的是（    ）A．这两种方法的关键都是要防止杂菌污染以保证获得培养物的纯度B．这两种方法均需同时将接种的平板和未接种的平板倒置进行培养C．接种环和涂布器均需要在火焰上灼烧，且涂布器灼烧前需用酒精引燃D．用稀释涂布平板法统计菌落数目时，所获得的数据往往比实际值大10.研究人员从市售酸奶中分离出一种叫嗜热链球菌(St)的细菌,为了便于培养和纯化,首先制备甲酚绿(BCG)牛乳培养基:将脱脂乳粉100 g加入500 mL蒸馏水中,再加入1.6%的BCG乙醇溶液(一种指示剂)1 mL,高压蒸汽灭菌(80~90 ℃)20 min,即得溶液A。将酵母膏(富含蛋白质和B族维生素等)10 g,琼脂20 g,蒸馏水500 mL,分别配制成pH为5.5和7.0的溶液,121 ℃高压蒸汽灭菌20 min,即得溶液B。以无菌操作将A、B两溶液等体积混合均匀,倒于平板,待冷凝后置于37 ℃恒温培养箱中倒置培养24 h,若无杂菌生长,即可使用。然后通过平板划线法进行培养和纯化。根据以上材料回答问题:(1)BCG培养基从物理性质分类属于　　　　培养基。(2)加入酵母膏的目的是　　　　　　　　　　　　。(3)常用的灭菌方法除了材料中提到的高压蒸汽灭菌外,还有　　　　　、　　　　　。(4)下列示意图中正确的操作顺序为　　　　。(5)每次划线前灼烧接种环是为了　　　　　　　　　　　　　,在第二次以及后面的划线操作时,总是从　　　　　　　　开始划线,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。(6)倒平板中的平板指的是　　　　　　　　。11.11.某同学配制含琼脂的牛肉膏蛋白胨培养基后,对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌,当培养基温度下降到50 ℃时,在酒精灯火焰附近倒平板,待培养基冷却至室温,按如表处理:将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养2~3天,观察每个培养皿中的菌落特征和数目。回答下列问题:(1)上述实验的实验目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　。若E组的培养基表面有菌落生长,说明　　　　　　　　　　。(2)培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为微生物生长分别提供　　　　和　　　　　。“在酒精灯火焰附近”进行相关操作是为了　　　　　　　　　　　　　　。(3)实验过程特别强调温度控制,请简要说明下列温控措施的目的:①“待培养基冷却至室温”的目的有　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。②“将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养”的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。(4)培养微生物时将培养皿倒置的目的是　　　　　　　　　　　　　　。实验结束后,对使用过的培养基应进行　　　　　处理。1.2.1微生物的培养技术及应用Part1目标任务：对接课标，了解目标Part2预习导学：自主梳理+预习检测，掌握基本知识点Part3探究提升：代入情景+典例精讲，深入学习知识要点 酵母菌的纯培养Part4网络梳理：建立知识间的联系Part5强化训练：必刷经典试题，能力提升内容导航自主梳理微生物的基本培养技术研究和应用微生物的前提是防止杂菌污染，获得纯净的微生物培养物。在实验室培养微生物，一方面要为人们需要的微生物提供合适的营养和环境条件;另一方面要确保其他微生物无法混入，并将需要的微生物分离出来。一、培养基的配制1．概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。2. 作用：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物——培养基。3．种类：固体培养基、液体培养基；微生物在琼脂固体培养基表面或内部生长，可以形成肉眼可见的菌落。4．培养基的组成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质，此外还需要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及O2的需求。例如培养乳酸杆菌时，需要添加维生素；培养霉菌时需要将培养基调至酸性；培养细菌时需要将培养基调至中性或弱碱性；培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件。二、无菌技术1．获得纯净的微生物培养物的关键：防止杂菌污染。无菌技术应围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括消毒和灭菌。2.消毒(1)概念：指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。(2)适用对象：操作的空间、操作者的衣着和手等。(3)常用方法：巴氏消毒（在62-65℃消毒30分钟或80-90℃处理30秒-1分钟，可以杀死牛奶中的绝大多数微生物且基本不会破坏牛奶的营养成分）、煮沸消毒（在100℃煮沸5-6分钟）等。3.灭菌(1)概念：指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。(2)适用对象：用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等。(3)常用方法：灼烧灭菌（微生物的接种工具，如涂布器、接种环、接种针或其他金属工具，试管口、瓶口等易被污染的部位）、干热灭菌（耐高温的和需要保持干燥的物品）和湿热（高压蒸汽灭菌的效果最好，一般用于培养基的灭菌）灭菌等。三、微生物的纯培养1.概念：在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体称为培养物。由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，获得纯培养物的过程就是纯培养。 2.纯培养步骤：配制培养基、灭菌、接种、分离和培养 。预习检测（限时10分钟）1．下列不属于微生物生长所需营养物质的是（    ）A．琼脂 B．碳源 C．氮源 D．无机盐【答案】A【详解】微生物生长所需要的营养物质主要有碳源、氮源、水、无机盐、特殊营养物质等。琼脂是凝固剂，不是微生物生长所需的营养物质，A错误，BCD正确。故选A。2．琼脂在培养基中的作用是（    ）A．碳源 B．氮源 C．凝固剂 D．生长因子【答案】C【详解】琼脂是以藻类的石花菜及江篱、紫菜等制成的明胶产品，为最常用的微生物培养基的固化剂，琼脂的特性加热在85℃以上可溶解于水，冷却至28-35℃则形成凝胶。因此可以作为制作培养基的凝固剂。故选C。3．下列叙述正确的是（    ）A．微生物的培养基中都必须加入碳源、氮源、无机盐、水及特殊营养物质B．无菌技术包括对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌C．微生物的生长除受营养因素影响外，还受pH、氧气、渗透压的影响D．固体培养基中的琼脂可为微生物的生长提供能量【答案】C【详解】A、培养基不一定都含有碳源、氮源，如培养自养型微生物的培养基中不需加入碳源，分离自生固氮菌的培养基中，不需加入氮源，A错误；B、操作者的衣着和手只能进行消毒，不能灭菌，要考虑物体的耐受程度，B错误；C、对于微生物的生长来说，在营养物质供应充分的基础上，pH适宜、渗透压浓度适宜及适宜的氧气对于其生长繁殖都是有利的，C正确；D、琼脂属于凝固剂，不能为微生物提供能量，D错误。故选C。4．消毒和灭菌是两个不同的概念。下列哪些事物适用于消毒处理？（    ）①皮肤②饮用水③牛奶④注射器⑤培养皿⑥接种环⑦培养基⑧果汁⑨接种室⑩手术刀A．①②③⑧⑨ B．④⑤⑥⑦⑩ C．①②③④⑧ D．以上全部【答案】A【详解】ABCD、①皮肤应进行酒精消毒，②饮用水应进行氯气消毒，③牛奶应进行巴氏消毒，④注射器应进行灭菌，⑤培养皿应进行干热灭菌，⑥接种环应进行灼烧灭菌，⑦培养基应进行湿热灭菌，⑧果汁应进行消毒，⑨接种室应进行紫外线消毒，⑩手术刀应进行灭菌。综上所述，需要进行消毒的是①②③⑧⑨，BCD错误，A正确。故选A。5．微生物培养都需要无菌操作，下列不适宜干热灭菌的是（    ）A．吸管 B．培养皿C．金属用具 D．用于培养的微生物【答案】D【详解】A、吸管一般为玻璃材质的，需要干燥，能耐高温的，适合用干热灭菌，A错误；B、培养皿一般为玻璃材质的，需要干燥，能耐高温的，适合用干热灭菌，B错误；C、金属用具需要干燥，能耐高温的，适合用干热灭菌，C错误；D、用于培养的微生物不能用干热灭菌，会被杀死，D正确。故选D。6．如图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是（    ）A．对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌处理B．步骤①待培养基温度降至40℃左右进行倒平板操作C．步骤③每次划线前和划线后都需要对接种环灼烧灭菌D．步骤③划线结束后在皿盖上标注菌种及接种日期等信息【答案】C【详解】A、对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒处理，而非灭菌，灭菌通常用较强的理化方法杀死所有微生物，培养基以及培养皿进行灭菌，A错误；B、待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，B错误；C、平板划线法每次划线前后都需要对接种环灼烧灭菌，C正确；D、划线结束后在培养皿底部标注菌种及接种日期等信息，D错误。故选C。7．采用平板法培养微生物的过程中，使微生物均匀分布在培养基上需要用到的工具是（    ）A．接种环 B．涂布器 C．接种针 D．移液管【答案】B【详解】采用平板法培养微生物的过程中，采用稀释涂布平板法培养微生物，使微生物均匀分布在培养基上需要用到的工具是涂布器，B符合题意。故选B。8．下图为平板划线法接种微生物的示意图，下列说法错误的是（    ）A．观察或比较各种细菌菌落形态的最佳区域是④B．划线时要注意不能将④区域的划线与①区域相连C．每次划线后，都应将接种环放在酒精灯火焰上灼烧D．划线结束时即可看到划线末端出现不连续单菌落【答案】D【详解】A、④区域的划线与①区域没有相连，根据箭头方向，可知④区域是最后划线区域，由于随着在平板上连续划线，菌体数量越来越少，故观察或比较各种细菌菌落形态的最佳区域是④，A正确；B、划线时要注意不能将④区域的划线与①区域相连，才能达到分离的效果，B正确；C、图中所示的4次划线后，都应将接种环放在酒精灯上灼烧，其中前三次划线结束后的灼烧是为了杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端，使每次划线菌种数目减少，最后一次灼烧是为了杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者，C正确；D、划线结束后，将培养皿倒置放在一定温度的恒温培养箱中培养一定时间后，可看到划线末端出现不连续单菌落，D错误。故选D。► 酵母菌的纯培养【情景材料】分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，这就是菌落。采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。下面，我们尝试在马铃薯琼脂培养基上进行酵母菌的纯培养。目的要求1.学会配制培养酵母菌的培养基并倒平板。2.学会进行无菌操作3.尝试通过平板划线操作来获得纯化的酵母菌菌落材料用具酵母菌培养液、马铃薯、葡萄糖(或蔗糖 )、琼脂、蒸馏水、天平、小刀、纱布.烧杯、锥形瓶、棉塞、牛皮纸(或报纸).皮筋、培养皿、接种环、酒精灯、超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、干热灭菌箱和恒温地养箱等。方法步骤1.制备培养基配制培养基 称取去皮的马铃薯200g.切成小块，加水1000 mL，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入20 g葡萄糖(也可用蔗糖代替)、15~20g琼脂用蒸留水定容至1000mL。灭菌 将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，再放入高压蒸汽灭菌锅中，在压力为100 kPa、温度为121C的条件下，灭菌15~30 min。将58套培养皿包成一包用几层牛皮纸包紧，放入干热灭菌箱内，在160~170C灭菌2h。倒平板 待培养基冷却至50C左右时在酒精灯火焰附近倒平板。倒平板的具体操作步骤如下。制作传统泡菜是利用植物体表面天然的乳酸菌来进行发酵的。发酵期间，乳酸会不断积累，当它的质量分数为0.4%~0.8%时，泡菜的口味、品质最佳。2.接种和分离酵母菌通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养，可以分离得到单菌落。3.培养酵母菌完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放人28C左右(培养温度因酵母菌种类的不同而稍有差异)的恒温培养箱中培养。【问题探究】1.为什么倒平板和接种整个过程要在酒精灯火焰旁进行？2.平板冷却凝固后，要将平板倒放过来的原因。3.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？4.怎么确定所倒平板未被杂菌污染或灭菌彻底？5.取菌种前、每次划线前、接种结束后接种环都要进行灼烧灭菌原因分别是什么？6.在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线的原因？7.在第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线的原因是？8.为什么最后一次划线与第一次的划线不能相连？【答案】1. 避免杂菌污染2. 既可以防止水分过快蒸发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。3. 不能 空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。4. 将所倒平板放入37℃的恒温箱中培养12h～24h，观察是否有菌落存在以确定是否被污染或灭菌是否彻底。5. 杀死接种环上原有微生物；杀死上次划线时残留菌种，使下一次划线的菌种直接来源上次划线的末端，从而使每次划线时菌种数目逐渐减少直至得到单个细胞；杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者6. 以免接种环温度太高，杀死菌种。7. 使酵母菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细胞繁殖而来的菌落。8. 因为最后一次划线已经将细菌稀释成单个的细胞，如果与第一次划线相连则增加了细菌的数目，得不到纯化的效果。要点归纳1.培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。2.培养基按照物理性质可分为液体培养基 半固体培养基和固体培养基。在液体培养基中加入凝固剂琼脂（是从红藻中提取的一种多糖，在配制培养基中用作凝固剂）后，制成琼脂固体培养基。微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。根据菌落的特征可以判断是哪一种菌。液体培养基应用于工业或生活生产，固体培养基应用于微生物的分离和鉴定，半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。3.按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。4.碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的物质。如CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳源。5.氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如N2、NH3、NO3-、NH4+（无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。只有固氮微生物才能利用N2。6.菌和消毒的主要方法和应用范围7.无菌技术可用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还能有效避免操作者自身被微生物感染。8.做好消毒和灭菌工作后，要注意避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。为了避免周围环境中微生物的污染，接下来许多操作都应在超净工作台上并在酒精灯火焰附近进行。（酒精灯火焰附近是无菌区域，在其附近操作可以避免周围环境中微生物的污染。）【注意问题】高压蒸汽灭菌的2个注意点(1)高压蒸汽灭菌开始之前要将锅内的冷空气排尽。因为空气的膨胀压大于水蒸气的膨胀压，所以，当水蒸气中含有空气时，在同一压力下，含空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度。(2)灭菌完毕后，要待压力降到0时才能打开排气阀。否则会导致锅内压力突然下降，使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口，造成棉塞沾染培养基而发生污染。典例精讲【例1】获取纯净微生物的关键在于无菌技术，主要包括消毒和灭菌。下列关于无菌技术的叙述错误的是（    ）A．牛奶一般通过100℃煮沸5~6min来消毒B．紫外线照射30min可以杀死物体表面的微生物C．吸管和培养皿通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌D．接种环、试管口、棉塞通过灼烧灭菌法进行灭菌【答案】A【详解】A、牛奶不耐高温，牛奶的消毒应采用巴氏消毒法，即在62-65℃条件下消毒30分钟或在80-90℃条件下处理30s～1分钟，A错误；B、接种室、接种箱或超净工作台在使用前，可用紫外线照射30min进行消毒，以杀死物体表面或空气中的微生物，B正确；C、吸管和培养皿通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，也可用干热灭菌法进行，C正确；D、接种环、试管口、棉塞等实验中频繁使用的常使用灼烧灭菌法，D正确。故选A。【例2】下列有关细菌纯化培养的说法，不正确的是（    ）A．实验操作者接种前要用70％的酒精棉球擦手消毒B．每次划线后接种环要在酒精灯火焰上灼烧灭菌C．培养基上的单个菌落都是一个细菌细胞的克隆D．分离并纯化硝化细菌时，培养基中需要添加氮源无需添加碳源【答案】C【详解】A、对操作者的衣着和手要进行消毒，一般实验操作者接种前要用70%的酒精棉球擦手消毒，A正确；B、最后一个划线区之前接种时，每次划线后接种环要在酒精灯火焰上灼烧灭菌，杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端，使每次划线菌种数目减少。最后一个区划线结束后接种环要在酒精灯火焰上灼烧灭菌，防止菌种污染环境，B正确；C、培养基上的单个菌落也可能由两个连在一起的细菌细胞分裂而来，C错误；D、硝化细菌为化能自养型微生物，分离并纯化硝化细菌时，培养基中需要添加氮源无需添加碳源，D正确。故选C。【例3】下列关于实验室培养和纯化酵母菌过程中的部分操作，说法错误的是（    ）A．紫外线照射前，适量喷洒石炭酸等消毒液，可以加强消毒效果B．配制培养基、倒平板、接种均需要在酒精灯火焰旁进行C．连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面D．转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线【答案】B【详解】A、紫外线照射前，适量喷洒石炭酸等消毒液，可以加强消毒效果，有利于获得纯净培养物，A正确；B、倒平板、接种均需要在酒精灯火焰旁进行，配制培养基可以不在酒精灯火焰附近进行，配制好的培养基再进行灭菌，B错误；C、连续划线的目的是通过该操作将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，从而获得单菌落，C正确；D、转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线，以免接种环上残留菌种，这样可以保证划线的菌种来自上一次划线的末端，D正确。故选B。【例4】下列有关微生物培养基制备的叙述，正确的是（    ）A．培养基配方中都含有碳源、氮源、水、无机盐及琼脂等成分B．在微生物的实验室培养中，培养皿可用体积分数为70%的酒精擦拭灭菌C．在熔化琼脂时，需要控制火力并不断搅拌，以免发生糊底D．倒平板时需将培养基冷却至室温，再在酒精灯火焰旁倒平板【答案】C【详解】A、培养基配方中一般都含有碳源、氮源、水、无机盐等成分，琼脂是制作固体培养基所需要的凝固剂，不属于营养成分，A错误；B、在微生物的实验室培养中，培养皿可用干热灭菌法灭菌，B错误；C、在熔化琼脂时，需要控制火力并不断搅拌，否则会导致糊底，影响培养基的质量，C正确；D、倒平板时需要将培养基冷却到50℃左右时，才能用来倒平板，需要在酒精灯火焰旁进行倒平板的操作，防止杂菌污染，D错误。故选C。【例5】下列关于平板划线法和稀释涂布平板法的叙述，错误的是（    ）A．倒平板操作应等培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近进行B．这两种方法均需同时将接种的平板和未接种的平板倒置进行培养C．这两种方法都能在固体培养基上得到单菌落D．用平板划线法分离菌种，划线五个区域，接种环需要灼烧灭菌5次【答案】D【详解】A、由于温度过高会烫手，温度过低培养基又会凝固，所以倒平板操作应等培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近进行，防止杂菌污染，A正确；B、为验证培养基是否被污染或灭菌是否合格，两种方法均需同时将接种的平板和未接种的平板倒置，在培养箱中进行培养，B正确；C、平板划线法和稀释涂布平板法是微生物常见的接种方法，都能在固体培养基上得到由单个细胞形成的单菌落，C正确；D、用平板划线法分离菌种，划线五个区域，每次接种之前需要灼烧接种环灭菌，最后划线完成也需要灼烧灭菌，共6次，D错误。故选D。【例6】防止杂菌入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是（　　）A．实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒B．无菌技术中，若处理对象为液体，则只能消毒，不能灭菌C．若培养皿皿盖和皿底之间溅有培养基，则不宜用此培养基培养大肠杆菌D．使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境【答案】B【详解】A、接种室、接种箱或超净工作台在使用前，可以用紫外线照射30 min，以杀死物体表面或空气中的微生物，在照射前，适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可以加强消毒效果，A正确；B、无菌技术中，若处理的液体对象为牛奶，则可使用巴氏消毒法，若处理的液体对象为液体培养基，则需要对其灭菌后才能接种微生物，B错误；C、若培养皿皿盖和皿底之间溅有培养基，则可能会导致杂菌污染，不宜用此培养基培养大肠杆菌，C正确；D、使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境，D正确。故选B。【例7】为了观察手掌上附着的微生物，某同学制作培养基，将自己的手掌在配制的牛肉膏蛋白胨固体培养基上轻轻按压后，盖上培养皿盖，将平板倒置放在恒温培养箱中培养48h，结果如图所示。与此实验相关的叙述错误的是（　　）  A．培养结果显示出手掌上布满了菌落B．待灭菌后的培养基冷却至50℃左右后，再进行倒平板C．在超净工作台上和酒精灯火焰旁进行操作，是为了防止杂菌污染D．手掌在牛肉膏蛋白胨固体培养基上轻轻按压属于接种操作【答案】A【详解】A、将自己的手掌在配制的牛肉膏蛋白胨固体培养基上轻轻按压后，手上的微生物转移到培养基上，经过培养形成了菌落，因此培养结果显示出手掌上布满了微生物，A错误；B、待高温灭菌后的培养基冷却至50℃左右后，再进行倒平板，该温度为刚好不烫手的温度，且表现为液态，因而可以进行倒平板操作，B正确；C、在超净工作台上和酒精灯火焰旁进行操作，目的是防止杂菌污染，因为该部位属于无菌区，C正确；D、手掌在牛肉膏蛋白胨固体培养基上轻轻按压属于接种操作，可将手上的微生物转移到培养基上，D正确。故选A。【例8】如图为平板划线法接种微生物的示意图。下列说法正确的是（    ）  A．倒平板后需要间歇晃动培养皿，以保证表面平整B．划线时，将培养皿盖完全打开后再进行划线C．每次划线后，都要将接种环放在酒精灯火焰上灼烧D．观察或比较各种细菌菌落形态的最佳区域是①【答案】C【详解】A、倒平板后，不需要间歇晃动培养皿，A错误；B、划线时，将培养皿盖打开一条缝后再进行划线，以防杂菌污染，B错误；C、每次划线后，都要将接种环放在酒精灯火焰上灼烧，进行灭菌，C正确；D、划线是从区域①开始的，随着在平板上连续划线，菌体数目越来越少，因此，观察或比较各种细菌菌落形态的最佳区域是④，D错误。故选C。1．关于微生物的营养，下列说法正确的是（    ）A．同一种物质不可能既作为碳源又作为氮源B．凡是碳源都能提供能量C．除水以外的无机物仅提供无机盐D．无机氮源也可能提供能量【答案】D【详解】A、对异养微生物来说，含C、H、O、N的化合物既是碳源又是氮源，A错误；B、CO2是光能自养细菌的碳源，但不能提供能量，B错误；C、CO2和N2是无机物，也是微生物的碳源和氮源，C错误；D、硝化细菌所利用的氮源是无机氮源——氨，同时氨也为硝化细菌提供用于化能合成作用的能量，D正确。故选D。2．培养微生物需要提供适宜的培养基。下列关于培养微生物的培养基的叙述，错误的是（    ）A．培养基为目标微生物提供适宜的生长环境B．培养基的成分需根据微生物的代谢特点而定C．培养基需满足各种微生物生长繁殖的需求D．培养基通常需包含水、无机盐、碳源、氮源等营养物质【答案】C【详解】A、培养基中含有微生物生长需要的营养物质，还能满足微生物生长对环境的要求，A正确；B、根据微生物的代谢特点，配制培养基的成分，同时还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质的需要，B正确；C、培养基是根据不同微生物的生长繁殖需求进行配制的，不能满足各种微生物生长繁殖的需求，C错误；D、培养基中一般含有水、碳源、氮源、无机盐，有些还需要加入特殊营养物质等，D正确。故选C。3．下列有关微生物的纯培养、分离及计数的叙述，正确的是（    ）A．培养基配方中都含有碳源、氮源、水、无机盐及琼脂等成分B．用纤维素为唯一氮源的培养基可以选择分离出尿素分解菌C．用稀释涂布平板法统计的样品活菌数目往往与实际数目多D．平板划线法通过连续划线将聚集的菌种分散，但不宜用于计数【答案】D【详解】A、培养基配方中一般都含有碳源、氮源、水、无机盐等成分，琼脂是制作固体培养基所需要的凝固剂，A错误；B、用纤维素为唯一碳源的培养基可以选择分离出纤维素分解菌，用尿素为唯一氮源的培养基可以选择分离出尿素分解菌，B错误；C、利用稀释涂布平板法计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落，所以统计结果比活菌实际数目低，C错误；D、平板划线法通过连续划线将聚集的菌种分散，但平板划线法不能对微生物进行计数，D正确。故选D。4．下表是培养某种微生物的培养基配方，以下说法正确的是（    ）A．该培养基中含有碳源、氮源、水和无机盐四类物质B．该培养基可用来培养硝化细菌，不能用来培养酵母菌C．该培养基在培养硝化细菌时，需要密封D．要用该培养基培养酵母菌，需要加入葡萄糖作为氮源【答案】B【详解】A、分析题表可知，该培养基中不含有碳源，A错误；B、由A分析可知，该培养基中不含有碳源，而酵母菌是异养生物，硝化细菌是自养生物，其可以利用空气中CO2来合成有机物，因此该培养基可用来培养硝化细菌，不能用来培养酵母菌，B正确；C、硝化细菌需要利用空气中的CO2来合成有机物，因此该培养基在培养硝化细菌时，不能密封，C错误；D、要用该培养基培养酵母菌，需要加入葡萄糖作为碳源，D错误。故选B。5．下图为微生物实验室培养的有关操作，下列叙述正确的是（    ）A．图中接种方法是平板划线法，培养霉菌时需将培养基的pH调至中性或弱碱性B．图示操作的正确步骤是：d→b→f→a→e→c→h→gC．步骤d为灭菌操作，需将接种工具灼烧至变红，本次操作一共进行了5次步骤dD．该过程使用的是固体培养基，接种前需要对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和灭菌【答案】B【详解】A、由图可知，图中接种方法是平板划线法，培养霉菌时要将培养基的pH调至酸性，A错误；B、图示操作的正确步骤是：d将接种环灭菌→b取棉塞→f将试管口靠近酒精灯火焰→a取菌种→e塞棉塞→c接种→h划线→g培养，B正确；C、步骤d为灭菌操作，需将接种工具灼烧至变红，由图h可知，本次操作一共进行了5次划线，每次划线前均需对接种环进行灭菌，最后一次接种后还需对接种环灭菌，以免感染操作者或污染环境，即共进行了6次步骤d，C错误；D、该过程使用的是固体培养基，接种前需要对实验操作的空间、操作者的衣着进行清洁和灭菌，对操作者的手进行消毒，D错误。故选B。6．无菌技术是获得纯净微生物培养物的关键。下列相关叙述正确的是（　　）A．实验过程中所有器皿、培养基及生物材料均需进行灭菌处理B．酒精能使细胞中的蛋白质变性失活，70%的酒精用来灭菌效果最好C．试管口、瓶口等易被污染的部位，接种时可通过火焰灼烧来灭菌D．不耐高温的牛奶可使用巴氏消毒法，其优点是能够杀死全部微生物，保留牛奶风味【答案】C【详解】A、微生物培养的器皿、接种用具和培养基等均需要灭菌，生物材料依据情况消毒或灭菌，A错误；B、酒精能使细胞中的蛋白质变性失活，酒精用于消毒，不是灭菌，B错误；C、将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌，C正确；D、消毒是指用比较温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程，D错误；故选C。7．灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是（    ）A．为了防止杂菌污染，应将配制好的选择培养基分装到培养皿中再进行高压蒸汽灭菌B．配制培养基、倒平板、接种均需要在酒精灯火焰旁进行C．为防止蛋白质变性，不能用高压蒸汽灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌D．可用干热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌【答案】D【详解】A、配制好的选择培养基应先进行高压蒸汽灭菌然后再进行倒平板操作，即分装到培养皿，A错误；B、配置好的培养基需要灭菌，故配制培养基不需要在酒精灯火焰旁进行，倒平板、接种均需要在酒精灯火焰旁进行，B错误；C、一般用高压蒸汽灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌，防止杂菌污染，C错误；D、可用高压蒸汽灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌，也可用干热灭菌法进行，D正确。故选D。8．研究人员采用下图所示方法获得高耐酒精的高产醋酸菌，相关叙述错误的是（　　）  A．制备的醋酸菌培养基属于液体培养基B．接种时所用的甘蔗渣需灭菌处理C．振荡培养可使菌体与营养物质充分接触D．纯化培养过程可采用稀释涂布平板法接种【答案】B【详解】A、制备的醋酸菌培养基的成分中没有琼脂，可判断属于液体培养基，A正确；B、自然发酵的甘蔗渣不能灭菌，灭菌时甘蔗渣中的酒精就挥发了，不能将高耐酒精的高产醋酸菌筛选出来，B错误；C、振荡培养可使菌体与营养物质充分接触，有利于菌体的繁殖，C正确；D、纯化培养过程可采用稀释涂布平板法或平板划线法接种醋酸菌，都能使微生物纯化，D正确。故选B。9．分散的微生物在适宜的固体培养基表面繁殖形成的肉眼可见的、有一定形态结构的细胞群体，称为纯培养物。获取纯培养物的常用方法是平板划线法和稀释涂布平板法。下列有关这两种方法的说法，错误的是（    ）A．这两种方法的关键都是要防止杂菌污染以保证获得培养物的纯度B．这两种方法均需同时将接种的平板和未接种的平板倒置进行培养C．接种环和涂布器均需要在火焰上灼烧，且涂布器灼烧前需用酒精引燃D．用稀释涂布平板法统计菌落数目时，所获得的数据往往比实际值大【答案】D【详解】A、获得纯培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，故两种纯化方法都要防止杂菌污染，A正确；B、为验证培养基是否被污染，两种方法均需同时将接种的平板和未接种的平板倒置，在培养箱中进行培养，B正确；C、接种环和涂布器均需要在火焰上灼烧，接种环可直接灼烧灭菌，涂布器要沾少量酒精在火焰上引燃进行灼烧灭菌，C正确；D、当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故用稀释涂布平板法进行微生物的计数时，所获得的数据往往比实际值小，D错误。故选D。10.研究人员从市售酸奶中分离出一种叫嗜热链球菌(St)的细菌,为了便于培养和纯化,首先制备甲酚绿(BCG)牛乳培养基:将脱脂乳粉100 g加入500 mL蒸馏水中,再加入1.6%的BCG乙醇溶液(一种指示剂)1 mL,高压蒸汽灭菌(80~90 ℃)20 min,即得溶液A。将酵母膏(富含蛋白质和B族维生素等)10 g,琼脂20 g,蒸馏水500 mL,分别配制成pH为5.5和7.0的溶液,121 ℃高压蒸汽灭菌20 min,即得溶液B。以无菌操作将A、B两溶液等体积混合均匀,倒于平板,待冷凝后置于37 ℃恒温培养箱中倒置培养24 h,若无杂菌生长,即可使用。然后通过平板划线法进行培养和纯化。根据以上材料回答问题:(1)BCG培养基从物理性质分类属于　　　　培养基。(2)加入酵母膏的目的是　　　　　　　　　　　　。(3)常用的灭菌方法除了材料中提到的高压蒸汽灭菌外,还有　　　　　、　　　　　。(4)下列示意图中正确的操作顺序为　　　　。(5)每次划线前灼烧接种环是为了　　　　　　　　　　　　　,在第二次以及后面的划线操作时,总是从　　　　　　　　开始划线,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。(6)倒平板中的平板指的是　　　　　　　　。【答案】(1)固体　(2)为细菌的生长提供蛋白质和维生素　(3)干热灭菌　灼烧灭菌　(4)ADBEC　(5)杀死接种环上残留的菌种　上一次划线的末端　使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少　(6)冷却凝固后的固体培养基【详解】(1)BCG培养基制作时加入了琼脂,因此其从物理性质上看,属于固体培养基。(2)酵母膏富含蛋白质和维生素等营养成分,能为细菌的生长提供蛋白质和维生素。(3)常用的灭菌方法有湿热灭菌(高压蒸汽灭菌)、干热灭菌和灼烧灭菌等。(4)根据平板划线操作流程可知,示意图中正确的操作顺序为ADBEC。(5)每次划线前灼烧接种环是为了杀死接种环上残留的菌种。在第二次以及后面的划线操作时,总是从上一次划线的末端开始划线,原因是使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,达到分离菌株的目的。(6)倒平板中的平板是冷却凝固后的固体培养基。11.某同学配制含琼脂的牛肉膏蛋白胨培养基后,对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌,当培养基温度下降到50 ℃时,在酒精灯火焰附近倒平板,待培养基冷却至室温,按如表处理:将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养2~3天,观察每个培养皿中的菌落特征和数目。回答下列问题:(1)上述实验的实验目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　。若E组的培养基表面有菌落生长,说明　　　　　　　　　　。(2)培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为微生物生长分别提供　　　　和　　　　　。“在酒精灯火焰附近”进行相关操作是为了　　　　　　　　　　　　　　。(3)实验过程特别强调温度控制,请简要说明下列温控措施的目的:①“待培养基冷却至室温”的目的有　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。②“将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养”的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。(4)培养微生物时将培养皿倒置的目的是　　　　　　　　　　　　　　。实验结束后,对使用过的培养基应进行　　　　　处理。【答案】(1)探究不同高度空气中微生物的种类和数量　平板灭菌不合格(受到杂菌污染)　(2)碳源　氮源　避免周围环境中微生物的污染　(3)①使培养基凝固,防止培养基温度过高杀死接种在其上的微生物　②让微生物在适宜的温度下生长(繁殖)　(4)防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上(污染培养基和破坏菌落)　灭菌【详解】(1)题述实验中的自变量是打开培养皿盖的培养皿距地面的高度,因此该实验的实验目的是探究不同高度空气中微生物的种类和数量。若E组的培养基表面有菌落生长,说明平板灭菌不彻底(受到杂菌污染)。(2)培养基中的牛肉膏提供的主要营养物质是碳源、磷酸盐和维生素等,蛋白胨提供的主要营养物质是氮源和维生素等,而微生物的生长需要的营养物质主要是碳源和氮源。“在酒精灯火焰附近”进行相关操作是为了避免周围环境中微生物的污染。(3)①“待培养基冷却至室温”的目的是使培养基凝固,防止培养基温度过高杀死接种在其上的微生物。②“将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养”的目的是让微生物在适宜的温度下生长(繁殖)。(4)培养微生物时将培养皿倒置的目的是防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上,污染培养基和破坏菌落。实验结束后,对使用过的培养基应进行灭菌处理。新课程标准学习目标1.阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的前提。2.阐明无菌技术是在操作过程中，保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术。3.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物。1.明确微生物培养的关键，掌握培养基配制的基础知识。2.讨论并掌握无菌技术的实验操作方法。 3.讨论并掌握微生物的纯培养的方法。成分NH4NO3KH2PO4CaCl2FeSO4维生素蒸馏水含量0.5g3.0g0.5g0.5g少许定容至1000ml组别处理A组打开培养皿盖,距地面0.3米处暴露15分钟B组打开培养皿盖,距地面0.6米处暴露15分钟C组打开培养皿盖,距地面0.9米处暴露15分钟D组打开培养皿盖,距地面1.2米处暴露15分钟E组不打开培养皿盖新课程标准学习目标1.阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的前提。2.阐明无菌技术是在操作过程中，保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术。3.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物。1.明确微生物培养的关键，掌握培养基配制的基础知识。2.讨论并掌握无菌技术的实验操作方法。 3.讨论并掌握微生物的纯培养的方法。成分NH4NO3KH2PO4CaCl2FeSO4维生素蒸馏水含量0.5g3.0g0.5g0.5g少许定容至1000ml组别处理A组打开培养皿盖,距地面0.3米处暴露15分钟B组打开培养皿盖,距地面0.6米处暴露15分钟C组打开培养皿盖,距地面0.9米处暴露15分钟D组打开培养皿盖,距地面1.2米处暴露15分钟E组不打开培养皿盖