高中生物人教版 (新课标)选修3《现代生物科技专题》动物细胞融合与单克隆抗体教学课件ppt

这是一份高中生物人教版 (新课标)选修3《现代生物科技专题》动物细胞融合与单克隆抗体教学课件ppt，共34页。PPT课件主要包含了动物单个细胞的获得，两个细胞正在融合，受精作用，形成单核的杂交细胞，细胞膜的流动性，诱导方式，杂种细胞，愈伤组织，杂种植株，植物细胞A等内容，欢迎下载使用。
1、抗体是由何种细胞产生的？
2、抗体是如何产生的？
3、一种B淋巴细胞能产生几种抗体？
动物细胞虽然没有细胞壁，但细胞间的连接方式多样而复杂，在进行有效的细胞融合之前，也必需获得单个分散的细胞。
细胞融合是正常的生命活动
指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。
物理法：离心、振动、电激
化学法：聚乙二醇（PEG)
生物法：灭活的病毒（例如：仙台病毒）
该实验证明：细胞膜的流动性
融合后的细胞进行有丝分裂
注意：动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细胞。
为什么灭活的病毒能作为诱导剂？因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。不灭活的病毒能作为诱导剂吗？不能，因为不灭活的病毒会感染细胞，而不能诱导细胞融合。
意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。
应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段 特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体
已成功的动物细胞融合实例还有哪些？
生物种类 成功年代 酵母菌—鸡 1975年人—胡萝卜 1976年人—小鼠 1978年
总结：比较植物体细胞杂交和动物细胞融合
细胞膜的流动性、植物细胞的全能性
用纤维素酶、果胶酶去壁
主要用于制备单克隆抗体
抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。
“克隆”从英文“clne”音译而来，是指从一个共同祖先，通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的DNA分子，细胞或个体。在细胞水平指动物细胞培养.
3．每一个B淋巴细胞只能产生一种抗体。
1．B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生抗体。
2．动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。
该法制备抗体的特点：产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。
抗体的传统生产方法及缺陷是什么？
思 考：如何获取某种特定抗体？
由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。
那么，如何大量获得化学性质单一、特异性强的抗体？（即单克隆抗体）　
在体外，一个B淋巴细胞是不可能无限增殖的。　
提示1：仅用细胞培养技术可行吗？
提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？
提示3：有什么方法能使B细胞产生抗体的能 力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？
大量生产单克隆抗体思路
1.B淋巴细胞具产生抗体的功能2.骨髓瘤细胞具无限增殖的特性3.利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和骨髓瘤细胞特性的杂交瘤细胞4.利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞
细胞融合 筛选（选择性培养基）
克隆培养、抗体检测、多次筛选
足够数量、能分泌单一抗体的细胞群
杂交瘤细胞（B-瘤细胞）
足量单一类型杂交瘤细胞
纯度高，特异性强，灵敏度高，产量大
1、本过程利用了哪些原理？
免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理
2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？
这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体。
诱导其融合的方法有哪些？
融合后培养液中有几种细胞
怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞有何优点
大量增殖杂交瘤细胞获得单抗的方法
两种亲本细胞融合的混合物中可能有多种类型细胞，筛选的目的是获得优良的杂种细胞。
1）亲本 2）同核体：同源原生质体的融合体3）异核体：非同源的原生质体的融合体4）多核体：含有双亲不同比例 核物质的融合体5）异胞质体：具有不同胞质来源的杂合细胞。6）核质体：有细胞核而带有少量细胞质的亚原生质体
动物细胞的筛选方式（特定培养基）：
1）利用抗药性筛选系统：利用生物细胞对药物敏感性差异筛选杂种细胞。
2）营养互补筛选系统：细胞在缺乏一种或几种营养成分时，不能生长繁殖，即营养缺陷型细胞。利用两种亲本细胞营养互补作用原理可以筛选杂种细胞。
3）温度敏感突变型杂种细胞的筛选：一般的培养细胞能在32度到40度的范围内生长，但温度敏感突变型的细胞能在高温或低温下生长。由此筛选杂种细胞。
优点：准确、高效、简易、快速
②用于治疗疾病和运载药物（主要用于癌症治疗，也可运载药物，如 “生物导弹”）
（导向作用，作为载体，生物导弹=单克隆抗体+药物，治疗肿瘤）（位置准确、疗效高、副作用小）
一个诱导细胞融合的新方法－－灭活病毒
一个新细胞－－杂交瘤细胞
一个优势－－单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势
1.动物细胞工程技术的基础是（ ）A．动物细胞融合B．胚胎移植C．动物细胞培养D．核移植
2.动物细胞融合和植物原生质融合决定于（ ） A.细胞膜的流动性B．细胞膜的选择透过性 C.细胞质的流动性D．细胞质酶的活性
3.只能使动物细胞融合的常用诱导方（ ） A．PEG　　 B．灭活的病毒C．电刺激 D．离心
4.用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（ ）A.将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞B.用氯化钙作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合C.筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体D.该杂交瘤细胞株的增殖方式和产物分别是有丝分裂和单克隆抗体
5．在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（　　）A．结果是相同的B．杂种细胞的形成过程基本相同C．操作过程中酶的作用相同D．诱导融合的手段相同
6.“生物导弹”是指（ ）A．单克隆抗体 B．产生特定抗体的B淋巴细胞C．杂交瘤细胞 D．在单克隆抗体上连接抗癌药物