高中生物人教版 (新课标)选修1《生物技术实践》微生物的实验室培养评课课件ppt

这是一份高中生物人教版 (新课标)选修1《生物技术实践》微生物的实验室培养评课课件ppt，共49页。PPT课件主要包含了基础知识，一培养基，液体培养基，表面生长，均匀混浊生长，沉淀生长，固体培养基，半固体培养基，培养基的用途，无菌技术的概念等内容，欢迎下载使用。
到目前为止，几十项Nbel生理学和医学奖，化学奖都与微生物学有关
微生物的实验室培养技术，是完成微生物相关研究的基础，在实验室中如何对微生物进行培养呢？
1.通过阅读教材，结合观看培养基的相关素材，认识有关培养基的基础知识。2.通过观看无菌操作视频，结合教师详细讲解，能够掌握无菌操作技术。3.通过观看实验视频，结合实际实验操作，能够完成纯化大肠杆菌的操作。
（1）按物理状态来分：培养基可分为固体培养基和液体培养基。固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等。（2）按功能来分，可分为选择培养基和鉴别培养基。（3）按成分来分，可分为天然培养基和合成培养基。
1.培养基的类型和用途
无动力 有动力(弥散)
2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方
3.不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、和氮源、 无机盐等营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
液体培养基：增菌、工业生产固体培养基：纯化（分离），　　　　　　鉴定、活菌计数、　　　　　　保藏菌种半固体培养基：动力检测
（1）消毒定义：　　利用化学或物理方法，杀死大部分致病微生物的过程。区分为高程度消毒、中程度消毒、低程度消毒三种方式。
2.消毒与灭菌的概念及两者的区别
（2）灭菌的定义： 以化学剂或物理方法消灭所有微生物，包括所有细菌的繁殖体、芽孢、霉菌及病毒，而达到完全无菌之过程。
3.常用的消毒与灭菌的方法
b.干热灭菌：160-170℃下加热1-2h。c.高压蒸气灭菌：100kPa、121℃下维持15-30min.
(一)制备牛肉膏蛋白胨培养基
1．计算、称量 2．溶化3．调pH：pH7.6　4．过滤：这一步可以省去。5．分装：分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。6．加塞 7．包扎
8．灭菌: 将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌锅，在压力为100kPa、温度为121℃，灭菌15～30min。将培养皿用旧报纸包裹，放入干热灭菌箱内，在160～170℃下灭菌2h。
A.将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拨出棉塞。
B.右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰。
C.用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基(约10~20mL)倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖
D.等待平板冷却凝固大约需5~10min。然后，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上。
9．倒平板: 待培养基冷却到50 ℃左右时，在酒精灯附近倒平板。2d后观察平板，无杂菌污染才可用来接种。10．无菌检查： 将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时，以检查灭菌是否彻底。
1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？
答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。
2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？
答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。
3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？
答：空气中微生物可能在皿盖与皿底之间培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。
1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？
答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。
2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？
答：以免接种环温度太高，杀死菌种。
3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？
答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
各梯度分别涂布3个平板
涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？
应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。
（一）培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2 d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。
（二）接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。
（三）是否进行了及时细致的观察与记录 培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同，及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察到其他一些细微的变化。这一步的要求主要是培养学生良好的科学态度与习惯。
试管固体斜面培养基上，4℃，菌种易被污染、变异
甘油管藏，1ml甘油＋1ml菌液，－20℃
制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
计算、称量、溶化、灭菌、倒平板
1．下列叙述正确的是（ ）A.为微生物的生长繁殖提供营基质的是固体培养基 B.培养基只有两类:液体培养基和固体培养基C.固体培养基中加入少量水可制成液体培养基 D.微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的菌落
A.氮源物质为该微生物提供必须的氮素B.碳源物质也是该微生物的能源物质C.无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D.水是该微生物的营养物质之一
2．不同微生物对营养物质的需求各不相同，下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是（ ）
3．下列关于消毒和灭菌的说法，不正确的是（ ）A.灭菌是指杀死环境中的一切微生物的细胞、芽胞和孢子B.消毒和灭菌实质上是相同的C.接种环用灼烧的方法灭菌 D.常用消毒方法有煮沸法、紫外线法、化学药品法
4.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是（ ）
A.计算、称量、倒平板、溶化、灭菌B.计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C.计算、称量、溶化、灭菌、倒平板D.计算、称量、灭菌、溶化、倒平板