江苏省南京市六校联考2024-2025学年高二下学期5月期中生物试卷（解析版）

这是一份江苏省南京市六校联考2024-2025学年高二下学期5月期中生物试卷（解析版），共26页。试卷主要包含了单项选择题，多项选择题，非选择题等内容，欢迎下载使用。
1. 下列有关细胞的物质基础和结构基础的叙述中，正确的是 （ ）
A. DNA和脱氧核糖的元素组成均为C、H、O、N、P
B. 组成细胞的各种元素大多以化合物形式存在
C. 病毒的主要成分是核酸和蛋白质，蛋白质在其核糖体上合成
D. 溶酶体合成各种水解酶时，需要线粒体提供能量来源
【答案】B
【分析】化合物的元素组成：①糖类：C、H、O；②脂质：C、H、O，磷脂还含有少量的N、P；③蛋白质：C、H、O、N，少量含有S；④核酸：C、H、O、N、P。
【详解】A、DNA的元素组成为C、H、O、N、P，脱氧核糖的元素组成为C、H、O，A错误；
B、组成细胞的元素大多以化合物的形式存在，元素以化合物的形式存在时比单质更具稳定性，B正确；
C、病毒无细胞结构，没有核糖体这个细胞器，C错误；
D、水解酶的化学本质是蛋白质，在核糖体上合成，D错误。
故选B。
2. 下图为某植物（2n=24）减数分裂过程中不同时期的细胞图像，下列有关叙述错误的是 （ ）
A. 应取该植物的花药制成临时装片，才更容易观察到上面的图像
B. 图丁的每个细胞中染色体数量与甲细胞染色体数量相等
C. 图乙细胞中含有同源染色体，具有48条染色体
D. 不考虑突变，图戊中4个细胞的基因型可能是一种、二种或四种
【答案】C
【分析】根据染色体的数目、形态以及细胞的数目分析。图中甲细胞处于减数分裂Ⅰ中期，乙细胞处于减数分裂Ⅰ后期，丙细胞处于减数分裂Ⅱ中期，丁细胞处于减数分裂Ⅱ后期，戊细胞处于减数分裂Ⅱ末期。
【详解】A、图示为观察减数分裂的示意图，进行减数分裂的精原细胞比卵原细胞更多，所以本实验最好选择植物的花药制成临时装片，A正确；
B、图甲细胞处于减数第一次分裂中期，图丁细胞处于减数第二次分裂后期，图丁时每个细胞中核DNA数目为甲细胞的一半，但染色体数与甲细胞相同，B正确；
C、乙细胞处于减数分裂Ⅰ后期，含有同源染色体，含有和体细胞一样多的染色体，即24条染色体，C错误；
D、不考虑突变，若细胞为纯合子，戊中4个细胞的基因型是一种；若为杂合子且不考虑交叉互换基因型二种，若为两对以上基因的杂合子且发生了交叉互换，基因型为四种，D正确。
故选C。
3. 《本草纲目》记载豌豆“其苗柔弱宛宛，故得豌名。”豌豆营养价值高，具有抗氧化、降血压等功能，在遗传学研究中更是一种重要的实验材料，下列有关叙述正确的是 （ ）
A. 同一株豌豆上的自花传粉和同一株玉米上的异花传粉，都属于自交
B. 豌豆体细胞中成对的常染色体和性染色体均可分离进入不同的配子中
C. 孟德尔在实施测交实验来验证性状分离的解释时，隐性纯合亲本均要去雄
D. 基因型为 Aa的豌豆在自然状态下生长多年后，后代中显性个体逐代增多
【答案】A
【分析】（1）相对性状是指同种生物的相同性状的不同表现类型。
（2）人工异花授粉过程为：去雄（在花蕾期去掉雄蕊）→套上纸袋→人工异花授粉（待花成熟时，采集另一株植株的花粉涂在去雄花的柱头上）→套上纸袋。
【详解】A、豌豆花是两性花，在未开放时完成自花传粉，属于自交，玉米花是单性花，雌雄同株，同株的雄花与雌花间进行的异花传粉，也属于自交，A正确；
B、豌豆花是两性花，植株之间没有性别分化，所以其染色体没有常染色体和性染色体的划分，B错误；
C、孟德尔为了验证性状分离现象的解释，实施了测交实验，用F1植株分别作为父本和母本与隐性纯合子杂交，所以当用 F1植株作母本与隐性纯合子杂交时，隐性纯合亲本作父本不可以去雄，C错误；
D、基因型为Aa的豌豆自然状态下自交，后代基因型为AA（25%）、Aa（50%）、aa（25%）。显性个体（AA+Aa）占比75%，但连续自交会导致Aa比例逐代减半，最终显性个体（AA）和隐性个体（aa）各趋近于50%。显性个体比例实际逐代减少，而非增多，D错误。
故选A。
4. 如图为某生物细胞内发生的一系列生理变化，下列相关叙述正确的是（ ）
A. X与a上的起始密码子结合，启动转录过程
B. 过程工和Ⅱ均沿模板链的5'~3'方向进行
C. 过程I和Ⅱ中共有的碱基互补配对方式有A-U、C-G、G-C
D. 图中一个mRNA上相继结合多个核糖体有利于缩短每条肽链合成所需的时间
【答案】C
【分析】（1）RNA是在细胞核中，通过RNA聚合酶以DNA的一条链为模板合成的，这一过程为转录。
（2）游离在细胞质中的各种氨基酸，就以mRNA为模板合成具有一定氨基酸顺序的蛋白质，这一过程叫做翻译。
【详解】A、a表示DNA，X表示RNA聚合酶，X与a上的启动子结合，启动转录过程，起始密码子是位于mRNA上，A错误；
B、过程I表示转录，过程Ⅱ表示翻译，前者是从子链的5'端向3'端方向进行，后者是从mRNA的5'端向3'端方向进行，B错误；
C、过程I和Ⅱ中共有的碱基互补配对方式有A-U、C-G、G-C，前者特有的是T-A，后者特有的是U-A，C正确；
D、图中一个mRNA上相继结合多个核糖体，同时进行多条肽链的合成，但不能缩短每条肽链合成所需的时间，D错误。
故选C。
5. 下列关于生物进化和育种的叙述，不正确的是 （ ）
A. 基因突变必然改变种群的基因频率，导致新物种的形成
B. 二倍体西瓜与四倍体西瓜存在生殖隔离，不是同一物种
C. 诱变育种和杂交育种都可以产生新的基因型
D. 单倍体育种和多倍体育种常用秋水仙素或低温处理使染色体加倍
【答案】A
【分析】进化的实质是种群基因频率的改变，但进化不一定形成新物种，新物种的形成通常需要长期的地理隔离和生殖隔离。
【详解】A、基因突变确实会改变种群的基因频率（产生新基因），但新物种形成的标志是生殖隔离，而基因频率改变未必会直接导致生殖隔离，A错误；
B、二倍体西瓜与四倍体西瓜杂交产生的三倍体西瓜高度不育（减数分裂时染色体联会紊乱），因此二者存在生殖隔离，属于不同物种，B正确；
C、诱变育种通过基因突变产生新基因，进而形成新基因型。杂交育种通过基因重组将已有基因重新组合，产生新的基因型。二者均不产生新物种，但都能产生新基因型，C正确；
D、秋水仙素和低温作用机理相同，均为抑制纺锤体形成，导致染色体不能移向细胞两极，从而使染色体数目加倍，D正确。
故选A。
6. 循环血量是人体循环血液的总量，其发生变化会影响动脉血压及各器官、组织的血液供应。在大动脉、左心房壁的内膜下存在一种容量感受器，当血量过多时，左心房内压增高，容量感受器受到刺激而产生兴奋，兴奋传至神经中枢，间接地抑制抗利尿激素的释放。下列有关叙述正确的是 （ ）
A. 抗利尿激素分泌增多可以增加循环血量并降低血压
B. 抗利尿激素是由下丘脑合成、垂体释放的一种固醇类激素
C. 循环血量减少时，容量感受器产生的兴奋传到下丘脑并产生渴觉
D. 抗利尿激素释放减少，肾小管和集合管对水的重吸收作用减弱
【答案】D
【分析】当机体失水过多、饮水不足、食物过咸时，细胞外液渗透压升高，下丘脑渗透压感受器受到的刺激增强，致使抗利尿激素分泌量增加，肾小管和集合管对水的重吸收作用增强。当机体饮水过多时，细胞外液渗透压降低，下丘脑渗透压感受器受到的刺激减弱，致使抗利尿激素分泌量减少，肾小管和集合管对水的重吸收作用减弱。
【详解】A、抗利尿激素的作用是促进肾小管和集合管对水的重吸收，使尿量减少，从而使循环血量增加，血压升高，而不是降低血压，A错误；
B、抗利尿激素是由下丘脑合成、垂体释放的一种多肽类激素，并非固醇类激素，B错误；
C、渴觉是在大脑皮层产生的，而不是下丘脑。当循环血量减少时，容量感受器产生的兴奋传到下丘脑，下丘脑通过调节会使抗利尿激素分泌增加等，但不会在下丘脑产生渴觉，C错误；
D、抗利尿激素能促进肾小管和集合管对水的重吸收，当抗利尿激素释放减少时，肾小管和集合管对水的重吸收作用就会减弱，D正确。
故选D。
7. 下列有关调查种群密度和物种丰富度方法的叙述，错误的是 （ ）
A. 标记重捕法中，重捕时捕获的个体部分死亡，会使估算结果偏大
B. 可以通过取样器取样法来研究土壤中小动物类群的丰富度
C. 黑光灯诱捕法可以用来调查农田中趋光性昆虫的种群密度
D. 通过分析大熊猫的粪便信息可以调查大熊猫的种群密度
【答案】A
【分析】（1）种群密度的调查一般有样方法和标记重捕法。在利用样方法调查种群密度时需注意随机取样、样方大小合适，并且样本数据足够大等。
（2）采用样方法调查种群密度的具体过程为：确定调查对象→选取样方（五点取样法或等距取样法）→计数→计算种群密度（取平均值）。
（3）标记重捕法计算公式：种群中个体数（N）÷第一次捕获并标记的个体数=第二次重捕总数÷重捕中被标志的个体数。
【详解】A、标记重捕法的计算公式为：种群数量 =（第一次捕获标记的个体数×第二次捕获的个体数）÷第二次捕获的个体中被标记的个体数。重捕时捕获的个体部分死亡，只要能准确识别标记个体，不影响第二次捕获的个体中被标记的个体数，对估算结果无影响，A错误；
B、取样器取样法可以采集土壤中的小动物，通过对采集到的小动物进行分类和计数，来研究土壤中小动物类群的丰富度，B正确；
C、趋光性昆虫具有趋向光源的特性，黑光灯诱捕法利用这一特性，通过统计诱捕到的昆虫数量来调查农田中趋光性昆虫的种群密度，C正确；
D、大熊猫的粪便中含有未消化的食物残渣等信息，通过分析粪便中大熊猫的DNA等信息，可以估算大熊猫的种群密度，D正确。
故选A。
8. 丹顶鹤是我国一级保护动物，属于迁徙生物，栖息于开阔的平原、沼泽、湖泊、草地、海滩以及芦苇荡等地。下列相关叙述正确的是 （ ）
A. 导致自然保护区内丹顶鹤种群密度变化的主要因素是出生率、死亡率
B. 候鸟的迁徙会改变群落的物种组成，群落的季节性变化属于次生演替
C. 该区域岸边植物与湖底植物的生物分布属于群落的垂直结构
D. 丹顶鹤是消费者，其存在能够加快该生态系统的物质循环
【答案】D
【分析】初生演替：是指一个从来没有被植物覆盖的地面，或者是原来存在过植被，但是被彻底消灭了的地方发生的演替。次生演替：原来有的植被虽然已经不存在，但是原来有的土壤基本保留，甚至还保留有植物的种子和其他繁殖体的地方发生的演替。
【详解】A、丹顶鹤是我国一级保护动物，属于迁徙生物，导致自然保护区内丹顶鹤种群密度变化的主要因素是迁入率和迁出率，A错误；
B、候鸟迁徙可以改变群落的物种组成，群落的季节性变化不属于群落的演替过程，B错误；
C、该区域岸边植物与湖底植物生物分布属于群落的水平结构，C错误；
D、丹顶鹤是消费者，消费者能够加快该生态系统的物质循环，D正确。
故选D。
9. 交配迷向技术是指人为放置性信息素味源，掩盖雌虫释放的性信息素气味，使雄虫无法找到雌虫，降低成虫交配概率，以达到防治目的。下列叙述正确的是 （ ）
A. 性信息素属于化学信息，交配迷向技术属于化学防治
B. 交配迷向技术通过破坏种群的性别比例达到防治的目的
C. 生态系统中信息传递的过程需要信息源、信道和信息受体
D. 性信息素影响成虫交配说明生物的生命活动离不开信息的传递
【答案】C
【分析】生态系统中信息的种类：物理信息（生态系统中的光、声、温度、湿度、磁力等通过物理过程传递的信息）、化学信息（生物产生的可以传递信息的化学物质）和行为信息（生物通过其特殊行为特征在同种或异种生物之间传递的信息）。
【详解】A、性信息素属于化学信息，利用昆虫信息素诱捕有害动物属于生物防治，交配迷向技术属于生物防治技术，A错误；
B、交配迷向技术通过破坏茶小卷叶蛾种群的正常交配达到防治的目的，该过程中其性别比例不变，B错误；
C、生态系统中信息传递的过程需要信息源、信道和信息受体，C正确；
D、性信息素影响成虫交配，说明种群的繁衍离不开信息的传递，D错误。
故选C。
10. 植物无糖组织培养技术是指在植物组织培养中以CO2代替糖作为植物体的碳源，生产优质种苗的一种新的植物微繁殖技术，在中药材繁殖等方面广泛应用。有关叙述错误的是 （ ）
A. 该技术通过改变碳源在一定程度上降低了杂菌污染的可能性
B. 该技术选取植物体的各种部位作为外植体，获得的新植株基因型相同
C. 通过该技术繁殖新个体也需要经历脱分化和再分化过程
D. 该技术需要的环境条件包括适宜的光照、充足的CO2等
【答案】B
【分析】植物组织培养是利用植物细胞具有全能性，将离体的植物器官、组织或细胞，在培养了一段时间后，会通过细胞分裂，形成愈伤组织。由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化，或者叫做去分化。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。进而发育成完整个体的过程。
【详解】A、杂菌大多是异养微生物，以二氧化碳为碳源降低了污染的可能性，A正确；
B、该技术外植体一般选择具有较强分生能力的部位，并不是植物体的各种部位都合适，而且如果外植体取自植物的花药等部位，获得的新植株基因型与正常植株不同，B错误；
C、植物无糖组织培养技术作为一种新型植物组织培养技术，外植体同样需要经历脱分化和再分化过程，C正确；
D、该技术是光自养微繁殖技术，需要提供适宜的光照、充足的CO2、稳定的pH值等，保证植物的光合作用，D正确。
故选B。
11. 在制备单克隆抗体过程中，诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后，在培养体系中会存在多种细胞，常使用HAT培养基筛选所需的杂交瘤细胞，其原理如图（哺乳动物细胞有两条途径可以合成DNA，一条途径会被HAT培养基中的氨基蝶呤阻断，另一条途径需要关键酶HGPRT的参与）。下列分析正确的是 （ ）

注：+/-分别代表存在和缺失。
A. 融合处理后存在未融合的亲本细胞、同种融合的细胞和产生同种抗体的杂交瘤细胞
B. 融合成功的杂交瘤细胞能够存活并无限增殖，但还需要进一步筛选
C. 实验过程中使用的骨髓瘤细胞是缺陷型细胞，不具备无限增殖的能力
D. 免疫B细胞的DNA合成过程被培养基中的氨基蝶呤阻断从而不能在体外无限繁殖
【答案】B
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛进出杂交瘤细胞；进行克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、诱导融合后会产生三种类型的细胞：未融合的亲本细胞、融合同种核的细胞和杂交瘤细胞，但杂交瘤细胞有多种类型，能够产生多种类型的抗体，A错误；
B、融合成功的杂交瘤细胞能够存活并无限增殖，但这些杂交瘤细胞产生的抗体不同，需要通过抗原-抗体杂交技术筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，B正确；
C、实验过程中使用的骨髓瘤细胞是经过人工筛选的缺陷型细胞，缺乏关键酶HGPRT，但仍具备通过另一条途径进行DNA合成实现无限增殖的能力，C错误；
D、免疫B细胞是高度分化的细胞，本身就不具备无限繁殖能力，D错误。
故选B。
12. 多种方法获得的早期胚胎，均需移植给受体才能获得后代。下列叙述正确的是 （ ）
A. ①②③技术得到的个体均含只含有两个体（父母）的基因
B. ①②③技术都体现了动物细胞核具有全能性
C. ①③技术中需取滋养层细胞进行性别鉴定，方可获得相应的奶牛或山羊
D. ①②③技术中需将胚胎培养到原肠胚方可进行胚胎移植
【答案】C
【分析】胚胎移植是指将通过体外受精及其 他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术。
【详解】A、②通过无性繁殖的方式生产，不具有两个体（父母）的基因，A错误；
B、③技术不能体现了动物细胞核具有全能性，B错误；
C、滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，胚胎移植前可取滋养层的细胞鉴定性别，C正确；
D、①②③技术中需将胚胎培养到桑葚胚或囊胚方可进行胚胎移植，D错误。
故选C。
13. 某野生大肠杆菌经X射线照射后，形成了两种不同的氨基酸缺陷型菌株A、B，其在基本培养基上及进行相应处理后的生长情况如表所示。下列叙述错误的是 （ ）
A. 基本培养基含碳源、氮源、无机盐和水等细菌生长繁殖所需的基本营养成分
B. 组氨酸和色氨酸是诱变菌种生长所必需的氨基酸
C. X射线照射可能导致菌株B发生染色体变异，影响色氨酸合成
D. 菌株A和B混合培养时，可能互相提供了对方不能合成的氨基酸
【答案】C
【分析】表格分析，野生菌株能在基本培养基上生长，菌株A需要添加组氨酸才能生长，菌株B需要添加色氨酸才能生长，而菌株A和B混合培养时能生长，可能时菌株A和B互相提供了对方不能合成的氨基酸。
【详解】A、基本培养基是满足微生物生长繁殖所需基本营养成分的培养基，通常含有碳源、氮源、无机盐和水等，A正确；
B、从表格中可以看出，诱变菌株A在基本培养基上不生长，添加组氨酸后能生长；诱变菌株B在基本培养基上不生长，添加色氨酸后能生长，这说明组氨酸和色氨酸是诱变菌种生长所必需的氨基酸，B正确；
C、大肠杆菌是原核生物，没有染色体，X射线照射导致的是基因突变，而不是染色体变异，C错误；
D、菌株A和B混合培养时，不添加组氨酸和色氨酸均能生长，推测可能是互相提供了对方不能合成的氨基酸，D正确。
故选C。
14. 戴米斯·哈萨比斯和约翰·江珀开发了预测蛋白质结构AI工具AlphaFld，该工具可通过输入的氨基酸序列信息生成蛋白质空间结构模型。下列说法正确的是 （ ）
A. 蛋白质工程中，难度最大的是设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列
B. 蛋白质工程通过改变氨基酸的空间结构而制造出新的蛋白质
C. AI技术有助于科学家探索通过功能设计蛋白质结构，再逆向推导氨基酸序列
D. 蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径与基因工程的途径相同
【答案】C
【分析】通过AI预测蛋白质结构，这为蛋白质工程提供了逆向设计的工具，即从功能需求出发设计结构，再推导基因序列。
【详解】A、蛋白质工程中最困难的环节是从氨基酸序列预测蛋白质的三维结构，而非“设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列”。后者可通过已知的蛋白质结构数据库和氨基酸序列反向推导，相对较易。A错误；
B、蛋白质工程通过改造基因序列（即改变DNA编码的氨基酸序列）来制造新蛋白质，而非直接改变氨基酸的空间结构。氨基酸本身无独立空间结构，其排列顺序决定蛋白质的折叠方式。B错误；
C、AI技术（如AlphaFld）可根据蛋白质的功能需求，预测可能的三维结构，再逆向推导出所需的氨基酸序列。这正是蛋白质工程的核心思路——从功能出发设计结构，再反推基因序列。C正确；
D、蛋白质工程被称为“第二代基因工程”，但其基本途径与基因工程相反。基因工程是“从基因到蛋白质”（直接表达天然基因），而蛋白质工程是“从蛋白质到基因”（先设计蛋白质功能，再改造基因）。D错误。
故选C。
15. 生物技术就像一把“双刃剑”，下列叙述错误的是 （ ）
A. 生物武器是用病毒类、致病菌及生化毒剂类等来形成杀伤力
B. 干细胞培养在临床医学等领域前景广泛，但也存在导致肿瘤发生的风险
C. 食用转基因食品，其中的基因会整合到人的基因组中
D. 反对设计试管婴儿的原因之一是避免有人滥用此技术选择性设计婴儿
【答案】C
【分析】（1）生物技术安全性问题包括食物安全、生物安全、环境安全三个方面。
（2）伦理问题主要在克隆人的问题上出现争议。
【详解】A、生物武器是指利用致病菌类、病毒类和生化毒剂类等作为战争武器，危害极大，A正确；
B、干细胞培养在临床医学等领域前景广泛，比如用于治疗一些疑难疾病，但由于干细胞的分化和增殖等特性，也可能面临安全性问题，如肿瘤形成等，B正确；
C、转基因食品中的基因在人体消化道内会被分解为小分子，不会整合到人的基因组中，C错误；
D、为了防止有人滥用设计试管婴儿技术选择性设计婴儿，我国反对设计试管婴儿，D正确。
故选C。
二、多项选择题：本部分包括4题，每题3分，共计12分。每题有不止一个选项符合题意，全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。
16. 睾丸女性化由X染色体上的tf基因决定，患者性染色体组成为XY，有睾丸和女性生殖器官，外貌和正常女性一样，但没有生育能力，性别鉴定为女性。下图是一个睾丸女性化家系的部分系谱图，相关叙述正确的是 （ ）
A. 图中所有患者均为杂合子
B. 患者家系中女性常多于男性
C. IV2和正常男性结婚生一个正常男孩的概率是1/3
D. II2和II3再生了一个孩子，其患病的概率是1/4
【答案】BD
【分析】（1）伴X染色体隐性遗传病：红绿色盲、血友病、进行性肌营养不良（假肥大型）。发病特点：①男患者多于女患者； ②男患者将致病基因通过女儿传给他的外孙（交叉遗传）。
（2）伴X染色体显性遗传病：抗维生素D性佝偻病；发病特点：女患者多于男患者。
（3）常染色体显性遗传病：多指、并指、软骨发育不全； 发病特点：患者多，多代连续得病，且与性别无关。
（4）常染色体隐性遗传病：白化病、先天聋哑、苯丙酮尿症；发病特点：患者少，个别代有患者，一般不连续，遇常染色体类型，只推测基因，而与 X、Y无关。
【详解】A、睾丸女性化由X染色体上的tf基因决定，患者性染色体组成为XY，据图判断，该病为X染色体上的隐性遗传病，图中所有患者均为隐性纯合子，A错误；
B、正常情况下男女数量应该基本相同，但由于患者为XY染色体，表现为女性，所以该家系中，女性的数量多于男 性，B正确；
C、IV2是患者，没有生育能力，则不能生育后代，C错误；
D、II2和II3有一个患病子代，说明II2基因型为XTFXtf，II3基因型为XtfY，则II2和II3再生一个孩子，其患病（XtfY）的概率是1/4，D正确。
故选BD。
17. 下列有关实验的叙述错误的是 （ ）
A. 分离各种细胞器和证明DNA进行半保留复制实验均用了差速离心法
B. 不能用黑藻的叶肉细胞代替洋葱鳞片叶外表皮进行质壁分离与复原实验
C. 利用蝗虫精巢或蚕豆花粉观察减数分裂时，装片制作无需解离、漂洗步骤
D. 在探究抗生素对细菌的选择作用的实验中，连续培养几代后，抑菌圈直径不断增大
【答案】ABD
【分析】质壁分离为植物细胞常有的现象，质壁分离是指植物的细胞壁和原生质层（细胞膜、液泡膜及两层膜之间的成分）分开。质壁分离的原理为：①浓度差的存在，引起细胞失水，②细胞壁的伸缩性小于原生质层，因此细胞发生质壁分离。
【详解】A、在证明DNA进行半保留复制的实验中，是将大肠杆菌放在含 15 N的培养基中培养若干代后，再转移到含 14 N的培养基中培养，然后提取不同时期的DNA进行密度梯度离心，根据离心后的条带情况来证明DNA的半保留复制，并非用差速离心法，A错误；
B、黑藻成熟叶片的叶肉细胞中液泡呈无色，叶绿体的存在使原生质层呈绿色，有利于实验现象的观察，B错误；
C、利用蝗虫精巢或蚕豆花粉观察减数分裂时，由于子细胞之间并不像一般组织那样紧密，因此不需要解离步骤，因为本身就是分散的状态，C正确；
D、在探究抗生素对细菌的选择作用的实验中，连续培养几代后，抗生素选择出的是耐药性强的细菌，则抑菌圈的直径不断缩小，D错误。
故选ABD。
18. 下图为能量流经生态系统某营养级的变化示意图（能量的单位为kJ）。下列有关叙述正确的是 （ ）
A. 丁能将动植物遗体残骸中的有机物分解为无机物
B. 第二营养级呼吸作用以热能的形式散失的能量为210 kJ
C. 第二营养级与第三营养级之间的能量传递效率为11%
D. 能量金字塔通常都是上窄下宽的金字塔形体现了能量逐级递减的特点
【答案】ABD
【分析】能量金字塔通常是上窄下宽的，体现了能量流动具有逐级递减的特点，且能量金字塔不可倒置。
【详解】A、丁代表第二营养级流向分解者的能量，分解者的作用是将动植物遗体残骸中的有机物分解为无机物，维持生态系统的物质循环，A正确；
B、摄入量550 kJ，同化量甲 = 550 - 100 = 450 kJ。用于生长发育和繁殖的能量乙 = 240 kJ，则呼吸作用以热能的形式散失的能量丙 = 450 - 240 = 210 kJ，B正确；
C、能量传递效率应为第三营养级同化量与第二营养级同化量的比值。题目中第三营养级摄入量为48kJ，但未提供其同化量（需扣除粪便量），因此无法准确计算传递效率。若假设摄入量等于同化量，则传递效率为48/450≈10.67%（约11%），但此假设不符合生态学规范，C错误；
D、能量金字塔上窄下宽，直观反映了能量逐级递减的规律（约10%-20%传递效率），D正确。
故选ABD。
19. 我国传统发酵技术历史悠久，很多典籍中均有记载：①《周礼·天官》郑玄注：“大羹不致五味，刑羹加盐菜矣。”②《北山酒经》中记载：“每坛加蜡三钱，竹叶五片，隔水煮开，乘热灌封坛口。”③《齐民要术》中记载：“回酒酢法：凡酿酒失所味醋者，或初好後动未压者，皆宜回作醋”④《本草纲目拾遗》中记述：“豆腐又名菽乳，豆腐腌过酒糟或酱制者，味咸甘心。”下列说法正确的是 （ ）
A. ①介绍的是泡菜制作技术，配制的盐水要煮沸冷却后使用
B. ②中每坛加蜡，隔水煮开等灭菌操作，有助于陈酒的储藏
C. ③中从酒化到醋化的过程，当缺少氧气时将乙醇变为醋酸
D. ④中使用豆腐作为固体培养基产腐乳的过程不需严格灭菌
【答案】AD
【分析】（1）传统发酵技术是直接利用原料中天然存在的微生物，或利用前一次发酵保存下来的面团、卤汁等发酵物中的微生物进行发酵、制作食品的技术。
（2）果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。
【详解】A、从“刑羹加盐菜矣”可推测与泡菜制作相关，在泡菜制作中，配制的盐水煮沸是为了杀灭杂菌，冷却后使用是防止高温杀死乳酸菌等发酵菌，A正确；
B、隔水煮开属于沸水消毒，不属于灭菌，B错误；
C、醋酸菌是好氧菌，在有氧条件下才能将乙醇变为醋酸，缺少氧气时不能完成此转化，C错误；
D、传统制作腐乳时，利用空气中的毛霉等微生物，豆腐作为固体培养基，不需要严格灭菌，在一定的条件下，有益微生物能在豆腐上生长繁殖，D正确。
故选AD。
三、非选择题：本题包括5小题，共58分。
20. 图1为轮叶黑藻的叶肉细胞在适宜光照下的物质变化示意图，其中a、b、c表示物质，①-④表示生理过程。图2表示轮叶黑藻在不同温度下CO2的吸收或释放量。图3是轮叶黑藻叶肉细胞光合作用相关过程示意图（有研究表明，水中CO2浓度降低能诱导轮叶黑藻光合途径由C3途径向C4途径转变，而且两条途径在同一细胞中进行）。请回答下列问题：
（1）图1中②处发生的反应称为_____，需要①处反应提供_____才能使C3转变成糖类等有机物。
（2）图1中过程①③发生的场所分别是_____，_____。物质c是_____。
（3）据图2分析，温度为_____℃时，光合速率最大。若在5℃条件下，每隔12小时交替黑暗与光照，则该植物的叶绿体在24小时内固定的CO2的量为_____。
（4）图3中催化过程①和过程④固定CO2的酶分别为PEPC、Rubisc，其中与CO2亲和力较高的是_____。为证明低浓度CO2能诱导轮叶黑藻光合途径的转变，研究人员开展相关实验，请完成下表（提示：实验中利用pH-stat法测定轮叶黑藻净光合速率；用缓冲液提取光合酶）。
【答案】（1）①. 暗反应 ②. ATP和NADPH
（2）①. 类囊体薄膜 ②. 细胞质基质 ③. 水
（3）①. 30 ②. 18
（4）①. PEPC ②. 密闭 ③. 制备酶粗提液 ④. 上清液 ⑤. 高于
【分析】图1：①光反应、②暗反应、③有氧呼吸的第一阶段、④有氧呼吸的二三阶段；a、b、c依次表示：氧气、CO2、水。
图2：光照下吸收CO2速率表示净光合速率，黑暗中释放CO2速率表示呼吸速率
图3：C3途径是指CO2被C5固定形成C3，C3在光反应提供的ATP和[H]的作用下还原生成糖类等有机物。C4途径是指在PEPC的催化下，PEP在叶肉细胞中与HCO3-结合，先把CO2固定成草酰乙酸，再转化成苹果酸，重新释放出CO2后进入卡尔文循环。
【解析】（1）图1中，②为暗反应，需要①光反应为其提供NADPH和ATP，才能将C3还原成糖类等有机物。
（2）①光反应的场所是叶绿体类囊体薄膜，③有氧呼吸第一阶段的场所是细胞质基质。④为有氧呼吸的二三阶段，c与丙酮酸反应，c表示水。
（3）图2中，5℃-35℃，光合速率依次为1+0.5=1.5mg/h，1.7+0.8=2.5mg/h，2.5+1=3.5mg/h，3.2+1.5=4.7mg/h，3.7+2.2=5.9mg/h，3.5+3=6.5mg/h，2.8+3.5=6.3mg/h，温度为30℃时，光合速率最大。若在5℃条件下，总光合速率为1+0.5=1.5mg/h，每隔12小时交替黑暗与光照，则该植物的叶绿体在24小时内只有12个小时进行光合作用，光合作用固定的CO2的量为：1.5×12=18mg。
（4）根据图示，CO2充足时，CO2可以通过④过程直接固定生成C3；根据题干信息：水中CO2浓度降低能诱导轮叶黑藻光合途径由C3途径向C4途径转变，说明PEPC羧化酶固定CO2的能力强于C3循环中的Rubisc，据此推测与CO2亲和力较高的是PEPC。根据实验目的“证明低浓度CO2能诱导黑藻光合途径转变”，确定实验自变量是黑藻培养的CO2浓度，因变量为净光合速率，因此设置的对照实验为：将20只生态缸随机均分为两组；一组密闭，另一组通入适量CO2。温度和光照等为本实验的无关变量，为排除无关变量的影响，两组生态缸均置于适宜温度和光照等条件下培养14d；制备酶粗提液步骤中，叶片研磨并离心后，酶存在上清液中，因此应该取上清液。根据题干信息“水中CO2浓度降低能诱导轮叶黑藻（一种沉水植物）光合途径由C3途径向C4途径转变”，因此预期实验结果是实验组黑藻净光合速率和PEPC的活性明显高于对照组。
21. 应激是机体对内外环境刺激做出的适应性反应，过度应激会产生过量的促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）损伤海马脑区，进而表现出抑郁症状。为研究该机制，研究者用CRH处理脑区得到相关的实验结果如图1和图2所示。5-羟色胺(5-HT)是一种使人感觉愉悦的神经递质，可改善抑郁症状。据此回答下列问题：
（1）大脑接受刺激后，信号传至下丘脑产生CRH经_____运输作用于_____，最终促进肾上腺分泌肾上腺皮质激素（GC）。如图1所示，与对照组相比，CRH处理组_____，原因可能是CRH 处理使突触前膜释放的神经递质减少，也可能是突触后膜上_____的数量或活性下降。
（2）_____细胞对神经元具有支持、保护、营养和修复的功能，也存在于海马脑区。研究发现，该细胞分泌的细胞因子LIX可促进与突触形成相关蛋白质的表达。图2结果表明，CRH浓度越高，分泌LIX的量_____，推测突触形成的数量会_____，从而表现出抑郁症状。影响以上作用的关键受体是_____（填“R1”或“R2”）。
（3）图3表示正在传递兴奋的突触结构局部放大示意图。据研究抗抑郁药物TCA主要通过改变5-HT的浓度起抗抑郁作用，据图分析其作用机理是_____。
【答案】（1）①. 体液 ②. 垂体 ③. 电流产生频率和幅度均有所降低 ④. 神经递质受体
（2）①. 神经胶质 ②. 越少 ③. 减少 ④. R1
（3）TCA能阻止5-羟色胺被突触前膜回收，进而使突触间隙中5-羟色胺含量增加
【分析】兴奋在神经元之间需要通过突触结构进行传递，突触包括突触前膜、突触间隙、突触后膜。兴奋在突触处传递的信号转换是电信号→化学信号→电信号。
（1）传递过程为：兴奋以电流的形式传导到轴突末梢时，突触小泡释放神经递质，神经递质作用于突触后膜，引起突触后膜产生膜电位（电信号），从而将兴奋传递到下一个神经元。
（2）由于神经递质只能由突触前膜释放，作用于突触后膜，因此神经元之间兴奋的传递只能是单方向的。但是离体神经纤维上兴奋的传导是双向的。
【解析】（1）肾上腺皮质激素的分泌存在下丘脑-垂体-肾上腺皮质的轴线，故大脑接受刺激后，信号传至下丘脑，其产生的CRH属于激素，激素通过体液运输作用于垂体，最终促进肾上腺分泌肾上腺皮质激素（GC）；该分级调节调节的意义是可以放大激素的调节效应，形成多级反馈调节，有利于精细调 控，从而维持机体的稳态。根据图1可知，与对照组相比，CRH处理组的电流产生频率和幅度均有所降低；神经元之间兴奋的传递是通过突触结构实现的，需要由突触前膜释放，作用于突触后膜的受体，故CRH 处理使神经递质释放减少，也可能是突触后膜上神经递质受体数量或活性下降、也可能是突触后膜阳 离子通道关闭或阴离子通道开放 。
（2） 神经胶质细胞对神经元具有支持、保护和营养和修复功能；分析图2，在实验范围内，CRH浓度越高、神经胶质细胞分泌LIX的量越少，推测突触形成的数量会越少，从而表现出抑郁症状。与对照组相比，CRH处理组两种蛋白表达量下降，说明CRH抑制H区突触形成，分析题图可知，CRH只通过R1抑制胶质细胞分泌LIX，且效果与浓度呈正相关。
（3）图3表示正在传递兴奋的突触结构局部放大示意图。据研究抗抑郁药物TCA主要通过改变5-HT的浓度起抗抑郁作用，图示表明TCA能阻止5-羟色胺被突触前膜回收，进而使突触间隙中5-羟色胺含量增加，起到缓解抑郁的作用。
22. 发霉的绿色橘子在某二手交易平台被标价售卖，价格从几十元到上百元不等。卖家在商品描述中称发霉橘子可用于生物实验。
（1）某生物兴趣组购买了发霉橘子（图1），尝试分离橘子上的青霉菌。在制备培养基时，除了添加必要的营养成分外，还需要加入_____，然后将pH调至_____性。青霉菌通常能产生抗生素，配制的培养基_____（填“需要”或“无需”）灭菌，理由是_____。
（2）制备好平板后，一小组同学采用平板划线法进行分离纯化。图2中正确的接种方式为_______（填字母）。

（3）另一小组成员采用稀释涂布平板法进行分离计数。用无菌小刀把柑橘腐烂位置切下，与适量的_____混合均匀得到原液，将原液稀释103倍，取100μL进行涂布，结果如下：
注：表中数据为每克橘子组织中含有霉菌数（单位：CFU/g）
根据统计结果可知，在腐烂病斑处，病斑直径1cm（甲组）的青霉菌数量多于病斑直径2cm（乙组）的。在病斑外延不等距离处，青霉菌数量多的是_____（填“甲”或“乙”）组。原因可能是随着柑橘腐烂程度的增加，腐烂区域营养物质减少，导致该处青霉菌种群的_____升高。
a.死亡率 b.出生率 c.迁入率 d.迁出率
（4）将分离的菌送机构鉴定，结果显示他们分离的菌多为扩展青霉。该菌不仅会引起水果腐烂，还会产生展青霉素，人误食会反胃呕吐。为了抑制扩展青霉的生长，小组成员将酵母菌接种到含青霉的柑橘表面，3天后柑橘腐败率降低30%，原因是酵母菌_____或_____。
【答案】（1）①. 凝固剂##琼脂##琼脂粉 ②. 酸 ③. 需要 ④. 抗生素通常抑制细菌，可能有其他真菌生长 （2）A
（3）①. 无菌水 ②. 乙 ③. ad
（4）①. 与青霉菌竞争营养和空间 ②. 分泌抗菌物质来抑制扩展青霉菌生长
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【解析】（1）固体培养基可通过凝固剂（如琼脂）形成稳定结构，适合采用划线法或涂布法等技术分离微生物，形成独立菌落以实现纯培养，是分离纯化的最佳选择。故在制备培养基时，为了分离橘子上的青霉菌，除了添加必要的营养成分外，还需要加入凝固剂（琼脂/琼脂粉)，同时需要在灭菌前调节 pH，因为如果在灭菌后调节，可能会造成培养基被杂菌污染。在培养霉菌时，除了添加必要的营养成分外，一般还需要将培养基调至酸性。由于青霉菌产生抗生素通常抑制细菌，而培养基中可能有其他真菌生长，为了避免培养基中其他真菌对实验结果产生干扰，配制的培养基需要进行灭菌处理。
（2）在采用平板划线法进行分离纯化时，每次从上次划线的末端开始划线，A符合题意。
（3）采用稀释涂布平板法进行分离计数时，首先需要用无菌小刀把柑橘腐烂位置切下，与适量的无菌水混合均匀得到原液。然后将原液稀释一定倍数，取一定量的稀释液进行涂布。根据统计结果，可以发现在腐烂病斑处，病斑直径较小的甲组青霉菌数量多于病斑直径较大的乙组。在病斑外延不等距离处，青霉菌数量多的是乙组。原因可能是随着柑橘腐烂程度的增加，腐烂区域营养物质减少，导致该处青霉菌种群的死亡率升高，同时活的青霉菌为了寻找更多的营养物质而迁移到其他区域，即迁出率也会升高。
（4）为了抑制扩展青霉的生长，小组成员将酵母菌接种到含青霉的柑橘表面。3天后柑橘腐败率降低30%，可能是酵母菌与扩展青霉之间存在竞争关系。酵母菌可能通过竞争营养物质（如碳源、氮源等）和生存空间来抑制扩展青霉的生长；或者是酵母菌能够产生某些抗菌物质来抑制扩展青霉的生长。这两种机制都可能导致扩展青霉的生长受到抑制，从而降低柑橘的腐败率。
23. 某研究团队利用大鼠（2N=42）、小鼠（2N=40）两个远亲物种创造出世界首例异种杂合二倍体胚胎干细胞（AdESCs），为研究进化中不同物种间性状差异的分子机制提供了工具。该团队首先探索获得单倍体胚胎干细胞的研究路径（见图1），据图回答问题。
（1）为了获得尽可能多的MⅡ卵母细胞，应使用_____激素促进小鼠超数排卵。培养细胞的培养液中通常加入_____等天然成分，培养所需气体中含有95%_____和5%CO2。
（2）孤雄单倍体胚胎培养过程中，吸去的是_____，注入的是_____。孤雌单倍胚胎干细胞取自孤雌囊胚中的_____。
（3）若诱导孤雄单倍体干细胞与卵细胞融合得到的半克隆小鼠均为雌性，说明_____。
若将孤雌单倍体干细胞替代精子，注射入卵细胞，获得两个雌性亲本的后代小鼠，该过程涉及的技术有_____（填字母）。
a.体细胞核移植 b.体外受精 c. 动物细胞培养 d.胚胎移植
（4）该团队进一步尝试利用单倍体胚胎干细胞研究物种间杂交，过程如下
使用PEG融合法、_____等方法将两种单倍体干细胞进行融合，得到的AdESCs中染色体数目是_____，该方法打破了物种间存在的_____获得了杂交胚胎干细胞。但该细胞不能发育成完整个体，说明动物的发育需要_____。
【答案】（1）①. 促性腺 ②. 血清 ③. 空气
（2）①. MⅡ卵母细胞的细胞核(或纺锤体-染色体复合物) ②. 精子 ③. 内细胞团
（3）①. 带有Y染色体的孤雄细胞无活性(或带有X染色体的孤雄单倍体干细胞有活性) ②. cd
（4）①. 电融合法、灭活病毒诱导法 ②. 41 ③. 生殖隔离##远缘杂交不亲和的障碍 ④. 完整的染色体
【分析】动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：哺乳动物多以36.5℃为宜，最适pH为7.2-7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH。）
【解析】（1）为了获得尽可能多的MⅡ卵母细胞，需要使用促性腺激素对雌性小鼠进行超数排卵处理。促性腺激素能够刺激卵巢，使其产生更多的卵母细胞。动物细胞培养时，需要在培养基中添加血清等天然成分，且需要在含有95%空气和5%CO2混合气体的CO2培养箱中培养。
（2）据题图分析可知，在孤雄单倍体胚胎的培养过程中，通过显微操作技术，将精子注入去核的MⅡ卵母细胞中，再通过体外培养获得孤雄单倍体胚胎。故吸去的是MⅡ卵母细胞的细胞核(或纺锤体-染色体复合物)。而注入的是经过精子。孤雌单倍胚胎干细胞则是取自孤雌囊胚中的内细胞团。内细胞团是囊胚中发育成胎儿各种组织的细胞来源，具有发育的全能性。
（3）孤雄单倍体胚胎干细胞来源于鼠的精子经过体外诱导、培养获得的，鼠的精子中的性染色体可能是X染色体，也可能是Y染色体，若诱导孤雄单倍体干细胞与卵细胞融合得到的半克隆小鼠均为雌性，说明带有Y染色体的孤雄细胞无活性(或带有X染色体的孤雄单倍体干细胞有活性)。若将孤雌单倍体干细胞替代精子，注射入卵细胞，以获得两个雌性亲本的后代小鼠，该过程涉及的技术有c动物细胞培养和d胚胎移植。首先，需要对孤雌单倍体干细胞进行体外培养，使其增殖并达到一定的数量和质量。然后，将培养好的干细胞注射入卵细胞中，使其与卵细胞融合。最后，将融合后的胚胎移植到雌性小鼠的子宫中，使其发育成后代小鼠。该过程并没有涉及到体外受精和体细胞核移植技术。
（4）诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等，据题干信息和题图分析可知，大鼠（2N=42）形成的精子染色体数为21，小鼠（2N=40）形成的卵细胞染色体数为20，而AdESCs是由孤雄单倍体胚胎干细胞和孤雌单倍体胚胎干细胞经诱导融合形成的异源二倍体胚胎干细胞，故AdESCs中染色体数目是41；由于大鼠和小鼠属于两个物种，存在生殖隔离，不能杂交产生可育后代，所以该技术创造性地突破了生殖隔离（远缘杂交不亲和的障碍）而获得了杂交胚胎干细胞。但该细胞不能发育成完整个体，说明动物的发育需要完整的染色体。
24. 低温是限制农作物产量的重要胁迫因子。科学家将寒带植物中的抗寒基因CBFs转移到拟南芥中构建拟南芥耐寒模型，用于植物低温胁迫机制的相关研究。回答下列问题：

（1）设计引物克隆目的基因。如图所示应选择引物_____（填序号）对CBFs基因进行克隆，为了后续能将目的基因正确连接到载体上，应在CBFs基因上游引物的_____端添加_____（“EcRⅠ”或“BamHⅠ”或“MunⅠ”）识别序列。
（2）根据图示Ti质粒的结构，应选用限制酶_____切割Ti质粒，并通过_____酶进行连接。
（3）用_____处理农杆菌方能将重组质粒导入。在培养基中添加_____来筛选成功导入质粒的农杆菌。将拟南芥叶片浸泡在转基因农杆菌菌液中一段时间对其进行转化，然后提取叶片中的DNA，通过PCR对CBFs基因是否整合到拟南芥基因组中进行检测，结果如下图所示。该转基因叶片的基因组中可能已整合CBFs基因，PCR结果中显示出小分子非目标条带，产生的原因可能是_____（填字母）。
A．变性温度太低 B．复性温度太低 C．复性温度太高 D．引物特异性弱
（4）已获取成功转入CBFs基因的拟南芥植株，将其放置在_____环境中检测拟南芥耐寒模型是否建立成功。成功转基因的拟南芥，通过自交产生的后代，_____（填“能”或“不能”）稳定遗传耐寒性状。
【答案】（1）①. ①④ ②. 5' ③. Mun I
（2）①. EcRⅠ和SphⅠ ②. DNA连接（酶）
（3）①. Ca2+ ②. 氨苄青霉素 ③. BD
（4）①. 寒冷 ②. 不能
【分析】PCR反应过程:变性→复性→延伸。变性:当温度上升到90℃以上时，双链DNA解聚为单链，复性:温度下降到50℃左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合，延伸:72℃左右时，Taq酶有最大活性，可使DNA新链由5'端向3'端延伸。
【解析】（1）PCR 扩增时，引物①（3'→5'）和④（5'→3'）与模板链互补，可扩增目标基因，故选①④。 为保证目的基因正确连接到载体，需在引物 5' 端添加限制酶识别序列。据表可知，EcRⅠ和MunⅠ是同尾酶，EcRⅠ能切割目的基因不能用，结合后续 Ti 质粒切割使用的酶（见第 2 问）及图示酶切位点分布，上游片段中EcRⅠ靠近目的基因起始端，EcRⅠ能切割目的基因不能用，则使用同尾酶MunⅠ，且不切割基因内部，因此上游引物的 5' 端 添加 MunⅠ 识别序列。
（2）BamHⅠ切割标记基因不能用，Sau3A的识别序列包含BamHⅠ的识别序列也不能用；Ti 质粒的 T-DNA 区域需保留完整以确保目的基因转移，图示中 EcRⅠ和 SphⅠ位于 T-DNA 内且无重叠，切割后可产生互补末端便于连接，故选用 EcRⅠ 和 SphⅠ。 切割后通过DNA连接酶将目的基因和切割后的Ti质粒进行连接。
（3）用Ca2+处理农杆菌可使其成为感受态细胞，能更好地吸收重组质粒。 在培养基中添加氨苄青霉素来筛选成功导入质粒的农杆菌，因为Ti质粒上有氨苄青霉素抗性基因（Ampr）。
PCR结果中显示出小分子目标条带，原因可能是复性温度太低，导致引物与模板的结合特异性降低；引物特异性弱也会出现非特异性扩增，产生小分子条带，BD正确。
故选BD。
（4）将成功转入CBF4基因的拟南芥植株放在寒冷环境中检测拟南芥耐寒模型是否建立成功。 转基因的拟南芥，通过自交产生的后代不能稳定遗传耐寒性状，因为导入的基因在后代中可能会发生性状分离，不一定都含有目的基因。
接种的菌种
基本培养基
实验处理和结果
野生菌株
能生长
不处理
诱变菌株A
不生长
添加组氨酸，能生长
诱变菌株B
不生长
添加色氨酸，能生长
诱变菌株A+B
均能生长
不处理
实验步骤的目的
主要实验步骤
制作生态缸
取20只玻璃缸，在缸底铺经处理的底泥并注入适量池水：每只缸中各移栽3株生长健壮、长势基本一致的轮叶黑藻，驯化培养10d。
设置对照实验
将20只生态缸随机均分为两组：一组①_____，另一组通入适量CO2
控制无关变量
两组生态缸均置于适宜温度和光照等条件下培养14d；每天定时利用pH-stat法测定轮叶黑藻净光合速率。
②_____
取等量的两组黑藻叶片，利用液氮冷冻处理后迅速研磨（目的是充分破碎植物细胞）：再加入适量冷的缓冲液继续研磨，离心取③_____（“上清液”或“沉淀物”）。
测定酶活性
利用合适方法测定两组酶粗提液中PEPC的活性，并比较。
预期实验结果
实验组轮叶黑藻净光合速率和PEPC的活性明显④_____（“高于”或“低于”）对照组。
病斑外延距离/cm
0
1
2
3
4
病斑直径/cm
1
20000
1700
110
20
＜10
2
120004
5600
2602
110
＜10