山东省实验中学2024—2025学年高二下学期3月考试生物试题（原卷版+解析版）

这是一份山东省实验中学2024—2025学年高二下学期3月考试生物试题（原卷版+解析版），共41页。试卷主要包含了03）， 原浆苹果醋的简要工艺流程为， 聚羟基脂肪酸酯等内容，欢迎下载使用。
说明：试题分为第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分
第Ⅰ卷（选择题）
一、单项选择题：本大题共20小题。每小题只有一个选项符合题意。
1. 原浆苹果醋的简要工艺流程为：苹果采摘→挑选清洗→破碎榨汁→酵母发酵→醋酸发酵→陈酿2年左右。下列叙述正确的是（ ）
A. 酵母发酵结束后，改变通气条件即可进行醋酸发酵
B. 工艺流程中的“酵母发酵”发生在苹果细胞的细胞质基质中
C. 酿醋过程中发酵液的pH逐渐降低，与酿酒制作过程中相反
D. 醋酸发酵阶段中产生的气泡量少于酒精发酵阶段
2. 苹果酒口感甘醇，深受广大消费者喜爱。选用新鲜、成熟、无病虫害的苹果作为原料，进行清洗、去皮并榨汁。将苹果汁加入适量的酵母菌和白砂糖，充分混合后装入发酵桶中，用气密塞封好，放置在适宜的温度下进行发酵，发酵过程中可摇动一次，一段时间后，苹果酒便酿制成功。结合所给材料，下列叙述正确的是（ ）
A. 酵母菌利用的氮源、无机盐均来自苹果汁
B. 过度清洗和去皮将使发酵无法进行
C. “在适宜的温度下进行发酵”的温度为30~35℃
D. 发酵过程中摇动一次是为了增加苹果汁中的溶解氧
3. 利用杨木生产燃料乙醇的基本流程主要包括原料粉碎、提高纤维素浓度的预处理、释放单糖的酶解糖化、产生乙醇的微生物发酵、乙醇脱水的蒸馏工艺等步骤（预处理过程所需的果胶酶常来自于黑曲霉等微生物）。下图为发酵阶段菌种接种量对发酵结果的影响。下列说法正确的是（ ）
A. 培养黑曲霉时一般需将培养基调至酸性，果胶酶是黑曲霉分泌的一种单细胞蛋白
B. 在伊红—亚甲蓝培养基上可筛选出高产纤维素酶的菌株用于酶解糖化过程
C. 接种的菌种为酵母菌，当接种量为12%左右时，发酵后的酒精含量与残糖含量相等
D. 接种量超过15%时酒精产量反而有所降低的原因可能是菌种生长消耗大量的糖分
4. 以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理：①沸盐水冷却后再倒入坛中；②盐水需要浸没全部菜料；③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水；④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法正确的是（ ）
A. ①主要是为了防止菜料表面的醋酸杆菌被杀死
B. ②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌
C. ③是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入
D. ④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低
5. 培养基是按照微生物、植物和动物组织对营养物质不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。下列叙述正确的是（ ）
A. 脱分化培养基中含有蔗糖、无机盐和植物激素等营养物质
B. 微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染
C. 配制马铃薯琼脂培养基时，可不在酒精灯火焰旁
D. 基本培养基中可能不含有氮源，但一定含有碳源
6. 为从泡菜汁中分离出乳酸菌高产菌株，甲、乙两同学分别采用平板划线法和稀释涂布平板法获取单菌落。已知在培养基中添加碳酸钙可使培养基变浑浊，而乳酸等酸性物质可溶解培养基中的碳酸钙形成透明圈。下列说法错误的是（ ）
A. 利用泡菜汁进行平板划线操作前无需进行稀释
B. 涂布用的菌浓度应控制在30～300个/mL
C. 接种后需将平板放置在无氧条件下培养
D. 周围透明圈最大的菌株，产酸能力不一定最强
7. 聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中寻找生产PHA的菌种，流程图如下。下列叙述正确的是（ ）

A. 步骤②可用稀释涂布平板法接种到含合成塑料的选择培养基上
B. 步骤③所用的培养基中营养物质浓度越高，对嗜盐菌的生长越有利
C. 扩大培养所用的培养基应加入琼脂，放置摇床上培养，以便于挑取菌落获得纯化菌株
D. 挑取菌落时，应取多个菌落并分别测定嗜盐菌的PHA含量
8. 细胞摇摆式间歇浸没生物反应器是通过摆动架的倾斜摆动，使培养液周期性间歇浸没组培苗，实现组培苗的快速生长。下列叙述正确的是（ ）
A. 获得组培苗的培养基含有水、无机盐、蔗糖、琼脂和激素等多种营养物质
B. 间歇摆动提高培养液溶氧量，有利于组培苗进行有氧呼吸
C. 获得组培苗的步骤：外植体→脱分化形成胚状体→再分化形成试管苗
D. 经过间歇浸没培养获得的植株需要消毒后炼苗再移栽到经灭菌处理的土壤中
9. 为实现多肉植物的规模化生产，科研人员开展了如下研究。相关叙述正确的是（ ）
A. 过程①宜选择成熟叶片，分别用次氯酸钠和70%酒精浸泡30s
B. 过程②应避光培养，防止愈伤组织分化成筛管、维管等
C. 过程③的生芽培养基中，生长素与细胞分裂素的比值大于1
D. 过程④应在珍珠岩基质中添加适量蔗糖，为幼苗生长提供碳源
10. 胞质杂种是指两个原生质体融合产生的杂种细胞，其中一个细胞的细胞核消失后，两个原生质体的细胞质杂交得到的个体。科研人员利用雄性不育的品种A与可育的品种B通过植物体细胞杂交技术获得了雄性不育的胞质杂种“华柚2号”，制备过程如下图所示，其中GFP（绿色荧光蛋白）基因转入了品种A的细胞核基因组中。经检测，“华柚2号”的细胞核和叶绿体基因来自品种B，线粒体基因来自品种A，下列说法正确的是（ ）

A. 制备原生质体时需用胰蛋白酶或纤维素酶去除细胞壁
B. 聚乙二醇或灭活的病毒可用于诱导原生质体A和B的融合
C. “华柚2号”的获得说明控制雄性不育的基因可能位于线粒体中
D. 应筛选发绿色荧光的杂种细胞C经植物组织培养技术获得“华柚2号”
11. CMV 是危害烟草的主要病毒，CMV 侵染烟草后，发病的叶片会褪绿变成黄色。为筛选抗 CMV的烟草突变株，科研小组进行的实验流程如图所示。下列说法正确的是（ ）
A. 烟草幼苗茎尖病毒极少，直接取其进行组织培养可得到抗 CMV 植株
B. 若发病叶片中出现绿色区域，取该区域进行组织培养可能得到抗CMV 植株
C. 选取的叶片组织需先进行灭菌处理，再经过脱分化和再分化培养成抗 CMV 植株
D. 接种CMV起到了选择作用，因此经组织培养后得到的植株无需再进行抗CMV 鉴定
12. 甘草是中医使用最多的药材之一，其提取物中的黄酮具有抗衰老、抗炎等作用。如图表示利用悬浮培养生产甘草黄酮的过程。下列叙述正确的是（ ）

A. 可用次氯酸钠和酒精对种子进行灭菌
B. 图中添加果胶酶的主要目的是获得原生质体
C. 对细胞悬液进行人工诱变，其变异率常高于对器官或个体进行诱变
D. 图示过程能体现植物细胞的全能性
13. 紫花苜蓿是常用的豆科牧草，但易使家畜患鼓胀病；百脉根富含物质X，X可与紫花苜蓿中特定蛋白结合，抑制鼓胀病的发生。为培育抗鼓胀病的新品种，科学家以紫花苜蓿和百脉根为材料进行了实验，主要流程如下图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. ①过程用到纤维素酶和果胶酶，该过程利用的生物技术原理是植物细胞的全能性
B. 为确保最终得到的F植株为杂种植株，可对②过程形成的C进行筛选和鉴定
C. ③过程中C的高尔基体活动性增强，D的形成是植物体细胞杂交完成的标志
D. ④过程需进行光照处理，将细胞培养至E阶段即可研究物质X的作用
14. 植物体细胞杂交可分为对称性和非对称性细胞杂交两类。前者是直接将两个亲本原生质体诱导融合，形成重组细胞。后者指利用紫外线照射等方法使供体亲本染色质片段化，再与未处理的受体亲本融合。研究人员尝试培育产紫杉醇的柴胡，将红豆杉愈伤组织（2n＝24）和柴胡愈伤组织（2n＝12）进行了非对称性细胞杂交。下列说法正确的是（ ）
A. 该实验中需要用紫外线照射柴胡细胞，使其染色体片段化
B. 在诱导愈伤组织的培养基中加入聚乙二醇可诱导细胞融合
C. 将染色体数目多于12条的杂种细胞经植物组织培养即可得到产紫杉醇的柴胡
D. 对称性细胞杂交技术中不同物种间基因表达的干扰程度高于非对称性细胞杂交技术
15. 2023年11月，青岛农业大学成功完成了我国优良地方猪种里岔黑猪的克隆工作，成功产下20头雄性里岔黑猪。下列说法正确的是（ ）
A. 可以使用差速离心的方法去除由核膜包被的卵母细胞的细胞核
B. 利用电融合法使供受体细胞融合，供体核进入卵母细胞，形成重构胚
C. 在胚胎移植之前，需要切取滋养层细胞做DNA分析，鉴定性别
D. 克隆出20头雄性里岔黑猪的遗传物质均只与供体细胞有关
16. 近年来由于栖息地丧失和人为捕猎，亚洲黑熊数量骤减，科学家期望通过人工授精、胚胎移植等方法拯救亚洲黑熊，其过程如下图。下列说法正确的是（ ）
A. 胚胎工程一般采用促性腺激素释放激素处理A使其超数排卵
B. E后代遗传性状与 A 和C一致，F后代遗传性状与B一致
C. D受体雌性必须和 A、B同期发情处理
D. A 排出的卵子必须培养成熟到MII才能与C的获能精子受精
17. 小鼠正常2细胞期胚胎经过电融合诱导形成四倍体胚胎，四倍体胚胎具有发育缺陷，只能发育形成胎盘等胚体以外的结构。ES细胞能够诱导分化形成所有的细胞类型，但很难分化形成胎盘。将ES细胞和四倍体胚胎聚合形成新的重构胚，可发育成完整小鼠个体，称为四倍体补偿技术。下列说法错误的是（ ）
A. 重构胚中ES细胞具有自我更新能力，但很难分化为胎盘等胚外组织
B. 重构胚发育至桑葚胚或囊胚再移植到生理状态相同的小鼠子宫内才能发育成完整小鼠个体
C. 通过四倍体补偿技术得到的小鼠个体的基因型与供体ES细胞的基因型不同
D. 利用四倍体补偿技术，可将ES细胞经过体外遗传学修饰，得到经过人为修饰的目的小鼠
18. 卵母细胞成熟包括“细胞核成熟”和“细胞质成熟”。研究人员利用基因敲除技术敲除小鼠的Bta4基因，发现Bta4敲除的卵母细胞虽能正常受精，但形成的早期胚胎却全部停滞在1到2细胞阶段，胚胎停止发育的原因是卵母细胞中的mRNA不能被及时降解。下列说法错误的是（ ）
A. 卵细胞形成过程中减数分裂是不连续的，MII期卵母细胞具备受精能力
B. 早期胚胎发育到2细胞阶段是在透明带内进行的，胚胎的总体积不变
C. 卵母细胞中mRNA的及时降解是启动早期胚胎基因组表达的前提条件
D. Bta4基因与卵母细胞中mRNA降解有关，可促使卵母细胞的细胞核成熟
19. 我国现已成功克隆出了多种哺乳动物。下列说法错误的是（ ）
A. 动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植
B. 哺乳动物的卵母细胞在体外培养到MⅡ期方可通过显微操作去核
C. 重构胚发育到囊胚时内细胞团从囊胚腔中伸展出来的过程称为孵化
D. 胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理状态下空间位置的转移
20. 基因组印记（通过甲基化实现受精卵中来自双亲的两个等位基因一个表达另一个不表达）阻碍了哺乳动物的“孤雌生殖”。某研究团队利用甲基化酶、去甲基化酶和基因编辑技术，改变了小鼠生殖细胞的“基因组印记”，使其“变性”，然后将一个第二极体注入修饰后的次级卵母细胞（类似受精作用），最终创造出“孤雌生殖”的小鼠。实验过程如图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 体外培养卵母细胞时，需将培养皿置于含95%O2和5%CO2的培养箱中培养
B. 基因组印记会阻碍次级卵母细胞与精子或第二极体的结合
C. 需对代孕母鼠进行同期发情处理后，再进行胚胎移植
D. “孤雌小鼠”的诞生过程没有精子参与，所以其基因型与提供卵母细胞的雌鼠相同
二、不定项选择题：本大题共10小题。
21. 鲁菜是中国八大菜系之首，十分讲究配料和调料的搭配，烹饪中常使用酱油、腐乳、味精、白酒、醋和泡菜进行调味，下列说法错误的是（ ）
A. 白酒、味精和醋的发酵生产所需要的微生物均为真核生物
B. 酱油的发酵生产经过蛋白质分解为小分子肽和氨基酸
C. 腐乳发酵过程中起主要作用的微生物是黑曲霉
D. 泡菜发酵后期，尽管乳酸菌占优势，但仍有产气菌繁殖，需开盖放气
22. 柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂。如图为研究人员以红薯粉为原料经黑曲霉发酵生产柠檬酸的简要流程图。下列说法错误的是（ ）
A. 黑曲霉与生产果醋和腐乳时所用主要微生物的代谢类型相同
B. 将菌种接种至A培养基时，浸泡在酒精中的涂布器使用前需在火焰上灼烧
C. 将菌种转接至B培养基的目的是增加黑曲霉菌种数量
D. 若发酵罐C中的原料为大豆粉，可利用黑曲霉水解大豆中的淀粉制成酱油
23. 细菌X合成的tcel蛋白和tcil蛋白使其在与其他细菌的竞争中占优势，其中tcel蛋白是一种有毒性的分泌蛋白。研究人员利用野生型细菌X及其不同突变体进行了如下实验：在固体培养基表面放置一张能隔离细菌的滤膜，将一种菌（下层菌）滴加在滤膜上后再放置第二张滤膜，滴加等量的另一种菌（上层菌），共同培养后，对上、下层菌计数得到的结果如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 实验中的培养皿、固体培养基和滤膜均需要进行消毒处理
B. 对上、下层菌计数可以将滤膜菌体稀释后采用血球计数板计数
C. 由甲、乙，丙三组结果可推测tcil蛋白能够中和tcel蛋白的毒性
D. 野生型细菌X在与tcel—tcil双突变体和tcel突变体的竞争中均占优势
24. 下列关于植物愈伤组织的说法正确的是（ ）
A. 用果胶酶和胶原蛋白酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体
B. 融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织
C. 体细胞杂交获得杂种植株细胞中具有来自亲本的2个细胞核
D. 通过愈伤组织再生出多个完整植株的过程属于无性繁殖
25. 肉苁蓉具有较高的药用价值，自然条件下的产量较低，其次生代谢产物苯乙醇苷(PeGs)是主要活性成分。研究人员以外植体诱导出愈伤组织，进一步进行细胞悬浮培养。在不同的初始接种浓度下培养一段时间后，对悬浮培养液的PeGs进行测定，结果如下图所示。下列有关叙述不正确的是（ ）
A. 植物细胞培养的目的主要是获得植物生长和生存所必需的次生代谢产物
B. 若工厂化大量生产PeGs细胞悬浮培养时就应选择接种细胞的浓度为3.2g·L-1
C. 若需进一步了解细胞生成PeGs的能力，则要检测培养后培养液中的细胞密度
D. 植物组织培养时，应对外植体进行灭菌处理以防止培养基及愈伤组织污染
26. 自杀基因系统是指外源基因导入受体细胞后会表达相应的酶，该酶可催化无毒的药物前体转化为有毒物质，从而导致受体细胞被杀死。为探究外源基因TK与药物更昔洛韦能否组成自杀基因系统。研究人员以肝癌细胞为受体细胞进行实验，结果如图所示。下列说法错误的是（ ）
A. 培养肝癌细胞的过程中需定期更换培养液以保持无菌、无毒的环境
B. 肝癌细胞在细胞培养过程中没有接触抑制，因而无需进行传代培养
C. 对照组和实验组应分别为导入TK和未导入TK的肝癌细胞
D. 实验结果表明外源基因TK与更昔洛韦可组成自杀基因系统
27. 细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。某研究小组以小鼠甲为实验材料设计实验，研制抗病毒A的单克隆抗体。下列叙述错误的是（ ）
A. 实验前必须给小鼠甲注射病毒A是为了得到能产生特定抗体的B淋巴细胞
B. 将小鼠体内取出的脾脏用剪刀剪碎后加入胃蛋白酶处理，使其分散成单个细胞
C. 筛选1需用特定的选择培养基进行筛选才能获得融合的杂交痛瘤胞
D. 筛选2利用96孔板经1次筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞
28. 科研人员成功培育了能分泌含卵泡刺激素（FSH）乳汁的转基因山羊，其基本流程为：含FSH基因表达载体→导入山羊成纤维细胞→核移植→重构胚→检测并获得转基因山羊。下列说法错误的是（ ）
A. 需将转基因成纤维细胞的细胞核移入到MⅡ期的去核卵母细胞中
B. 采用电融合法激活重构胚后才能将其移入代孕母羊体内
C. 悬浮培养成纤维细胞及重构胚时因无接触抑制现象细胞会持续增殖
D. 需根据山羊胚胎的早期发育特点确定重构胚的胚胎移植时期
29. 线粒体置换技术是将妈妈携带突变线粒体的卵子细胞核移植到去核的健康线粒体捐赠者卵胞浆中获得的重构卵母细胞，与携带者丈夫精子进行受精，从而获得重构胚胎也就是通常说的“三亲胚胎”，也被称为“第四代试管婴儿”。下列有关说法错误的是（ ）
A. 受精作用前，精子需进行获能处理，为受精提供能量
B. 第四代试管婴儿的DNA来自携带者与其丈夫
C. 第四代试管婴儿可避免线粒体疾病
D. 第四代试管婴儿的培育还需要经历早期胚胎培养和胚胎移植等技术
30. 在自然界中，嵌合体现象并不罕见。嵌合体是指在同一个体中，由基因型不同的细胞或组织相互接触且维持各自并存的混合状态。若细胞来自不同物种则为异种嵌合体；若细胞来自同一物种则为同种嵌合体。迄今为止，异种嵌合体仅有大、小鼠异种嵌合体实验获得成功。科研人员主要利用iPS细胞与囊胚构建嵌合体，下列叙述错误的是（ ）
A. iPS细胞和囊胚的内细胞团细胞都具有发育的全能性
B. A过程前往往需要超数排卵处理，B过程为胚胎移植
C. 体外采集到的精子可使用含有Ca2+的溶液处理使精子获能
D. 若小鼠的染色体数目为40条，大鼠的染色体数目为42条，则嵌合体鼠的体细胞在有丝分裂后期染色体数目为82条
第Ⅱ卷（非选择题）
二、非选择题：本大题共3大题。
31. 有机磷农药使用不当有时会造成瓜果蔬菜等食品农药残留超标，危害人类健康。某兴趣小组同学提出：土壤中可能存在高效降解有机磷农药的微生物。请回答下列问题：
（1）在制备固体培养基时需加入的常用凝固剂是_____。若培养基需要调节pH，则应在灭菌之_____（填“前”或“后”）调节。配制好的培养基通常采用的灭菌方法是_____。为了获得能降解有机磷农药的微生物菌种，需在培养基中添加适量的_____行选择培养。
（2）该小组在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板在适宜条件下先培养一段时间，这样做的目的是_____。
（3）如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，图B接种方法是_____。利用图A的方法在5个平板上各接种稀释倍数为103的菌液样品（涂布体积为0.2mL），培养一段时间后，平板上的菌落数分别为96个、100个、108个、112个、430个，则每升原菌液样品中的细菌数为_____个，用这种方法测定菌体密度时，实际活菌数量要比测得的数量多，原因是_____。
（4）将获得的3种待选微生物菌种甲、乙、丙分别接种在1L含20mg有机磷农药的相同培养液中培养（培养液中其他营养物质充裕、条件适宜），观察从实验开始到微生物停止生长所用的时间。甲、乙、丙分别为32小时、45小时、16小时，则应选择微生物_____（填“甲”“乙”或“丙”）作为菌种进行后续培养。
32. 癌症的免疫疗法通过重新激活抗肿瘤的免疫细胞，克服肿瘤的免疫逃逸，在癌症治疗方法中取得越来越突出地位，科研人员在不断研究中发现多种免疫治疗方法的结合是提高治疗效果的途径之一。
（1）某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白PSMA和PD-L1，如图1.PD-L1能抑制T细胞的活化，使癌细胞发生免疫逃逸。单克隆抗体最主要的优点在于_____。临床上可利用PD-1的单克隆抗体进行癌症治疗。将等量的纯化PD-1蛋白分别注射到5只小鼠体内，经过二次免疫后测定小鼠抗PD-1抗体的免疫效果，取其中免疫效果最好的1号小鼠用于后面的融合实验。在融合前三天，对1号小鼠加强免疫一次，目的是_____。然后取小鼠的脾脏细胞用_____（化学试剂）诱导与骨髓瘤细胞融合，用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。
（2）一段时间后，将（1）所得细胞进行抗体阳性检测，检测原理如上图。
①在检测时需要将PD-1蛋白固定于固相载体表面制成_____，并加入多孔板培养槽中的_____（细胞、上清液），即待测样本。
②加入酶标抗体后一段时间，需要用洗涤剂将未与_____结合的酶标抗体洗去。
③加入相应酶促反应底物显色后，颜色的深浅可代表_____。
33. 荷斯坦奶牛的产奶量很高，某公司引进了纯种荷斯坦奶牛（供体1），欲利用现代生物工程技术实现优良品种的快速繁殖，其操作流程设计如图，请回答下列问题：
（1）胚胎工程的理论基础是_____，图中受体母牛必须具备健康的体质和_____。
（2）为了充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，通过途径1繁育小牛时，常用_____对供体母牛进行超数排卵处理，但毕竟供体母牛提供的卵子总量有限，因而可通过途径2，对早期胚胎进行_____以提高胚胎的利用率，相对于途径1、2，途径3在提供胚胎数量方面具有更大的优势，理由是_____。
（3）为了获得优质奶牛，在胚胎移植前，需要取滋养层细胞进行_____。
（4）通过途径1得到的后代之间在性状上差异较大，而通过途径2得到的后代在性状上基本一致，原因是_____。
山东省实验中学2023级阶段性测试
生物试题（2025.03）
说明：试题分为第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分
第Ⅰ卷（选择题）
一、单项选择题：本大题共20小题。每小题只有一个选项符合题意。
1. 原浆苹果醋的简要工艺流程为：苹果采摘→挑选清洗→破碎榨汁→酵母发酵→醋酸发酵→陈酿2年左右。下列叙述正确的是（ ）
A. 酵母发酵结束后，改变通气条件即可进行醋酸发酵
B. 工艺流程中的“酵母发酵”发生在苹果细胞的细胞质基质中
C. 酿醋过程中发酵液的pH逐渐降低，与酿酒制作过程中相反
D. 醋酸发酵阶段中产生的气泡量少于酒精发酵阶段
【答案】D
【解析】
【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色；
2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。
【详解】A、醋酸发酵需要通入氧气，且温度比果酒发酵温度高，所以酵母发酵结束后，改变通气条件和升高温度有利于醋酸发酵，A错误；
B、果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，其场所是细胞质基质，因此工艺流程中的“酵母发酵”发生在酵母菌的细胞质基质中，B错误；
C、果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低，果酒制作过程中产生二氧化碳，发酵液pH也逐渐降低，C错误；
“醋酸发酵”时，当糖源充足，糖将分解成醋酸且产生二氧化碳，即有气泡产生，但当缺少糖源时，酒精将转变成醋酸且不产生二氧化碳，即不产生气泡，因此醋酸发酵阶段中产生的气泡量少于酒精发酵阶段，D正确。
故选D。
2. 苹果酒口感甘醇，深受广大消费者喜爱。选用新鲜、成熟、无病虫害的苹果作为原料，进行清洗、去皮并榨汁。将苹果汁加入适量的酵母菌和白砂糖，充分混合后装入发酵桶中，用气密塞封好，放置在适宜的温度下进行发酵，发酵过程中可摇动一次，一段时间后，苹果酒便酿制成功。结合所给材料，下列叙述正确的是（ ）
A. 酵母菌利用的氮源、无机盐均来自苹果汁
B. 过度清洗和去皮将使发酵无法进行
C. “在适宜的温度下进行发酵”的温度为30~35℃
D. 发酵过程中摇动一次是为了增加苹果汁中的溶解氧
【答案】A
【解析】
【分析】在苹果酒制作中菌种的主要来源是苹果皮上野生的酵母菌，发酵时一般不消毒，原因是在缺氧、呈酸性的环境中，绝大多数的微生物都无法适应这一环境而受到抑制。
【详解】A、白砂糖可为酵母菌提供碳源，但酵母菌利用的氮源、无机盐均来自苹果汁，A正确；
B、过度清洗和去皮后苹果上可能不再有酵母菌，但由于苹果汁中加入了适量的酵母菌，故过度清洗和去皮后，发酵仍能进行，B错误；
C、酿酒时，适宜的发酵温度是18~30℃，30~35℃是酿醋的适宜温度，C错误；
D、酵母菌制酒时为无氧发酵，摇动一次是为了使菌体与苹果汁能充分接触，D错误。
故选A。
3. 利用杨木生产燃料乙醇的基本流程主要包括原料粉碎、提高纤维素浓度的预处理、释放单糖的酶解糖化、产生乙醇的微生物发酵、乙醇脱水的蒸馏工艺等步骤（预处理过程所需的果胶酶常来自于黑曲霉等微生物）。下图为发酵阶段菌种接种量对发酵结果的影响。下列说法正确的是（ ）
A. 培养黑曲霉时一般需将培养基调至酸性，果胶酶是黑曲霉分泌的一种单细胞蛋白
B. 在伊红—亚甲蓝培养基上可筛选出高产纤维素酶的菌株用于酶解糖化过程
C. 接种的菌种为酵母菌，当接种量为12%左右时，发酵后的酒精含量与残糖含量相等
D. 接种量超过15%时酒精产量反而有所降低的原因可能是菌种生长消耗大量的糖分
【答案】D
【解析】
【分析】1、培养基的概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。
2、培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
【详解】A．培养黑曲霉时一般需将培养基调至酸性，但单细胞蛋白指微生物菌体，果胶酶不属于单细胞蛋白，A错误；
B．伊红—亚甲蓝培养基是鉴定大肠杆菌的培养基，本实验应该用刚果红培养基筛选高产纤维素酶菌株，B错误；
C．酒精发酵的菌种为酵母菌，当接种量为12%左右时，发酵后的酒精含量与残糖含量曲线有交点，但两者的纵坐标数值及单位均不同，故发酵后二者含量不同，C错误；
D．由图可知，菌种接种量为15%时对应的酒精含量达到最大值，接种量超过15%，菌种数量大，自身的生长会大量消耗反应物，导致酒精产量降低，D正确。
故选D。
4. 以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理：①沸盐水冷却后再倒入坛中；②盐水需要浸没全部菜料；③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水；④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法正确的是（ ）
A. ①主要是为了防止菜料表面的醋酸杆菌被杀死
B. ②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌
C. ③是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入
D. ④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低
【答案】C
【解析】
【分析】泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
（1）泡菜的制作流程是：选择原料、配置盐水、调味装坛、密封发酵。
（2）选用火候好、无裂纹、无砂眼、坛沿深、盖子吻合好的泡菜坛。
（3）原料加工：将新鲜蔬菜修整、洗涤、晾晒、切分成条状或片状。
（4）配制盐水：按照比例配制盐水，并煮沸冷却。原因是为了杀灭杂菌，冷却之后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响。
（5）泡菜的制作：将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀，装入泡菜坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配制好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖。在坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。在发酵过程中要注意经常补充水槽中的水。
【详解】A、盐水煮沸是为了杀灭杂菌，沸盐水冷却后再倒入坛中主要是为了防止菜料表面乳酸菌被杀死，A错误；
B、②盐水需要浸没全部菜料，造成无氧环境，有利于乳酸菌无氧呼吸，B错误；
C、③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水，为了制造无氧环境，同时可排出初期酵母菌等发酵产生的气体，C正确；
D、④检测泡菜中亚硝酸盐的含量，腌制泡菜过程中亚硝酸盐的含量先增多后减少，D错误。
故选C。
5. 培养基是按照微生物、植物和动物组织对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。下列叙述正确的是（ ）
A. 脱分化培养基中含有蔗糖、无机盐和植物激素等营养物质
B. 微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染
C. 配制马铃薯琼脂培养基时，可不在酒精灯火焰旁
D. 基本培养基中可能不含有氮源，但一定含有碳源
【答案】C
【解析】
【分析】培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物种和氧气的要求。
【详解】A、植物激素起调节作用，不提供营养，不是营养物质，A错误；
B、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染，保证无菌环境，而微生物培养时如果加入抗生素，可能会影响目的菌的生长，B错误；
C、配制马铃薯琼脂培养基时，可不在酒精灯火焰旁操作，因为培养基配制好后还要经灭菌处理，C正确；
D、有些基本培养基可能不含有氮源，如培养固氮菌培养基；有些基本培养基也可能不含有碳源，如培养自养微生物的培养基，D错误。
故选C。
6. 为从泡菜汁中分离出乳酸菌高产菌株，甲、乙两同学分别采用平板划线法和稀释涂布平板法获取单菌落。已知在培养基中添加碳酸钙可使培养基变浑浊，而乳酸等酸性物质可溶解培养基中的碳酸钙形成透明圈。下列说法错误的是（ ）
A. 利用泡菜汁进行平板划线操作前无需进行稀释
B. 涂布用的菌浓度应控制在30～300个/mL
C. 接种后需将平板放置在无氧条件下培养
D. 周围透明圈最大的菌株，产酸能力不一定最强
【答案】B
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、平板划线操作中在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落，该方法接种时不需要稀释，A正确；
B、涂布时所用菌液通常不超过0.1mL，平板上的菌落数应介于30～300个，则涂布用的菌浓度应控制在300-3000个/mL，B错误；
C、乳酸菌是厌氧菌，接种后需将平板放置在无氧条件下培养，C正确；
D、周围透明圈最大的菌株，产酸能力不一定最强，应选择透明圈与菌落直径比例最大的类型，D正确。
故选B。
7. 聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中寻找生产PHA的菌种，流程图如下。下列叙述正确的是（ ）

A. 步骤②可用稀释涂布平板法接种到含合成塑料的选择培养基上
B. 步骤③所用的培养基中营养物质浓度越高，对嗜盐菌的生长越有利
C. 扩大培养所用的培养基应加入琼脂，放置摇床上培养，以便于挑取菌落获得纯化菌株
D. 挑取菌落时，应取多个菌落并分别测定嗜盐菌的PHA含量
【答案】D
【解析】
【分析】培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。微生物培养基需要为微生物繁殖提供碳源、氮源、水、无机盐等营养物质，此外还要满足微生物对特殊营养物质、pH和O2的需求。培养基按照其物理状态可以分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基。液体培养基常应用于工业或生活生产。
【详解】A、PHA是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，要筛选嗜盐细菌，步骤②可用稀释涂布平板法接种到含盐量较高的选择培养基上，A错误；
B、步骤③培养基浓度过高，会导致菌体失水死亡，不利于嗜盐细菌的生长，B错误；
C、扩大培养应选用液体培养基，液体培养基中无需加入琼脂，C错误；
D、要挑选高产聚羟基脂肪酸酯（PHA）的嗜盐菌，挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量，进行比较，D正确。
故选D。
8. 细胞摇摆式间歇浸没生物反应器是通过摆动架的倾斜摆动，使培养液周期性间歇浸没组培苗，实现组培苗的快速生长。下列叙述正确的是（ ）
A. 获得组培苗的培养基含有水、无机盐、蔗糖、琼脂和激素等多种营养物质
B. 间歇摆动提高培养液溶氧量，有利于组培苗进行有氧呼吸
C. 获得组培苗的步骤：外植体→脱分化形成胚状体→再分化形成试管苗
D. 经过间歇浸没培养获得的植株需要消毒后炼苗再移栽到经灭菌处理的土壤中
【答案】B
【解析】
【分析】植物组织培养中生长素和细胞分裂素使用比例对植物细胞发育的影响：生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成。比值适中时，促进愈伤组织的形成。
【详解】A、琼脂是凝固剂，不提供营养，A错误；
B、间歇摆动提高培养液溶氧量，有利于组培苗进行有氧呼吸，有氧呼吸能为组培苗的生长发育提供能量，因此可以提高生长速度，B正确；
C、外植体脱分化可以形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，C错误；
D、植物组织培养是在无菌条件下进行的，经过间歇浸没培养获得的植株不需要消毒处理，D错误。
故选B。
9. 为实现多肉植物的规模化生产，科研人员开展了如下研究。相关叙述正确的是（ ）
A. 过程①宜选择成熟叶片，分别用次氯酸钠和70%的酒精浸泡30s
B. 过程②应避光培养，防止愈伤组织分化成筛管、维管等
C. 过程③的生芽培养基中，生长素与细胞分裂素的比值大于1
D. 过程④应在珍珠岩基质中添加适量蔗糖，为幼苗生长提供碳源
【答案】B
【解析】
【分析】植物组织培养操作流程：①外植体的选择和处理：从具有本品种典型特征、生长健壮、无病虫害的植株上获取生长速度快、性状基本稳定的部位，作为外植体（从植物体上分离出的器官或组织的片段），将流水充分冲洗后的外植体用酒精消毒30s，然后立即用无菌水清洗2~3次；再用次氯酸钠溶液处理30min后，立即用无菌水清洗2~3次。用无菌滤纸吸去表面的水分，用解剖刀将外植体切成0.5~1cm长的小段。②愈伤组织的诱导与培养：在酒精灯火焰旁，将外植体的~插入诱导愈伤组织的培养基中。将接种了外植体的锥形瓶或植物组织培养瓶置于18~22℃的培养箱中培养。定期观察和记录愈伤组织的生长情况。③芽、根的诱导与培养：将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽的培养基上。长出芽后，再将其转接到诱导生根的培养基上，进一步诱导形成试管苗。④炼苗移植：将试管苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中，壮苗后再移栽入土。
【详解】A、过程①选取幼嫩叶片（分化程度低，易脱分化），应该在70%的酒精浸泡30s后，立即取出，在无菌水清洗2~3次，再用次氯酸钠溶液处理30min后，立即用无菌水清洗2~3次，A错误；
B、愈伤组织是高度液泡化，不定形的薄壁组织团块，过程②诱导愈伤组织期间一般不需要光照，为了防止愈伤组织分化成筛管、维管等，应避光培养，B正确；
C、过程③应配制2种培养基，其主要目的是满足不同阶段试管苗对特定激素的需求，生长素/细胞分裂素比值高有利于根的分化、抑制芽的形成，生长素/细胞分裂素比值低有利于芽的分化、抑制根的形成，C错误；
D、过程④将试管苗移植到消过毒的珍珠岩基质中，是为了试管苗适应外界环境，再移栽到土壤中。试管苗能进行光合作用合成有机物，不需要在珍珠岩基质中添加适量蔗糖作为碳源，D错误。
故选B。
10. 胞质杂种是指两个原生质体融合产生的杂种细胞，其中一个细胞的细胞核消失后，两个原生质体的细胞质杂交得到的个体。科研人员利用雄性不育的品种A与可育的品种B通过植物体细胞杂交技术获得了雄性不育的胞质杂种“华柚2号”，制备过程如下图所示，其中GFP（绿色荧光蛋白）基因转入了品种A的细胞核基因组中。经检测，“华柚2号”的细胞核和叶绿体基因来自品种B，线粒体基因来自品种A，下列说法正确的是（ ）

A. 制备原生质体时需用胰蛋白酶或纤维素酶去除细胞壁
B. 聚乙二醇或灭活的病毒可用于诱导原生质体A和B的融合
C. “华柚2号”的获得说明控制雄性不育的基因可能位于线粒体中
D. 应筛选发绿色荧光的杂种细胞C经植物组织培养技术获得“华柚2号”
【答案】C
【解析】
【分析】植物体细胞杂交，又称原生质体融合，是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。植物细胞具有细胞壁，未脱壁的两个细胞是很难融合的，植物细胞只有在脱去细胞壁成为原生质体后才能融合，所以植物的细胞融合也称为原生质体融合。
【详解】A、制备原生质体时需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，A错误；
B、灭活的病毒不能用于植物原生质体的诱导，B错误；
C、雄性不育的胞质杂种华柚2号的细胞核和叶绿体基因来自品种B，线粒体基因来自品种A，融合后品种A的细胞核消失，控制雄性不育的基因可能位于线粒体中，C正确；
D、GFP（绿色荧光蛋白）基因转入了品种A的细胞核基因组中，而融合后的华柚2号不含品种A的细胞核，因此发绿色荧光的杂种细胞应被淘汰，D错误。
故选C。
11. CMV 是危害烟草的主要病毒，CMV 侵染烟草后，发病的叶片会褪绿变成黄色。为筛选抗 CMV的烟草突变株，科研小组进行的实验流程如图所示。下列说法正确的是（ ）
A. 烟草幼苗茎尖病毒极少，直接取其进行组织培养可得到抗 CMV 植株
B. 若发病叶片中出现绿色区域，取该区域进行组织培养可能得到抗CMV 植株
C. 选取的叶片组织需先进行灭菌处理，再经过脱分化和再分化培养成抗 CMV 植株
D. 接种CMV起到了选择作用，因此经组织培养后得到的植株无需再进行抗CMV 鉴定
【答案】B
【解析】
【分析】物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。
【详解】A 、烟草幼苗茎尖病毒极少，但不能直接确定其就是抗 CMV 的，直接取其进行组织培养不一定能得到抗 CMV 植株，A 错误；
B、若发病叶片中出现绿色区域，说明可能存在对 CMV 有抗性的细胞，取该区域进行组织培养有可能得到抗 CMV 植株，B 正确；
C 、叶片组织不能先进行灭菌处理，这样会杀死细胞，应该先进行脱分化形成愈伤组织，再进行再分化培养成抗 CMV 植株，C 错误；
D、 接种 CMV 起到了选择作用，但经组织培养后得到的植株仍需再进行抗 CMV 鉴定来确保其抗性，D 错误。
故选B。
12. 甘草是中医使用最多的药材之一，其提取物中的黄酮具有抗衰老、抗炎等作用。如图表示利用悬浮培养生产甘草黄酮的过程。下列叙述正确的是（ ）

A. 可用次氯酸钠和酒精对种子进行灭菌
B. 图中添加果胶酶的主要目的是获得原生质体
C. 对细胞悬液进行人工诱变，其变异率常高于对器官或个体进行诱变
D. 图示过程能体现植物细胞的全能性
【答案】C
【解析】
【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。
【详解】A、可用次氯酸钠和酒精对种子进行消毒，A错误；
B、图示过程中添加果胶酶的主要目的瓦解植物的胞间层，更快获得细胞悬液，B错误；
C、愈伤组织细胞分裂旺盛，更易发生突变，C正确；
D、题图所示过程并未从已分化的植物细胞获得完整植株，不能体现植物细胞的全能性，D错误。
故选C。
13. 紫花苜蓿是常用的豆科牧草，但易使家畜患鼓胀病；百脉根富含物质X，X可与紫花苜蓿中特定蛋白结合，抑制鼓胀病的发生。为培育抗鼓胀病的新品种，科学家以紫花苜蓿和百脉根为材料进行了实验，主要流程如下图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. ①过程用到纤维素酶和果胶酶，该过程利用的生物技术原理是植物细胞的全能性
B. 为确保最终得到的F植株为杂种植株，可对②过程形成的C进行筛选和鉴定
C. ③过程中C的高尔基体活动性增强，D的形成是植物体细胞杂交完成的标志
D. ④过程需进行光照处理，将细胞培养至E阶段即可研究物质X的作用
【答案】B
【解析】
【分析】据图分析，图中①是去除细胞壁，②是原生质体的融合过程，③是筛选出杂种细胞的过程，④是脱分化过程，⑤是再分化过程，据此分析作答。
【详解】A、①是制备原生质体的过程，由于植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，故过程①需要用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞，其原理是酶的专一性，A错误；
B、②形成的细胞类型可能有紫花苜蓿-紫花苜蓿型、百脉根-百脉根型、紫花苜蓿-百脉根型等，为确保最终得到的F植株为新品种，可对②过程形成的C进行初步的筛选和鉴定，B正确；
C、③是筛选出杂种细胞的过程，该过程中由于要形成新的细胞壁，故高尔基体的活动增强，植物体细胞杂交完成的标志是形成新植株，而非图中的D形成，C错误；
D、④过程是脱分化过程，该过程需要避光处理，D错误。
故选B。
14. 植物体细胞杂交可分为对称性和非对称性细胞杂交两类。前者是直接将两个亲本原生质体诱导融合，形成重组细胞。后者指利用紫外线照射等方法使供体亲本染色质片段化，再与未处理的受体亲本融合。研究人员尝试培育产紫杉醇的柴胡，将红豆杉愈伤组织（2n＝24）和柴胡愈伤组织（2n＝12）进行了非对称性细胞杂交。下列说法正确的是（ ）
A. 该实验中需要用紫外线照射柴胡细胞，使其染色体片段化
B. 在诱导愈伤组织的培养基中加入聚乙二醇可诱导细胞融合
C. 将染色体数目多于12条的杂种细胞经植物组织培养即可得到产紫杉醇的柴胡
D. 对称性细胞杂交技术中不同物种间基因表达的干扰程度高于非对称性细胞杂交技术
【答案】D
【解析】
【分析】植物体细胞杂交技术：
1、概念：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术；
2、过程：
①诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等；化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂；
②细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成；
③植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束；
④杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。
3、意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。
【详解】A、紫杉醇是红豆杉属植物体内的一种次生代谢物，所以为培育产紫杉醇的柴胡，需要用紫外线照射红豆杉细胞，使其染色体片段化，A错误；
B、诱导植物细胞融合，应先用酶解法去除细胞壁，获取原生质体，然后加入聚乙二醇诱导，B错误；
C、得到产紫杉醇的柴胡的杂种细胞的染色体数目应介于柴胡的染色体数目12和两种生物染色体数目之和（36），C错误；
D、杂种细胞中两种植物细胞的染色体间排斥较为明显，所以对称性细胞杂交技术中不同物种间基因表达的干扰程度高于非对称性细胞杂交技术，D正确。
故选D。
15. 2023年11月，青岛农业大学成功完成了我国优良地方猪种里岔黑猪的克隆工作，成功产下20头雄性里岔黑猪。下列说法正确的是（ ）
A. 可以使用差速离心的方法去除由核膜包被的卵母细胞的细胞核
B. 利用电融合法使供受体细胞融合，供体核进入卵母细胞，形成重构胚
C. 在胚胎移植之前，需要切取滋养层细胞做DNA分析，鉴定性别
D. 克隆出的20头雄性里岔黑猪的遗传物质均只与供体细胞有关
【答案】B
【解析】
【分析】1、动物核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，继而发育成动物个体的技术。
2、利用核移植技术克隆动物时，其基本操作获取去核卵细胞→构建重构胚→激活重构胚→胚胎移植→获得克隆个体。
【详解】A、在核移植过程中，可通过显微操作去除卵母细胞中的细胞核，获得去核卵母细胞，A错误；
B、去核的卵母细胞与供体细胞可以通过电融合法融合，供体核进入受体卵母细胞，形成重构胚，B正确；
C、克隆的动物，性别不需要做鉴定，是已知的性别，与供体性别一致，C错误；
D、通过核移植方法培育的克隆动物，其细胞核的遗传物质全部来自供体细胞核，但细胞质中的遗传物质则来自提供去核卵细胞的雌性，D错误。
故选B。
16. 近年来由于栖息地丧失和人为捕猎，亚洲黑熊数量骤减，科学家期望通过人工授精、胚胎移植等方法拯救亚洲黑熊，其过程如下图。下列说法正确的是（ ）
A. 胚胎工程一般采用促性腺激素释放激素处理A使其超数排卵
B. E后代遗传性状与 A 和C一致，F后代遗传性状与B一致
C. D受体雌性必须和 A、B同期发情处理
D. A 排出的卵子必须培养成熟到MII才能与C的获能精子受精
【答案】D
【解析】
【分析】胚胎移植的基本程序：①对供、受体的选择和处理（用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。
【详解】A、胚胎工程一般采用促性腺激素处理A使其超数排卵，A错误；
B、E后代（由A的卵细胞和C的精子体内受精形成的受精卵发育形成）遗传物质来源于A和C，E后代遗传性状与A和C一致，而F后代（A的卵细胞提供细胞质，B提供细胞核）遗传物质来源于A和B，F后代遗传性状大部分与B一致，少数性状与A相同，B错误；
C、D受体雌性接受来自动物园亚洲黑熊♀A体内的胚胎，所以必须和动物园亚洲黑熊♀A同期发情处理，目的是使体内的生理环境保持一致，提高胚胎的存活率，而野生亚洲黑熊♀B只需要提供体细胞，所以不需要同期发情处理，C错误；
D、A超数排卵排出的细胞必须生长到MII才具有受精能力，C的精子获能后才能发生受精，因此A排出的卵子必须培养成熟到MII才能与C的获能精子受精，D正确。
故选D。
17. 小鼠正常2细胞期胚胎经过电融合诱导形成四倍体胚胎，四倍体胚胎具有发育缺陷，只能发育形成胎盘等胚体以外的结构。ES细胞能够诱导分化形成所有的细胞类型，但很难分化形成胎盘。将ES细胞和四倍体胚胎聚合形成新的重构胚，可发育成完整小鼠个体，称为四倍体补偿技术。下列说法错误的是（ ）
A. 重构胚中的ES细胞具有自我更新能力，但很难分化为胎盘等胚外组织
B. 重构胚发育至桑葚胚或囊胚再移植到生理状态相同的小鼠子宫内才能发育成完整小鼠个体
C. 通过四倍体补偿技术得到的小鼠个体的基因型与供体ES细胞的基因型不同
D. 利用四倍体补偿技术，可将ES细胞经过体外遗传学修饰，得到经过人为修饰的目的小鼠
【答案】C
【解析】
【分析】胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。包括体外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术。胚胎工程的许多技术，实际是在体外条件下，对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作。嵌合体-遗传学上用以指不同遗传性状嵌合或混杂表现的个体。
【详解】A、据题干信息“ES细胞能够诱导分化形成所有的细胞类型，但很难分化形成胎盘”，所以重构胚中的ES细胞具有自我更新能力，但很难分化为胎盘等胚外组织，可分化为处胎盘以外的所有细胞类型，A正确；
B、胚胎发育至桑椹（桑葚）胚或囊胚期再移植入与之生理状态相同的小鼠子宫内才可以进一步发育，B正确；
C、四倍体胚胎与ES细胞的嵌合体则会使二者的发育潜能相互补偿，可得到ES小鼠，其中的四倍体胚胎只能发育成胚外组织，所以嵌合体发育形成的ES小鼠基因型与供体ES细胞的基因型相同，C错误；
D、正常小鼠是二倍体，所以两个2细胞期胚胎用灭活病毒等诱导法使细胞融合，可得到一个含四个染色体组的细胞，再经胚胎的早期培养可得到四倍体胚胎，可将ES细胞经过体外遗传学修饰，得到经过人为修饰的目的小鼠，D正确。
故选C。
18. 卵母细胞成熟包括“细胞核成熟”和“细胞质成熟”。研究人员利用基因敲除技术敲除小鼠的Bta4基因，发现Bta4敲除的卵母细胞虽能正常受精，但形成的早期胚胎却全部停滞在1到2细胞阶段，胚胎停止发育的原因是卵母细胞中的mRNA不能被及时降解。下列说法错误的是（ ）
A. 卵细胞形成过程中减数分裂是不连续的，MII期卵母细胞具备受精能力
B. 早期胚胎发育到2细胞阶段是在透明带内进行的，胚胎的总体积不变
C. 卵母细胞中mRNA的及时降解是启动早期胚胎基因组表达的前提条件
D. Bta4基因与卵母细胞中mRNA降解有关，可促使卵母细胞的细胞核成熟
【答案】D
【解析】
【分析】题意分析，敲除小鼠的Btg4基因后卵母细胞虽能正常成熟和受精，但形成的早期胚胎却全部阻滞在1到2细胞阶段，造成雌性不育，说明Btg4基因在雌性育性方面有重要作用。
【详解】A、卵细胞形成过程中减数分裂是不连续的，MⅡ期卵母细胞具备受精能力，通常将次级卵母细胞培养到MⅡ中期，A正确；
B、胚胎发育的早期有一段时间是在透明带中进行的，这一时期称为卵裂期，2细胞阶段属于卵裂期，卵裂期胚胎的总体积不变，B正确；
C、题意显示“胚胎停止发育原因是卵母细胞中的mRNA不能被及时降解”，显然，卵母细胞中mRNA的及时降解是启动早期胚胎基因组激活的前提条件，C正确；
D、Btg4基因敲除后卵母细胞能正常成熟和受精，说明该基因与细胞核成熟无关，而形成的早期胚胎却全部阻滞在1到2细胞阶段，推测可能是Btg4基因能促使细胞质成熟，D错误。
故选D。
19. 我国现已成功克隆出了多种哺乳动物。下列说法错误的是（ ）
A. 动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植
B. 哺乳动物的卵母细胞在体外培养到MⅡ期方可通过显微操作去核
C. 重构胚发育到囊胚时内细胞团从囊胚腔中伸展出来的过程称为孵化
D. 胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理状态下空间位置的转移
【答案】C
【解析】
【分析】动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难。因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。胚胎移植是指将通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体叫“受体”。通过任何一项技术（如转基因、核移植和体外受精等）获得的胚胎，都必须移植给受体才能获得后代。
【详解】A、由于动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难，因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，A正确；
B、因为处于MII期的卵母细胞细胞核的位置靠近第一极体，便于显微镜操作去核，所以哺乳动物的卵母细胞在体外都培养到MII期在进行显微操作去核，B正确；
C、囊胚进一步扩大，会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫做孵化，C错误；
D、胚胎移植的成功率，与供、受体生理状况环境条件一致性密切相关，只有供、受体生理环境高度一致，移入受体的胚胎才能被接受并继续发育，因此胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理状态下空间位置的转移，D正确。
故选C。
20. 基因组印记（通过甲基化实现受精卵中来自双亲的两个等位基因一个表达另一个不表达）阻碍了哺乳动物的“孤雌生殖”。某研究团队利用甲基化酶、去甲基化酶和基因编辑技术，改变了小鼠生殖细胞的“基因组印记”，使其“变性”，然后将一个第二极体注入修饰后的次级卵母细胞（类似受精作用），最终创造出“孤雌生殖”的小鼠。实验过程如图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 体外培养卵母细胞时，需将培养皿置于含95%O2和5%CO2的培养箱中培养
B. 基因组印记会阻碍次级卵母细胞与精子或第二极体的结合
C. 需对代孕母鼠进行同期发情处理后，再进行胚胎移植
D. “孤雌小鼠”的诞生过程没有精子参与，所以其基因型与提供卵母细胞的雌鼠相同
【答案】C
【解析】
【分析】表观遗传是指DNA序列不发生变化，但基因的表达却发生了可遗传的改变，即基因型未发生变化而表现型却发生了改变，如DNA的甲基化，甲基化的基因不能与RNA聚合酶结合，故无法进行转录产生mRNA，也就无法进行翻译，最终无法合成相应蛋白，从而抑制了基因的表达。
【详解】A、体外培养卵母细胞时，需将培养皿置于含95%空气和5%CO2的培养箱中培养，A错误；
B、基因组印记会阻碍了哺乳动物的“孤雌生殖”，但不能推出其阻碍次级卵母细胞与精子或第二极体的结合，B错误；
C、胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎或通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为个体的技术；胚胎移植的实质是早期胚胎在同种生理环境条件下空间位置的转移，为了保证胚胎移植的成功率需对代孕母鼠进行同期发情处理后，再进行胚胎移植，C正确；
D、“孤雌小鼠”是由修饰后的次级卵母细胞和一个第二极体结合后发育形成的，同时由于配子在形成过程中会经历减数分裂的基因重组，或发生基因突变，将导致“孤雌小鼠”的基因型不一定与提供卵母细胞的雌鼠相同，D错误。
故选C。
二、不定项选择题：本大题共10小题。
21. 鲁菜是中国八大菜系之首，十分讲究配料和调料的搭配，烹饪中常使用酱油、腐乳、味精、白酒、醋和泡菜进行调味，下列说法错误的是（ ）
A. 白酒、味精和醋的发酵生产所需要的微生物均为真核生物
B. 酱油的发酵生产经过蛋白质分解为小分子肽和氨基酸
C. 腐乳发酵过程中起主要作用的微生物是黑曲霉
D. 泡菜发酵后期，尽管乳酸菌占优势，但仍有产气菌繁殖，需开盖放气
【答案】ACD
【解析】
【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
3、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
【详解】A、白酒酿造使用的菌种是酵母菌，为真核生物；生产味精用的菌种是谷氨酸棒状杆菌，为原核生物；酿醋使用的菌种是醋酸菌，为原核生物，A错误；
B、酿造酱油以大豆为主要原料，利用产生蛋白酶霉菌（如黑曲霉），将原料中的蛋白质水解成小分子的肽和氨基酸，然后经淋洗、调制成酱油产品，B正确；
C、腐乳发酵过程中起主要作用的微生物是毛霉，C错误；
D、乳酸菌属于厌氧菌，开盖放气会影响乳酸菌发酵，因此不能开盖放气，D错误。
故选ACD。
22. 柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂。如图为研究人员以红薯粉为原料经黑曲霉发酵生产柠檬酸的简要流程图。下列说法错误的是（ ）
A. 黑曲霉与生产果醋和腐乳时所用主要微生物的代谢类型相同
B. 将菌种接种至A培养基时，浸泡在酒精中的涂布器使用前需在火焰上灼烧
C. 将菌种转接至B培养基的目的是增加黑曲霉菌种数量
D. 若发酵罐C中的原料为大豆粉，可利用黑曲霉水解大豆中的淀粉制成酱油
【答案】BD
【解析】
【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。
【详解】A、由培养时需要通气振荡可知，黑曲霉的异化作用类型为需氧型，因此其代谢类型为异养需氧型，制作果醋利用的是醋酸菌，制作腐乳利用的是毛霉，它们的代谢类型均为异养需氧型，A正确；
B、将菌种接种至A培养基时，平板划线法的接种工具接种环在使用前需在火焰上灼烧灭菌，B错误；
C、将菌种转接至B培养基是将菌种转接至新的培养基，目的是为了进行扩大培养，从而增加菌种的数量，C正确；
D、以大豆为主要原料，利用产生蛋白酶的霉菌(如黑曲霉)，将原料中的蛋白质水解成小分子的肽和氨基酸，然后经淋洗、调制可以制成酱油产品，D错误。
故选BD。
23. 细菌X合成的tcel蛋白和tcil蛋白使其在与其他细菌的竞争中占优势，其中tcel蛋白是一种有毒性的分泌蛋白。研究人员利用野生型细菌X及其不同突变体进行了如下实验：在固体培养基表面放置一张能隔离细菌的滤膜，将一种菌（下层菌）滴加在滤膜上后再放置第二张滤膜，滴加等量的另一种菌（上层菌），共同培养后，对上、下层菌计数得到的结果如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A. 实验中的培养皿、固体培养基和滤膜均需要进行消毒处理
B. 对上、下层菌计数可以将滤膜菌体稀释后采用血球计数板计数
C. 由甲、乙，丙三组结果可推测tcil蛋白能够中和tcel蛋白的毒性
D. 野生型细菌X在与tcel—tcil双突变体和tcel突变体的竞争中均占优势
【答案】C
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、为避免杂菌的污染，实验中的滤膜、培养皿、固体培养基等均需灭菌处理，A错误；
B、对活菌进行计数的方法是稀释涂布平板法，具体方法是：先将菌体进行梯度稀释，再涂布到滤膜的表面，待菌落数稳定时进行计数，不能用显微镜直接计数的原因是显微镜直接计数不能区分死菌和活菌，B错误；
C、tcel蛋白是一种有毒性的分泌蛋白，乙组中野生型可产生tce1蛋白作用于tcel-tcil双突变体，后者无法产生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生菌在竞争中占据优势；而在丙组中，野生型可产生tce1蛋白作用于tcel突变体，后者可以产生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生型的生长受到抑制，由此推测， tcil蛋白能够中和tcel蛋白的毒性，C正确；
D、由甲组、乙组可知，野生型细菌X在与tcel-tcil双突变体的竞争中均占优势，由甲组、丙组可知，野生型细菌X在与tcel突变体的竞争中不占优势，D错误。
故选C。
24. 下列关于植物愈伤组织说法正确的是（ ）
A. 用果胶酶和胶原蛋白酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体
B. 融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织
C. 体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的2个细胞核
D. 通过愈伤组织再生出多个完整植株的过程属于无性繁殖
【答案】BD
【解析】
【分析】植物体细胞杂交过程：将植物细胞A与植物细胞B用纤维素酶和果胶酶处理，得到不含细胞壁的原生质体A和原生质体B，运用物理方法或化学方法诱导融合，形成杂种细胞，再利用植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株。
【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，故用果胶酶和纤维素酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体，A错误；
B、用纤维素酶和果胶酶分别处理不同的植物细胞，得到原生质体，运用物理方法或化学方法诱导融合，形成杂种细胞，再利用植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株，故融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织，B正确；
C、体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的遗传物质，只有1个细胞核，C错误；
D、通过愈伤组织再生出多个完整植株的过程属于植物的组织培养，从繁殖看属于无性繁殖，D正确。
故选BD。
25. 肉苁蓉具有较高的药用价值，自然条件下的产量较低，其次生代谢产物苯乙醇苷(PeGs)是主要活性成分。研究人员以外植体诱导出愈伤组织，进一步进行细胞悬浮培养。在不同的初始接种浓度下培养一段时间后，对悬浮培养液的PeGs进行测定，结果如下图所示。下列有关叙述不正确的是（ ）
A. 植物细胞培养的目的主要是获得植物生长和生存所必需的次生代谢产物
B. 若工厂化大量生产PeGs细胞悬浮培养时就应选择接种细胞的浓度为3.2g·L-1
C. 若需进一步了解细胞生成PeGs的能力，则要检测培养后培养液中的细胞密度
D. 植物组织培养时，应对外植体进行灭菌处理以防止培养基及愈伤组织污染
【答案】ABD
【解析】
【分析】1、植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。
2、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。
【详解】A、植物细胞培养的目的主要是获得植物细胞的次生代谢产物，次生代谢不是生物生长所必需的，A错误；
B、若工厂化大量生产PeGs，细胞悬浮培养时选择接种细胞的浓度应在2.4至4.0g·L-1之间设置梯度浓度找到最适浓度，B错误；
C、若需进一步了解细胞生成PeGs的能力，细胞密度若过大影响其产量，因此要检测培养后培养液中的细胞密度，C正确；
D、植物组织培养时，应对外植体进行消毒处理，对培养基进行灭菌处理，以防止培养基及愈伤组织污染，D错误。
故选ABD。
26. 自杀基因系统是指外源基因导入受体细胞后会表达相应的酶，该酶可催化无毒的药物前体转化为有毒物质，从而导致受体细胞被杀死。为探究外源基因TK与药物更昔洛韦能否组成自杀基因系统。研究人员以肝癌细胞为受体细胞进行实验，结果如图所示。下列说法错误的是（ ）
A. 培养肝癌细胞的过程中需定期更换培养液以保持无菌、无毒的环境
B. 肝癌细胞在细胞培养过程中没有接触抑制，因而无需进行传代培养
C. 对照组和实验组应分别为导入TK和未导入TK的肝癌细胞
D. 实验结果表明外源基因TK与更昔洛韦可组成自杀基因系统
【答案】ABC
【解析】
【分析】定期更换培养液主要有以下作用：一是可以补充细胞生长所需的营养物质，因为随着细胞的生长和代谢，培养液中的营养成分会逐渐消耗；二是可以清除细胞代谢产生的废物，如二氧化碳、乳酸等，避免这些废物积累对细胞生长产生不利影响；三是可以维持培养液适宜的酸碱度和渗透压等理化性质，为细胞提供良好的生长环境。
【详解】A 、培养肝癌细胞的过程中需定期更换培养液可以补充细胞生长所需的营养物质，清除细胞代谢产生的废物等，A 错误；
B 、肝癌细胞在培养过程中不会有接触抑制，但受空间和营养物质限制，仍需要进行传代培养，B 错误；
C 、 对照组应为未导入 TK 的肝癌细胞，实验组应为导入 TK 的肝癌细胞，C 错误；
D 、 从图中可以看出，添加更昔洛韦后，实验组细胞数量明显减少，而对照组变化不大，说明外源基因 TK 与更昔洛韦可组成自杀基因系统，D 正确。
故选ABC。
27. 细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。某研究小组以小鼠甲为实验材料设计实验，研制抗病毒A的单克隆抗体。下列叙述错误的是（ ）
A. 实验前必须给小鼠甲注射病毒A是为了得到能产生特定抗体的B淋巴细胞
B. 将小鼠体内取出的脾脏用剪刀剪碎后加入胃蛋白酶处理，使其分散成单个细胞
C. 筛选1需用特定的选择培养基进行筛选才能获得融合的杂交痛瘤胞
D. 筛选2利用96孔板经1次筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞
【答案】BD
【解析】
【分析】1、单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾脏内获得相应的B淋巴细胞；（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体；（3）克隆化培养和抗体检测；（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖；（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
2、单克隆抗体的应用：①作为诊断试剂，具有准确、高效、简易、快速的优点；②用于治疗疾病和运载药物。
【详解】A、该实验前必须给小鼠甲注射病毒A，该处理的目的是诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞，A正确；
B、将小鼠体内取出的脾脏用剪刀剪碎后加入胰蛋白酶处理，使其分散成单个细胞，B错误；
C、为了得到能产生抗病毒A单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。第一次筛选用特定的选择培养基筛选：未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(“BB”细胞、“瘤瘤”细胞)都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞(“B瘤”细胞)才能生长，C正确；
D、第二次筛选用多孔培养皿培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测，经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群，该过程用到抗原抗体杂交，获取的杂交瘤细胞通过培养获得大量的分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，D错误。
故选BD。
28. 科研人员成功培育了能分泌含卵泡刺激素（FSH）乳汁的转基因山羊，其基本流程为：含FSH基因表达载体→导入山羊成纤维细胞→核移植→重构胚→检测并获得转基因山羊。下列说法错误的是（ ）
A. 需将转基因成纤维细胞的细胞核移入到MⅡ期的去核卵母细胞中
B. 采用电融合法激活重构胚后才能将其移入代孕母羊体内
C. 悬浮培养成纤维细胞及重构胚时因无接触抑制现象细胞会持续增殖
D. 需根据山羊胚胎的早期发育特点确定重构胚的胚胎移植时期
【答案】BC
【解析】
【分析】动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。动物细胞培养需要的条件有：①无菌、无毒的环境；②营养；③温度和pH；④气体环境：95%空气+5%CO2；动物细胞培养技术主要应用在：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质等。
【详解】A、作为核移植受体细胞的去核卵母细胞一般处在减数第二次分裂中期，利用显微操作去核法，将细胞核和第一极体一并吸出，然后将转基因成纤维细胞的细胞核移入到MⅡ期的去核卵母细胞中，A正确；
B、可通过电刺激法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，B错误；
C、悬浮培养的细胞会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，不会持续增殖，需要进行分瓶处理，C错误；
D、需根据山羊胚胎的早期发育特点确定重构胚的胚胎移植时期，一般是将胚胎发育至桑葚胚或囊胚阶段，D正确。
故选BC。

29. 线粒体置换技术是将妈妈携带突变线粒体的卵子细胞核移植到去核的健康线粒体捐赠者卵胞浆中获得的重构卵母细胞，与携带者丈夫精子进行受精，从而获得重构胚胎也就是通常说的“三亲胚胎”，也被称为“第四代试管婴儿”。下列有关说法错误的是（ ）
A. 受精作用前，精子需进行获能处理，为受精提供能量
B. 第四代试管婴儿的DNA来自携带者与其丈夫
C. 第四代试管婴儿可避免线粒体疾病
D. 第四代试管婴儿的培育还需要经历早期胚胎培养和胚胎移植等技术
【答案】AB
【解析】
【分析】试管婴儿是指人的卵细胞和精子在体外完成受精作用，发育到早期胚胎的一定阶段，再移入到母体子宫内继续发育到足月诞生的婴儿，由于受精过程和早期胚胎发育通常在试管中完成，所以叫试管婴儿。
【详解】A、受精作用前，精子需进行获能处理，不是提供能量，而是获得受精能力，A错误；
B、细胞中的DNA包括核DNA和质DNA，第四代试管婴儿的核DNA来自携带者及其丈夫，质DNA来自捐赠者线粒体DNA，B错误；
C、第四代试管婴儿是由携带者突变线粒体的卵子提供细胞核，捐赠者提供去核的细胞质，可避免携带者的线粒体疾病通过母系遗传传递给下一代，C正确；
D、第四代试管婴儿的培育还需要经历早期胚胎培养到适宜时期，再经历胚胎移植等技术移植到母体子宫孕育成熟，D正确。
故选AB。
30. 在自然界中，嵌合体现象并不罕见。嵌合体是指在同一个体中，由基因型不同的细胞或组织相互接触且维持各自并存的混合状态。若细胞来自不同物种则为异种嵌合体；若细胞来自同一物种则为同种嵌合体。迄今为止，异种嵌合体仅有大、小鼠异种嵌合体实验获得成功。科研人员主要利用iPS细胞与囊胚构建嵌合体，下列叙述错误的是（ ）
A. iPS细胞和囊胚的内细胞团细胞都具有发育的全能性
B. A过程前往往需要超数排卵处理，B过程为胚胎移植
C. 体外采集到的精子可使用含有Ca2+的溶液处理使精子获能
D. 若小鼠的染色体数目为40条，大鼠的染色体数目为42条，则嵌合体鼠的体细胞在有丝分裂后期染色体数目为82条
【答案】CD
【解析】
【分析】题图分析，图中A为获取卵母细胞的过程，该过程需要通过超数排卵处理，B过程为胚胎移植技术，图示获得的嵌合体为同种嵌合体。
【详解】A、iPS细胞和囊胚的内细胞团细胞都具有发育的全能性，因而可以形成嵌合体，A正确；
B、为了获得更多的卵母细胞，A过程前往往需要超数排卵处理，B过程为胚胎移植，通常需要对代孕母鼠进行同期发情处理，B正确；
C、体外采集到的精子可使用含有Ca2+载体的溶液处理使精子获能，C错误；
D、若小鼠的染色体数目为40条，大鼠的染色体数目为42条，则嵌合体鼠的体细胞在有丝分裂后期染色体数目为84条或80条，D错误。
故选CD。
第Ⅱ卷（非选择题）
二、非选择题：本大题共3大题。
31. 有机磷农药使用不当有时会造成瓜果蔬菜等食品农药残留超标，危害人类健康。某兴趣小组同学提出：土壤中可能存在高效降解有机磷农药的微生物。请回答下列问题：
（1）在制备固体培养基时需加入的常用凝固剂是_____。若培养基需要调节pH，则应在灭菌之_____（填“前”或“后”）调节。配制好的培养基通常采用的灭菌方法是_____。为了获得能降解有机磷农药的微生物菌种，需在培养基中添加适量的_____行选择培养。
（2）该小组在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板在适宜条件下先培养一段时间，这样做的目的是_____。
（3）如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，图B接种方法是_____。利用图A的方法在5个平板上各接种稀释倍数为103的菌液样品（涂布体积为0.2mL），培养一段时间后，平板上的菌落数分别为96个、100个、108个、112个、430个，则每升原菌液样品中的细菌数为_____个，用这种方法测定菌体密度时，实际活菌数量要比测得的数量多，原因是_____。
（4）将获得的3种待选微生物菌种甲、乙、丙分别接种在1L含20mg有机磷农药的相同培养液中培养（培养液中其他营养物质充裕、条件适宜），观察从实验开始到微生物停止生长所用的时间。甲、乙、丙分别为32小时、45小时、16小时，则应选择微生物_____（填“甲”“乙”或“丙”）作为菌种进行后续培养。
【答案】（1） ①. 琼脂 ②. 前 ③. 高压蒸汽灭菌法##湿热灭菌法 ④. 有机磷农药
（2）检测培养基平板灭菌是否合格
（3） ①. 平板划线法 ②. 5.2× 108 ③. 当两个或多个细胞连在一起时发育为菌落时，平板上观察到的只是一个菌落 （4）丙
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养，在线的开始部分微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【小问1详解】
在制备固体培养基时需加入的常用凝固剂是琼脂；制备培养基过程中，为了避免杂菌污染，应该先调节pH再灭菌； 常用高压蒸汽灭菌法（湿热灭菌法）对培养基进行灭菌；因为要获得能降解有机磷农药的微生物菌种，所以要在添加了适量的有机磷农药的培养基上进行选择培养。
【小问2详解】
检测培养基平板灭菌是否合格的方法：将未接种的空白培养基在适宜条件下培养一段时间后观察，无菌落形成说明该培养基灭菌合格，有菌落形成就不合格。
【小问3详解】
图A菌落分布较均匀，说明接种方法是稀释涂布平板法，图B菌落集中呈线状，说明接种方法是平板划线法；为了保证结果准确，一般选择菌落数为30~300的平板进行计数，根据题意可知，每升原菌液样品中细菌数为（96+100+108+112）÷4÷0.2×1000×103=5.2 × 108个；当样品的稀释度足够高时，培养基表面一个活菌就生长为一个菌落，故用这种方法测定菌体密度时，由于存在少数两个或多个活菌细胞连在一起的现象，而平板上观察到的只是一个菌落，所以实际活菌数量要比测得的数量多。
【小问4详解】
微生物停止生长，说明有机磷农药被分解完，丙分解等量有机磷所用时间比甲、乙少，说明丙分解有机磷农药的能力比甲、乙强，因此应选择微生物丙作为菌种进行后续培养。
32. 癌症的免疫疗法通过重新激活抗肿瘤的免疫细胞，克服肿瘤的免疫逃逸，在癌症治疗方法中取得越来越突出地位，科研人员在不断研究中发现多种免疫治疗方法的结合是提高治疗效果的途径之一。
（1）某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白PSMA和PD-L1，如图1.PD-L1能抑制T细胞的活化，使癌细胞发生免疫逃逸。单克隆抗体最主要的优点在于_____。临床上可利用PD-1的单克隆抗体进行癌症治疗。将等量的纯化PD-1蛋白分别注射到5只小鼠体内，经过二次免疫后测定小鼠抗PD-1抗体的免疫效果，取其中免疫效果最好的1号小鼠用于后面的融合实验。在融合前三天，对1号小鼠加强免疫一次，目的是_____。然后取小鼠的脾脏细胞用_____（化学试剂）诱导与骨髓瘤细胞融合，用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。
（2）一段时间后，将（1）所得细胞进行抗体阳性检测，检测原理如上图。
①在检测时需要将PD-1蛋白固定于固相载体表面制成_____，并加入多孔板培养槽中的_____（细胞、上清液），即待测样本。
②加入酶标抗体后一段时间，需要用洗涤剂将未与_____结合的酶标抗体洗去。
③加入相应酶促反应底物显色后，颜色的深浅可代表_____。
【答案】（1） ①. 能准确地识别抗原的细微差异（灵敏度高），与特定抗原发生特异性结合（特异性强），并且可以大量制备 ②. 刺激机体产生更多能够分泌特异性抗体的B细胞（浆细胞） ③. PEG##聚乙二醇
（2） ①. 固相抗原 ②. 上清液 ③. 抗PD-1抗体 ④. 抗PD-1抗体的量
【解析】
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【小问1详解】
单克隆抗体最主要的优点在于能准确地识别抗原的细微差异（灵敏度高），与特定抗原发生特异性结合（特异性强），并且可以大量制备。加强免疫可刺激机体产生更多能够分泌特异性抗体的B细胞（浆细胞）。可用PEG试剂诱导小鼠的脾脏细胞和骨髓瘤细胞融合，用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。
【小问2详解】
①在检测时需要将PD-1蛋白固定于固相载体表面制成固相抗原。单克隆抗体是分泌蛋白，分布在上清液中，所以在固定抗原上加入多孔板培养槽中的上清液，即待测样本。
②加入酶标抗体后一段时间，为了排除干扰，则需要用洗涤剂将未与抗PD-1抗体结合的酶标抗体洗去。
③由图可知，酶标抗体可催化无色底物生成蓝色物质，PD-1蛋白与抗PD-1抗体的结合量越多颜色越深，所以加入相应酶促反应底物显色后，颜色的深浅可代表与抗PD-1抗体的量。
33. 荷斯坦奶牛的产奶量很高，某公司引进了纯种荷斯坦奶牛（供体1），欲利用现代生物工程技术实现优良品种的快速繁殖，其操作流程设计如图，请回答下列问题：
（1）胚胎工程的理论基础是_____，图中受体母牛必须具备健康的体质和_____。
（2）为了充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，通过途径1繁育小牛时，常用_____对供体母牛进行超数排卵处理，但毕竟供体母牛提供的卵子总量有限，因而可通过途径2，对早期胚胎进行_____以提高胚胎的利用率，相对于途径1、2，途径3在提供胚胎数量方面具有更大的优势，理由是_____。
（3）为了获得优质奶牛，在胚胎移植前，需要取滋养层细胞进行_____。
（4）通过途径1得到的后代之间在性状上差异较大，而通过途径2得到的后代在性状上基本一致，原因是_____。
【答案】（1） ①. 哺乳动物受精和早期胚胎发育的规律 ②. 正常的繁殖能力
（2） ①. 促性腺激素 ②. 胚胎分割 ③. 途径3中供体1可提供大量的体细胞，而卵母细胞可由体质健康和繁殖能力强的本地牛提供，来源广泛
（3）性别鉴定、遗传病的筛查等
（4）途径1得到的后代为有性生殖产生的后代，彼此之间性状有较大差异；途径2得到的后代为无性生殖，彼此之间性状基本一致
【解析】
【分析】途径1中：良种公牛和供体1配种形成受精卵，并发育成早期胚胎，胚胎移植到受体子宫发育成小牛，属于有性生殖；途径2中：采用了胚胎分割技术；途径3中：供体1提供体细胞，供体2提供细胞质，经过核移植技术形成重组细胞，并发育形成早期胚胎，再胚胎移植到受体子宫发育成小牛，称为克隆生物。
【小问1详解】
胚胎工程的理论基础是哺乳动物受精和早期胚胎发育的规律。受体母牛必须具备健康的体质和正常的繁殖能力，以保证移植胚胎后可正常妊娠和发育。
【小问2详解】
常用促性腺激素对供体母牛进行超数排卵处理，而不用雌激素，原因是促性腺激素能够促进性腺发育，并促进排卵，而雌激素对下丘脑和垂体具有负反馈调节作用，过量的雌激素会导致性腺萎缩；但毕竟供体母牛提供的卵子总量有限，因而可通过途径2，对早期胚胎进行胚胎分割以提高胚胎的利用率，相对于途径1、2，途径3中供体1可提供大量的体细胞，而卵母细胞可由体质健康和繁殖能力强的本地牛提供，来源广泛，所以其具有相对更大的优势。
【小问3详解】
为了获得优质奶牛，在胚胎移植前，需要取滋养层细胞进行性别鉴定、遗传病的筛查等，以获得无相关遗传病的优质奶牛（母牛）。
【小问4详解】
途径1得到的后代为有性生殖产生的后代，彼此之间性状有较大差异；途径2得到的后代为无性生殖，彼此之间性状基本一致。