高中生物人教版 (2019)选择性必修3二 动物细胞融合技术与单克隆抗体教课课件ppt

这是一份高中生物人教版 (2019)选择性必修3二 动物细胞融合技术与单克隆抗体教课课件ppt，共36页。PPT课件主要包含了动物细胞融合技术，单克隆抗体，单克隆抗体的应用，课堂小结，课堂练习等内容，欢迎下载使用。
动物细胞工程的基本技术
植物体细胞杂交技术跨越不同种植物之间生殖隔离的屏障，克服远缘杂交不亲和的障碍，培育出新的作物类型。　　　　　
有没有技术让不同种动物的体细胞杂交，培育出集不同细胞优势于一身的动物细胞呢？
1970年，有两位科学家做了一个人—鼠细胞融合的实验，以证明细胞膜上的蛋白质分子是运动的。
如果让动物细胞进行融合，与植物有哪些不同之处？
无需去除细胞壁全能性受限制，不能培育成新的动物个体
指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。
细胞膜具有一定的流动性细胞增殖
物理法：离心、振动、电激
化学法：聚乙二醇（PEG)
生物法：灭活的病毒诱导法
与植物原生质体融合的方法相同
灭活：是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构。
原理：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝集，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。
生物方法：灭活病毒诱导法
思考：19世纪30年代，科学家曾在患肺结核、天花和麻疹等疾病的病人的病理组织中观察到多核细胞。如何解释这一现象？
病人体内病毒等诱导多个体细胞融合形成了多核细胞。
形成杂交细胞。即融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。
突破有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能，种间、属间、科间，甚至动物和植物之间的细胞融合都已获得成功。
①成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段；②利用动物细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。
7、动物细胞融合技术与植物体细胞杂交技术的比较
细胞膜具有一定的流动性植物细胞的全能性
细胞膜具有一定的流动性
用果胶酶和纤维素酶去除细胞壁
分散成单个细胞后诱导细胞融合
电融合法、离心法；聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法
PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法
主要用于制造单克隆抗体
打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种
突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能
缺陷：产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。
１）体内产生的特异性抗体种类多达百万种以上２）每个B淋巴细胞只分泌一种特异性的抗体
体外培养时，一个B淋巴细胞不能无限增殖
由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。
我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的?
有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和无限增殖能力同时具备?
1975年，英国科学家米尔斯坦和德国科学家科勒设计了一个极富创造性的试验方案：
既能迅速大量增殖，又能产生特异性抗体
由于发明了单克隆抗体的制备技术，米尔斯坦和科勒于1984年获得了诺贝尔生理学或医学奖。
米尔斯坦和科勒制备单克隆抗体的过程
BB 、B瘤 、瘤瘤
在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长
2、单克隆抗体的制备过程
(抗原-抗体杂交技术)
能分泌所需抗体的杂交瘤细胞
克隆化培养，专一抗体检验
体外培养或小鼠腹腔内增殖
优点：特异性强灵敏度高可大量制备
特点：既能大量繁殖又能产生专一抗体
从多种融合细胞中，筛选杂交瘤细胞
筛选能产生特异性抗体的足够数量杂交瘤细胞
知识拓展：第一次筛选获得杂交瘤细胞
①细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基喋呤阻断。②人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但不能分裂增殖。 ③鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，但能不断分裂增殖。
筛选出杂交瘤细胞方法？
B淋巴细胞及同型融合细胞
骨髓瘤细胞及同型融合细胞
抗体检测的方法——抗原-抗体杂交法
在单克隆抗体制备过程中，两次筛选的目的和方法是不相同的。
将杂交瘤细胞群稀释，约每孔1个细胞进行培养（克隆化培养）
1、诊断试剂——最广泛应用
比原来诊断方法提前了10d左右，准确率在90﹪以上。
具有准确、高效、简易、快速特点
资料1：用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”，在妊娠第8天就可以作出诊断。
资料2：抗体—药物偶联物（antibdy-drug cnjugate，ADC）通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。
主要用于癌症治疗。如：单克隆抗体+药物 =“生物导弹”
优点：位置准确、疗效高、副作用小
(“生物导弹” —单抗导向，药物为弹头)
医药领域，单抗类药物占有重要地位。
一个诱导细胞融合的新方法
－－单克隆抗体特异性强、灵敏度高、可大量制备的优势
1、关于动物细胞融合与植物体细胞杂交技术的比较,下列叙述合理的是(　　)A.均可使用PEG、电激或灭活病毒诱导细胞融合B.两者都可以跨越种属间的生殖隔离C.两者都可以体现细胞的全能性D.在适宜条件下，均可发育成完整个体
2、动物细胞融合属于动物细胞工程技术手段之一，下列有关动物细胞融合叙述正确的是(　　)A.动物细胞融合产生的细胞称为重组细胞B.融合后形成的细胞为单核或多核细胞C.常用的诱导融合的生物诱导剂是聚乙二醇、灭活的病毒等D.也称细胞杂交，可由两个或多个动物细胞结合成一个细胞
3、如图为单克隆抗体的制备流程示意图。下列叙述正确的是(　　)A.甲是从已免疫的小鼠脾脏中获得的致敏T淋巴细胞B.①表示将骨髓瘤细胞去核后进行细胞融合C.乙为融合细胞，同时具有细胞甲和骨髓瘤细胞的特性D.②表示筛选能产生特异性抗体的细胞
4、如图所示为杂交瘤细胞的制备示意图。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT-)，在HAT选择培养液中不能正常合成DNA，无法生长。下列叙述错误的是(　　)A.可用灭活的病毒诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合B.两两融合的细胞都能在HAT选择培养液中生长C.杂交瘤细胞需进一步筛选才能用于生产D.细胞膜的流动性是细胞融合的基础
1、有关动物细胞融合的叙述不正确的是(　　)A．使远缘杂交成为可能B．杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息C．其基本原理是细胞膜的选择透过性D．为制造单克隆抗体开辟了新途
2、用动物细胞工程技术制备单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是(　　)A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞B．用氯化钙作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合C．筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体D．该杂交瘤细胞的增殖方式和产物分别是有丝分裂和单克隆抗体