人教版 (2019)选择性必修3二 动物细胞融合技术与单克隆抗体导学案
展开第二节动物细胞工程
----- 动物细胞融合技术与单克隆抗体
【学习目标】
1.举例说出动物细胞融合的概念、原理及应用(生命观念、社会责任)
2.举例说出单克隆抗体的原理及应用(生命观念、社会责任)
3.单克隆抗体的制备过程(生命观念)
课前自主探究
一、动物细胞融合技术
1.概念:使 细胞结合形成一个细胞的技术。
2.诱导原理和结果
(1)诱导原理: 。
(2)诱导结果:形成 细胞。
3.诱导方法: 法、电融合法和 法等。
4.意义:突破了 的局限,使 成为可能。
5.动物细胞融合技术的应用
(1)成为研究 、 、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。
(2)用于制备 。
教材中的隐性知识 源于选择性必修3 P48“相关信息”:(1)灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去 ,但并不破坏病原体的 。
(2)灭活病毒诱导细胞融合与病毒和细胞所含的糖蛋白有关。
二、单克隆抗体
1.制备原理
(1)B淋巴细胞特点:
一种B淋巴细胞分泌一种 抗体。
(2)骨髓瘤细胞特点:
能在体外大量 。
(3)杂交瘤细胞特点:B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到的杂交瘤细胞,既能 又能产生大量 。
2.制备过程(如图)
3.单克隆抗体的优点
能准确地识别 ,与特定抗原发生特异性结合,并且可以 。
4.单克隆抗体的应用
(1)作为 ,具有准确、高效、简易、快速的优点。
(2)用于 和 。
易错易混辨析:
(1)植物原生质体融合与动物细胞融合的原理是相同的( )
(2)杂交瘤细胞进行体内培养,更容易控制培养条件( )
(3)制备单克隆抗体时,要选用已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞( )
(4)灭活的病毒能促进动物细胞融合,但不能促进植物细胞融合( )
(5)相比植物体细胞杂交,动物细胞融合特有的诱导方式是用灭活的病毒处理( )
(6)杂交瘤细胞进行体内培养,是为了获得能产生单克隆抗体的胚胎( )
(7)杂交瘤细胞的特点是既能迅速大量繁殖,又能产生专一抗体( )
课堂合作探究
探究一、动物细胞融合
【情境探究】如图为两种生物细胞融合的过程示意图,请思考回答:
(1)动物细胞融合的结构基础是什么?
(2)融合处理后的细胞是否可以直接用于培养?为什么?
(3)比较动物细胞融合与植物体细胞杂交所用的促融方法的异同。
(4)若该图为植物体细胞杂交,细胞甲有2个染色体组,细胞乙有4个染色体组,那么X个体含有几个染色体组?
(5)某同学为了保证融合不会出现其他情况,只选用一个甲细胞和一个乙细胞进行融合,你认为他的做法是否合理?说出你的理由。
【归纳总结】
1.动物细胞融合过程解读:
(1)操作过程:细胞膜融合→细胞质融合→细胞核融合(实质)。
(2)筛选意义:诱导融合的手段只是促使细胞间的融合,不能保证所有的细胞都发生融合,形成的融合细胞也有多种。
(3)融合细胞特点:具有两个细胞的遗传信息,通过动物细胞的培养,杂交细胞表现出两个亲本的特点。
2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较
比较项目 | 植物体细胞杂交 | 动物细胞融合 |
原理 | 细胞膜的流动性、细胞的全能性 | 细胞膜的流动性、细胞的增殖 |
融合前处理 | 先除去细胞壁 | 先使细胞分散开 |
使用的酶 | 纤维素酶和果胶酶 | 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 |
诱导手段 | 物理法:电融合法、离心法 化学法:PEG融合法、高Ca2+—高pH融合法 | 除物理法和化学法外,也可用灭活的病毒诱导 |
结果 | 杂种植株 | 杂交细胞 |
应用 | 培育植物新品种 | 主要用于制备单克隆抗体 |
意义 | 克服了远缘杂交不亲和的障碍,打破了生殖隔离,扩展了杂交的亲本组合 |
探究二、单克隆抗体
【情境探究】下图为单克隆抗体的制备过程,请据图回答问题:
(1)用特定抗原对小鼠进行免疫的原因?
(2)动物细胞融合与植物原生质体融合的原理相同吗?
(3)制备单克隆抗体的过程中的几种细胞,如免疫的B淋巴细胞、骨髓瘤细胞、杂交瘤细胞各有何特点?
(4) 已知小鼠的体细胞含2N=40条染色体,那么融合的杂交瘤细胞中染色体和染色体组数分别是多少?
(5)单克隆抗体被广泛用作诊断试剂的原因是什么?
【归纳总结】
1.两种抗体的比较
名称 | 产生 | 特点 |
血清抗体 | 由 细胞分泌 | 一般从血清中分离,产量低、纯度低、特异性差 |
单克隆抗体 | 由 细胞分泌 | 特异性强、灵敏度高,能大量制备 |
2.制备单克隆抗体过程中的两次筛选
项目 | 第一次筛选 | 第二次筛选 |
筛选原因 | 诱导融合后得到多种杂交细胞,另外还有 的细胞 | 从小鼠体内提取的B淋巴细胞有很多种,形成的杂交瘤细胞也有很多种 |
筛选方法 | 用特定的 培养基筛选:未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞都会死亡,只有 细胞才能生长 | 用多孔培养皿培养,在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始 培养和 检测,经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群 |
筛选目的 | 得到 细胞 | 得到能 的杂交瘤细胞 |
第2节 动物细胞融合和单克隆抗体
课前自主探究
一、动物细胞融合技术
1.两个或多个 2.(1)细胞膜的流动性 (2)杂交
3. PEG融合 灭活病毒诱导 4.有性杂交 远缘杂交
5.(1)细胞遗传 细胞免疫 (2)单克隆抗体
教材中的隐性知识 感染能力 抗原结构 糖蛋白
二、单克隆抗体
1.(1)特异性 (2)增殖 (3)大量增殖 特定抗体
2.杂交瘤细胞 能产生所需抗体
3.抗原的细微差异 大量制备 4.(1)诊断试剂 (2)治疗疾病 运载药物
易错易混辨析:√√√√√ ×√
课堂合作探究
探究一、动物细胞融合
(1)细胞膜的流动性。
(2)不可以,还需要筛选。因为诱导融合的手段只是促使细胞间的融合,不能保证所有细胞都发生融合,形成的融合细胞也有多种,因此需要筛选。
(3)相同点:二者都可以采用PEG融合法、电融合法进行促融。
不同点:动物细胞融合还可以采用灭活病毒诱导进行促融。
(4)X个体含有6个染色体组。
(5)不合理。因为细胞融合成功率较低,只选用两个细胞可能无法获得融合的细胞。
探究二、单克隆抗体
(1)B淋巴细胞要经过免疫过程,即接触抗原,增殖分化为有特异性免疫功能的B淋巴细胞,才能产生相应的抗体,所以,与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞实际上是浆细胞。
(2)相同,都依据细胞膜的流动性。
(3)免疫的B淋巴细胞:能产生单一抗体,但不能无限增殖;骨髓瘤细胞:能无限增殖,但不能产生抗体;杂交瘤细胞:既能产生特定的抗体,又能在组织培养条件下进行无限增殖。
(4)80条染色体,4个染色体组
(5)单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异,与特定抗原发生特异性结合,并且可以大量制备。
【归纳总结】
1.B淋巴(浆) 杂交瘤
2.第一次筛选:未融合 选择 融合的杂交瘤 杂交瘤
第二次筛选:克隆化 抗体 分泌所需抗体
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