高中生物人教版 (2019)选择性必修3二 动物细胞融合技术与单克隆抗体课前预习ppt课件

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动物细胞工程—动物细胞培养技术和单克隆抗体
动物细胞是否也可以发生融合呢？
人工诱导—人-鼠细胞融合
动物细胞融合技术是指使两个或多个动物细胞融合形成一个细胞的技术。
原理: 细胞膜的流动性
动物细胞融合的方法:PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等
动物细胞融合特有灭活病毒诱导法
资料：19世纪30年代，科学家曾在肺结核、天花和麻疹等疾病的病人的病理组织中观察到多核细胞。
病人体内病毒等诱导多个体细胞融合形成了多核细胞。
PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等
细胞核的融合，标志融合完成
应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段，特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体
意义：突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能
细胞膜的流动性、植物细胞的全能性
用果胶酶和纤维素酶去除细胞壁
用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散成单个细胞
电融合法、离心法、聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法
PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法
突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能
打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种
植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较
一种B淋巴细胞（只产生一种特定抗体）
能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞
由于发明了单克隆抗体的制备技术，米尔斯坦和科勒于1984年获得了诺贝尔生理学或医学奖
①未融合的细胞、②多种杂交细胞
抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞（能产生特定抗体的杂交瘤细胞）
用特定的选择培养基第一次筛选
克隆化培养、抗体检测第二次筛选（可进行多次）
诱导融合后的细胞有多少种，该如何进行筛选呢?
特定的HAT选择培养基进行筛选: 未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。
由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激，所以经第一次筛选获得的杂交瘤细胞中存在产生其他抗体的细胞。
获得的杂交瘤细胞一定是所需的吗?
每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞
检测原理：抗原和抗体能够特异性结合(分子水平的鉴定) --抗原抗体杂交法。
融合的杂交瘤细胞特点：既能大量繁殖，又能产生专一的抗体。
抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞
从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体
单克隆抗体最主要的优点在于它的特异性强，灵敏度高，并可大量制备。
单克隆抗体应用—作为诊断试剂
女性怀孕后会分泌一种糖蛋白一一人绒毛膜促性腺激素(HCG)，用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体检测即抗HCG单克隆抗体（抗原-抗体杂交原理）制备试纸可以测试女性是否怀孕。
此外，还可广泛用于新冠病毒、乙肝病毒等多种疾病的诊断；利用同位素标记的单克隆抗体，在特定组织中成像，可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病。诊断肿瘤、心血管畸形等。
单克隆抗体应用—作为治疗疾病和运载药物—“生物导弹”
把抗癌细胞的单克隆抗体跟放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合，如抗体-药物偶联物(ADC)通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合对肿瘤细胞选择性杀伤。
1.关于动物细胞融合的说法错误的是( )
A.动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的多核细胞称为杂交细胞B.动物细胞融合己成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育的重要手段C.常用于诱导动物细胞融合手段有聚乙二醇、灭活的病毒、电激等D.细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能
2.单克隆抗体制备过程中，对骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培养基上不能存活、增殖的细胞是( )①B淋巴细胞 ②骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞 ④骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞A.①②③④B.①③⑤C.②④D.①③
3.某科研人员将病毒A注射到小鼠体内，制备针对病毒A的单克隆抗体。下列有关叙述正确的是( )A.小鼠体内产生的浆细胞与病毒A结合并产生抗体B.只有同种小鼠的浆细胞与骨髓瘤细胞能够融合C.与骨髓瘤细胞相比，杂交瘤细胞的高尔基体发达D.杂交瘤细胞的遗传物质与浆细胞相同
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