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高中生物人教版 (2019)选择性必修3一 动物细胞培养教学ppt课件
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这是一份高中生物人教版 (2019)选择性必修3一 动物细胞培养教学ppt课件,共28页。PPT课件主要包含了什么是动物细胞培养,动物细胞工程,课堂小结,探究新知,情境导入,课堂练习,动物细胞培养等内容,欢迎下载使用。
一.动物细胞培养的条件二.动物细胞培养的过程三.干细胞培养及其应用
怎样才能获得大量自体健康皮肤?
治疗大面积烧伤时,通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对病人来说,自体健康皮肤非常有限,使用他人皮肤来源不足且会产生免疫排斥反应。
可从病人身上取少量正常、健康皮肤在体外进行培养、扩增。目前,可对皮肤干细胞进行培养,获得适合临床上使用的人造皮肤。
从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。
获得细胞或者细胞产物,不能获得完整动物个体
适宜的温度、pH和渗透压
动物细胞培养所需的基本条件
1.营养条件:合成培养基 + 血清等天然成分
一、动物细胞培养的条件
营养条件
以便清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。
无菌无毒的环境
哺乳动物细胞培养的温度多以______________为宜;
多数动物细胞生存的适宜pH为___________
③维持适宜的渗透压的目的:
维持细胞正常的形态和功能
温度、PH、渗透压
通常采用培养皿或松盖培养瓶。
置于含有 和 的混合气体 的CO2培养箱中进行培养。
气体环境
一般取材于动物胚胎或幼龄动物的组织、器官。
细胞分化程度低,增殖能力强,容易培养。
二、动物细胞培养的过程
①从动物体取出的成块组织中,细胞与细胞靠在一起,彼此限制了生长和增殖。②利于细胞与培养液充分接触,更易进行物质交换。
(2)怎样将动物组织分散成单个细胞?
机械的方法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间。
不可以,因为胃蛋白酶的最适PH为1.5左右
细胞膜也含蛋白质,长时间会分解细胞膜蛋白,破坏细胞结构,把细胞消化掉。注意控制时间和酶用量。
①说明动物细胞间的物质主要是什么成分?
③胰蛋白酶处理时间过长,会怎样?
用培养液将细胞制成细胞悬液。
将细胞悬液放入培养皿或培养瓶内,置于适宜环境中进行原代培养。
能够悬浮在培养液中生长增殖。
需要贴附于某些基质表面才能生长增殖。
这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上。
要求:培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。
指动物组织经处理后的初次培养。
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞通常会停止分裂增殖。
会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻。
除受以上因素影响外,还会发生接触抑制现象。
思考:细胞培养一段时间,分裂会受阻,这是为什么?怎样解决这一问题?
适宜条件下在培养液可以无限增殖下去。
癌细胞的细胞膜上糖蛋白等物质减少
正常细胞增殖到相互接触的时候,糖蛋白识别了这种信息,会使细胞停止继续增殖,出现接触抑制的现象。某些异常细胞能解除这种现象。
体外动物细胞培养如何解决细胞分裂受阻的问题呢?
需要对细胞进行分瓶培养,让细胞继续增殖。
重新用胰蛋白酶等处理,使之分散成单个细胞,然后再用离心法收集。
(2)将收集的细胞制成细胞悬液,分瓶培养
动物细胞的整个培养过程中可能多次用到胰蛋白酶或胶原蛋白酶:
10代以内,保持细胞正常的二倍体核型(遗传物质不改变);
用机械的方法,或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理
植物组织培养和动物细胞培养的比较
1.培养过程中细胞都进行有丝分裂,不涉及减数分裂;2.均需无菌操作,需要适宜的温度、pH等条件
动物和人体内仍保留的少数具有分裂和分化能力的细胞。在一定条件下,干细胞可以分化成其他类型的细胞。
干细胞存在于 、 和 等多种组织和器官中。
三、干细胞培养及其应用
在体外分化成心肌细胞、神经元细胞和造血干细胞等
必须从胚胎中获取,涉及伦理问题;因而限制了在医学上的应用。
胚胎干细胞(ES或EK细胞)
(1)形态上:体积小、细胞核大、核仁明显。
(3)在体外培养的条件下,可以只增殖,而不分化。可以冷冻保存,也可以进行遗传改造。
(2)功能上:具有发育的全能性。
造血干细胞(骨髓、外周血和脐带血中)神经干细胞(神经系统中)精原干细胞(睾丸中)
具有组织特异性,只能分化成特定的细胞或组织,不具有发育成完整个体的能力
治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病(如帕金森病、阿尔茨海默病等)
治疗白血病及一些恶性肿瘤放疗或化疗后引起的造血系统、免疫系统功能障碍等疾病
治疗细胞损伤造成的疾病
成体干细胞
通过体外诱导小鼠成纤维细胞得到的类似胚胎干细胞的一种细胞
①将特定基因或特定蛋白导入细胞 (成纤维细胞、已分化的T细胞、B细胞)
②用小分子化合物诱导形成。
①诱导过程无须破坏胚胎;
②iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞,将它移植回病人体内后,理论上可以避免免疫排斥反应。
可治疗镰状细胞贫血症;在治疗阿尔兹海默病、心血管疾病等领域的研究也取得新进展
诱导多能干细胞(iPS细胞)
诱导iPS细胞定向分化为多种组织细胞
能够分化成为动物体内的任何细胞,并进一步形成组织、器官甚至生物个体
成体组织或器官,如造血干细胞、神经干细胞和精原干细胞等
能分化成为具有特定功能的细胞来治疗疾病。无须破坏胚胎,且避免免疫排斥反应。
具有组织特异性,能分化成特定的细胞或组织
不具有发育成完整个体的能力
需从胚胎中获取,涉及伦理问题,限制了它在医学上的应用
面临的问题:存在着导致肿瘤发生的风险。
动物细胞培养的概念和原理
在适当的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术
(1)营养条件(2)无菌、无毒的环境(3)温度、pH和渗透压(4)气体环境
胚胎干细胞( ES细胞)
早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中
1.下图为幼鼠肾脏上皮细胞培养过程示意图,下列有关叙述错误的是( )A.甲→乙过程通常需要剪碎后,用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理B.在丙中培养的细胞通常在10代以内,一般未发生癌变C.丁过程表示传代培养,大多细胞一般能增殖10~50代D.培养过程中应提供5%CO2和95%O2的气体环境,以维持培养液正常的pH
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