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高中生物人教版 (2019)选择性必修3二 动物细胞融合技术与单克隆抗体优质课ppt课件
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这是一份高中生物人教版 (2019)选择性必修3二 动物细胞融合技术与单克隆抗体优质课ppt课件，共60页。PPT课件主要包含了动物细胞培养，第2课时，什么是单克隆抗体，用于疾病的预防和治疗，早期抗体的制备方法，多克隆抗体，如何解决这些问题，细胞融合，细胞培养，单克隆抗体等内容，欢迎下载使用。
plant cell engineering
《生物技术与工程》 第二章 细胞工程 第2节
动物细胞融合技术与单克隆抗体
动物体细胞核移植技术与克隆动物
从视频中了解到针对新冠肺炎的特效药是什么？
抗新冠病毒单克隆抗体
针对新冠病毒的单克隆抗体
机体的免疫系统在抗原刺激下，由B淋巴细胞分化成的浆细胞所产生的，可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。
抗体在临床上有什么作用？
这种方法制备的多克隆抗体存在的缺点
同种抗原具有多个抗原表位，因此能产生多种抗体
产量低、纯度低、特异性差
通过大量克隆单个的B淋巴细胞，形成细胞群。这个细胞群所分泌的就是同一种特异性抗体，即为单克隆抗体。
单克隆抗体特异性强，灵敏度高
由单个B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。
B细胞在体外不能无限增殖，怎么解决这个问题？
通过大量克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞群。这个细胞群所分泌的就是同一种特异性抗体，即为单克隆抗体。
一个极富创造性的试验方案
Animal cell fusin technlgy
活动：阅读教材P48，思考下列问题：
1.什么是动物细胞融合？2.诱导动物细胞融合有哪些方法？3.灭活病毒诱导动物细胞融合的原理？4.动物细胞融合的原理？5.动物细胞融合的意义？
使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术
①物理法：电融合法、离心法等
②化学法：PEG融合法
③生物法：灭活病毒诱导法
指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构。
病人体内病毒等诱导多个体细胞融合形成了多核细胞
思考：19世纪30年代，科学家曾在肺结核、天花和麻疹等疾病的病人的病理组织中观察到多核细胞。如何解释这一现象？
原理：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝集，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。
突破了有性杂交的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能
Mnclnal antibdy and its applicatin
Mnclnal antibdy
Mnclnal antibdy preparatin prcess
除了杂交瘤细胞外，有骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合，以及B淋巴细胞与B淋巴细胞融合；还有未融合的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞。
思考：如何利用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞？
参考资料： DNA的合成有D途径和S途径两种途径，D途径能被氨基喋呤阻断。B淋巴细胞中具有两种DNA的合成途径，但不能分裂增殖；骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，但能无限增殖
杂交瘤细胞既具有B淋巴细胞的S途径，又具有骨髓瘤细胞的无限增殖能力。
第二次筛选之克隆化培养
96孔板培养（每一个孔中只接种一个杂交瘤细胞）
能产生特定抗体的杂交瘤细胞
给小鼠反复注射某种抗原
细胞融合——膜的流动性
第1次：选出杂交瘤细胞
第2次：选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞
Applicatin f Mnclnal Antibdies
思考1：制备抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体时，应选用何种抗原刺激小鼠产生相应的B淋巴细胞？
人绒毛膜促性腺激素（HCG）
思考2：利用单克隆抗体作为诊断试剂的原理是什么？
提示：单克隆抗体能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合
【资料2】抗体一药物偶联物（ADC）作用机制如下图所示
思考1：ADC的抗体和药物各具有什么作用？
抗体：靶向运输药物，即通过特异性结合靶细胞表面的抗原，将连接的药物输送到靶细胞。
药物：发挥治疗效应，如杀伤靶细胞
思考2：除了细胞毒素，还有哪些物质理论上可以作为ADC偶联的药物？
提示：可用放射性同位素标记单克隆抗体进行靶向放疗。一些作用于细胞信号转导通路的药物可以通过阻断肿瘤细胞的信号通路来抑制其生长，理论上也可以将这些药物与单克隆抗体结合进行治疗。
思考3：单克隆抗体诊断试剂盒和ADC在临床上各具有什么优势？
提示：单克隆抗体诊断试剂盒中的抗体只与特定的抗原反应，故特异性和灵敏度提高，生产单克隆抗体的杂交瘤细胞可以传代培养、冷冻保存和复苏利用，利于控制质量和标准化生产。
提示：ADC能够协同发挥抗体特异性识别的靶向作用和细胞毒素对肿瘤细胞的杀伤作用，因此它在临床上具有靶点清楚、毒副作用小等优点。
单克隆抗体药物已经成为治疗自身免疫性疾病的主要选择
可用于治疗类风湿性关节炎、银屑病、炎症性肠病等多种自身免疫性疾病
1.下列有关动物细胞融合与植物体细胞杂交比较的叙述，错误的是（ ） A.它们的原理都涉及细胞膜的流动性 B.都可以用电融合法或PEG融合法诱导融合 C.融合前都需用纤维素酶或果胶酶处理细胞 D.前者主要是为了获得细胞产品，后者主要是为了获得杂种植株
2.科学家以SARS病毒的核衣壳蛋白为抗原，制备出了单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（ ） A.利用该单克隆抗体可以诊断是否感染SARS病毒 B.体外培养单个B淋巴细胞可以获得针对SARS病毒的单克隆抗体 C.将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞 D.将纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，从小鼠血清中分离出的抗体为单克隆抗体
3.下列关于单克隆抗体制备的说法，正确的是（ ） A.将特定抗原注射到小鼠体内，可以从小鼠血清中获得单克隆抗体 B.培养杂交瘤细胞必需提供动物血清 C.诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后，发生融合的细胞均为杂交瘤细胞 D.第二次筛选杂交瘤细胞是为了筛选出能产生特定抗体且遗传稳定的杂交瘤细胞
4.抗PD-L1单克隆抗体能与癌细胞膜表面的PD-L1特异性结合，因而具有治疗某些癌症的作用。如下图是制备抗PD-L1单克隆抗体的示意图，下列叙述错误的是（ ）
A．提取的脾B淋巴细胞有多种，是因为一种病原体可以诱导产生多种B淋巴细胞B．多孔玻璃板中的细胞为B淋巴细胞和鼠瘤细胞的融合细胞C．图中细胞集落a-d既能大量繁殖，又能产生抗体D．图中细胞集落a可用于扩大化培养生产抗PD-L1单克隆抗体
假如你掌握了动物细胞融合技术，你想用这种技术来解决哪些问题?解决这些问题的大致思路是怎样的?这样做会有什么风险?请查阅相关资料，完善自己的思路，并形成文字报告，与同学交流。
提示：可以利用动物细胞融合技术培育多倍体胚胎，研究其发育机制，甚至可能培育出新的物种。但是，目前相关技术还不成熟，存在融合率低、胚胎死亡率高等问题，并且还可能带来一些伦理方面的问题。
plant cell engineering
《生物技术与工程》 第二章 细胞工程 第2节
动物细胞融合技术与单克隆抗体
动物体细胞核移植技术与克隆动物
从视频中了解到针对新冠肺炎的特效药是什么？
抗新冠病毒单克隆抗体
针对新冠病毒的单克隆抗体
机体的免疫系统在抗原刺激下，由B淋巴细胞分化成的浆细胞所产生的，可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。
抗体在临床上有什么作用？
这种方法制备的多克隆抗体存在的缺点
同种抗原具有多个抗原表位，因此能产生多种抗体
产量低、纯度低、特异性差
通过大量克隆单个的B淋巴细胞，形成细胞群。这个细胞群所分泌的就是同一种特异性抗体，即为单克隆抗体。
单克隆抗体特异性强，灵敏度高
由单个B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。
B细胞在体外不能无限增殖，怎么解决这个问题？
通过大量克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞群。这个细胞群所分泌的就是同一种特异性抗体，即为单克隆抗体。
一个极富创造性的试验方案
Animal cell fusin technlgy
活动：阅读教材P48，思考下列问题：
1.什么是动物细胞融合？2.诱导动物细胞融合有哪些方法？3.灭活病毒诱导动物细胞融合的原理？4.动物细胞融合的原理？5.动物细胞融合的意义？
使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术
①物理法：电融合法、离心法等
②化学法：PEG融合法
③生物法：灭活病毒诱导法
指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构。
病人体内病毒等诱导多个体细胞融合形成了多核细胞
思考：19世纪30年代，科学家曾在肺结核、天花和麻疹等疾病的病人的病理组织中观察到多核细胞。如何解释这一现象？
原理：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝集，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。
突破了有性杂交的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能
Mnclnal antibdy and its applicatin
Mnclnal antibdy
Mnclnal antibdy preparatin prcess
除了杂交瘤细胞外，有骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合，以及B淋巴细胞与B淋巴细胞融合；还有未融合的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞。
思考：如何利用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞？
参考资料： DNA的合成有D途径和S途径两种途径，D途径能被氨基喋呤阻断。B淋巴细胞中具有两种DNA的合成途径，但不能分裂增殖；骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，但能无限增殖
杂交瘤细胞既具有B淋巴细胞的S途径，又具有骨髓瘤细胞的无限增殖能力。
第二次筛选之克隆化培养
96孔板培养（每一个孔中只接种一个杂交瘤细胞）
能产生特定抗体的杂交瘤细胞
给小鼠反复注射某种抗原
细胞融合——膜的流动性
第1次：选出杂交瘤细胞
第2次：选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞
Applicatin f Mnclnal Antibdies
思考1：制备抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体时，应选用何种抗原刺激小鼠产生相应的B淋巴细胞？
人绒毛膜促性腺激素（HCG）
思考2：利用单克隆抗体作为诊断试剂的原理是什么？
提示：单克隆抗体能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合
【资料2】抗体一药物偶联物（ADC）作用机制如下图所示
思考1：ADC的抗体和药物各具有什么作用？
抗体：靶向运输药物，即通过特异性结合靶细胞表面的抗原，将连接的药物输送到靶细胞。
药物：发挥治疗效应，如杀伤靶细胞
思考2：除了细胞毒素，还有哪些物质理论上可以作为ADC偶联的药物？
提示：可用放射性同位素标记单克隆抗体进行靶向放疗。一些作用于细胞信号转导通路的药物可以通过阻断肿瘤细胞的信号通路来抑制其生长，理论上也可以将这些药物与单克隆抗体结合进行治疗。
思考3：单克隆抗体诊断试剂盒和ADC在临床上各具有什么优势？
提示：单克隆抗体诊断试剂盒中的抗体只与特定的抗原反应，故特异性和灵敏度提高，生产单克隆抗体的杂交瘤细胞可以传代培养、冷冻保存和复苏利用，利于控制质量和标准化生产。
提示：ADC能够协同发挥抗体特异性识别的靶向作用和细胞毒素对肿瘤细胞的杀伤作用，因此它在临床上具有靶点清楚、毒副作用小等优点。
单克隆抗体药物已经成为治疗自身免疫性疾病的主要选择
可用于治疗类风湿性关节炎、银屑病、炎症性肠病等多种自身免疫性疾病
1.下列有关动物细胞融合与植物体细胞杂交比较的叙述，错误的是（ ） A.它们的原理都涉及细胞膜的流动性 B.都可以用电融合法或PEG融合法诱导融合 C.融合前都需用纤维素酶或果胶酶处理细胞 D.前者主要是为了获得细胞产品，后者主要是为了获得杂种植株
2.科学家以SARS病毒的核衣壳蛋白为抗原，制备出了单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（ ） A.利用该单克隆抗体可以诊断是否感染SARS病毒 B.体外培养单个B淋巴细胞可以获得针对SARS病毒的单克隆抗体 C.将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞 D.将纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，从小鼠血清中分离出的抗体为单克隆抗体
3.下列关于单克隆抗体制备的说法，正确的是（ ） A.将特定抗原注射到小鼠体内，可以从小鼠血清中获得单克隆抗体 B.培养杂交瘤细胞必需提供动物血清 C.诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后，发生融合的细胞均为杂交瘤细胞 D.第二次筛选杂交瘤细胞是为了筛选出能产生特定抗体且遗传稳定的杂交瘤细胞
4.抗PD-L1单克隆抗体能与癌细胞膜表面的PD-L1特异性结合，因而具有治疗某些癌症的作用。如下图是制备抗PD-L1单克隆抗体的示意图，下列叙述错误的是（ ）
A．提取的脾B淋巴细胞有多种，是因为一种病原体可以诱导产生多种B淋巴细胞B．多孔玻璃板中的细胞为B淋巴细胞和鼠瘤细胞的融合细胞C．图中细胞集落a-d既能大量繁殖，又能产生抗体D．图中细胞集落a可用于扩大化培养生产抗PD-L1单克隆抗体
假如你掌握了动物细胞融合技术，你想用这种技术来解决哪些问题?解决这些问题的大致思路是怎样的?这样做会有什么风险?请查阅相关资料，完善自己的思路，并形成文字报告，与同学交流。
提示：可以利用动物细胞融合技术培育多倍体胚胎，研究其发育机制，甚至可能培育出新的物种。但是，目前相关技术还不成熟，存在融合率低、胚胎死亡率高等问题，并且还可能带来一些伦理方面的问题。
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