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天津市滨海新区2022-2023学年高二下学期期末生物试题
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滨海新区2022-2023学年度第二学期期末质量检测
高二生物学试题
1. 下列关于传统发酵技术的相关叙述，错误的是（ ）
A. 传统发酵技术以固体发酵和半固体发酵为主
B. 我国具有悠久的酿酒文化，是因为我们的祖先发现酵母菌可应用于酿酒
C. 传统发酵存在杂菌情况不明、过程控制缺乏标准等问题
D. 传统发酵利用的微生物一般为天然存在的多菌种
【答案】B
【解析】
【分析】发酵是利用微生物，在适宜的条件下，将原料经过特定的代谢途径转化为人类所需要的产物的过程。
【详解】A、发酵前需对菌种扩大培养，传统发酵常常是固体发酵或者是半固体发酵，A正确；
B、1857年巴斯德首先通过实验证明酒精发酵是由活的酵母菌引起的，我国具有悠久的酿酒文化，但古代人民并没有发现酵母菌，B错误；
C、发酵工程产物无论是代谢物还是菌体本身，都需要进行质量检查，合格后才能成为正式产品，而传统发酵存在杂菌情况不明、过程控制缺乏标准等问题，C正确；
D、现代发酵工程所用大多为单一菌种，有杂菌污染影响产量，培养基和设备需严格灭菌；而传统发酵技术很难实现单一菌种的利用，D正确。
故选B。
【点睛】本题考查传统发酵技术的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，难度不大。
2. 下列关于果酒、果醋和泡菜制作的叙述，错误的是（ ）
A. 果酒发酵的主要微生物属于真核生物，果醋发酵菌种属于原核生物
B. 酒精发酵后去除瓶盖，盖一层纱布，再进行醋酸发酵需提高发酵温度
C. 参与果酒、果醋和泡菜制作的微生物细胞中都有核糖体
D. 发酵产生的果醋和泡菜都呈酸味，形成酸味的物质相同
【答案】D
【解析】
【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型；果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
3、参与泡菜制作的微生物乳酸菌是原核生物。
【详解】A、果酒发酵的主要微生物是酵母菌，属于真核生物，果醋发酵菌种为醋酸菌，属于原核生物，A正确；
B、酒精发酵后去除瓶盖，盖一层纱布，可为醋酸菌提供适宜的氧气环境，由于醋酸菌的生长繁殖最适温度比酵母菌高，故再进行醋酸发酵需提高发酵温度，B正确；
C、参与果酒制作的微生物酵母菌是真核生物，参与果醋制作的微生物醋酸菌是原核生物，参与泡菜制作的微生物乳酸菌是原核生物，真原核生物共有的细胞器是核糖体，故参与果酒、果醋和泡菜制作的微生物细胞中都有核糖体，C正确；
D、发酵产生的果醋和泡菜都呈酸味，形成酸味的物质不相同，发酵产生的果醋的酸是醋酸，发酵产生的泡菜酸是乳酸，D错误。
故选D。
【点睛】
3. 下列有关微生物培养基制备的叙述，正确的是（ ）
A. 培养基配方中都含有碳源、氮源、水、无机盐及琼脂等成分
B. 培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性
C. 在微生物的实验室培养中，培养皿可用体积分数为70%的酒精擦拭灭菌
D. 倒平板时需将培养基冷却至室温，再在酒精灯火焰旁倒平板
【答案】B
【解析】
【分析】培养基的基本成分：水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子；培养基的配制过程中，操作顺序如下：称量、溶化、调节pH、分装、加棉塞、包扎，灭菌等。
【详解】A、培养基配方中都含有碳源、氮源、水、无机盐等成分，若配制液体培养基不需要添加琼脂，因为琼脂只是作为凝固剂，不是营养成分之一，A错误；
B、霉菌生长繁殖的最适pH为酸性，故培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，B正确；
C、在微生物的实验室培养中，培养皿要用干热灭菌法彻底消灭其中的微生物，C错误；
D、倒平板时需待培养基冷却至50度左右而不是室温，并在酒精灯火焰附近倒平板，D错误。
故选B。
4. 下列关于微生物纯培养的叙述，正确的是（ ）
A. 消毒和灭菌的杀菌程度存在差异，消毒可以杀死物体内外所有的微生物
B. 培养基中营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利
C. 固体培养基表面生长的一个单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的
D. 在实验室中，可以在非实验区域进食和喝水
【答案】C
【解析】
【分析】1、无菌技术：无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。灭菌与消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。
2、消毒与灭菌的区别：
比较项目
理化因素的作用强度
消灭微生物的数量
芽孢和孢子能否被消灭
消毒
较为温和
部分生活状态的微生物
不能
灭菌
强烈
全部微生物
能
【详解】A、消毒只能杀灭物体体表或内部的一部分微生物，不能杀死孢子和芽孢，而灭菌是用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，A错误；B、培养基中的营养物质要协调，注意各种营养物质的浓度和比例，若浓度过高，微生物会通过渗透作用失水，对微生物的增殖不利，B错误；
C、菌落是指细菌或真菌在固体培养基上由一个细胞生长繁殖而形成的能被肉眼识别的子细胞群体，固体培养基表面生长的一个菌落一般是由单个微生物繁殖形成的，C正确；
D、为保证实验者的安全并避免杂菌污染，不能在实验室中进食和喝水，D错误。
故选C。
【点睛】本题主要考查微生物培养时灭菌与消毒的区别、培养基的配制原则，意在强化学生对相关内容的识记、理解与运用。
5. 图甲为利用诱变方式选育可高产β-胡萝卜素的布拉霉菌。未突变菌不能在含有β-紫罗酮的培养基上生长。随β-胡萝卜素含量增加菌体颜色从黄色加深至橙红色。下列叙述错误的是（ ）
A. 过程①紫外线照射的布拉霉菌不一定都能在含β-紫罗酮培养基生长
B. 进行③操作时，应选择较大的橙红色菌落中的菌株继续接种培养
C. 要得到图乙所示的菌落，可用稀释涂布平板法进行②操作，然后培养
D. 能在添加了β-紫罗酮的乙上长成菌落的细菌，可产生更多的β-胡萝卜素
【答案】D
【解析】
【分析】
分析图甲：图中过程①表示利用紫外线诱导基因突变，过程②表示微生物接种（结合图乙可知，平板中的菌落均匀分布，应采用了稀释涂布平板法），过程③④表示选择培养，过程⑥表示浓缩。
【详解】A、过程①表示利用紫外线诱导基因突变，由于突变频率低，只有少数基因突变的菌才能生长、繁殖，故紫外线照射的布拉霉菌不一定都能在含β-紫罗酮培养基生长，A正确；
B、本实验是选育高产β-胡萝卜素的布拉霉菌，橙红色菌落的菌株β-胡萝卜素含量较高，应选择继续接种培养，B正确；
C、从图乙所示的菌落均匀分布，可判断是用稀释涂布平板法进行②操作，C正确；
D、能在添加了β-紫罗酮的乙上长成菌落的细菌，是突变菌，由于突变是不定向的，突变菌不一定都能产生更多的β-胡萝卜素，D错误。
故选D。
【点睛】
6. 将从种植烟草的土壤里分离得到的尼古丁（C10H14N2）降解菌株SC接种到尼古丁培养基中，30℃摇床培养并定时取样，测定并计算发酵液中的尼古丁浓度和菌体浓度，得到的结果如图所示。下列分析不正确的是
A. 分离SC时可用稀释涂布平板法或划线法
B. 培养36h时SC的数量为该种群的环境容纳量
C. 影响SC种群密度变化的主要因素是O2浓度和pH
D. 发酵液中的尼古丁为SC提供碳源和氮源
【答案】C
【解析】
【详解】平板划线法和稀释涂布平板法均可分离和提纯细菌，A项正确；培养36h时，SC的数量达到最大值，为该种群的环境容纳量，B项正确；根据题意可知，尼古丁是SC的主要营养物质，为SC提供碳源和氮源，再结合曲线图可推知，影响SC种群密度变化的主要因素是培养基中尼古丁的含量，C项错误，D项正确。
【点睛】
两种纯化细菌的方法的比较
项目
优点
缺点
适用范围
平板划
线法
可以观察菌落特征，对混合菌进行分离
不能计数
适用于
好氧菌
稀释涂
布平
板法
可以计数，可以观察菌落特征
吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延
适用于厌氧菌和兼性厌氧菌
7. 平板划线法和稀释涂布平板法是微生物纯培养的常用方法，下列叙述正确的是（ ）
A. 灼烧接种环次数与划线次数不同，涂布器从酒精中取出直接放在火焰上灼烧
B. 两种方法都要将菌液进行一系列梯度稀释，都能对菌种进行计数
C. 通过稀释涂布平板法统计的活菌数往往小于实际的活菌数
D. 打开含菌种的试管后需要将试管口通过火焰，蘸取菌种后需要马上塞上棉塞
【答案】C
【解析】
【分析】分离微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。筛选或分类微生物时需要使用固体培养基进行平板划线法或稀释涂布平板法接种，其中稀释涂布平板法还可以用来进行微生物的计数。
【详解】A、平板划线法每次划线前后都会灼烧接种环，所以灼烧接种环次数=划线次数+1，涂布器从酒精中取出后在火焰上引燃，A错误；
B、平板划线法不需要稀释，也不能进行计数，B错误；
C、由于2个或者多个细菌可能形成1个菌落，因此通过稀释涂布平板法统计的活菌数往往小于实际的活菌数，C正确；
D、打开含菌种的试管后需要将试管口通过火焰，蘸取菌种后需要将试管口通过火焰在塞上棉塞，D错误。
故选C。
8. 下列对发酵工程的有关叙述，正确的是（ ）
A. 单细胞蛋白就是从人工培养微生物菌体中提取的蛋白质
B. 可通过诱变育种、基因工程等方法选育出性状优良的菌种进行扩大培养
C. 发酵工程与传统发酵技术最大的区别是前者可以用微生物进行发酵
D. 通常所指的发酵条件包括温度、溶解氧、pH和酶的控制等
【答案】B
【解析】
【分析】1、发酵工程生产的产品有两类：一类是代谢产物，另一类是菌体本身。
2、产品不同，分离提纯的方法一般不同。①如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；②如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。
3、发酵过程中要严格控制温度、PH、溶氧、通气量与转速等发酵条件。
4、发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。
【详解】A、单细胞蛋白是指利用淀粉或纤维素的水解液、制糖工业的废液、石化产品等为原料，通过发酵获得的大量的微生物菌体，A错误；
B、工程菌多为原核生物，可通过诱变育种、基因工程等方法，选育出性状优良的工程菌并进行扩大培养，B正确；
C、传统发酵技术和现代发酵工程最大的相同之处是利用各种微生物的代谢来实现相关产品的生产，C错误；
D、通常所指的发酵条件包括温度控制、溶氧控制、pH控制等，D错误。
故选B。
【点睛】
9. 在生物体内，细胞没有表现出全能性，而是分化为不同组织、器官，因为（ ）
A. 细胞丧失了全能性
B. 基因的表达具有选择性
C. 不同的细胞内基因不完全相同
D. 在个体发育的不同时期，细胞内的基因发生了变化
【答案】B
【解析】
【分析】1、细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态，结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。细胞分化的实质是基因的选择性表达。
2、同一生物体的不同体细胞都是由同一个受精卵有丝分裂形成的，都含有相同的基因，但不同细胞选择表达的基因不同，因此不同细胞所含的蛋白质和mRNA不同。
【详解】A、分化的细胞也具有全能性，A不符合题意；
B、细胞分化的根本原因是基因的选择性表达，B符合题意；
C、同一生物体的不同体细胞都是由同一个受精卵有丝分裂形成的，都含有相同的基因，C不符合题意；
D、在个体发育的不同时期，细胞内的基因不发生改变，D不符合题意。
故选B。
10. 下列关于菊花组织培养的叙述，错误的是（ ）
A. 菊花的组织培养需要经过细胞的脱分化和再分化过程
B. 要控制好培养基中生长素和细胞分裂素的浓度及比例
C. 为避免环境中微生物的污染，要对外植体进行灭菌处理
D. 接种外植体到培养基时，需要注意形态学方向，不可倒插
【答案】C
【解析】
【分析】
1、植物组织培养的过程： 。
2、植物组织培养的原理：植物细胞具有全能性。
3、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要，被称为“激素杠杆”。
【详解】A、由分析可知，菊花的组织培养需要经过细胞的脱分化和再分化过程，A正确；
B、培养基中生长素和细胞分裂素的浓度及比例影响愈伤组织的生长和分化，故要控制好培养基中生长素和细胞分裂素的浓度及比例，B正确；
C、植物组织培养时需要对外植体消毒，既要杀死材料表面的微生物，又要减少消毒剂对细胞的伤害，不能对其进行灭菌处理，C错误；
D、有些植物激素是极性运输的，即从形态学的上端运到形态学的下端，故接种外植体到培养基时，需要注意形态学方向，不可倒插，D正确。
故选C。
11. 植物细胞工程的应用取得了显著的社会效益和经济效益，以下技术和相应优点的对应关系中，正确的是（ ）
A. 微型繁殖技术——打破生殖隔离
B. 单倍体育种技术——利于获得突变体
C. 植物体细胞杂交技术——精准控制成体性状
D. 植物细胞培养——不占用耕地，几乎不受季节限制
【答案】D
【解析】
【分析】
植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
【详解】A、植物微型繁殖技术具有的优点：能保持植物原有的优良的遗传特性、繁殖速度快、不受季节、气候和地域的限制等，但并不能打破生殖隔离，A错误；
B、单倍体育种可以快速获得具有优良性状的纯合子，缩短育种年限，而非有利于获得突变体，B错误；
C、植物体细胞杂交技术的优点是克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍（或克服生殖隔离），该技术可能不会按照人们的意愿表达出双亲的优良性状，其原因可能是不同物种的基因在表达时相互干扰，从而不能有序表达，C错误；
D、植物组织培养技术是在无菌和人工控制的条件下，让离体的组织和细胞在特定培养基上先脱分化得到愈伤组织，再分化得到胚状体、丛芽等，进而得到新植株，该技术可实现作物的工厂化生产，且不占用耕地，几乎不受季节限制，D正确。
故选D。
12. 下图为“番茄－马铃薯”杂种植株幼苗的培育过程图，有关叙述错误的是（ ）
A. 通常在等渗溶液中用酶解法处理植物细胞获得原生质体a和b
B. 诱导a、b细胞融合的化学方法有聚乙二醇、高Ca2+—高pH融合法等
C. 可根据质壁分离现象鉴别杂种细胞的细胞壁是否再生
D. 上述过程中包含了有丝分裂、细胞分化和减数分裂等过程
【答案】D
【解析】
【分析】据图分析，①表示去除细胞壁，②表示原生质体的融合，③表示再生细胞壁，④表示脱分化，⑤表示再分化。
【详解】A、①过程为去除细胞壁的过程，植物体细胞杂交的实质是植物原生质体的融合，所以在融合前需要使用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除植物的细胞壁，获得植物的原生质体，为了获得植物的原生质体，操作一般在等渗溶液中进行，维持去掉细胞壁的原生质体的形态，A正确；
B、利用聚乙二醇、高Ca2+—高pH融合法和电激等方法可实现a、b细胞融合，B正确；
C、融合后的杂种细胞再生出新的细胞壁是原生质体融合完成的标志，故可利用质壁分离现象鉴定细胞壁是否再生，C正确；
D、图中①至⑤过程表示植物体细胞杂交，涉及细胞的分裂和分化，但不涉及有性生殖过程的减数分裂，D错误。
故选D。
13. 如图是通过植物细胞工程技术获得紫杉醇的途径，下列有关叙述错误的是（ ）
A. 该途径依据的原理是植物细胞具有全能性
B. 需在无菌和人工控制的条件下进行
C. 经过程①细胞的形态和结构发生了变化
D. 紫杉醇是紫杉植物体内的一种次级代谢物
【答案】A
【解析】
【分析】分析题图：图示是通过植物细胞工程技术获得紫杉醇的途径，其中①表示脱分化过程，②表示将愈伤组织分散成单个细胞，③表示细胞增殖过程。据此答题。
【详解】A、细胞全能性以细胞发育成个体为标志，而图中并没有形成完整植物体，A错误；
B、为避免杂菌污染，图示过程需在无菌和人工控制的条件下进行，B正确；
C、图中①是脱分化过程，经该过程细胞的形态和结构发生了变化，成为高度液泡化的薄壁细胞，C正确；
D、次级代谢产物是指生物生长到一定阶段后通过次级代谢合成的分子结构十分复杂、对该生物无明显生理功能，或并非是该生物生长和繁殖所必需的小分子物质，紫杉醇是紫杉植物体内的一种次级代谢物，D正确。
故选A。
14. 下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（ ）
A. 培养环境需要O2，不需要CO2
B. 体外培养的细胞既能贴壁生长又能悬浮生长，都会发生接触抑制的现象
C. 培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等
D. 培养瓶中细胞需要定期用相应的酶处理，分瓶后才能继续增殖
【答案】C
【解析】
【分析】动物细胞培养依据细胞增殖的原理，培养过程中需要无菌、无毒的环境中，以免杂菌污染；同时需要提供适宜的营养物质和温度、pH、气体条件。
【详解】A、培养环境需要CO2维持培养液一定的pH，A错误；
B、体外培养的细胞有的能贴壁生长，有的能悬浮生长，癌细胞培养时不会发生接触抑制的现象，B错误；
C、培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等，以满足细胞分裂、生长的需要，C正确；
D、培养瓶中细胞若悬浮生长，可直接用离心法收集，制成悬液后分瓶培养，D错误。
故选C。
【点睛】
15. 图中最能完整显示正常机体内干细胞基本特征的是（ ）
A. B. C. D.
【答案】D
【解析】
【分析】机体在发展适应过程中，保留了一部分未分化的原始细胞，称之为干细胞。一旦需要，这些干细胞按照发育途径通过分裂而产生分化细胞，以保证局部组织损伤的修复。
【详解】干细胞是具有细胞周期的细胞，它能不断分裂产生子细胞。有的子细胞仍然具有细胞周期，有的子细胞不再分裂，将分化成具有特定功能的细胞，已分化的细胞一般不再继续进行分裂，细胞分化具有不可逆转的特性。D正确。
故选D。
【点睛】
16. 如图所示是某动物细胞培养时，培养液中活细胞和死亡细胞密度统计结果，下列相关叙述错误的是（ ）
A. 实验中要控制胰蛋白酶溶液浓度和处理时间，以免损伤细胞
B. 培养液中应适当加入青霉素、链霉素，以避免杂菌污染
C. 曲线bc段变化的主要原因是培养液中营养物质不足及有害代谢产物积累
D. 培养至第6天时，新产生的细胞数等于死亡细胞数
【答案】D
【解析】
【分析】分析曲线图可知，ab段表示活细胞密度增加，bc段表示活细胞密度减少；培养0～8天时，死细胞密度增加。培养第6天时，活细胞数等于死亡细胞数。
【详解】A、实验中要控制胰蛋白酶溶液浓度和处理时间，以免损伤细胞，A正确；
B、培养液中应适当加入青霉素、链霉素，以避免杂菌污染，B正确；
C、曲线bc段表示活细胞密度减少而死细胞密度增加，产生的主要原因是培养液中营养物质不足及有害代谢产物积累等，C正确；
D、培养第6天时，活细胞数等于死亡细胞数，D错误。
故选D。
17. 下列对植物体细胞杂交和动物细胞融合的叙述，描述正确的是（ ）
A. 动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，诱导融合的方法也完全相同
B. 只有植物体细胞杂交突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能
C. 植物体细胞杂交为了获得杂种植株，动物细胞融合主要为了获得细胞产品
D. 杂种植株具有两个物种遗传物质的超级植物，并体现了两个物种的全部性状
【答案】C
【解析】
【分析】植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较：
项目
细胞融合原理
细胞融合方法
诱导手段
用途
植物体细胞杂交
细胞膜的流动性，（细胞的全能性）
去除细胞壁后诱导原生质体融合
离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导
克服远缘杂交不亲和，获得杂交植株
动物细胞融合
细胞膜的流动性
使细胞分散后，诱导细胞融合
离心、电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导
制备单克隆抗体的技术之一
【详解】A、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相似，都是细胞膜的流动性，但诱导融合方法不完全相同，后者没有生物方法，A错误；
B、动物细胞融合与植物原生质体融合都突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能，B错误；
C、植物体细胞杂交为了获得具有两物种性状的杂种植株，动物细胞全能性受到限制，动物细胞融合主要为了获得细胞产品，C正确；
D、目前科学家终于实现了两个植物物种间的体细胞杂交，得到同时具有两个物种遗传物质的超级植物，但目前不能使它们的性状全部得以体现，D错误。
故选C。
18. 下列关于高等哺乳动物受精与胚胎发育的叙述，正确的是（ ）
A. 在自然条件下，受精在子宫中完成
B. 精子入卵后，卵细胞膜会发生反应阻止其他精子入卵
C. 卵裂期细胞的体积随分裂次数的增加而不断增大
D. 在桑葚胚阶段，胚胎的内部开始出现含有液体的腔
【答案】B
【解析】
【分析】1、胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎[之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞]；（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔[注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化]；（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。
2、受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始．其中透明带反应和卵黄膜封闭作用是防止多精入卵的两道屏障。
【详解】A、在自然条件下，受精在输卵管中完成，A错误；
B、透明带反应和卵细胞膜封闭作用是防止多精入卵的两道屏障，精子入卵后，卵细胞膜会发生卵细胞膜封闭反应阻止其他精子入卵，B正确；
C、受精卵在卵裂过程中，胚胎的总体积基本不变或略有减小，而单个细胞的体积随分裂次数的增加而不断减小，C错误；
D、在囊胚阶段，胚胎的内部开始出现含有液体的腔，叫原肠腔，D错误。
故选B。
【点睛】
19. 2017年，某国批准首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请，下图为培育“三亲婴儿”的技术路线，据图分析下列叙述错误的是（ ）
A. 该技术可避免母亲的线粒体遗传基因传递给后代
B. 该技术涉及动物细胞培养、早期胚胎培养等操作
C. “三亲婴儿”同时拥有自己父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因
D. 捐献者的红绿色盲基因能够传递给“三亲婴儿”
【答案】D
【解析】
【分析】分析题图：图示表示三亲婴儿的培育过程，由图可知，三亲婴儿的培育采用了核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等。
【详解】A、该“三亲婴儿”的细胞质来自捐献者卵母细胞，母亲只提供卵细胞细胞核，故该技术可避免母亲的线粒体遗传基因传递给后代，A正确；
B、由图可知：三亲婴儿采用了体外受精的技术手段，该技术涉及动物细胞培养、早期胚胎培养等操作，B正确；
C、“三亲婴儿”同时拥有自己父亲的精子细胞核、母亲的卵细胞细胞核基因及卵母细胞捐献者的细胞质基因，C正确；
D、捐献者只提供了细胞质，而红绿色盲基因存在于细胞核，故捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给三亲婴儿，D错误。
故选D。
20. 以下几种酶与图中所指的化学键形成或断裂有关的有几种 （ ）
①限制性内切核酸酶 ②DNA连接酶 ③RNA聚合酶 ④解旋酶 ⑤DNA聚合酶
A. 一种 B. 两种 C. 三种 D. 四种
【答案】C
【解析】
【分析】分析题图：图中所指化学键是脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，是限制酶、DNA连接酶、DNA聚合酶、DNA水解酶的作用部位。
【详解】①限制性内切核酸酶 的作用对象是磷酸二酯键，其能将脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，①正确；
②DNA连接酶的作用对象是磷酸二酯键，其能将DNA片段之间的磷酸二酯键连接起来，②正确；
③RNA聚合酶的作用对象是磷酸二酯键，其能将核糖核苷酸之间的磷酸二酯键连接起来，而图示含有碱基T，不符合RNA聚合酶作用，③错误；
④解旋酶的作用对象是氢键，④错误；
⑤DNA聚合酶的作用对象是磷酸二酯键，其能将脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键连接起来，⑤正确。
故与磷酸二酯键的形成或断裂有关的有①②⑤三种。C符合题意。
故选C。
21. 基因工程中，需使用特定的限制性内切核酸酶切割目的基因和质粒便于重组和筛选。已知限制性内切核酸酶Ⅰ的识别序列和切点是一G↓GATCC一，限制性内切核酸酶Ⅱ的识别序列和切点是一↓GATC一，根据图示分析下列叙述正确的是（ ）
A. 质粒用限制酶性内切核酸酶Ⅱ切割，目的基因用限制性内切核酸酶Ⅰ切割
B. 用限制性内切核酸酶切割获得目的基因时，有四个磷酸二酯键被水解
C. 限制性内切核酸酶Ⅰ和限制性内切核酸酶Ⅱ切割后获得的黏性末端不同
D. 质粒中的标记基因便于筛选出目的基因已经表达的细胞
【答案】B
【解析】
【分析】由于限制酶Ⅱ能识别限制酶Ⅰ的识别序列，限制酶Ⅰ不能识别限制酶Ⅱ的识别序列；要将目的基因从该DNA链中提取出来，需要在目的基因左右切开，所以要用限制酶Ⅱ；质粒不能用限制酶Ⅱ，如果用该酶的话，质粒就会有两个切口。
【详解】A、通过分析可知，质粒用限制性核酸内切酶Ⅰ切割，目的基因用限制性核酸内切酶Ⅱ切割，A错误；
B、用限制性核酸内切酶Ⅱ，将目的基因左右切开切割，又由于DNA是双链，故需要有四个磷酸二酯键被水解，B正确；
C、根据题意可知二者产生的黏性末端相同，都是 ，C错误；
D、质粒中的标记基因的作用是用来筛选含有目的基因的受体细胞，D错误。
故选B。
22. 下列有关基因工程的叙述，错误的是（ ）
A. 基因工程可以克服物种间的生殖隔离，定向改造生物的遗传性状
B. 限制酶可特异性地识别6个、5个、4个核苷酸组成的序列
C. 载体上有一个或多个限制酶的切割位点，供外源DNA片段插入
D. 常用天然质粒作载体，质粒上的标记基因便于重组DNA分子的筛选
【答案】D
【解析】
【分析】基因工程又叫DNA重组技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取，②基因表达载体的构建，③将目的基因导入受体细胞，④目的基因的检测与鉴定。
【详解】A、基因工程可以按照人们的意愿，克服不同物种之间的生殖隔离，实现生物的定向变异，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品，A正确；
B、限制酶具有专一性，可特异性地识别6个、5个、4个核苷酸组成的反向重复序列，B正确；
C、载体上往往有一个或多个限制酶的切割位点，能够给外源DNA插入提供更多的选择，C正确；
D、质粒上的标记基因便于重组DNA分子的筛选，常用质粒作载体，天然质粒通常需要改造才能作为基因工程的运载体，D错误。
故选D。
【点睛】
23. 用XhoⅠ和SalⅠ两种限制性内切核酸酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图。下列叙述错误的是（ ）
A. 电泳是指带电的分子在电场的作用下发生迁移的过程
B. 泳道①中是用XhoI处理得到的酶切产物
C. 若用XhoI和SalI两种酶同时处理该DNA片段后电泳，其泳道可能只有5条
D. 电泳技术可以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系鉴定
【答案】B
【解析】
【分析】分析题图：限制酶SalⅠ有三处切割位点，切割后产生4个DNA片段，泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物；限制酶XhoⅠ有2处切割位点，切割后产生3个DNA片段，泳道②中是用XhoⅠ处理得到的酶切产物。
【详解】A、电泳是指带电的分子在电场的作用下发生迁移的过程，A正确；
B、限制酶SalⅠ有三处切割位点，切割后产生4个DNA片段，泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物，B错误；
C、限制酶SalⅠ有三处切割位点，切割后产生4个DNA片段，限制酶XhoⅠ有2处切割位点，切割后产生3个DNA片段，结合题图可知，若用XhoI和SalI两种酶同时处理该DNA片段后电泳，可能存在相同长度的DNA片段，其泳道可能只有5条，C正确；
D、不同生物的DNA切割后长度不同，切割后再进行电泳，可以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系的鉴定，D正确。
故选B。
【点睛】
24. SRY基因为Y染色体上的性别决定基因，可用SRY-PCR法鉴定胚胎性别，其基本程序如下图，相关说法不合理的是 （ ）
A. 通常提取囊胚期滋养层细胞的DNA作为扩增模板
B. PCR反应需要提供含DNA模板、两种引物、四种脱氧核苷酸和耐热DNA聚合酶的缓冲溶液
C. 扩增相同时间，获得DNA的含量与模板DNA及引物的量成正相关
D. PCR扩增得到的DNA含有胚胎细胞全部的遗传信息
【答案】D
【解析】
【分析】1、PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。
2、PCR反应过程是：变性→复性→延伸过程。
3、结果：上述三步反应完成后，一个DNA分子就变成了两个DNA分子，随着重复次数的增多，DNA分子就以2n的形式增加，PCR的反应过程都是在PCR扩增仪中完成的。
【详解】A、通常提取滋养层细胞的DNA作为复制模板，这是因为滋养层细胞是胎儿发育过程中形成的细胞，其DNA可作为扩增复制的模板，A正确；
B、PCR反应需要提供含DNA模板、两种引物、四种脱氧核苷酸作原料和耐热的DNA聚合酶的缓冲溶液，B正确；
C、PCR反应中，DNA分子以2n的形式增加，若扩增相同时间，获得DNA的含量与模板DNA及引物的量成正相关，C正确；
D、SRY-PCR法中，用位于Y染色体上的性别决定基因（即SRY基因）的一段碱基作引物，以滋养层细胞的DNA为模板进行PCR扩增，因此该PCR扩增过程只得到胚胎细胞的部分遗传信息，D错误。
故选D。
【点睛】
25. 下列关于DNA粗提取与鉴定的叙述，正确的是（ ）
A. 可以选取新鲜的洋葱、猪成熟红细胞等作为实验材料
B. DNA只能溶于2mol/LNaCI溶液
C. 预冷的乙醇可用来溶解DNA
D. 用二苯胺试剂鉴定DNA需要进行水浴加热
【答案】D
【解析】
【分析】DNA的粗提取和分离：
1、DNA的溶解性：（1）DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低），利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。（2）DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离。
2、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性：蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60-80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。
3、DNA的鉴定：在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
【详解】A、猪是哺乳动物，哺乳动物的成熟红细胞中没有细胞核，不含DNA，不能用于做DNA提取实验材料，A错误；
B、DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，当NaCl溶液的浓度为0.14mo/L时，DNA溶解度最小，0.15mol/L、2mol/LNaCI溶液中溶解度较大，B错误；
C、在预冷的95%酒精溶液中DNA的溶解度最低，DNA的沉淀量最大，故预冷的乙醇可用来进一步纯化粗提的DNA，C错误；
D、在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂，D正确。
故选D。
【点睛】
26. 下列关于基因表达载体构建的描述，错误的是（ ）
A. 启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，组成它的基本单位是脱氧核苷酸
B. 基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止密码子、标记基因等组件
C. 人工构建的诱导型启动子，当诱导物存在时，可激活或抑制目的基因的表达
D. 由于受体细胞不同，基因表达载体的构建也有所差别
【答案】B
【解析】
【分析】基因表达载体的构建
（1）目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用。
（2）基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因
启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始；
终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束；
由于受体细胞有植物、动物以及微生物之分，以及目的基因导入受体细胞的方法不同，因此基因表达载体的构建是不完全相同的。
【详解】A、启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶识别和结合的位点，组成它的基本单位是脱氧核苷酸，A正确；
B、基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子、标记基因等组件，B错误；
C、人工构建的诱导型启动子，当诱导物存在时，可激活或抑制目的基因的表达，C正确；
D、由于受体细胞有植物、动物以及微生物之分，以及目的基因导入受体细胞的方法不同，因此基因表达载体的构建是不完全相同的，D正确。
故选B。
27. 下列关于蛋白质工程的叙述，错误的是（ ）
A. 蛋白质工程的实质是通过改造基因来改造蛋白质
B. 蛋白质工程能生产出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子
C. 蛋白质工程需要改变蛋白质分子的所有氨基酸序列
D. 蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程
【答案】C
【解析】
【分析】概念及基本原理：
（1）蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）。
（2）蛋白质工程崛起的缘由：基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质。
（3）蛋白质工程的基本原理：它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构，又称为第二代的基因工程。
（4）基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因）以上是蛋白质工程特有的途径；以下按照基因工程的一般步骤进行。
【详解】A、蛋白质工程的实质是通过改造基因来改造蛋白质，A正确；
B、蛋白质工程能以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，B正确；
C、蛋白质工程并非是改变蛋白质分子的所有氨基酸序列，C错误；
D、蛋白质工程可以根据人的需求来设计蛋白质的结构，又称为第二代的基因工程，是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程，D正确。
故选C。
28. 下列关于生物技术安全性和伦理问题的叙述，错误的是（ ）
A. 要靠确凿的证据和严谨的逻辑思维来思考转基因技术的影响
B. 生殖性克隆面临伦理问题，治疗性克隆不会面临伦理问题
C. 我国政府对生物武器采取的态度是不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散
D. 我国允许生殖性克隆动物，但禁止生殖性克隆人
【答案】B
【解析】
【分析】1、生物武器种类：包括致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等．把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。
2、生物武器的特点：1、单位面积效应大；2、有特定的伤害对象；3、具有传染性；4、危害时间久；5、不易被发现和鉴定；6、使用者本身易受伤害；7、生物武器造价低，技术难度不大，隐秘性强，可以在任何地方研制和生产。
【详解】A、转基因生物具有安全性问题，但要靠确凿的证据和严谨的逻辑思维来思考转基因技术的影响，不能因噎废食，A正确；
B、治疗性克隆也会面临伦理问题，所以要对治疗性克隆有效监控和严格审查，B错误；
C、我国政府对生物武器采取的态度是不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散，C正确；
D、我国允许生殖性克隆动物，但禁止生殖性克隆人，D正确。
故选B。
29. 下列有关生物多样性的叙述，错误的是（ ）
A. 湿地生态系统具有蓄洪防旱、调节气候的功能，这属于生物多样性的间接价值
B. 我国政府颁布了《退耕还林条例》有利于保护生物多样
C. 目前保护生物多样性的最好做法就是禁止对生物资源的开发和利用
D. 人们从野生植物中提取青蒿素用于治疗疟疾，这属于生物多样性直接研究价值
【答案】C
【解析】
【分析】1、生物的多样性：生物圈内所有的植物、动物和微生物，它们所拥有的全部基因以及各种各样的生态系统，共同构成了生物多样性。生物多样性包括基因多样性、物种多样性和生态系统多样性。
2、生物多样性的价值直接价值：对人类有食用、药用和工业原料等使用意义，以及有旅游观赏、科学研究和文学艺术创作等非实用意义的；间接价值：对生态系统起重要调节作用的价值（生态功能）；潜在价值：目前人类不清楚的价值。
3、注意事项：协调好人与生态环境的关系；反对盲目地掠夺式开发和利用，并不意味禁止开发和利用；保护生物多样性需要全球合作。
【详解】A、湿地生态系统具有蓄洪防早、调节气候的功能，这属于生物多样性的间接价值，A正确；
B、我国政府颁布了《退耕还林条例》有利于保护生物多样性，B正确；
C、保护生物多样性并不意味着禁止对生物资源的开发和利用，而是要合理开发和利用自然资源，C错误；
D、人们从野生植物中提取青蒿素用于治疗疟疾，这属于生物多样性具有直接研究价值，D正确。
故选C。
30. 下列关于生态系统的稳态及多样性保护的叙述，错误的是（ ）
A. 物种多样性较高的生态系统抵抗力稳定性相对较高
B. 在一块牧草地上播种杂草形成杂草地后，其抵抗力稳定性提高
C. 对于珍稀濒危的物种，应该禁止一切形式的猎采和买卖
D. 生物多样性包括种群多样性、群落多样性和生态系统多样性
【答案】D
【解析】
【分析】生态系统能够保持和恢复自身结构和功能相对稳定，称为生态系统的稳定性，其原因生态系统具有一定的自我调节能力，自我调节能力的基础是负反馈，主要分为抵抗力稳定性和恢复力稳定性。
【详解】A、物种的种类增多，食物链和食物网比较复杂，则生态系统抵抗外界干扰的能力比较强，A正确；
B、在一块牧草地上播种杂草形成杂草地后，物种的丰富度增加，因此其抵抗力稳定性提高，B正确；
C、对于珍稀濒危的物种，应该禁止一切形式的猎采和买卖，若继续猎采和买卖，则会导致其彻底灭绝，C正确；
D、生物多样性包括基因多样性、物种多样性和生态系统多样性，D错误；
故选D。
31. 请回答下列关于工程技术问题。
（1）病毒在作物体内逐年积累，就会导致作物品质差，目前常采用_________技术脱去病毒。
（2）可通过______________技术将桑葚胚移入代孕母鼠子宫内，使其继续发育。
（3）胚胎分割中，在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将______________均等分割。
（4）将目的基因导入动物细胞最常用的一种方法是____________。
【答案】 ①. 茎尖组织培养 ②. 胚胎移植 ③. 内细胞团 ④. 显微注射
【解析】
【分析】1、植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织（高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织），愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。
2、影响植物组织培养的因素：①培养基配制；②外植体选取；③激素的运用；④消毒；⑤温度、pH、光照。
3、胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。
【详解】（1）病毒在作物体内逐年积累，就会导致作物品质差，由于茎尖等分生区病毒极少甚至无病毒，目前常采用茎尖组织培养技术脱去病毒。
（2）可通过胚胎移植技术将桑葚胚移入代孕母鼠子宫内，使其继续发育。
（3）胚胎分割中，在分割囊胚阶段的胚胎时，由于内细胞团将来发育成胎儿的组织器官，要注意将内细胞团均等分割，否则将会影响胚胎的进一步发育。
（4）将目的基因导入动物细胞最常用的一种方法是显微注射法。
【点睛】本题考查植物组织培养和胚胎移植的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，难度不大。
32. 普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种，过程如下图1所示。请回答下列问题。
（1）为了达到筛选目的，平板内固体培养基中的唯一碳源是_______，②、③过程需要重复几次，目的是_______________________________________________________________。
（2）某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如上图2所示。推测该同学接种时可能的操作失误是________________________________________。
（3）为了测定工程菌分解淀粉能力，可以在培养基中加入_______________，根据菌落周围______________大小可以判断工程菌利用淀粉的能力。
（4）某研究小组将1mL培养液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接种入0．1mL稀释液。需要每隔段时间统计一次，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样做的目的是_____________________________________。培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，据此可得出每升培养液中的活菌数为_____________。
【答案】 ①. 淀粉 ②. 确保筛选出真正高效利用淀粉的工程酵母菌菌种 ③. 涂布不均匀 ④. 碘液 ⑤. 透明圈 ⑥. 防止因培养时间不足而导致菌落遗漏 ⑦. 3．8×107
【解析】
【分析】1、在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。
2、微生物常见的接种的方法（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】（1）由题干信息分析可知，该实验的目的是为了获得可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种，故为达到筛选目的，平板内固体培养基中使用淀粉作为唯一的碳源；由图1观察可知，②、③的过程需要重复几次，是为了确保筛选出真正高效利用淀粉的工程酵母菌菌种。
（2）由图2分析可知，该平板上的菌落形成了单个菌落，且分布不均，是利用稀释涂布平板法进行的操作，出现这种情况的原因是涂布不均匀造成的。
（3）淀粉遇碘液会变蓝，故为了测定工程菌分解淀粉的能力，可以在培养基中加入碘液，根据菌落周围透明圈的大小，可以判断工程菌利用淀粉的能力，透明圈越大，利用淀粉的能力越强。
（4）采用稀释涂布平板法统计培养液中酵母菌的活菌数，需要每隔段时间统计一次，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样做的目的是防止因培养时间不足而导致菌落遗漏；培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，则平均数为（39+38+37）÷3=38，每升培养液中的活菌数为38÷0.1×100×1000=3.8×107。
【点睛】本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记微生物的接种方法等实验操作，能够结合题图信息，运用所学知识完成试题的解答。
33. 利用相关工程技术可以获得抗线虫病的杂种萝卜－油菜植株，已知萝卜具有抗线虫病基因，而油菜容易被胞囊线虫侵染造成减产。科研人员以萝卜和油菜为亲本进行体细胞杂交，以获得抗线虫病的杂种植株，具体操作流程如图所示。请回答下列问题。
（1）通过①获得原生质体，原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的____________，维持原生质体完整性。过程②细胞融合的基本原理是______________。
（2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的__________存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。对杂种植株进行_____________接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。
（3）若油菜和萝卜都是二倍体，则杂种植株为______倍体，从理论上讲，杂种植株的育性为______________（填“可育”或“不育”）。
【答案】 ①. 渗透压 ②. 细胞膜的流动性 ③. 叶绿体 ④. 胞囊线虫 ⑤. 四 ⑥. 可育
【解析】
【分析】分析题图：图示为采用植物体细胞杂交技术获得抗病杂种植株的流程图，其中①表示采用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除细胞壁的过程；②表示诱导原生质体融合的过程；之后再采用植物组织培养技术即可得到杂种植株，其中③表示脱分化，④表示再分化。
【详解】（1）通过①酶解法获得原生质体，原生质体没有细胞壁的保护，需要加入适宜浓度的甘露醇以保证渗透压的稳定，以避免原生质体吸水或失水破坏原生质体的完整性。过程②细胞融合的基本原理是细胞膜的流动性。
（2）用于融合两个细胞，一个是抗病的萝卜的幼叶，一个是易感病油菜的幼根细胞，其中供体叶片细胞特有的结构是叶绿体，因此可通过观察叶绿体的有无作为初步筛选杂种细胞的标志。根据题干信息，“已知萝卜具有抗线虫病基因”，则对杂种植株进行胞囊线虫接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。
（3）若油菜和萝卜都是二倍体，则杂种植株为四倍体；从理论上讲，杂种植株含有同源染色体，育性为可育。
【点睛】本题结合杂种植株的流程图，考查植物体细胞杂交的相关知识，要求考生识记植物体细胞杂交的概念、过程及意义，能正确分析题图，再结合所学的知识准确答题。
34. EV71是引发手足口病的一种人肠道病毒。为制备抗EV71的单克隆抗体，科研人员用小鼠进行实验。
（1）将EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1和VP2作为__________分别注射到3组小鼠体内，引发小鼠机体的________________免疫产生相应的抗体。
（2）多次免疫后，分别取上述3组小鼠的血清和未免疫小鼠血清，测定抗体与抗原的结合强度，结果如图所示。
①EV71免疫的小鼠血清抗体________（填“是”或“不是”）单一抗体，判断依据是_________________________________________________________________________。
②制备抗EV71单克隆抗体时，选用__________免疫的小鼠B细胞效果最佳。
（3）双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图：
①固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是________________________________________。
②研究人员获得三种抗EV71单克隆抗体，分别记为A、B、C，为检测它们之中哪两种适合用于双抗体夹心法，科研人员需要进行_____组实验，检测并比较各组实验的产物量。
【答案】 ①. 抗原 ②. 体液 ③. 不是 ④. EV71免疫的小鼠血清可以结合EV71、VP1和VP2多种抗原 ⑤. VP1 ⑥. 与待测抗原结合；酶催化检测底物反应，可通过测定酶反应产物量来判断待测抗原量 ⑦. 6
【解析】
【分析】能够引发机体发生特异性免疫反应的物质称为抗原，一般来说病毒的外壳蛋白就属于抗原，当抗原进入机体内环境，首先引发机体发生体液免疫。制备单克隆抗体抗体实际上利用的是动物细胞融合技术，从而获得既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
【详解】（1）EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1和VP2一般可作为抗原；能够引发小鼠机体发生体液免疫，从而产生产生相应的抗体。
（2）①分析柱形图可知，EV71免疫的小鼠血清可以与EV71、VP1和VP2多种抗原相结合，由此说明EV71免疫的小鼠血清抗体不是单一抗体。
②制备抗EV71单克隆抗体时，选用VP1免疫的小鼠脾脏细胞效果最佳，依据是第2组血清抗体可以结合EV71病毒（和VP1蛋白），第3组血清抗体无法特异性结合EV71病毒，仅能结合VP2。
（3）①分析题干可知双抗体夹心法是常用的定量检测抗原的方法，从图中可以发现固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，由此可见在该检测方法中，酶标抗体的作用是与待测抗原结合，另外通过酶催化检测底物反应，可通过测定酶反应产物量来判断待测抗原量。
②分析可知双抗体夹心法需要任意选择两种抗体，现有A、B、C三种抗体，即可有以下几种组合，AB、AC、AA、BB、BC、CC，总共有6种组合方式，因此科研人员需要进行6组实验，检测并比较各组实验的产物量。
【点睛】本题以免疫调节为背景，考查考生对免疫调节过程的理解，以及单克隆抗体的制备，要求考生能够从题图中获取有用信息，结合所学知识进行规范回答。
35. 在基因工程的操作过程中，有多种方法可检测目的基因是否导入受体菌，回答下列问题。
（1）荧光蛋白基因筛选法：某种荧光蛋白（GFP）在紫外线照射下会发出绿色荧光。将目的基因和GFP基因拼接成融合基因，并与_________________重组后导入受体菌，经培养筛选能发出绿色荧光的菌落。
（2）环丝氨酸辅助筛选法：四环素能使细菌停止生长但不致死；环丝氨酸能使正常生长的细菌致死，而对停止生长的细菌不致死。某质粒如图所示（Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因），Tetr中插入目的基因后失活。用此质粒构建表达载体，转化细菌后，结果有3种：未转化的细菌、含质粒的细菌、含重组质粒的细菌。
①用含有___________ 和 ___________的培养基对上述3种细菌进行筛选，只有含质粒的细菌被淘汰，理由是_________________________________________________________。
②在上述筛选的基础上，若要筛选出含重组质粒的细菌，还需使用含有的____________培养基。
（3）荧光定量PCR技术：荧光定量PCR技术可实现对转基因细菌中目的基因的定量检测。在PCR反应体系中，加入的荧光探针与模板DNA（目的基因）的某条链互补结合，当合成的子链延伸至探针处，探针被酶切降解，荧光监测系统就会接收到荧光信号，具体原理如下图所示。
①可通过检测_______________判定待测细菌中是否含有模板DNA，且荧光达到某一特定强度所需的循环次数越_______，模板DNA含量越高。
②通过上述技术定量检测目的基因，需从设计的多对引物和多种探针中选择特异性最好的组合，为此需进行多组实验，每个实验组需向反应体系中加入___________。（填字母）
a．转基因细菌的DNA模板 b．非转基因细菌DNA模板 c．定量的待测引物d．定量的待测荧光探针e．热稳定DNA聚合酶 f．解旋酶 g．足量的脱氧核苷酸（dNTP）
【答案】 ①. 载体 ②. 四环素 ③. 环丝氨酸 ④. 含质粒的细菌有Tetr，四环素对其不起作用，环丝氨酸使其致死 ⑤. 氨苄青霉素 ⑥. 荧光 ⑦. 多 ⑧. a、c、d、e、g
【解析】
【分析】基因工程育种原理：DNA重组技术（属于基因重组范畴）方法：按照人们的意愿，把一种生物的个别基因复制出来，加以修饰改造，放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。操作步骤包括：提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达等。举例：能分泌人类胰岛素的大肠杆菌菌株的获得，抗虫棉，转基因动物等。
【详解】（1）荧光蛋白基因筛选法：某种荧光蛋白（GFP）在紫外线照射下会发出绿色荧光。将目的基因和GFP基因拼接成融合基因，并与运载体（质粒）重组后导入受体菌，经培养筛选能发出绿色荧光的菌落，这属于个体生物学鉴定法。
（2）①用含有四环素和环丝氨酸的培养基对上述3种细菌进行筛选，只有含质粒的细菌被淘汰，而未转化的细菌和含有重组质粒的细菌停止生长，因为含质粒的细菌有Tetr，四环素对其不起作用，而环丝氨酸使其致死。
②在上述筛选的基础上，若要筛选出含重组质粒的细菌，还需使用含有氨苄青霉素的培养基，因为重组质粒上存在Ampr氨苄青霉素抗性基因，则在该培养基上含有重组质粒的细菌能正常生长，而未转化的细菌被淘汰。
（3）①可通过检测荧光探针判定待测植物中是否含有模板DNA，且荧光达到某一特定强度所需的循环次数越多，说明荧光探针被降解的越多，则模板DNA含量越高；
②通过上述技术定量检测目的基因，需从设计的多对引物和多种探针中选择特异性最好的组合，为此需进行多组实验，该实验运用了体外扩增DNA技术，因此需要耐高温的DNA聚合酶、引物、模板和原料，为了达到上述目的还需要加入基因探针，因此每个实验组需向反应体系中加入a．转基因细菌的DNA模板 ， c．定量的待测引物，d．定量的待测荧光探针，e．热稳定DNA聚合酶 ， g．足量的脱氧核苷酸（dNTP），即a、c、d、e、g。
【点睛】熟知基因工程的原理和操作步骤是解答本题的关键，本题重点考查目的基因检测和鉴定的方法和相应的原理，能根据题目信息进行合理的分析并结合所学准确答题是解答本题的必备能力。
滨海新区2022-2023学年度第二学期期末质量检测
高二生物学试题
1. 下列关于传统发酵技术的相关叙述，错误的是（ ）
A. 传统发酵技术以固体发酵和半固体发酵为主
B. 我国具有悠久的酿酒文化，是因为我们的祖先发现酵母菌可应用于酿酒
C. 传统发酵存在杂菌情况不明、过程控制缺乏标准等问题
D. 传统发酵利用的微生物一般为天然存在的多菌种
【答案】B
【解析】
【分析】发酵是利用微生物，在适宜的条件下，将原料经过特定的代谢途径转化为人类所需要的产物的过程。
【详解】A、发酵前需对菌种扩大培养，传统发酵常常是固体发酵或者是半固体发酵，A正确；
B、1857年巴斯德首先通过实验证明酒精发酵是由活的酵母菌引起的，我国具有悠久的酿酒文化，但古代人民并没有发现酵母菌，B错误；
C、发酵工程产物无论是代谢物还是菌体本身，都需要进行质量检查，合格后才能成为正式产品，而传统发酵存在杂菌情况不明、过程控制缺乏标准等问题，C正确；
D、现代发酵工程所用大多为单一菌种，有杂菌污染影响产量，培养基和设备需严格灭菌；而传统发酵技术很难实现单一菌种的利用，D正确。
故选B。
【点睛】本题考查传统发酵技术的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，难度不大。
2. 下列关于果酒、果醋和泡菜制作的叙述，错误的是（ ）
A. 果酒发酵的主要微生物属于真核生物，果醋发酵菌种属于原核生物
B. 酒精发酵后去除瓶盖，盖一层纱布，再进行醋酸发酵需提高发酵温度
C. 参与果酒、果醋和泡菜制作的微生物细胞中都有核糖体
D. 发酵产生的果醋和泡菜都呈酸味，形成酸味的物质相同
【答案】D
【解析】
【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型；果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
3、参与泡菜制作的微生物乳酸菌是原核生物。
【详解】A、果酒发酵的主要微生物是酵母菌，属于真核生物，果醋发酵菌种为醋酸菌，属于原核生物，A正确；
B、酒精发酵后去除瓶盖，盖一层纱布，可为醋酸菌提供适宜的氧气环境，由于醋酸菌的生长繁殖最适温度比酵母菌高，故再进行醋酸发酵需提高发酵温度，B正确；
C、参与果酒制作的微生物酵母菌是真核生物，参与果醋制作的微生物醋酸菌是原核生物，参与泡菜制作的微生物乳酸菌是原核生物，真原核生物共有的细胞器是核糖体，故参与果酒、果醋和泡菜制作的微生物细胞中都有核糖体，C正确；
D、发酵产生的果醋和泡菜都呈酸味，形成酸味的物质不相同，发酵产生的果醋的酸是醋酸，发酵产生的泡菜酸是乳酸，D错误。
故选D。
【点睛】
3. 下列有关微生物培养基制备的叙述，正确的是（ ）
A. 培养基配方中都含有碳源、氮源、水、无机盐及琼脂等成分
B. 培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性
C. 在微生物的实验室培养中，培养皿可用体积分数为70%的酒精擦拭灭菌
D. 倒平板时需将培养基冷却至室温，再在酒精灯火焰旁倒平板
【答案】B
【解析】
【分析】培养基的基本成分：水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子；培养基的配制过程中，操作顺序如下：称量、溶化、调节pH、分装、加棉塞、包扎，灭菌等。
【详解】A、培养基配方中都含有碳源、氮源、水、无机盐等成分，若配制液体培养基不需要添加琼脂，因为琼脂只是作为凝固剂，不是营养成分之一，A错误；
B、霉菌生长繁殖的最适pH为酸性，故培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，B正确；
C、在微生物的实验室培养中，培养皿要用干热灭菌法彻底消灭其中的微生物，C错误；
D、倒平板时需待培养基冷却至50度左右而不是室温，并在酒精灯火焰附近倒平板，D错误。
故选B。
4. 下列关于微生物纯培养的叙述，正确的是（ ）
A. 消毒和灭菌的杀菌程度存在差异，消毒可以杀死物体内外所有的微生物
B. 培养基中营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利
C. 固体培养基表面生长的一个单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的
D. 在实验室中，可以在非实验区域进食和喝水
【答案】C
【解析】
【分析】1、无菌技术：无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。灭菌与消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。
2、消毒与灭菌的区别：
比较项目
理化因素的作用强度
消灭微生物的数量
芽孢和孢子能否被消灭
消毒
较为温和
部分生活状态的微生物
不能
灭菌
强烈
全部微生物
能
【详解】A、消毒只能杀灭物体体表或内部的一部分微生物，不能杀死孢子和芽孢，而灭菌是用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，A错误；B、培养基中的营养物质要协调，注意各种营养物质的浓度和比例，若浓度过高，微生物会通过渗透作用失水，对微生物的增殖不利，B错误；
C、菌落是指细菌或真菌在固体培养基上由一个细胞生长繁殖而形成的能被肉眼识别的子细胞群体，固体培养基表面生长的一个菌落一般是由单个微生物繁殖形成的，C正确；
D、为保证实验者的安全并避免杂菌污染，不能在实验室中进食和喝水，D错误。
故选C。
【点睛】本题主要考查微生物培养时灭菌与消毒的区别、培养基的配制原则，意在强化学生对相关内容的识记、理解与运用。
5. 图甲为利用诱变方式选育可高产β-胡萝卜素的布拉霉菌。未突变菌不能在含有β-紫罗酮的培养基上生长。随β-胡萝卜素含量增加菌体颜色从黄色加深至橙红色。下列叙述错误的是（ ）
A. 过程①紫外线照射的布拉霉菌不一定都能在含β-紫罗酮培养基生长
B. 进行③操作时，应选择较大的橙红色菌落中的菌株继续接种培养
C. 要得到图乙所示的菌落，可用稀释涂布平板法进行②操作，然后培养
D. 能在添加了β-紫罗酮的乙上长成菌落的细菌，可产生更多的β-胡萝卜素
【答案】D
【解析】
【分析】
分析图甲：图中过程①表示利用紫外线诱导基因突变，过程②表示微生物接种（结合图乙可知，平板中的菌落均匀分布，应采用了稀释涂布平板法），过程③④表示选择培养，过程⑥表示浓缩。
【详解】A、过程①表示利用紫外线诱导基因突变，由于突变频率低，只有少数基因突变的菌才能生长、繁殖，故紫外线照射的布拉霉菌不一定都能在含β-紫罗酮培养基生长，A正确；
B、本实验是选育高产β-胡萝卜素的布拉霉菌，橙红色菌落的菌株β-胡萝卜素含量较高，应选择继续接种培养，B正确；
C、从图乙所示的菌落均匀分布，可判断是用稀释涂布平板法进行②操作，C正确；
D、能在添加了β-紫罗酮的乙上长成菌落的细菌，是突变菌，由于突变是不定向的，突变菌不一定都能产生更多的β-胡萝卜素，D错误。
故选D。
【点睛】
6. 将从种植烟草的土壤里分离得到的尼古丁（C10H14N2）降解菌株SC接种到尼古丁培养基中，30℃摇床培养并定时取样，测定并计算发酵液中的尼古丁浓度和菌体浓度，得到的结果如图所示。下列分析不正确的是
A. 分离SC时可用稀释涂布平板法或划线法
B. 培养36h时SC的数量为该种群的环境容纳量
C. 影响SC种群密度变化的主要因素是O2浓度和pH
D. 发酵液中的尼古丁为SC提供碳源和氮源
【答案】C
【解析】
【详解】平板划线法和稀释涂布平板法均可分离和提纯细菌，A项正确；培养36h时，SC的数量达到最大值，为该种群的环境容纳量，B项正确；根据题意可知，尼古丁是SC的主要营养物质，为SC提供碳源和氮源，再结合曲线图可推知，影响SC种群密度变化的主要因素是培养基中尼古丁的含量，C项错误，D项正确。
【点睛】
两种纯化细菌的方法的比较
项目
优点
缺点
适用范围
平板划
线法
可以观察菌落特征，对混合菌进行分离
不能计数
适用于
好氧菌
稀释涂
布平
板法
可以计数，可以观察菌落特征
吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延
适用于厌氧菌和兼性厌氧菌
7. 平板划线法和稀释涂布平板法是微生物纯培养的常用方法，下列叙述正确的是（ ）
A. 灼烧接种环次数与划线次数不同，涂布器从酒精中取出直接放在火焰上灼烧
B. 两种方法都要将菌液进行一系列梯度稀释，都能对菌种进行计数
C. 通过稀释涂布平板法统计的活菌数往往小于实际的活菌数
D. 打开含菌种的试管后需要将试管口通过火焰，蘸取菌种后需要马上塞上棉塞
【答案】C
【解析】
【分析】分离微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。筛选或分类微生物时需要使用固体培养基进行平板划线法或稀释涂布平板法接种，其中稀释涂布平板法还可以用来进行微生物的计数。
【详解】A、平板划线法每次划线前后都会灼烧接种环，所以灼烧接种环次数=划线次数+1，涂布器从酒精中取出后在火焰上引燃，A错误；
B、平板划线法不需要稀释，也不能进行计数，B错误；
C、由于2个或者多个细菌可能形成1个菌落，因此通过稀释涂布平板法统计的活菌数往往小于实际的活菌数，C正确；
D、打开含菌种的试管后需要将试管口通过火焰，蘸取菌种后需要将试管口通过火焰在塞上棉塞，D错误。
故选C。
8. 下列对发酵工程的有关叙述，正确的是（ ）
A. 单细胞蛋白就是从人工培养微生物菌体中提取的蛋白质
B. 可通过诱变育种、基因工程等方法选育出性状优良的菌种进行扩大培养
C. 发酵工程与传统发酵技术最大的区别是前者可以用微生物进行发酵
D. 通常所指的发酵条件包括温度、溶解氧、pH和酶的控制等
【答案】B
【解析】
【分析】1、发酵工程生产的产品有两类：一类是代谢产物，另一类是菌体本身。
2、产品不同，分离提纯的方法一般不同。①如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；②如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。
3、发酵过程中要严格控制温度、PH、溶氧、通气量与转速等发酵条件。
4、发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。
【详解】A、单细胞蛋白是指利用淀粉或纤维素的水解液、制糖工业的废液、石化产品等为原料，通过发酵获得的大量的微生物菌体，A错误；
B、工程菌多为原核生物，可通过诱变育种、基因工程等方法，选育出性状优良的工程菌并进行扩大培养，B正确；
C、传统发酵技术和现代发酵工程最大的相同之处是利用各种微生物的代谢来实现相关产品的生产，C错误；
D、通常所指的发酵条件包括温度控制、溶氧控制、pH控制等，D错误。
故选B。
【点睛】
9. 在生物体内，细胞没有表现出全能性，而是分化为不同组织、器官，因为（ ）
A. 细胞丧失了全能性
B. 基因的表达具有选择性
C. 不同的细胞内基因不完全相同
D. 在个体发育的不同时期，细胞内的基因发生了变化
【答案】B
【解析】
【分析】1、细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态，结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。细胞分化的实质是基因的选择性表达。
2、同一生物体的不同体细胞都是由同一个受精卵有丝分裂形成的，都含有相同的基因，但不同细胞选择表达的基因不同，因此不同细胞所含的蛋白质和mRNA不同。
【详解】A、分化的细胞也具有全能性，A不符合题意；
B、细胞分化的根本原因是基因的选择性表达，B符合题意；
C、同一生物体的不同体细胞都是由同一个受精卵有丝分裂形成的，都含有相同的基因，C不符合题意；
D、在个体发育的不同时期，细胞内的基因不发生改变，D不符合题意。
故选B。
10. 下列关于菊花组织培养的叙述，错误的是（ ）
A. 菊花的组织培养需要经过细胞的脱分化和再分化过程
B. 要控制好培养基中生长素和细胞分裂素的浓度及比例
C. 为避免环境中微生物的污染，要对外植体进行灭菌处理
D. 接种外植体到培养基时，需要注意形态学方向，不可倒插
【答案】C
【解析】
【分析】
1、植物组织培养的过程： 。
2、植物组织培养的原理：植物细胞具有全能性。
3、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要，被称为“激素杠杆”。
【详解】A、由分析可知，菊花的组织培养需要经过细胞的脱分化和再分化过程，A正确；
B、培养基中生长素和细胞分裂素的浓度及比例影响愈伤组织的生长和分化，故要控制好培养基中生长素和细胞分裂素的浓度及比例，B正确；
C、植物组织培养时需要对外植体消毒，既要杀死材料表面的微生物，又要减少消毒剂对细胞的伤害，不能对其进行灭菌处理，C错误；
D、有些植物激素是极性运输的，即从形态学的上端运到形态学的下端，故接种外植体到培养基时，需要注意形态学方向，不可倒插，D正确。
故选C。
11. 植物细胞工程的应用取得了显著的社会效益和经济效益，以下技术和相应优点的对应关系中，正确的是（ ）
A. 微型繁殖技术——打破生殖隔离
B. 单倍体育种技术——利于获得突变体
C. 植物体细胞杂交技术——精准控制成体性状
D. 植物细胞培养——不占用耕地，几乎不受季节限制
【答案】D
【解析】
【分析】
植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
【详解】A、植物微型繁殖技术具有的优点：能保持植物原有的优良的遗传特性、繁殖速度快、不受季节、气候和地域的限制等，但并不能打破生殖隔离，A错误；
B、单倍体育种可以快速获得具有优良性状的纯合子，缩短育种年限，而非有利于获得突变体，B错误；
C、植物体细胞杂交技术的优点是克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍（或克服生殖隔离），该技术可能不会按照人们的意愿表达出双亲的优良性状，其原因可能是不同物种的基因在表达时相互干扰，从而不能有序表达，C错误；
D、植物组织培养技术是在无菌和人工控制的条件下，让离体的组织和细胞在特定培养基上先脱分化得到愈伤组织，再分化得到胚状体、丛芽等，进而得到新植株，该技术可实现作物的工厂化生产，且不占用耕地，几乎不受季节限制，D正确。
故选D。
12. 下图为“番茄－马铃薯”杂种植株幼苗的培育过程图，有关叙述错误的是（ ）
A. 通常在等渗溶液中用酶解法处理植物细胞获得原生质体a和b
B. 诱导a、b细胞融合的化学方法有聚乙二醇、高Ca2+—高pH融合法等
C. 可根据质壁分离现象鉴别杂种细胞的细胞壁是否再生
D. 上述过程中包含了有丝分裂、细胞分化和减数分裂等过程
【答案】D
【解析】
【分析】据图分析，①表示去除细胞壁，②表示原生质体的融合，③表示再生细胞壁，④表示脱分化，⑤表示再分化。
【详解】A、①过程为去除细胞壁的过程，植物体细胞杂交的实质是植物原生质体的融合，所以在融合前需要使用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除植物的细胞壁，获得植物的原生质体，为了获得植物的原生质体，操作一般在等渗溶液中进行，维持去掉细胞壁的原生质体的形态，A正确；
B、利用聚乙二醇、高Ca2+—高pH融合法和电激等方法可实现a、b细胞融合，B正确；
C、融合后的杂种细胞再生出新的细胞壁是原生质体融合完成的标志，故可利用质壁分离现象鉴定细胞壁是否再生，C正确；
D、图中①至⑤过程表示植物体细胞杂交，涉及细胞的分裂和分化，但不涉及有性生殖过程的减数分裂，D错误。
故选D。
13. 如图是通过植物细胞工程技术获得紫杉醇的途径，下列有关叙述错误的是（ ）
A. 该途径依据的原理是植物细胞具有全能性
B. 需在无菌和人工控制的条件下进行
C. 经过程①细胞的形态和结构发生了变化
D. 紫杉醇是紫杉植物体内的一种次级代谢物
【答案】A
【解析】
【分析】分析题图：图示是通过植物细胞工程技术获得紫杉醇的途径，其中①表示脱分化过程，②表示将愈伤组织分散成单个细胞，③表示细胞增殖过程。据此答题。
【详解】A、细胞全能性以细胞发育成个体为标志，而图中并没有形成完整植物体，A错误；
B、为避免杂菌污染，图示过程需在无菌和人工控制的条件下进行，B正确；
C、图中①是脱分化过程，经该过程细胞的形态和结构发生了变化，成为高度液泡化的薄壁细胞，C正确；
D、次级代谢产物是指生物生长到一定阶段后通过次级代谢合成的分子结构十分复杂、对该生物无明显生理功能，或并非是该生物生长和繁殖所必需的小分子物质，紫杉醇是紫杉植物体内的一种次级代谢物，D正确。
故选A。
14. 下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（ ）
A. 培养环境需要O2，不需要CO2
B. 体外培养的细胞既能贴壁生长又能悬浮生长，都会发生接触抑制的现象
C. 培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等
D. 培养瓶中细胞需要定期用相应的酶处理，分瓶后才能继续增殖
【答案】C
【解析】
【分析】动物细胞培养依据细胞增殖的原理，培养过程中需要无菌、无毒的环境中，以免杂菌污染；同时需要提供适宜的营养物质和温度、pH、气体条件。
【详解】A、培养环境需要CO2维持培养液一定的pH，A错误；
B、体外培养的细胞有的能贴壁生长，有的能悬浮生长，癌细胞培养时不会发生接触抑制的现象，B错误；
C、培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等，以满足细胞分裂、生长的需要，C正确；
D、培养瓶中细胞若悬浮生长，可直接用离心法收集，制成悬液后分瓶培养，D错误。
故选C。
【点睛】
15. 图中最能完整显示正常机体内干细胞基本特征的是（ ）
A. B. C. D.
【答案】D
【解析】
【分析】机体在发展适应过程中，保留了一部分未分化的原始细胞，称之为干细胞。一旦需要，这些干细胞按照发育途径通过分裂而产生分化细胞，以保证局部组织损伤的修复。
【详解】干细胞是具有细胞周期的细胞，它能不断分裂产生子细胞。有的子细胞仍然具有细胞周期，有的子细胞不再分裂，将分化成具有特定功能的细胞，已分化的细胞一般不再继续进行分裂，细胞分化具有不可逆转的特性。D正确。
故选D。
【点睛】
16. 如图所示是某动物细胞培养时，培养液中活细胞和死亡细胞密度统计结果，下列相关叙述错误的是（ ）
A. 实验中要控制胰蛋白酶溶液浓度和处理时间，以免损伤细胞
B. 培养液中应适当加入青霉素、链霉素，以避免杂菌污染
C. 曲线bc段变化的主要原因是培养液中营养物质不足及有害代谢产物积累
D. 培养至第6天时，新产生的细胞数等于死亡细胞数
【答案】D
【解析】
【分析】分析曲线图可知，ab段表示活细胞密度增加，bc段表示活细胞密度减少；培养0～8天时，死细胞密度增加。培养第6天时，活细胞数等于死亡细胞数。
【详解】A、实验中要控制胰蛋白酶溶液浓度和处理时间，以免损伤细胞，A正确；
B、培养液中应适当加入青霉素、链霉素，以避免杂菌污染，B正确；
C、曲线bc段表示活细胞密度减少而死细胞密度增加，产生的主要原因是培养液中营养物质不足及有害代谢产物积累等，C正确；
D、培养第6天时，活细胞数等于死亡细胞数，D错误。
故选D。
17. 下列对植物体细胞杂交和动物细胞融合的叙述，描述正确的是（ ）
A. 动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，诱导融合的方法也完全相同
B. 只有植物体细胞杂交突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能
C. 植物体细胞杂交为了获得杂种植株，动物细胞融合主要为了获得细胞产品
D. 杂种植株具有两个物种遗传物质的超级植物，并体现了两个物种的全部性状
【答案】C
【解析】
【分析】植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较：
项目
细胞融合原理
细胞融合方法
诱导手段
用途
植物体细胞杂交
细胞膜的流动性，（细胞的全能性）
去除细胞壁后诱导原生质体融合
离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导
克服远缘杂交不亲和，获得杂交植株
动物细胞融合
细胞膜的流动性
使细胞分散后，诱导细胞融合
离心、电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导
制备单克隆抗体的技术之一
【详解】A、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相似，都是细胞膜的流动性，但诱导融合方法不完全相同，后者没有生物方法，A错误；
B、动物细胞融合与植物原生质体融合都突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能，B错误；
C、植物体细胞杂交为了获得具有两物种性状的杂种植株，动物细胞全能性受到限制，动物细胞融合主要为了获得细胞产品，C正确；
D、目前科学家终于实现了两个植物物种间的体细胞杂交，得到同时具有两个物种遗传物质的超级植物，但目前不能使它们的性状全部得以体现，D错误。
故选C。
18. 下列关于高等哺乳动物受精与胚胎发育的叙述，正确的是（ ）
A. 在自然条件下，受精在子宫中完成
B. 精子入卵后，卵细胞膜会发生反应阻止其他精子入卵
C. 卵裂期细胞的体积随分裂次数的增加而不断增大
D. 在桑葚胚阶段，胚胎的内部开始出现含有液体的腔
【答案】B
【解析】
【分析】1、胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎[之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞]；（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔[注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化]；（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。
2、受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始．其中透明带反应和卵黄膜封闭作用是防止多精入卵的两道屏障。
【详解】A、在自然条件下，受精在输卵管中完成，A错误；
B、透明带反应和卵细胞膜封闭作用是防止多精入卵的两道屏障，精子入卵后，卵细胞膜会发生卵细胞膜封闭反应阻止其他精子入卵，B正确；
C、受精卵在卵裂过程中，胚胎的总体积基本不变或略有减小，而单个细胞的体积随分裂次数的增加而不断减小，C错误；
D、在囊胚阶段，胚胎的内部开始出现含有液体的腔，叫原肠腔，D错误。
故选B。
【点睛】
19. 2017年，某国批准首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请，下图为培育“三亲婴儿”的技术路线，据图分析下列叙述错误的是（ ）
A. 该技术可避免母亲的线粒体遗传基因传递给后代
B. 该技术涉及动物细胞培养、早期胚胎培养等操作
C. “三亲婴儿”同时拥有自己父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因
D. 捐献者的红绿色盲基因能够传递给“三亲婴儿”
【答案】D
【解析】
【分析】分析题图：图示表示三亲婴儿的培育过程，由图可知，三亲婴儿的培育采用了核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等。
【详解】A、该“三亲婴儿”的细胞质来自捐献者卵母细胞，母亲只提供卵细胞细胞核，故该技术可避免母亲的线粒体遗传基因传递给后代，A正确；
B、由图可知：三亲婴儿采用了体外受精的技术手段，该技术涉及动物细胞培养、早期胚胎培养等操作，B正确；
C、“三亲婴儿”同时拥有自己父亲的精子细胞核、母亲的卵细胞细胞核基因及卵母细胞捐献者的细胞质基因，C正确；
D、捐献者只提供了细胞质，而红绿色盲基因存在于细胞核，故捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给三亲婴儿，D错误。
故选D。
20. 以下几种酶与图中所指的化学键形成或断裂有关的有几种 （ ）
①限制性内切核酸酶 ②DNA连接酶 ③RNA聚合酶 ④解旋酶 ⑤DNA聚合酶
A. 一种 B. 两种 C. 三种 D. 四种
【答案】C
【解析】
【分析】分析题图：图中所指化学键是脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，是限制酶、DNA连接酶、DNA聚合酶、DNA水解酶的作用部位。
【详解】①限制性内切核酸酶 的作用对象是磷酸二酯键，其能将脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，①正确；
②DNA连接酶的作用对象是磷酸二酯键，其能将DNA片段之间的磷酸二酯键连接起来，②正确；
③RNA聚合酶的作用对象是磷酸二酯键，其能将核糖核苷酸之间的磷酸二酯键连接起来，而图示含有碱基T，不符合RNA聚合酶作用，③错误；
④解旋酶的作用对象是氢键，④错误；
⑤DNA聚合酶的作用对象是磷酸二酯键，其能将脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键连接起来，⑤正确。
故与磷酸二酯键的形成或断裂有关的有①②⑤三种。C符合题意。
故选C。
21. 基因工程中，需使用特定的限制性内切核酸酶切割目的基因和质粒便于重组和筛选。已知限制性内切核酸酶Ⅰ的识别序列和切点是一G↓GATCC一，限制性内切核酸酶Ⅱ的识别序列和切点是一↓GATC一，根据图示分析下列叙述正确的是（ ）
A. 质粒用限制酶性内切核酸酶Ⅱ切割，目的基因用限制性内切核酸酶Ⅰ切割
B. 用限制性内切核酸酶切割获得目的基因时，有四个磷酸二酯键被水解
C. 限制性内切核酸酶Ⅰ和限制性内切核酸酶Ⅱ切割后获得的黏性末端不同
D. 质粒中的标记基因便于筛选出目的基因已经表达的细胞
【答案】B
【解析】
【分析】由于限制酶Ⅱ能识别限制酶Ⅰ的识别序列，限制酶Ⅰ不能识别限制酶Ⅱ的识别序列；要将目的基因从该DNA链中提取出来，需要在目的基因左右切开，所以要用限制酶Ⅱ；质粒不能用限制酶Ⅱ，如果用该酶的话，质粒就会有两个切口。
【详解】A、通过分析可知，质粒用限制性核酸内切酶Ⅰ切割，目的基因用限制性核酸内切酶Ⅱ切割，A错误；
B、用限制性核酸内切酶Ⅱ，将目的基因左右切开切割，又由于DNA是双链，故需要有四个磷酸二酯键被水解，B正确；
C、根据题意可知二者产生的黏性末端相同，都是 ，C错误；
D、质粒中的标记基因的作用是用来筛选含有目的基因的受体细胞，D错误。
故选B。
22. 下列有关基因工程的叙述，错误的是（ ）
A. 基因工程可以克服物种间的生殖隔离，定向改造生物的遗传性状
B. 限制酶可特异性地识别6个、5个、4个核苷酸组成的序列
C. 载体上有一个或多个限制酶的切割位点，供外源DNA片段插入
D. 常用天然质粒作载体，质粒上的标记基因便于重组DNA分子的筛选
【答案】D
【解析】
【分析】基因工程又叫DNA重组技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取，②基因表达载体的构建，③将目的基因导入受体细胞，④目的基因的检测与鉴定。
【详解】A、基因工程可以按照人们的意愿，克服不同物种之间的生殖隔离，实现生物的定向变异，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品，A正确；
B、限制酶具有专一性，可特异性地识别6个、5个、4个核苷酸组成的反向重复序列，B正确；
C、载体上往往有一个或多个限制酶的切割位点，能够给外源DNA插入提供更多的选择，C正确；
D、质粒上的标记基因便于重组DNA分子的筛选，常用质粒作载体，天然质粒通常需要改造才能作为基因工程的运载体，D错误。
故选D。
【点睛】
23. 用XhoⅠ和SalⅠ两种限制性内切核酸酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图。下列叙述错误的是（ ）
A. 电泳是指带电的分子在电场的作用下发生迁移的过程
B. 泳道①中是用XhoI处理得到的酶切产物
C. 若用XhoI和SalI两种酶同时处理该DNA片段后电泳，其泳道可能只有5条
D. 电泳技术可以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系鉴定
【答案】B
【解析】
【分析】分析题图：限制酶SalⅠ有三处切割位点，切割后产生4个DNA片段，泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物；限制酶XhoⅠ有2处切割位点，切割后产生3个DNA片段，泳道②中是用XhoⅠ处理得到的酶切产物。
【详解】A、电泳是指带电的分子在电场的作用下发生迁移的过程，A正确；
B、限制酶SalⅠ有三处切割位点，切割后产生4个DNA片段，泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物，B错误；
C、限制酶SalⅠ有三处切割位点，切割后产生4个DNA片段，限制酶XhoⅠ有2处切割位点，切割后产生3个DNA片段，结合题图可知，若用XhoI和SalI两种酶同时处理该DNA片段后电泳，可能存在相同长度的DNA片段，其泳道可能只有5条，C正确；
D、不同生物的DNA切割后长度不同，切割后再进行电泳，可以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系的鉴定，D正确。
故选B。
【点睛】
24. SRY基因为Y染色体上的性别决定基因，可用SRY-PCR法鉴定胚胎性别，其基本程序如下图，相关说法不合理的是 （ ）
A. 通常提取囊胚期滋养层细胞的DNA作为扩增模板
B. PCR反应需要提供含DNA模板、两种引物、四种脱氧核苷酸和耐热DNA聚合酶的缓冲溶液
C. 扩增相同时间，获得DNA的含量与模板DNA及引物的量成正相关
D. PCR扩增得到的DNA含有胚胎细胞全部的遗传信息
【答案】D
【解析】
【分析】1、PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。
2、PCR反应过程是：变性→复性→延伸过程。
3、结果：上述三步反应完成后，一个DNA分子就变成了两个DNA分子，随着重复次数的增多，DNA分子就以2n的形式增加，PCR的反应过程都是在PCR扩增仪中完成的。
【详解】A、通常提取滋养层细胞的DNA作为复制模板，这是因为滋养层细胞是胎儿发育过程中形成的细胞，其DNA可作为扩增复制的模板，A正确；
B、PCR反应需要提供含DNA模板、两种引物、四种脱氧核苷酸作原料和耐热的DNA聚合酶的缓冲溶液，B正确；
C、PCR反应中，DNA分子以2n的形式增加，若扩增相同时间，获得DNA的含量与模板DNA及引物的量成正相关，C正确；
D、SRY-PCR法中，用位于Y染色体上的性别决定基因（即SRY基因）的一段碱基作引物，以滋养层细胞的DNA为模板进行PCR扩增，因此该PCR扩增过程只得到胚胎细胞的部分遗传信息，D错误。
故选D。
【点睛】
25. 下列关于DNA粗提取与鉴定的叙述，正确的是（ ）
A. 可以选取新鲜的洋葱、猪成熟红细胞等作为实验材料
B. DNA只能溶于2mol/LNaCI溶液
C. 预冷的乙醇可用来溶解DNA
D. 用二苯胺试剂鉴定DNA需要进行水浴加热
【答案】D
【解析】
【分析】DNA的粗提取和分离：
1、DNA的溶解性：（1）DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低），利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。（2）DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离。
2、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性：蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60-80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。
3、DNA的鉴定：在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
【详解】A、猪是哺乳动物，哺乳动物的成熟红细胞中没有细胞核，不含DNA，不能用于做DNA提取实验材料，A错误；
B、DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，当NaCl溶液的浓度为0.14mo/L时，DNA溶解度最小，0.15mol/L、2mol/LNaCI溶液中溶解度较大，B错误；
C、在预冷的95%酒精溶液中DNA的溶解度最低，DNA的沉淀量最大，故预冷的乙醇可用来进一步纯化粗提的DNA，C错误；
D、在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂，D正确。
故选D。
【点睛】
26. 下列关于基因表达载体构建的描述，错误的是（ ）
A. 启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，组成它的基本单位是脱氧核苷酸
B. 基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止密码子、标记基因等组件
C. 人工构建的诱导型启动子，当诱导物存在时，可激活或抑制目的基因的表达
D. 由于受体细胞不同，基因表达载体的构建也有所差别
【答案】B
【解析】
【分析】基因表达载体的构建
（1）目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用。
（2）基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因
启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始；
终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束；
由于受体细胞有植物、动物以及微生物之分，以及目的基因导入受体细胞的方法不同，因此基因表达载体的构建是不完全相同的。
【详解】A、启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶识别和结合的位点，组成它的基本单位是脱氧核苷酸，A正确；
B、基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子、标记基因等组件，B错误；
C、人工构建的诱导型启动子，当诱导物存在时，可激活或抑制目的基因的表达，C正确；
D、由于受体细胞有植物、动物以及微生物之分，以及目的基因导入受体细胞的方法不同，因此基因表达载体的构建是不完全相同的，D正确。
故选B。
27. 下列关于蛋白质工程的叙述，错误的是（ ）
A. 蛋白质工程的实质是通过改造基因来改造蛋白质
B. 蛋白质工程能生产出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子
C. 蛋白质工程需要改变蛋白质分子的所有氨基酸序列
D. 蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程
【答案】C
【解析】
【分析】概念及基本原理：
（1）蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）。
（2）蛋白质工程崛起的缘由：基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质。
（3）蛋白质工程的基本原理：它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构，又称为第二代的基因工程。
（4）基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因）以上是蛋白质工程特有的途径；以下按照基因工程的一般步骤进行。
【详解】A、蛋白质工程的实质是通过改造基因来改造蛋白质，A正确；
B、蛋白质工程能以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，B正确；
C、蛋白质工程并非是改变蛋白质分子的所有氨基酸序列，C错误；
D、蛋白质工程可以根据人的需求来设计蛋白质的结构，又称为第二代的基因工程，是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程，D正确。
故选C。
28. 下列关于生物技术安全性和伦理问题的叙述，错误的是（ ）
A. 要靠确凿的证据和严谨的逻辑思维来思考转基因技术的影响
B. 生殖性克隆面临伦理问题，治疗性克隆不会面临伦理问题
C. 我国政府对生物武器采取的态度是不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散
D. 我国允许生殖性克隆动物，但禁止生殖性克隆人
【答案】B
【解析】
【分析】1、生物武器种类：包括致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等．把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。
2、生物武器的特点：1、单位面积效应大；2、有特定的伤害对象；3、具有传染性；4、危害时间久；5、不易被发现和鉴定；6、使用者本身易受伤害；7、生物武器造价低，技术难度不大，隐秘性强，可以在任何地方研制和生产。
【详解】A、转基因生物具有安全性问题，但要靠确凿的证据和严谨的逻辑思维来思考转基因技术的影响，不能因噎废食，A正确；
B、治疗性克隆也会面临伦理问题，所以要对治疗性克隆有效监控和严格审查，B错误；
C、我国政府对生物武器采取的态度是不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散，C正确；
D、我国允许生殖性克隆动物，但禁止生殖性克隆人，D正确。
故选B。
29. 下列有关生物多样性的叙述，错误的是（ ）
A. 湿地生态系统具有蓄洪防旱、调节气候的功能，这属于生物多样性的间接价值
B. 我国政府颁布了《退耕还林条例》有利于保护生物多样
C. 目前保护生物多样性的最好做法就是禁止对生物资源的开发和利用
D. 人们从野生植物中提取青蒿素用于治疗疟疾，这属于生物多样性直接研究价值
【答案】C
【解析】
【分析】1、生物的多样性：生物圈内所有的植物、动物和微生物，它们所拥有的全部基因以及各种各样的生态系统，共同构成了生物多样性。生物多样性包括基因多样性、物种多样性和生态系统多样性。
2、生物多样性的价值直接价值：对人类有食用、药用和工业原料等使用意义，以及有旅游观赏、科学研究和文学艺术创作等非实用意义的；间接价值：对生态系统起重要调节作用的价值（生态功能）；潜在价值：目前人类不清楚的价值。
3、注意事项：协调好人与生态环境的关系；反对盲目地掠夺式开发和利用，并不意味禁止开发和利用；保护生物多样性需要全球合作。
【详解】A、湿地生态系统具有蓄洪防早、调节气候的功能，这属于生物多样性的间接价值，A正确；
B、我国政府颁布了《退耕还林条例》有利于保护生物多样性，B正确；
C、保护生物多样性并不意味着禁止对生物资源的开发和利用，而是要合理开发和利用自然资源，C错误；
D、人们从野生植物中提取青蒿素用于治疗疟疾，这属于生物多样性具有直接研究价值，D正确。
故选C。
30. 下列关于生态系统的稳态及多样性保护的叙述，错误的是（ ）
A. 物种多样性较高的生态系统抵抗力稳定性相对较高
B. 在一块牧草地上播种杂草形成杂草地后，其抵抗力稳定性提高
C. 对于珍稀濒危的物种，应该禁止一切形式的猎采和买卖
D. 生物多样性包括种群多样性、群落多样性和生态系统多样性
【答案】D
【解析】
【分析】生态系统能够保持和恢复自身结构和功能相对稳定，称为生态系统的稳定性，其原因生态系统具有一定的自我调节能力，自我调节能力的基础是负反馈，主要分为抵抗力稳定性和恢复力稳定性。
【详解】A、物种的种类增多，食物链和食物网比较复杂，则生态系统抵抗外界干扰的能力比较强，A正确；
B、在一块牧草地上播种杂草形成杂草地后，物种的丰富度增加，因此其抵抗力稳定性提高，B正确；
C、对于珍稀濒危的物种，应该禁止一切形式的猎采和买卖，若继续猎采和买卖，则会导致其彻底灭绝，C正确；
D、生物多样性包括基因多样性、物种多样性和生态系统多样性，D错误；
故选D。
31. 请回答下列关于工程技术问题。
（1）病毒在作物体内逐年积累，就会导致作物品质差，目前常采用_________技术脱去病毒。
（2）可通过______________技术将桑葚胚移入代孕母鼠子宫内，使其继续发育。
（3）胚胎分割中，在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将______________均等分割。
（4）将目的基因导入动物细胞最常用的一种方法是____________。
【答案】 ①. 茎尖组织培养 ②. 胚胎移植 ③. 内细胞团 ④. 显微注射
【解析】
【分析】1、植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织（高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织），愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。
2、影响植物组织培养的因素：①培养基配制；②外植体选取；③激素的运用；④消毒；⑤温度、pH、光照。
3、胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。
【详解】（1）病毒在作物体内逐年积累，就会导致作物品质差，由于茎尖等分生区病毒极少甚至无病毒，目前常采用茎尖组织培养技术脱去病毒。
（2）可通过胚胎移植技术将桑葚胚移入代孕母鼠子宫内，使其继续发育。
（3）胚胎分割中，在分割囊胚阶段的胚胎时，由于内细胞团将来发育成胎儿的组织器官，要注意将内细胞团均等分割，否则将会影响胚胎的进一步发育。
（4）将目的基因导入动物细胞最常用的一种方法是显微注射法。
【点睛】本题考查植物组织培养和胚胎移植的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，难度不大。
32. 普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种，过程如下图1所示。请回答下列问题。
（1）为了达到筛选目的，平板内固体培养基中的唯一碳源是_______，②、③过程需要重复几次，目的是_______________________________________________________________。
（2）某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如上图2所示。推测该同学接种时可能的操作失误是________________________________________。
（3）为了测定工程菌分解淀粉能力，可以在培养基中加入_______________，根据菌落周围______________大小可以判断工程菌利用淀粉的能力。
（4）某研究小组将1mL培养液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接种入0．1mL稀释液。需要每隔段时间统计一次，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样做的目的是_____________________________________。培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，据此可得出每升培养液中的活菌数为_____________。
【答案】 ①. 淀粉 ②. 确保筛选出真正高效利用淀粉的工程酵母菌菌种 ③. 涂布不均匀 ④. 碘液 ⑤. 透明圈 ⑥. 防止因培养时间不足而导致菌落遗漏 ⑦. 3．8×107
【解析】
【分析】1、在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。
2、微生物常见的接种的方法（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】（1）由题干信息分析可知，该实验的目的是为了获得可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种，故为达到筛选目的，平板内固体培养基中使用淀粉作为唯一的碳源；由图1观察可知，②、③的过程需要重复几次，是为了确保筛选出真正高效利用淀粉的工程酵母菌菌种。
（2）由图2分析可知，该平板上的菌落形成了单个菌落，且分布不均，是利用稀释涂布平板法进行的操作，出现这种情况的原因是涂布不均匀造成的。
（3）淀粉遇碘液会变蓝，故为了测定工程菌分解淀粉的能力，可以在培养基中加入碘液，根据菌落周围透明圈的大小，可以判断工程菌利用淀粉的能力，透明圈越大，利用淀粉的能力越强。
（4）采用稀释涂布平板法统计培养液中酵母菌的活菌数，需要每隔段时间统计一次，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样做的目的是防止因培养时间不足而导致菌落遗漏；培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，则平均数为（39+38+37）÷3=38，每升培养液中的活菌数为38÷0.1×100×1000=3.8×107。
【点睛】本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记微生物的接种方法等实验操作，能够结合题图信息，运用所学知识完成试题的解答。
33. 利用相关工程技术可以获得抗线虫病的杂种萝卜－油菜植株，已知萝卜具有抗线虫病基因，而油菜容易被胞囊线虫侵染造成减产。科研人员以萝卜和油菜为亲本进行体细胞杂交，以获得抗线虫病的杂种植株，具体操作流程如图所示。请回答下列问题。
（1）通过①获得原生质体，原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的____________，维持原生质体完整性。过程②细胞融合的基本原理是______________。
（2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的__________存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。对杂种植株进行_____________接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。
（3）若油菜和萝卜都是二倍体，则杂种植株为______倍体，从理论上讲，杂种植株的育性为______________（填“可育”或“不育”）。
【答案】 ①. 渗透压 ②. 细胞膜的流动性 ③. 叶绿体 ④. 胞囊线虫 ⑤. 四 ⑥. 可育
【解析】
【分析】分析题图：图示为采用植物体细胞杂交技术获得抗病杂种植株的流程图，其中①表示采用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除细胞壁的过程；②表示诱导原生质体融合的过程；之后再采用植物组织培养技术即可得到杂种植株，其中③表示脱分化，④表示再分化。
【详解】（1）通过①酶解法获得原生质体，原生质体没有细胞壁的保护，需要加入适宜浓度的甘露醇以保证渗透压的稳定，以避免原生质体吸水或失水破坏原生质体的完整性。过程②细胞融合的基本原理是细胞膜的流动性。
（2）用于融合两个细胞，一个是抗病的萝卜的幼叶，一个是易感病油菜的幼根细胞，其中供体叶片细胞特有的结构是叶绿体，因此可通过观察叶绿体的有无作为初步筛选杂种细胞的标志。根据题干信息，“已知萝卜具有抗线虫病基因”，则对杂种植株进行胞囊线虫接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。
（3）若油菜和萝卜都是二倍体，则杂种植株为四倍体；从理论上讲，杂种植株含有同源染色体，育性为可育。
【点睛】本题结合杂种植株的流程图，考查植物体细胞杂交的相关知识，要求考生识记植物体细胞杂交的概念、过程及意义，能正确分析题图，再结合所学的知识准确答题。
34. EV71是引发手足口病的一种人肠道病毒。为制备抗EV71的单克隆抗体，科研人员用小鼠进行实验。
（1）将EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1和VP2作为__________分别注射到3组小鼠体内，引发小鼠机体的________________免疫产生相应的抗体。
（2）多次免疫后，分别取上述3组小鼠的血清和未免疫小鼠血清，测定抗体与抗原的结合强度，结果如图所示。
①EV71免疫的小鼠血清抗体________（填“是”或“不是”）单一抗体，判断依据是_________________________________________________________________________。
②制备抗EV71单克隆抗体时，选用__________免疫的小鼠B细胞效果最佳。
（3）双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图：
①固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是________________________________________。
②研究人员获得三种抗EV71单克隆抗体，分别记为A、B、C，为检测它们之中哪两种适合用于双抗体夹心法，科研人员需要进行_____组实验，检测并比较各组实验的产物量。
【答案】 ①. 抗原 ②. 体液 ③. 不是 ④. EV71免疫的小鼠血清可以结合EV71、VP1和VP2多种抗原 ⑤. VP1 ⑥. 与待测抗原结合；酶催化检测底物反应，可通过测定酶反应产物量来判断待测抗原量 ⑦. 6
【解析】
【分析】能够引发机体发生特异性免疫反应的物质称为抗原，一般来说病毒的外壳蛋白就属于抗原，当抗原进入机体内环境，首先引发机体发生体液免疫。制备单克隆抗体抗体实际上利用的是动物细胞融合技术，从而获得既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
【详解】（1）EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1和VP2一般可作为抗原；能够引发小鼠机体发生体液免疫，从而产生产生相应的抗体。
（2）①分析柱形图可知，EV71免疫的小鼠血清可以与EV71、VP1和VP2多种抗原相结合，由此说明EV71免疫的小鼠血清抗体不是单一抗体。
②制备抗EV71单克隆抗体时，选用VP1免疫的小鼠脾脏细胞效果最佳，依据是第2组血清抗体可以结合EV71病毒（和VP1蛋白），第3组血清抗体无法特异性结合EV71病毒，仅能结合VP2。
（3）①分析题干可知双抗体夹心法是常用的定量检测抗原的方法，从图中可以发现固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，由此可见在该检测方法中，酶标抗体的作用是与待测抗原结合，另外通过酶催化检测底物反应，可通过测定酶反应产物量来判断待测抗原量。
②分析可知双抗体夹心法需要任意选择两种抗体，现有A、B、C三种抗体，即可有以下几种组合，AB、AC、AA、BB、BC、CC，总共有6种组合方式，因此科研人员需要进行6组实验，检测并比较各组实验的产物量。
【点睛】本题以免疫调节为背景，考查考生对免疫调节过程的理解，以及单克隆抗体的制备，要求考生能够从题图中获取有用信息，结合所学知识进行规范回答。
35. 在基因工程的操作过程中，有多种方法可检测目的基因是否导入受体菌，回答下列问题。
（1）荧光蛋白基因筛选法：某种荧光蛋白（GFP）在紫外线照射下会发出绿色荧光。将目的基因和GFP基因拼接成融合基因，并与_________________重组后导入受体菌，经培养筛选能发出绿色荧光的菌落。
（2）环丝氨酸辅助筛选法：四环素能使细菌停止生长但不致死；环丝氨酸能使正常生长的细菌致死，而对停止生长的细菌不致死。某质粒如图所示（Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因），Tetr中插入目的基因后失活。用此质粒构建表达载体，转化细菌后，结果有3种：未转化的细菌、含质粒的细菌、含重组质粒的细菌。
①用含有___________ 和 ___________的培养基对上述3种细菌进行筛选，只有含质粒的细菌被淘汰，理由是_________________________________________________________。
②在上述筛选的基础上，若要筛选出含重组质粒的细菌，还需使用含有的____________培养基。
（3）荧光定量PCR技术：荧光定量PCR技术可实现对转基因细菌中目的基因的定量检测。在PCR反应体系中，加入的荧光探针与模板DNA（目的基因）的某条链互补结合，当合成的子链延伸至探针处，探针被酶切降解，荧光监测系统就会接收到荧光信号，具体原理如下图所示。
①可通过检测_______________判定待测细菌中是否含有模板DNA，且荧光达到某一特定强度所需的循环次数越_______，模板DNA含量越高。
②通过上述技术定量检测目的基因，需从设计的多对引物和多种探针中选择特异性最好的组合，为此需进行多组实验，每个实验组需向反应体系中加入___________。（填字母）
a．转基因细菌的DNA模板 b．非转基因细菌DNA模板 c．定量的待测引物d．定量的待测荧光探针e．热稳定DNA聚合酶 f．解旋酶 g．足量的脱氧核苷酸（dNTP）
【答案】 ①. 载体 ②. 四环素 ③. 环丝氨酸 ④. 含质粒的细菌有Tetr，四环素对其不起作用，环丝氨酸使其致死 ⑤. 氨苄青霉素 ⑥. 荧光 ⑦. 多 ⑧. a、c、d、e、g
【解析】
【分析】基因工程育种原理：DNA重组技术（属于基因重组范畴）方法：按照人们的意愿，把一种生物的个别基因复制出来，加以修饰改造，放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。操作步骤包括：提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达等。举例：能分泌人类胰岛素的大肠杆菌菌株的获得，抗虫棉，转基因动物等。
【详解】（1）荧光蛋白基因筛选法：某种荧光蛋白（GFP）在紫外线照射下会发出绿色荧光。将目的基因和GFP基因拼接成融合基因，并与运载体（质粒）重组后导入受体菌，经培养筛选能发出绿色荧光的菌落，这属于个体生物学鉴定法。
（2）①用含有四环素和环丝氨酸的培养基对上述3种细菌进行筛选，只有含质粒的细菌被淘汰，而未转化的细菌和含有重组质粒的细菌停止生长，因为含质粒的细菌有Tetr，四环素对其不起作用，而环丝氨酸使其致死。
②在上述筛选的基础上，若要筛选出含重组质粒的细菌，还需使用含有氨苄青霉素的培养基，因为重组质粒上存在Ampr氨苄青霉素抗性基因，则在该培养基上含有重组质粒的细菌能正常生长，而未转化的细菌被淘汰。
（3）①可通过检测荧光探针判定待测植物中是否含有模板DNA，且荧光达到某一特定强度所需的循环次数越多，说明荧光探针被降解的越多，则模板DNA含量越高；
②通过上述技术定量检测目的基因，需从设计的多对引物和多种探针中选择特异性最好的组合，为此需进行多组实验，该实验运用了体外扩增DNA技术，因此需要耐高温的DNA聚合酶、引物、模板和原料，为了达到上述目的还需要加入基因探针，因此每个实验组需向反应体系中加入a．转基因细菌的DNA模板 ， c．定量的待测引物，d．定量的待测荧光探针，e．热稳定DNA聚合酶 ， g．足量的脱氧核苷酸（dNTP），即a、c、d、e、g。
【点睛】熟知基因工程的原理和操作步骤是解答本题的关键，本题重点考查目的基因检测和鉴定的方法和相应的原理，能根据题目信息进行合理的分析并结合所学准确答题是解答本题的必备能力。
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